實驗七 細菌鞭毛染色和運動性觀察(半固體穿刺法)課件

實驗前準備工作菌株的連續(xù)活化染色液當天配制無菌液（試管或三角瓶中）的準備部分同學的實驗結(jié)果實例鉀細菌的莢膜水洗不水洗番紅染色枯草桿菌的芽孢孔雀綠+番紅染色部分同學的實驗結(jié)果實例實驗七、細菌鞭毛染色和運動性觀察（半固體穿刺法）學習并掌握細菌的鞭毛染色法觀察細菌鞭毛的形態(tài)特征和著生方式觀察細菌是否運動來間接證明是否有鞭毛了解細菌鞭毛染色的應(yīng)用一、實驗目的二、實驗原理細菌的鞭毛極細，直徑一般為10～20nm；長度為15～20μm。直徑10～20nm長度15～20μm。光學顯微鏡下觀察：特殊的鞭毛染色在染色前先用媒染劑處理，使它沉積在鞭毛上，使鞭毛直徑變粗，然后再進行染色。觀察和判斷細菌鞭毛的方法電子顯微鏡直接觀察根據(jù)培養(yǎng)特征判斷：半固體穿刺、菌落（菌苔）形態(tài)（在半固體培養(yǎng)基中呈擴散性生長）暗視野顯微鏡或相差顯微鏡觀察三、實驗材料1、菌種：枯草桿菌（Bacillussubtilis）（連續(xù)活化3-4代，每10-12小時接種一次），金黃色葡萄球菌（Staphyloccocusaureus）2、材料與試劑：載玻片（非常潔凈）等清洗酸泡水洗蒸溜水泡酒精泡

染液A（單寧酸，F(xiàn)eCl3，福爾馬林，NaOH）

染液B（AgNO3）3、培養(yǎng)基：半固體培養(yǎng)基（0.5%瓊脂）（二）銀染法1、菌懸液的制備。沿試管壁流入直至快接近培養(yǎng)基斜面的頂部，靜置10min，同時可雙手搓動試管。2、制片：用移液槍取約100ul菌液于載玻片的一端，順著傾斜的玻片流下，自然干燥。3、染色：滴加過濾的染液Ａ覆蓋8分鐘，用Ｂ液沖洗去Ａ液，再用Ｂ液覆蓋染色，緩緩加熱至冒氣，維持約0．5秒(加熱時注意勿使出現(xiàn)干涸面)在菌體多的部位可見深褐色至黑色(共約2分鐘)，停止加熱，用水沖凈，干后鏡檢。4、鏡檢，菌體及鞭毛為深褐色到黑色。六、視頻細菌鞭毛染色法1、繪圖表示所觀察到的細菌菌體及鞭毛形態(tài)。2、簡述鞭毛染色的基本原理，鞭毛染色應(yīng)掌握哪些環(huán)節(jié)？注意些什么問題？3、記錄觀察到的細菌運動性結(jié)果（下次補記）。4、討論實驗成敗的原因。七、作業(yè)與討論開放設(shè)計性實驗的準備分組（每一排為一組，5-6人，推選1人為組長，負責本組協(xié)調(diào)，每個人都要參與，在完成的實驗設(shè)計報告中列出所有組員的學號，姓名）選題（選感興趣的小實驗，查資料，討論可行性）寫實驗設(shè)計（要求詳細具體）

實驗目的（可簡單） 實驗原理 實驗材料（包括菌種、試劑、儀器設(shè)備） 方法與步驟 可能的結(jié)果 可能存在的問題4.兩星期后交實驗設(shè)計報告，并討論實驗可能性。該實驗設(shè)計內(nèi)容將計算為一次平時成績。設(shè)計性實驗的格式實驗題目成員的姓名，學號，組長及聯(lián)系方式

實驗目的 實驗原理 實驗材料（應(yīng)當是小組成