微生物考研課件6微生物的生長及其控制

第六章微生物的生長繁殖及其控制第六章1生物個體由小到大的增長，即表現(xiàn)為細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加生長指生物個體數(shù)目的增加繁殖在單細(xì)胞微生物中，生長繁殖的速度很快，而且兩者始終交替進行，個體生長與繁殖的界限難以劃清，因此實際上常群體生長作為衡量微生物生長的指標(biāo)。群體生長的實質(zhì)是包含著個體細(xì)胞生長與繁殖交替進行的過程生物個體由小到大的增長，即表現(xiàn)為細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加2第一節(jié)微生物純培養(yǎng)的獲得

平板劃線分離法

稀釋倒平板法單孢子或單細(xì)胞分離法利用選擇性培養(yǎng)基分離法第一節(jié)微生物純培養(yǎng)的獲得平板劃線分離法稀釋倒平板31.平板劃線分離法

用接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。1.平板劃線分離法用接種環(huán)以菌操作沾取少許41.倒平板:1.倒平板:52.劃線:2.劃線:63.挑菌落從分離的平板上單個菌落挑取少許菌苔,涂在載玻片上,在顯微鏡下觀察細(xì)胞的個體形態(tài),結(jié)合菌落形態(tài)特征,綜合分析.如不純,仍需平板分離法進行純化,直至認(rèn)為純培養(yǎng)為止.3.挑菌落72.稀釋倒平板法倒平板制備土壤稀釋液涂布培養(yǎng)挑菌落制備土壤稀釋液加菌懸液即土壤稀釋液混勻培養(yǎng)挑菌落2.稀釋倒平板法倒平板制備土壤稀釋液8微生物考研課件6微生物的生長及其控制93.單孢子或單細(xì)胞分離法采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細(xì)胞或單個個體進行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)。在顯微鏡下使用單孢子分離器進行機械操作，挑取單孢子或單細(xì)胞進行培養(yǎng)。也可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來，然后移到合適的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。3.單孢子或單細(xì)胞分離法采取顯微分離法從混雜群體中直接分離104.選擇性培養(yǎng)基分離法各種微生物對不同的化學(xué)試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它微生物生長的選擇培養(yǎng)基，用它來培養(yǎng)微生物以獲得純培養(yǎng)。微生物純培養(yǎng)分離方法的比較分離方法應(yīng)用范圍平皿劃線法方法簡便，多用于分離細(xì)菌稀釋倒平皿法即可定性，又可定量，用途廣泛單細(xì)胞挑取法局限于高度專業(yè)化的科學(xué)研究利用選擇培養(yǎng)基法適用于分離某些生理類型較特殊的4.選擇性培養(yǎng)基分離法各種微生物對不同的化學(xué)試劑、染料、抗11第二節(jié)微生物生長的測定評價不同的抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生抑制(或殺死)作用的效果；客觀地反映微生物生長的規(guī)律；評價培養(yǎng)條件、營養(yǎng)物質(zhì)等對微生物生長的影響；微生物生長第二節(jié)微生物生長的測定評價不同的抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生12微生物生長測量方法個體計數(shù)法重量法生理指標(biāo)法微生物生長測量方法個體計數(shù)法重量法生理指標(biāo)法131.個體計數(shù)法a.直接法利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對運動細(xì)菌的計數(shù)；需要相對高的細(xì)菌濃度；個體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察；1.個體計數(shù)法a.直接法利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容14微生物考研課件6微生物的生長及其控制15微生物考研課件6微生物的生長及其控制16微生物考研課件6微生物的生長及其控制17b.簡接法原理是每個活細(xì)菌在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。b.簡接法原理是每個活細(xì)菌在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長條件下可182.重量法通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測定間接推算微生物群體的生物量；測定多細(xì)胞及絲狀真菌生長情況的有效方法以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量；離心法:將待測液放入離心管中,用清水離心洗滌1-5次后進行干燥,干燥溫度可采用105℃,8小時,也可在較低溫度下進行真空干燥,然后稱干重.過濾法:絲狀真菌可用濾紙過濾,細(xì)菌則可用醋酸纖維膜等濾膜進行過濾,過濾后,細(xì)胞可用少量水洗滌,然后在40℃下真空干燥,稱干重.2.重量法通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測定間接推算測定多細(xì)胞193.生理指標(biāo)測定法樣品中微生物數(shù)量多或生長旺盛，這些指標(biāo)愈明顯，因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計等設(shè)備來測定相應(yīng)的指標(biāo)。常用于對微生物的快速鑒定與檢測微生物的生理指標(biāo)，如呼吸強度，耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。3.生理指標(biāo)測定法樣品中微生物數(shù)量多或生長旺盛，這些指標(biāo)愈明20第三節(jié)微生物的生長規(guī)律一、細(xì)菌群體生長規(guī)律

在不補充營養(yǎng)物質(zhì)或移去培養(yǎng)物，保持整個培養(yǎng)液體積不變條件下，以時間為橫坐標(biāo)，以菌數(shù)為縱坐標(biāo)，根據(jù)不同培養(yǎng)時間時細(xì)菌數(shù)量的變化，可以作出一條反映細(xì)菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。生長曲線第三節(jié)微生物的生長規(guī)律一、細(xì)菌群體生長規(guī)律在不補充21生長曲線可分：延滯期對數(shù)期衰亡期穩(wěn)定期生長曲線可分：延滯期對數(shù)期衰亡期穩(wěn)定期221.延滯期將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，或增加很少，生長速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。遲緩期的特點：分裂遲緩、代謝活躍、對外界不良條件如鹽溶液溫度抗生素等化學(xué)藥物的反應(yīng)敏感。1.延滯期將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不23影響延滯期長短的因素除菌種外有以下三點:接種齡:接種量:培養(yǎng)基成分:影響延滯期長短的因素除菌種外有以下三點:接種齡:24在工業(yè)發(fā)酵和科研中通常采取一定的措施縮短延滯期：①通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；②利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為“種子”；③盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；④適當(dāng)擴大接種量等方式縮短遲緩期，克服不良的影響。在工業(yè)發(fā)酵和科研中通常采取一定的措施①通過遺傳學(xué)方法改變種的252.對數(shù)期

對數(shù)生長期的細(xì)菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致，代謝旺盛、生長迅速、代時穩(wěn)定，所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟效益。以最大的速率生長和分裂，細(xì)菌數(shù)量呈對數(shù)增加，細(xì)菌內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加，表現(xiàn)為平衡生長。2.對數(shù)期對數(shù)生長期的細(xì)菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均263.穩(wěn)定期

由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化，逐步不適宜于細(xì)菌生長，導(dǎo)致生長速率降低直至零(即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)量)，結(jié)束對數(shù)生長期，進入穩(wěn)定生長期。原因：獲得更多的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物采取措施：補充營養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物或改善培養(yǎng)條件，如對好氧菌進行通氣、攪拌或振蕩等細(xì)胞開始儲存糖原3.穩(wěn)定期由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化，274.衰亡期

細(xì)菌代謝活性降低，細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物，如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)，有時產(chǎn)生畸形，細(xì)胞大小懸殊，有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。該時期死亡的細(xì)菌以對數(shù)方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分細(xì)菌產(chǎn)生抗性也會使細(xì)菌死亡的速率降低?，F(xiàn)象：特點：4.衰亡期細(xì)菌代謝活性降低，細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放28二、同步培養(yǎng)

1.概念同步培養(yǎng)(synchronousculture)：是一種培養(yǎng)方法，它能使群體中不同步的細(xì)胞轉(zhuǎn)變成能同時進行生長或分裂的群體細(xì)胞。同步生長：以同步培養(yǎng)方法使群體細(xì)胞能處于同一生長階段，并同時進行分裂的生長方式同步培養(yǎng)物常被用來研究在單個細(xì)胞上難以研究的生理與遺傳特性和作為工業(yè)發(fā)酵的種子，它是一種理想的材料。二、同步培養(yǎng)1.概念同步培養(yǎng)(synchronouscu29同步培養(yǎng)方法機械方法環(huán)境條件控制技術(shù)離心方法過濾分離法硝酸纖維素濾膜法溫度培養(yǎng)基成份控制光照和黑暗交替培養(yǎng)同步培養(yǎng)方法機械方法環(huán)境條件控制技術(shù)離心方法過濾分離法硝酸30硝酸纖維素濾膜法離心法硝酸纖維素濾膜法離心法31三、連續(xù)培養(yǎng)

連續(xù)培養(yǎng)(continouscultureofmicroorganisms)是在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。

連續(xù)培養(yǎng)的基本原則：微生物培養(yǎng)過程中不斷的補充營養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物連續(xù)培養(yǎng)類型恒濁連續(xù)培養(yǎng)恒化連續(xù)培養(yǎng)三、連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)(continousculture32(一)恒化連續(xù)培養(yǎng)在整個培養(yǎng)過程中通過控制培養(yǎng)基中某種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度基本恒定的方式，保持細(xì)菌的比生長速率恒定，使生長“不斷”進行。生長速率的控制因子：一般是氨基酸、氨和銨鹽等氮源，或是葡萄糖、麥芽糖等碳源或者是無機鹽，生長因子等物質(zhì)恒化器連續(xù)培養(yǎng)通常用于微生物學(xué)的研究，篩選不同的變種。(一)恒化連續(xù)培養(yǎng)在整個培養(yǎng)過程中通過控制培養(yǎng)基中某種營養(yǎng)物33微生物考研課件6微生物的生長及其控制34(二)恒濁連續(xù)培養(yǎng)通過連續(xù)培養(yǎng)裝置中的光電系統(tǒng)控制培養(yǎng)液中菌體濃度恒定、使細(xì)菌生長連續(xù)進行的一種培養(yǎng)方式。用于菌體以及與菌體生長平行的代謝產(chǎn)物生產(chǎn)的發(fā)酵工業(yè)(二)恒濁連續(xù)培養(yǎng)通過連續(xù)培養(yǎng)裝置中的光電系統(tǒng)控制培養(yǎng)液中菌35微生物考研課件6微生物的生長及其控制36(三)連續(xù)發(fā)酵與單批發(fā)酵相比優(yōu)點：縮短發(fā)酵周期，提高設(shè)備利用率；便于自動控制；降低動力消耗及體力勞動強度；產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定；缺點：雜菌污染和菌種退化(三)連續(xù)發(fā)酵與單批發(fā)酵相比優(yōu)點：縮短發(fā)酵周期，提高設(shè)備利用37第四節(jié)環(huán)境因素對微生物的影響影響因素：氧溫度PH值第四節(jié)環(huán)境因素對微生物的影響影響因素：氧溫38(一)溫度根據(jù)微生物生長的最適溫度不同，可以將微生物分為嗜冷、兼性嗜冷、嗜溫、嗜熱和超嗜熱等五種不同的類型。它們都有各自的最低、最適和最高生長溫度范圍。

微生物類型

生長溫度／℃最低最適最高嗜冷微生物0以下1520兼性嗜冷微生物020-3035；嗜溫微生物15-2020-4545以上嗜熱微生物4555-6580超嗜熱或嗜高溫微生物6580-90100以上(一)溫度根據(jù)微生物生長的最適溫度不同，可以將微生物分39最適生長溫度并不等于生長量最高時的培養(yǎng)溫度,也不等于發(fā)酵速度最高時的培養(yǎng)溫度或累積代謝產(chǎn)物量最高時的培養(yǎng)溫度,更不等于累積某一代謝產(chǎn)物量最高時的培養(yǎng)溫度.最高:微生物生長繁殖最高溫度界限,在此溫度下,微生物細(xì)胞易于衰老和死亡.最低:微生物生長繁殖最低溫度界限,在此溫度下,微生物生長速率很低,如果低于此溫度則生長完全停止.最適生長溫度：某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養(yǎng)溫度最適生長溫度并不等于生長量最高時的培養(yǎng)溫度,也不等于發(fā)酵速度40(二)PH微生物最低PH最適PH最高PH細(xì)菌3-56.5-7.58-10酵母菌2-34.5-5.57-8霉菌1-34.5-5.57-8微生物生長過程中機體內(nèi)發(fā)生的絕大多數(shù)的反應(yīng)是酶促反應(yīng)，而酶促反應(yīng)都有一個最適pH范圍，在此范圍內(nèi)只要條件適合，酶促反應(yīng)速率最高，微生物生長速率最大，因此微生物生長也有一個最適生長的pH范圍。真菌是嗜酸,多數(shù)放線菌是嗜堿性的(二)PH微生物最低PH最適PH最高PH細(xì)菌3-56.5-41嗜酸微生物:乳酸桿菌、醋酸桿菌嗜堿微生物:鏈霉菌嗜酸微生物:乳酸桿菌、醋酸桿菌42(三)氧根據(jù)氧與微生物生長的關(guān)系可將微生物分為好氧微好氧耐氧型兼性厭氧專性厭氧微生物類型最適生長的O2體積分?jǐn)?shù)好氧微好氧氧的忍耐型兼性厭氧專性厭氧等于或大于20％2％一lO％2％以下有氧或無氧不需要氧、有氧時死亡(三)氧根據(jù)氧與微生物生長的關(guān)系可將微生物分為好氧微好氧耐43專性好氧菌:必須在有分子氧的條件下才能生長.絕大多數(shù)真菌和許多細(xì)菌都是專性好氧菌.兼性厭氧菌:在有氧和無氧條件均能生長,但有氧情況下生長的更好,許多酵母菌和許多細(xì)菌都是.如釀酒酵母微好氧菌:只能在較低的氧分壓下才能正常生長.耐氧菌:一類可在分子氧存在下進行厭氧生活的厭氧菌,即他們的生長不需要氧,分子氧對它也無毒害.一般的乳酸菌.厭氧菌:分子氧對他們有毒.專性好氧菌:必須在有分子氧的條件下才能生長.絕大多數(shù)真菌和許44微生物考研課件6微生物的生長及其控制45自由基是一種強氧化劑，它與生物大分子互相作用，可導(dǎo)致產(chǎn)生生物分子自由基，從而對機體產(chǎn)生損傷或突變作用，直至死亡。氧之所以對專性厭氧微生物以外的其他四種類型微生物不產(chǎn)生致死作用，是因為它們具有超氧物歧化酶，可催化起氧化基化合物分解，最終分解成水。氧對于好氧微生物生長雖然可以通過好氧呼吸產(chǎn)生更多的能量，滿足機體的生長需要，但另一方面，氧對一切生物都會使其產(chǎn)生有毒害作用的代謝產(chǎn)物，如超氧基化合物與H2O2，這兩種代謝產(chǎn)物互相作用還會產(chǎn)生毒性很強的自由基OH.。自由基是一種強氧化劑，它與生物大分子互相作用，可導(dǎo)致產(chǎn)生生物46SOD是一種重要的氧自由基清除劑，作為一種藥用酶，引起國內(nèi)外生化屆和醫(yī)藥屆的極大關(guān)注。SOD應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床上可以治療多種疾病，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、心肌梗塞等，在防輻射，抗衰老，抗腫瘤等方面也有積極的作用，而且廣泛用于化妝品和食品添加劑的行列。細(xì)胞中SOD超氧化物岐化酶的主要功能是將自由基，過氧化物轉(zhuǎn)化為過氧化氫。因為過氧化物需3個電子增強其本身，是人體中產(chǎn)生的最強、最危險的自由基。大多數(shù)只需1個電子。SOD對細(xì)胞線粒體和細(xì)胞質(zhì)同時施加有益的影響。SOD是一種重要的氧自由基清除劑，作為一種藥用酶，引起國內(nèi)外471、蔬菜中的四季豆、青菜、芹菜、菠菜、韭菜、蔥、茄子、胡蘿卜、西紅柿、黃瓜、南瓜和土豆中都含有豐富的SOD，常吃這些菜可減少氧自由基對人體的損害，延緩衰老。2、抗氧化劑有清除氧自由基的作用，常見的抗氧化劑有維生素C、E和β-胡蘿卜素，西紅柿、草莓、柑桔中含有維生素C最多，而甘薯、胡蘿卜和多葉綠色蔬菜富含β-胡蘿卜素。3、茶葉中的茶多酚有強大的抗氧自由基損傷組織的功能。4、微量元素硒的抗氧化能力比維生素類高500倍，含硒豐富的食物有玉米、熟毛豆、大蒜、海帶、洋蔥以及肉食類等。5、花色素有強大的抗氧化功能，能清除氧自由基?；ㄉ仄毡榇嬖谟谥参锏幕ò辍⑷~子、果實、種子和水果蔬菜中。此外，葡萄酒尤其是紅酒中富含大量花色素，法國人紅酒的消費量最多，而心血管病的死亡率卻是較低的，可能與此有關(guān)。

1、蔬菜中的四季豆、青菜、芹菜、菠菜、韭菜、蔥、茄子、胡蘿卜48第五節(jié)微生物生長繁殖的控制一、基本概念防腐(antisepsis)：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長的一種措施低溫缺氧干燥高滲高酸度防腐劑第五節(jié)微生物生長繁殖的控制一、基本概念防腐(antise49消毒是一種采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的病原菌，而對被消毒的物體基本無害的措施。如一些常用的對皮膚、水果、飲用水進行藥劑消毒的方法；對啤酒、牛奶、果汁和醬油等進行消毒處理的巴豕消毒法消毒(disinfection)：利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施消毒是一種采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對50滅菌(sterilization)：指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施滅菌(sterilization)：指利用某種方法殺死物體中51化療(chemotherapy)：利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)如磺胺、抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織成病受細(xì)胞進行治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞，但對機體本身無毒害作用的治療措施。\化療(chemotherapy)：利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)52死亡：對微生物來說，就是不可逆，喪失了生長繁殖的能力，即使再放到合適的環(huán)境中也不再繁殖。因此在檢查理化因素對微生物的致死作用時，要接種看是否生長。死亡：對微生物來說，就是不可逆，喪失了生長繁殖的能力，即53二、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)

1．抗微生物劑

抗微生物劑(antimicrobialagcnt)是一類能夠殺死微生物或抑制微生物生長的化學(xué)物質(zhì)根據(jù)它們抗微生物的特性可分為：

抑菌劑

殺菌劑

溶菌劑

用機理是這類物質(zhì)結(jié)合到核糖體上抑制蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致生長停止，由于它們同核糖體結(jié)合不緊，它們在濃度降低時又會游離出來，核糖體合成蛋白質(zhì)的能力恢復(fù)，使生長恢復(fù)它們是緊緊地結(jié)合到細(xì)胞的作用靶上，即使在濃度降低時也不能游離出來，因此生長不能恢復(fù)能抑制細(xì)胞壁合成或損傷細(xì)胞質(zhì)膜二、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)1．抗微生物劑抗微生物劑(ant54抗微生物劑通常又將它們分為消毒劑：可殺死微生物，通常用于非生物材料的滅菌或消毒。防腐劑：能殺死微生物或抑制其生長，但對人及動物的體表組織無毒性或毒性低，可作為外用抗微生物藥物。HgCl2、CuSO4、碘液、氯氣、乙烯氧化物、甲醛劑、臭氧有機汞、0.1%-1％硝酸銀、碘液、70%乙醇、3％過氧化氫抗微生物劑通常又將它們分為消毒劑：可殺死微生物，通常用于非生55各種抗微生物化學(xué)制劑殺菌能力的比較標(biāo)準(zhǔn)：石炭酸系數(shù)：指在一定時間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規(guī)定處理時間為10分鐘，而供試菌定為Salmonellatyphi（傷寒沙門氏菌）。在臨床上最早使用的消毒劑----石炭酸各種抗微生物化學(xué)制劑殺菌能力的比較標(biāo)準(zhǔn)：石炭酸系數(shù)：在臨床上56類型名稱及使用濃度作用機制應(yīng)用范圍重金屬鹽類0.05-0.1%升汞與蛋白質(zhì)的巰基結(jié)合使失活非金屬物品器皿酚類3-5%石炭酸蛋白質(zhì)變性損傷細(xì)胞膜地面家具器皿醇類70-75%乙醇蛋白質(zhì)變性,損傷細(xì)胞膜皮膚,器械酸類5-10ml醋酸熏蒸破壞細(xì)胞膜和蛋白質(zhì)房間消毒(防呼吸道感染)醛類0.5-10%甲醛破壞蛋白質(zhì)氫鍵或氨基物品消毒接種環(huán)境熏蒸氧化劑0.1%高錳酸鉀臭氧氧化蛋白質(zhì)的活性基團皮膚尿道水果蔬菜食品表面活性劑新潔爾滅蛋白質(zhì)變性破壞膜皮膚黏膜手術(shù)器械鹵素及化合物氯氣漂白粉破壞細(xì)胞膜酶蛋白質(zhì)水,游泳池水廁所類型名稱及使用濃度作用機制應(yīng)用范圍重金屬鹽類0.05-0.1572．抗代謝物

(Antimetabolite)有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似，以至可以和特定的酶結(jié)合，從而阻礙了酶的功能，干擾了代謝的正常進行，這些物質(zhì)稱為抗代謝物。葉酸對抗物（磺胺）、嘌呤對抗物（6-巰基嘌呤）、苯丙氨酸對抗物（對氟苯丙氨酸）、尿嘧啶對抗物（5-氟尿嘧啶）胸腺嘧啶對抗物（5-溴胸腺嘧啶）2．抗代謝物(Antimetabolite)有些化合物在結(jié)58磺胺藥物是最早發(fā)現(xiàn)，也是最常見的化學(xué)療劑，抗菌譜廣，能治療多種傳染性疾病。大多數(shù)革蘭氏陽性細(xì)菌（如肺炎球菌、溶血性鏈球菌等）某些革蘭氏陰性細(xì)菌（如痢疾桿菌、腦膜炎球菌、流感桿菌等）對放線菌也有一定的作用。作用機理：磺胺是葉酸組成部分對氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu)類似物磺胺的抑菌作用是因為很多細(xì)菌需要自己合成葉酸而生長。磺胺對人體細(xì)胞無毒性，因為人缺乏從對氨基苯甲酸合成葉酸的相關(guān)酶----二氫葉酸合成酶，不能用外界提供的對氨基苯甲酸自行合成葉酸，而必須直接利用葉酸為生長因子進行生長。磺胺藥物是最早發(fā)現(xiàn)，也是最常見的化學(xué)療劑，抗菌譜廣，能治療多593．抗生素

抗生素(Antibiotic)是由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產(chǎn)物或衍生物，它們在很低濃度時就能抑制或影響它種生物的生命活動，如殺死微生物或抑制其生長。(1)概念自本世紀(jì)40年代以來，已找到上萬種新抗生素，合成了近10萬種半合成抗生素，但其中在臨床上常用的僅幾十種。3．抗生素抗生素(Antibiotic)是由某些生物合成60(2)作用機制抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成破壞細(xì)胞質(zhì)膜作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化抑制蛋白質(zhì)和核酸合成(2)作用機制抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成破壞細(xì)胞質(zhì)膜作用于呼吸鏈以干61微生物考研課件6微生物的生長及其控制62(3)細(xì)菌抗藥性的產(chǎn)生抗性菌株特點：細(xì)胞質(zhì)膜透性改變，使抗生素不進入細(xì)胞或進入細(xì)胞后被細(xì)胞主動排出；藥物作用靶改變；合成了修飾抗生素的酶；抗性菌株發(fā)生遺傳變異，導(dǎo)致合成新的多聚體，以取代或部分取原來的多聚體；(3)細(xì)菌抗藥性的產(chǎn)生抗性菌株特點：細(xì)胞質(zhì)膜透性改變，使抗生63(4)應(yīng)用抗生素注意(1)第一次使用的藥物劑量要足；(2)避免在一個時期或長期多次使用同種抗生素；(3)不同的抗生素(或與其他藥物)混合使用；(4)對現(xiàn)有抗生素進行改造；(5)篩選新的更有效的抗生素；(4)應(yīng)用抗生素注意(1)第一次使用的藥物劑量要足；64三、控制微生物的物理因素

溫度輻射作用過濾滲透壓干燥超聲波三、控制微生物的物理因素溫度輻射作用過濾滲透壓干燥超聲波651.高溫滅菌①高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌的溫度越高，微生物死亡越快。通常情況下溫度為121.3℃。衡量滅菌效果的指標(biāo)十倍致死時間(decimalreductiontime)：即在一定的溫度條件下，微生物數(shù)量十倍減少所需要的時間。熱致死時間(thennaldeathtime)：即在一定溫度下殺死所有某一濃度微生物所需要的時間1.高溫滅菌①高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌的溫度越高，微生物66②干熱滅菌烘箱內(nèi)熱空氣滅菌火焰灼燒干熱滅菌溫度：150-170℃；時間：1-2h對象：金屬器械、玻璃器皿等②干熱滅菌烘箱內(nèi)熱空氣滅菌干熱滅菌溫度：150-170℃；67將待消毒物品如注射器、金屬用具、解剖用具等在水中煮沸15min或更長時間，以殺死細(xì)菌或其他微生物的營養(yǎng)體和少部分的芽孢或孢子。③煮沸消毒

如果在水中適當(dāng)加1％碳酸鈉或2％一5％的石炭酸則殺菌效果更好將待消毒物品如注射器、金屬用具、解剖用具等在水中煮沸15mi68對于某些培養(yǎng)基，由于高壓蒸汽滅菌會破壞某些營養(yǎng)成分，可用間隙滅菌法滅菌，即流通蒸汽(或蒸煮)反復(fù)滅菌幾次，④間隙滅菌法例如第一次蒸煮后殺死微生物營養(yǎng)體，冷卻，培養(yǎng)過夜，孢子萌發(fā)，又第二次蒸煮，殺死營養(yǎng)體。這樣反復(fù)2—3次就可以完全殺死營養(yǎng)體和芽孢，也可保持某些營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。對于某些培養(yǎng)基，由于高壓蒸汽滅菌會破壞某些營養(yǎng)成分69高溫對牛奶及其熱敏感物質(zhì)不適宜，因為高熱破壞了食品的營養(yǎng)與風(fēng)味。⑤巴氏消毒法具體方法低溫維持法：只要在63℃下維持30min高溫瞬時法：只要在72℃下維持15s超高溫法：只要在135-150℃下維持2-6s高溫對牛奶及其熱敏感物質(zhì)不適宜，因為高熱破壞了食品的營70高溫對培養(yǎng)基成分的有害影響及其防止影響:形成沉淀物;破壞營養(yǎng);改變酸堿性;降低培養(yǎng)基濃度防止:采用特殊加熱滅菌法過濾除菌法其他方法高溫對培養(yǎng)基成分的有害影響及其防止712．輻射作用(radiationSterilization)輻射滅菌是利用電磁輻射產(chǎn)生的電磁波殺死大多數(shù)物質(zhì)上的微生物的一種有效力法。電磁波:微波:通過熱產(chǎn)生殺死微生物的作用；紫外線(UV):使DNA分子中相鄰的嘧啶形成嘧啶二聚體，抑制DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄等功能，殺死微生物；X射線和y射線:使其他物質(zhì)氧化或產(chǎn)生自由基(OH·、H·)破壞和改變生物大分子的結(jié)構(gòu)，以抑制或殺死微生物。2．輻射作用(radiationSterilizatio723．過濾作用不耐熱的液體培養(yǎng)基的滅菌3．過濾作用不耐熱的液體培養(yǎng)基的滅菌73第六章微生物的生長繁殖及其控制第六章74生物個體由小到大的增長，即表現(xiàn)為細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加生長指生物個體數(shù)目的增加繁殖在單細(xì)胞微生物中，生長繁殖的速度很快，而且兩者始終交替進行，個體生長與繁殖的界限難以劃清，因此實際上常群體生長作為衡量微生物生長的指標(biāo)。群體生長的實質(zhì)是包含著個體細(xì)胞生長與繁殖交替進行的過程生物個體由小到大的增長，即表現(xiàn)為細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加75第一節(jié)微生物純培養(yǎng)的獲得

平板劃線分離法

稀釋倒平板法單孢子或單細(xì)胞分離法利用選擇性培養(yǎng)基分離法第一節(jié)微生物純培養(yǎng)的獲得平板劃線分離法稀釋倒平板761.平板劃線分離法

用接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。1.平板劃線分離法用接種環(huán)以菌操作沾取少許771.倒平板:1.倒平板:782.劃線:2.劃線:793.挑菌落從分離的平板上單個菌落挑取少許菌苔,涂在載玻片上,在顯微鏡下觀察細(xì)胞的個體形態(tài),結(jié)合菌落形態(tài)特征,綜合分析.如不純,仍需平板分離法進行純化,直至認(rèn)為純培養(yǎng)為止.3.挑菌落802.稀釋倒平板法倒平板制備土壤稀釋液涂布培養(yǎng)挑菌落制備土壤稀釋液加菌懸液即土壤稀釋液混勻培養(yǎng)挑菌落2.稀釋倒平板法倒平板制備土壤稀釋液81微生物考研課件6微生物的生長及其控制823.單孢子或單細(xì)胞分離法采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細(xì)胞或單個個體進行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)。在顯微鏡下使用單孢子分離器進行機械操作，挑取單孢子或單細(xì)胞進行培養(yǎng)。也可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來，然后移到合適的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。3.單孢子或單細(xì)胞分離法采取顯微分離法從混雜群體中直接分離834.選擇性培養(yǎng)基分離法各種微生物對不同的化學(xué)試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它微生物生長的選擇培養(yǎng)基，用它來培養(yǎng)微生物以獲得純培養(yǎng)。微生物純培養(yǎng)分離方法的比較分離方法應(yīng)用范圍平皿劃線法方法簡便，多用于分離細(xì)菌稀釋倒平皿法即可定性，又可定量，用途廣泛單細(xì)胞挑取法局限于高度專業(yè)化的科學(xué)研究利用選擇培養(yǎng)基法適用于分離某些生理類型較特殊的4.選擇性培養(yǎng)基分離法各種微生物對不同的化學(xué)試劑、染料、抗84第二節(jié)微生物生長的測定評價不同的抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生抑制(或殺死)作用的效果；客觀地反映微生物生長的規(guī)律；評價培養(yǎng)條件、營養(yǎng)物質(zhì)等對微生物生長的影響；微生物生長第二節(jié)微生物生長的測定評價不同的抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生85微生物生長測量方法個體計數(shù)法重量法生理指標(biāo)法微生物生長測量方法個體計數(shù)法重量法生理指標(biāo)法861.個體計數(shù)法a.直接法利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對運動細(xì)菌的計數(shù)；需要相對高的細(xì)菌濃度；個體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察；1.個體計數(shù)法a.直接法利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容87微生物考研課件6微生物的生長及其控制88微生物考研課件6微生物的生長及其控制89微生物考研課件6微生物的生長及其控制90b.簡接法原理是每個活細(xì)菌在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。b.簡接法原理是每個活細(xì)菌在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長條件下可912.重量法通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測定間接推算微生物群體的生物量；測定多細(xì)胞及絲狀真菌生長情況的有效方法以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量；離心法:將待測液放入離心管中,用清水離心洗滌1-5次后進行干燥,干燥溫度可采用105℃,8小時,也可在較低溫度下進行真空干燥,然后稱干重.過濾法:絲狀真菌可用濾紙過濾,細(xì)菌則可用醋酸纖維膜等濾膜進行過濾,過濾后,細(xì)胞可用少量水洗滌,然后在40℃下真空干燥,稱干重.2.重量法通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測定間接推算測定多細(xì)胞923.生理指標(biāo)測定法樣品中微生物數(shù)量多或生長旺盛，這些指標(biāo)愈明顯，因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計等設(shè)備來測定相應(yīng)的指標(biāo)。常用于對微生物的快速鑒定與檢測微生物的生理指標(biāo)，如呼吸強度，耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。3.生理指標(biāo)測定法樣品中微生物數(shù)量多或生長旺盛，這些指標(biāo)愈明93第三節(jié)微生物的生長規(guī)律一、細(xì)菌群體生長規(guī)律

在不補充營養(yǎng)物質(zhì)或移去培養(yǎng)物，保持整個培養(yǎng)液體積不變條件下，以時間為橫坐標(biāo)，以菌數(shù)為縱坐標(biāo)，根據(jù)不同培養(yǎng)時間時細(xì)菌數(shù)量的變化，可以作出一條反映細(xì)菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。生長曲線第三節(jié)微生物的生長規(guī)律一、細(xì)菌群體生長規(guī)律在不補充94生長曲線可分：延滯期對數(shù)期衰亡期穩(wěn)定期生長曲線可分：延滯期對數(shù)期衰亡期穩(wěn)定期951.延滯期將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，或增加很少，生長速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。遲緩期的特點：分裂遲緩、代謝活躍、對外界不良條件如鹽溶液溫度抗生素等化學(xué)藥物的反應(yīng)敏感。1.延滯期將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不96影響延滯期長短的因素除菌種外有以下三點:接種齡:接種量:培養(yǎng)基成分:影響延滯期長短的因素除菌種外有以下三點:接種齡:97在工業(yè)發(fā)酵和科研中通常采取一定的措施縮短延滯期：①通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；②利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為“種子”；③盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；④適當(dāng)擴大接種量等方式縮短遲緩期，克服不良的影響。在工業(yè)發(fā)酵和科研中通常采取一定的措施①通過遺傳學(xué)方法改變種的982.對數(shù)期

對數(shù)生長期的細(xì)菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致，代謝旺盛、生長迅速、代時穩(wěn)定，所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟效益。以最大的速率生長和分裂，細(xì)菌數(shù)量呈對數(shù)增加，細(xì)菌內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加，表現(xiàn)為平衡生長。2.對數(shù)期對數(shù)生長期的細(xì)菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均993.穩(wěn)定期

由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化，逐步不適宜于細(xì)菌生長，導(dǎo)致生長速率降低直至零(即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)量)，結(jié)束對數(shù)生長期，進入穩(wěn)定生長期。原因：獲得更多的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物采取措施：補充營養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物或改善培養(yǎng)條件，如對好氧菌進行通氣、攪拌或振蕩等細(xì)胞開始儲存糖原3.穩(wěn)定期由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化，1004.衰亡期

細(xì)菌代謝活性降低，細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物，如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)，有時產(chǎn)生畸形，細(xì)胞大小懸殊，有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。該時期死亡的細(xì)菌以對數(shù)方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分細(xì)菌產(chǎn)生抗性也會使細(xì)菌死亡的速率降低?，F(xiàn)象：特點：4.衰亡期細(xì)菌代謝活性降低，細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放101二、同步培養(yǎng)

1.概念同步培養(yǎng)(synchronousculture)：是一種培養(yǎng)方法，它能使群體中不同步的細(xì)胞轉(zhuǎn)變成能同時進行生長或分裂的群體細(xì)胞。同步生長：以同步培養(yǎng)方法使群體細(xì)胞能處于同一生長階段，并同時進行分裂的生長方式同步培養(yǎng)物常被用來研究在單個細(xì)胞上難以研究的生理與遺傳特性和作為工業(yè)發(fā)酵的種子，它是一種理想的材料。二、同步培養(yǎng)1.概念同步培養(yǎng)(synchronouscu102同步培養(yǎng)方法機械方法環(huán)境條件控制技術(shù)離心方法過濾分離法硝酸纖維素濾膜法溫度培養(yǎng)基成份控制光照和黑暗交替培養(yǎng)同步培養(yǎng)方法機械方法環(huán)境條件控制技術(shù)離心方法過濾分離法硝酸103硝酸纖維素濾膜法離心法硝酸纖維素濾膜法離心法104三、連續(xù)培養(yǎng)

連續(xù)培養(yǎng)(continouscultureofmicroorganisms)是在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。

連續(xù)培養(yǎng)的基本原則：微生物培養(yǎng)過程中不斷的補充營養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物連續(xù)培養(yǎng)類型恒濁連續(xù)培養(yǎng)恒化連續(xù)培養(yǎng)三、連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)(continousculture105(一)恒化連續(xù)培養(yǎng)在整個培養(yǎng)過程中通過控制培養(yǎng)基中某種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度基本恒定的方式，保持細(xì)菌的比生長速率恒定，使生長“不斷”進行。生長速率的控制因子：一般是氨基酸、氨和銨鹽等氮源，或是葡萄糖、麥芽糖等碳源或者是無機鹽，生長因子等物質(zhì)恒化器連續(xù)培養(yǎng)通常用于微生物學(xué)的研究，篩選不同的變種。(一)恒化連續(xù)培養(yǎng)在整個培養(yǎng)過程中通過控制培養(yǎng)基中某種營養(yǎng)物106微生物考研課件6微生物的生長及其控制107(二)恒濁連續(xù)培養(yǎng)通過連續(xù)培養(yǎng)裝置中的光電系統(tǒng)控制培養(yǎng)液中菌體濃度恒定、使細(xì)菌生長連續(xù)進行的一種培養(yǎng)方式。用于菌體以及與菌體生長平行的代謝產(chǎn)物生產(chǎn)的發(fā)酵工業(yè)(二)恒濁連續(xù)培養(yǎng)通過連續(xù)培養(yǎng)裝置中的光電系統(tǒng)控制培養(yǎng)液中菌108微生物考研課件6微生物的生長及其控制109(三)連續(xù)發(fā)酵與單批發(fā)酵相比優(yōu)點：縮短發(fā)酵周期，提高設(shè)備利用率；便于自動控制；降低動力消耗及體力勞動強度；產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定；缺點：雜菌污染和菌種退化(三)連續(xù)發(fā)酵與單批發(fā)酵相比優(yōu)點：縮短發(fā)酵周期，提高設(shè)備利用110第四節(jié)環(huán)境因素對微生物的影響影響因素：氧溫度PH值第四節(jié)環(huán)境因素對微生物的影響影響因素：氧溫111(一)溫度根據(jù)微生物生長的最適溫度不同，可以將微生物分為嗜冷、兼性嗜冷、嗜溫、嗜熱和超嗜熱等五種不同的類型。它們都有各自的最低、最適和最高生長溫度范圍。

微生物類型

生長溫度／℃最低最適最高嗜冷微生物0以下1520兼性嗜冷微生物020-3035；嗜溫微生物15-2020-4545以上嗜熱微生物4555-6580超嗜熱或嗜高溫微生物6580-90100以上(一)溫度根據(jù)微生物生長的最適溫度不同，可以將微生物分112最適生長溫度并不等于生長量最高時的培養(yǎng)溫度,也不等于發(fā)酵速度最高時的培養(yǎng)溫度或累積代謝產(chǎn)物量最高時的培養(yǎng)溫度,更不等于累積某一代謝產(chǎn)物量最高時的培養(yǎng)溫度.最高:微生物生長繁殖最高溫度界限,在此溫度下,微生物細(xì)胞易于衰老和死亡.最低:微生物生長繁殖最低溫度界限,在此溫度下,微生物生長速率很低,如果低于此溫度則生長完全停止.最適生長溫度：某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養(yǎng)溫度最適生長溫度并不等于生長量最高時的培養(yǎng)溫度,也不等于發(fā)酵速度113(二)PH微生物最低PH最適PH最高PH細(xì)菌3-56.5-7.58-10酵母菌2-34.5-5.57-8霉菌1-34.5-5.57-8微生物生長過程中機體內(nèi)發(fā)生的絕大多數(shù)的反應(yīng)是酶促反應(yīng)，而酶促反應(yīng)都有一個最適pH范圍，在此范圍內(nèi)只要條件適合，酶促反應(yīng)速率最高，微生物生長速率最大，因此微生物生長也有一個最適生長的pH范圍。真菌是嗜酸,多數(shù)放線菌是嗜堿性的(二)PH微生物最低PH最適PH最高PH細(xì)菌3-56.5-114嗜酸微生物:乳酸桿菌、醋酸桿菌嗜堿微生物:鏈霉菌嗜酸微生物:乳酸桿菌、醋酸桿菌115(三)氧根據(jù)氧與微生物生長的關(guān)系可將微生物分為好氧微好氧耐氧型兼性厭氧專性厭氧微生物類型最適生長的O2體積分?jǐn)?shù)好氧微好氧氧的忍耐型兼性厭氧專性厭氧等于或大于20％2％一lO％2％以下有氧或無氧不需要氧、有氧時死亡(三)氧根據(jù)氧與微生物生長的關(guān)系可將微生物分為好氧微好氧耐116專性好氧菌:必須在有分子氧的條件下才能生長.絕大多數(shù)真菌和許多細(xì)菌都是專性好氧菌.兼性厭氧菌:在有氧和無氧條件均能生長,但有氧情況下生長的更好,許多酵母菌和許多細(xì)菌都是.如釀酒酵母微好氧菌:只能在較低的氧分壓下才能正常生長.耐氧菌:一類可在分子氧存在下進行厭氧生活的厭氧菌,即他們的生長不需要氧,分子氧對它也無毒害.一般的乳酸菌.厭氧菌:分子氧對他們有毒.專性好氧菌:必須在有分子氧的條件下才能生長.絕大多數(shù)真菌和許117微生物考研課件6微生物的生長及其控制118自由基是一種強氧化劑，它與生物大分子互相作用，可導(dǎo)致產(chǎn)生生物分子自由基，從而對機體產(chǎn)生損傷或突變作用，直至死亡。氧之所以對專性厭氧微生物以外的其他四種類型微生物不產(chǎn)生致死作用，是因為它們具有超氧物歧化酶，可催化起氧化基化合物分解，最終分解成水。氧對于好氧微生物生長雖然可以通過好氧呼吸產(chǎn)生更多的能量，滿足機體的生長需要，但另一方面，氧對一切生物都會使其產(chǎn)生有毒害作用的代謝產(chǎn)物，如超氧基化合物與H2O2，這兩種代謝產(chǎn)物互相作用還會產(chǎn)生毒性很強的自由基OH.。自由基是一種強氧化劑，它與生物大分子互相作用，可導(dǎo)致產(chǎn)生生物119SOD是一種重要的氧自由基清除劑，作為一種藥用酶，引起國內(nèi)外生化屆和醫(yī)藥屆的極大關(guān)注。SOD應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床上可以治療多種疾病，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、心肌梗塞等，在防輻射，抗衰老，抗腫瘤等方面也有積極的作用，而且廣泛用于化妝品和食品添加劑的行列。細(xì)胞中SOD超氧化物岐化酶的主要功能是將自由基，過氧化物轉(zhuǎn)化為過氧化氫。因為過氧化物需3個電子增強其本身，是人體中產(chǎn)生的最強、最危險的自由基。大多數(shù)只需1個電子。SOD對細(xì)胞線粒體和細(xì)胞質(zhì)同時施加有益的影響。SOD是一種重要的氧自由基清除劑，作為一種藥用酶，引起國內(nèi)外1201、蔬菜中的四季豆、青菜、芹菜、菠菜、韭菜、蔥、茄子、胡蘿卜、西紅柿、黃瓜、南瓜和土豆中都含有豐富的SOD，常吃這些菜可減少氧自由基對人體的損害，延緩衰老。2、抗氧化劑有清除氧自由基的作用，常見的抗氧化劑有維生素C、E和β-胡蘿卜素，西紅柿、草莓、柑桔中含有維生素C最多，而甘薯、胡蘿卜和多葉綠色蔬菜富含β-胡蘿卜素。3、茶葉中的茶多酚有強大的抗氧自由基損傷組織的功能。4、微量元素硒的抗氧化能力比維生素類高500倍，含硒豐富的食物有玉米、熟毛豆、大蒜、海帶、洋蔥以及肉食類等。5、花色素有強大的抗氧化功能，能清除氧自由基?；ㄉ仄毡榇嬖谟谥参锏幕ò辍⑷~子、果實、種子和水果蔬菜中。此外，葡萄酒尤其是紅酒中富含大量花色素，法國人紅酒的消費量最多，而心血管病的死亡率卻是較低的，可能與此有關(guān)。

1、蔬菜中的四季豆、青菜、芹菜、菠菜、韭菜、蔥、茄子、胡蘿卜121第五節(jié)微生物生長繁殖的控制一、基本概念防腐(antisepsis)：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長的一種措施低溫缺氧干燥高滲高酸度防腐劑第五節(jié)微生物生長繁殖的控制一、基本概念防腐(antise122消毒是一種采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的病原菌，而對被消毒的物體基本無害的措施。如一些常用的對皮膚、水果、飲用水進行藥劑消毒的方法；對啤酒、牛奶、果汁和醬油等進行消毒處理的巴豕消毒法消毒(disinfection)：利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施消毒是一種采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對123滅菌(sterilization)：指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施滅菌(sterilization)：指利用某種方法殺死物體中124化療(chemotherapy)：利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)如磺胺、抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織成病受細(xì)胞進行治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞，但對機體本身無毒害作用的治療措施。\化療(chemotherapy)：利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)125死亡：對微生物來說，就是不可逆，喪失了生長繁殖的能力，即使再放到合適的環(huán)境中也不再繁殖。因此在檢查理化因素對微生物的致死作用時，要接種看是否生長。死亡：對微生物來說，就是不可逆，喪失了生長繁殖的能力，即126二、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)

1．抗微生物劑

抗微生物劑(antimicrobialagcnt)是一類能夠殺死微生物或抑制微生物生長的化學(xué)物質(zhì)根據(jù)它們抗微生物的特性可分為：

抑菌劑

殺菌劑

溶菌劑

用機理是這類物質(zhì)結(jié)合到核糖體上抑制蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致生長停止，由于它們同核糖體結(jié)合不緊，它們在濃度降低時又會游離出來，核糖體合成蛋白質(zhì)的能力恢復(fù)，使生長恢復(fù)它們是緊緊地結(jié)合到細(xì)胞的作用靶上，即使在濃度降低時也不能游離出來，因此生長不能恢復(fù)能抑制細(xì)胞壁合成或損傷細(xì)胞質(zhì)膜二、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)1．抗微生物劑抗微生物劑(ant127抗微生物劑通常又將它們分為消毒劑：可殺死微生物，通常用于非生物材料的滅菌或消毒。防腐劑：能殺死微生物或抑制其生長，但對人及動物的體表組織無毒性或毒性低，可作為外用抗微生物藥物。HgCl2、CuSO4、碘液、氯氣、乙烯氧化物、甲醛劑、臭氧有機汞、0.1%-1％硝酸銀、碘液、70%乙醇、3％過氧化氫抗微生物劑通常又將它們分為消毒劑：可殺死微生物，通常用于非生128各種抗微生物化學(xué)制劑殺菌能力的比較標(biāo)準(zhǔn)：石炭酸系數(shù)：指在一定時間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規(guī)定處理時間為10分鐘，而供試菌定為Salmonellatyphi（傷寒沙門氏菌）。在臨床上最早使用的消毒劑----石炭酸各種抗微生物化學(xué)制劑殺菌能力的比較標(biāo)準(zhǔn)：石炭酸系數(shù)：在臨床上129類型名稱及使用濃度作用機制應(yīng)用范圍重金屬鹽類0.05-0.1%升汞與蛋白質(zhì)的巰基結(jié)合使失活非金屬物品器皿酚類3-5%石炭酸蛋白質(zhì)變性損傷細(xì)胞膜地面家具器皿醇類70-75%乙醇蛋白質(zhì)變性,損傷細(xì)胞膜皮膚,器械酸類5-10ml醋酸熏蒸破壞細(xì)胞膜和蛋白質(zhì)房間消毒(防呼吸道感染)醛類0.5-10%甲醛破壞蛋白質(zhì)氫鍵或氨基物品消毒接種環(huán)境熏蒸氧化劑0.1%高錳酸鉀臭氧氧化蛋白質(zhì)的活性基團皮膚尿道水果蔬菜食品表面活性劑新潔爾滅蛋白質(zhì)變性破壞膜皮膚黏膜手術(shù)器械鹵素及化合物氯氣漂白粉破壞細(xì)胞膜酶蛋白質(zhì)水,游泳池水廁所類型名稱及使用濃度作用機制應(yīng)用范圍重金屬鹽類0.05-0.11302．抗代謝物

(Antimetabolite)有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似，以至可以和特定的酶結(jié)合，從而阻礙了酶的功能，干擾了代謝的正常進行，這些物質(zhì)稱為抗代謝物。葉酸對抗物（磺胺）、嘌呤對抗物（6-巰基嘌呤）、苯丙氨酸對抗物（對氟苯丙氨酸）、尿嘧啶對抗物（5-氟尿嘧啶）胸腺嘧啶對抗物（5-溴胸腺嘧啶）2．抗代謝物(Antimetabolite)有些化合物在結(jié)131磺胺藥物是最早發(fā)現(xiàn)，也是最常