實驗室生物安全與實驗室監(jiān)督檢查-實驗室生物安全與監(jiān)督檢查

實驗室生物安全與監(jiān)督檢查方法

廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生監(jiān)督所

黃春松

1第一部分

實驗室生物安全實驗室生物危害和生物安全的含義實驗室生物安全相關(guān)的指南的發(fā)展2（一）實驗室生物安全的含義什么是生物危害？廣義上的生物危害：指有害或有潛在危害的生物因子對人、環(huán)境、生態(tài)和社會造成的危害或潛在危害。實驗室生物危害：指在微生物和生物醫(yī)學實驗室研究過程中對人、環(huán)境、生態(tài)和社會造成的危害和對環(huán)境造成的污染。3實驗室生物危害的類型例如：病毒、細菌、真菌、毒素和寄生蟲等。

來自感染的人和動物的血液、體液和各種組織等。組織細胞的培養(yǎng)和某些類型的核酸的轉(zhuǎn)染。4實驗室相關(guān)感染暴露途徑：

經(jīng)皮接種感染氣溶膠吸入感染粘膜接觸感染食入感染5實驗室相關(guān)感染感染源培養(yǎng)物和儲存物實驗動物標本被上述內(nèi)容污染的物品6實驗室相關(guān)感染敏感宿主免疫系統(tǒng)疫苗接種狀況年齡7實驗室相關(guān)感染80%是不明原因的感染。20%感染的原因是明確的。80%是由工作人員操作失誤引起的；20%是由設(shè)備故障引起的。導致感染最多的4種實驗室事故溢出和潑灑針頭和注射器銳器、碎玻璃動物或動物體外寄生蟲的咬傷或抓傷8

實驗室相關(guān)感染（事例）1941年美國發(fā)生74例實驗室相關(guān)的吸入性布氏桿菌感染事故1976年英國某醫(yī)學實驗室的工作人員體檢時發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌感染者比其他人員高5倍1978年英國報告一個商業(yè)洗衣房因清洗來自一Q熱實驗室的內(nèi)衣褲及外衣時發(fā)生6例雇員和1例參觀者感染Q熱1992年美國報告因工作感染愛滋病的人員13例，其中有1例是實驗室工作者，12例是臨床醫(yī)生或護士1993年國內(nèi)某醫(yī)院報告225名醫(yī)院工作人員HBV檢測結(jié)果，醫(yī)生護士、食堂工作人員、檢驗人員、其中檢驗人員感染率最高，陽性率為81.2%。多為主觀估計錯誤及操作失誤引發(fā)2003年新加坡、臺灣SARS實驗室感染事件2004年北京SARS實驗室感染事件9什么是生物安全？為了避免微生物和醫(yī)學實驗室中在進行各種有危害或有潛在危害的生物因子活動過程中,可能對人、環(huán)境和社會造成的危害或潛在危害，而采取的防護措施（簡稱硬件:包括實驗室設(shè)施和安全設(shè)備）和管理措施（簡稱軟件:是指管理體系,包括生物手冊、程序性文件、管理制度、操作細則以及相應記錄表格），達到對人、環(huán)境和社會的安全防護目的。實驗室生物安全防護的內(nèi)容包括安全設(shè)備、個體防護裝置和措施（一級防護），實驗室的特殊設(shè)計和建設(shè)要求（二級防護），嚴格的管理制度和標準化的操作程序和規(guī)程。10（二二））實實驗驗室室生生物物安安全全相相關(guān)關(guān)的的指指南南WHO的的《《實實驗驗室室生生物物安安全全手手冊冊》》1983年年第第一一版版，，1993第第二二版版，，2004第第三三版版，，歐洲洲經(jīng)經(jīng)濟濟共共同同體體（（EEC））EEC委委員員會會指指令令93/88對對微微生生物物危危險險等等級級的的分分類類美國國的的《《微微生生物物和和生生物物醫(yī)醫(yī)學學實實驗驗室室生生物物安安全全手手冊冊》》1983年年第第一一版版，，1993年年第第三三版版，，1999年年第第四四版版；；美國國的的《《生生物物危危害害主主要要防防護護：：生生物物安安全全柜柜的的選選擇擇、、安安裝裝和和使使用用》》2000年年第第二二版版；；11（二二））實實驗驗室室生生物物安安全全相相關(guān)關(guān)的的指指南南加拿拿大大的的《《實實驗驗室室生生物物安安全全指指南南》》1990年年第第一一版版，，1996年年第第二二版版，，2003年年第第三三版版(征征求求意意見見稿稿)英國國的的《《根根據(jù)據(jù)危危害害和和防防護護分分類類的的生生物物因因子子的的分分類類》》(危危險險病病原原體體咨咨詢詢委委員員會會,ACDP)1995年年，，第第四四版版12（二二））實實驗驗室室生生物物安安全全相相關(guān)關(guān)的的指指南南我國國的的生生物物安安全全相相關(guān)關(guān)標標準準GB19489《《實實驗驗室室－－生生物物安安全全通通用用要要求求》》，，2004年年4月月6日日，，第第一一版版衛(wèi)生生部部的的《《微微生生物物和和生生物物醫(yī)醫(yī)學學實實驗驗室室－－生生物物安安全全通通用用準準則則》》，，2003年年8月月1日日，，第第一一版版《病病原原微微生生物物實實驗驗室室生生物物安安全全環(huán)環(huán)境境管管理理辦辦法法》》2006年年3月月2日日國國家家環(huán)環(huán)境境保保護護總總局局第第32號號13病原微微生物物的分分類第七條條國國家根根據(jù)病病原微微生物物的傳傳染性性、感感染后后對個個體或或者群群體的的危害害程度度，將將病原原微生生物分分為四四類：：《病原原微生生物實實驗室室生物物安全全管理理條例例》14病原微微生物物的分分類第一類類病原原微生生物，，是指指能夠夠引起起人類類或者者動物物非常常嚴重重疾病病的微微生物物，以以及我我國尚尚未發(fā)發(fā)現(xiàn)或或者已已經(jīng)宣宣布消消滅的的微生生物。。第第二類類病原原微生生物，，是指指能夠夠引起起人類類或者者動物物嚴重重疾病病，比比較容容易直直接或或者間間接在在人與與人、、動物物與人人、動動物與與動物物間傳傳播的的微生生物。。第一類類、第第二類類病原原微生生物統(tǒng)統(tǒng)稱為為高致致病性性病原原微生生物。。15病原微微生物物的分分類第三類類病原原微生生物，，是指指能夠夠引起起人類類或者者動物物疾病病，但但一般般情況況下對對人、、動物物或者者環(huán)境境不構(gòu)構(gòu)成嚴嚴重危危害，，傳播播風險險有限限，實實驗室室感染染后很很少引引起嚴嚴重疾疾病，，并且且具備備有效效治療療和預預防措措施的的微生生物。。第第四類類病原原微生生物，，是指指在通通常情情況下下不會會引起起人類類或者者動物物疾病病的微微生物物。16人間傳傳染的的病原原微生生物名名錄中華人人民共共和國國衛(wèi)生生部制制定二○○○六年年一月月十一一日17微生物物的危危害等等級（（RiskGroup）危害等等級分分類的的依據(jù)據(jù)：微生物物的致致病性性；傳播方方式和和宿主主范圍圍；具有的的有效效預防防措施施；具有的的有效效治療療措施施。18微生物物的危危害等等級（（RiskGroup）微生物物的危危害等等級（（分為為四個個等級級）：：危害等等級I：是指低低個體體和低低社會會危害害；不可能能引起起健康康成人人或動動物致致病的的微生生物；；要求I級生物物安全全防護護水平平（BSL－I）危害等等級II：：是指中中等個個體危危害，，有限限的社社會危危害；；很少引引起嚴嚴重的的人或或動物物疾病病；要要求二二級生生物防防護水水平（（BSL－2）19微生物物的危危害等等級（（RiskGroup）危害等等級III：是指高高個體體危險險，低低社會會危險險；可以引引起嚴嚴重的的疾病病（Bacillusanthracis,MycobacteriumtuberculosisHantaanviruses,YellowfevervirusCreutzfeldt-JakobHIV），要求三三級生生物安安全防防護水水平（（BSL－3）危害等等級VI：：是指高高個體體危險險和高高社會會危險險；可能要要求非非常嚴嚴重的的疾病?。ɡ_熱熱病毒毒、埃埃波拉拉病病毒,馬爾堡堡病毒毒），，要求求四級級生物物安全全防護護水平平（BSL－4）20(三)實驗室的標標準和要求求第五條國國家實行統(tǒng)統(tǒng)一的實驗驗室生物安安全標準。。實驗室應應當符合國國家標準和和要求。21國家的生物物安全相關(guān)關(guān)標準GB19489《實實驗室－生生物安全通通用要求》》，2004年4月月6日，第第一版衛(wèi)生部的《《微生物和和生物醫(yī)學學實驗室－－生物安全全通用準則則》，2003年8月1日，，第一版衛(wèi)生部《臨臨床實驗室室安全準則則》2005年12月1日22《實驗室－－生物安全全通用要求求》BSL-1實驗室1)無須須特殊選址址，普通建建筑物即可可，但應有有防止節(jié)肢肢動物和嚙嚙齒動物進進入的設(shè)計計。2)每個實實驗室應設(shè)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在在靠近出口口處。3)在實實驗室門口口處應設(shè)掛衣裝置，個人便裝裝與實驗室室工作服分分開設(shè)置。。4)實驗驗室的墻壁壁、天花板和地地面應平整整、易清潔、、不滲水、、耐化學品品和消毒劑劑的腐蝕。。地面應防防滑，不得得鋪設(shè)地毯毯。5)實驗臺面應防水，耐耐腐蝕、耐耐熱。6)實驗驗室中的櫥櫥柜和實驗驗臺應牢固固。櫥柜、、實驗臺彼彼此之間應應保持一定距距離，以便于清清潔。7)實驗驗室如有可可開啟的窗窗戶，應設(shè)設(shè)置紗窗。。8)實驗驗室內(nèi)應保保證工作照照明，避免免不必要的的反光和強強光。9)應有有適當?shù)南驹O(shè)備。23《實驗室－－生物安全全通用要求求》BSL-2實驗室1)滿足足6.1要要求。2)實驗驗室門應帶帶鎖并可自自動關(guān)閉。。實驗室的門門應有可視窗窗。3)應有有足夠的存存儲空間擺擺放物品以以方便使用用。在實驗驗室工作區(qū)區(qū)域外還應應當有供長長期使用的的存儲空間間。4)在實實驗室內(nèi)應應使用專門門的工作服服；應戴乳膠手套。5)在實實驗室工作作區(qū)域外應應有存放個個人衣物的的條件。6)在實實驗室所在在的建筑物物內(nèi)應配備備高壓蒸汽滅滅菌器，并按期檢檢查和驗證證，以保證證符合要求求。7)應在在實驗室內(nèi)內(nèi)配備生物安全柜柜。8)應設(shè)設(shè)洗眼設(shè)施，必要時應應有幾噴淋裝置。9)應通通風，如使使用窗戶自自然通風，，應有防蟲蟲紗窗。10)有有可靠的電電力供應和和應急照明明。必要時時，重要設(shè)設(shè)備如培養(yǎng)養(yǎng)箱、生物物安全柜、、冰箱等設(shè)設(shè)備用電源源。11)實實驗室出口口應有在黑黑暗中可明明確辨認的的標識。24高致病性病病原微生物物的運輸?shù)谑畻l運運輸高致病病性病原微微生物菌（（毒）種或或者樣本，，應當通過過陸路運輸輸；沒有陸陸路通道，，必須經(jīng)水水路運輸?shù)牡?，可以通通過水路運運輸；緊急急情況下或或者需要將將高致病性性病原微生生物菌（毒毒）種或者者樣本運往往國外的，，可以通過過民用航空空運輸。第第十十一條運運輸高致病病性病原微微生物菌（（毒）種或或者樣本，，應當具備備下列條件件：25實驗室級別別第二十條三三級、四四級實驗室室應當通過過實驗室國國家認可。。國務(wù)院認證證認可監(jiān)督督管理部門門確定的認認可機構(gòu)應應當依照實實驗室生物物安全國家家標準以及及本條例的的有關(guān)規(guī)定定，對三級級、四級實實驗室進行行認可；實實驗室通過過認可的，，頒發(fā)相應應級別的生生物安全實實驗室證書書。證書有有效期為５５年。第二十一條條一級、、二級實驗驗室不得從從事高致病病性病原微微生物實驗驗活動。三級、四級級實驗室從從事高致病病性病原微微生物實驗驗活動，應應當具備下下列條件：：26實驗室備案案第二十五條條新建、改建建或者擴建建一級、二二級實驗室室，應當向向設(shè)區(qū)的市市級人民政政府衛(wèi)生主主管部門或或者獸醫(yī)主主管部門備備案。設(shè)區(qū)的市級級人民政府府衛(wèi)生主管管部門或者者獸醫(yī)主管管部門應當當每年將備備案情況匯匯總后報省省、自治區(qū)區(qū)、直轄市市人民政府府衛(wèi)生主管管部門或者者獸醫(yī)主管管部門。27工作人員培培訓第三十四條條實驗室室或者實驗驗室的設(shè)立立單位應當當每年定期期對工作人人員進行培培訓，保證證其掌握實實驗室技術(shù)術(shù)規(guī)范、操操作規(guī)程、、生物安全全防護知識識和實際操操作技能，，并進行考考核。工作作人員經(jīng)考考核合格的的，方可上上崗。28實驗檔案和和環(huán)境保護護第三十七條條實驗室室應當建立立實驗檔案案，記錄實實驗室使用用情況和安安全監(jiān)督情情況。實驗驗室從事高高致病性病病原微生物物相關(guān)實驗驗活動的實實驗檔案保保存期，不不得少于２２０年。第第三三十八條實實驗室應應當依照環(huán)環(huán)境保護的的有關(guān)法律律、行政法法規(guī)和國務(wù)務(wù)院有關(guān)部部門的規(guī)定定，對廢水水、廢氣以以及其他廢廢物進行處處置，并制制定相應的的環(huán)境保護護措施，防防止環(huán)境污污染。29標識第三十九條條三級、四級級實驗室應當在明顯顯位置標示示國務(wù)院衛(wèi)衛(wèi)生主管部部門和獸醫(yī)醫(yī)主管部門門規(guī)定的生生物危險標標識和生物物安全實驗驗室級別標標志。30法律責任第五十六條條三級、、四級實驗驗室未依照照本條例的的規(guī)定取得得從事高致致病性病原原微生物實實驗活動的的資格證書書，或者已已經(jīng)取得相相關(guān)資格證證書但是未未經(jīng)批準從從事某種高高致病性病病原微生物物或者疑似似高致病性性病原微生生物實驗活活動的，由由縣級以上上地方人民民政府衛(wèi)生生主管部門門、獸醫(yī)主主管部門依依照各自職職責，責令令停止有關(guān)關(guān)活動，監(jiān)監(jiān)督其將用用于實驗活活動的病原原微生物銷銷毀或者送送交保藏機機構(gòu)，并給給予警告；；31法律責任第五十九條條違反本本條例規(guī)定定，在不符符合相應生生物安全要要求的實驗驗室從事病病原微生物物相關(guān)實驗驗活動的，，由縣級以以上地方人人民政府衛(wèi)衛(wèi)生主管部部門、獸醫(yī)醫(yī)主管部門門依照各自自職責，責責令停止有有關(guān)活動，，監(jiān)督其將將用于實驗驗活動的病病原微生物物銷毀或者者送交保藏藏機構(gòu)，并并給予警告告；32法律責任第六十條實實驗室有有下列行為為之一的，，由縣級以以上地方人人民政府衛(wèi)衛(wèi)生主管部部門、獸醫(yī)醫(yī)主管部門門依照各自自職責，責責令限期改改正，給予予警告；逾逾期不改正正的，由實實驗室的設(shè)設(shè)立單位對對主要負責責人、直接接負責的主主管人員和和其他直接接責任人員員，依法給給予撤職、、開除的處處分；有許許可證件的的，并由原原發(fā)證部門門吊銷有關(guān)關(guān)許可證件件：33法律責任（一）未依依照規(guī)定在在明顯位置置標示國務(wù)務(wù)院衛(wèi)生主主管部門和和獸醫(yī)主管管部門規(guī)定定的生物危危險標識和和生物安全全實驗室級級別標志的的；（（二）未未向原批準準部門報告告實驗活動動結(jié)果以及及工作情況況的；（（三））未依照規(guī)規(guī)定采集病病原微生物物樣本，或或者對所采采集樣本的的來源、采采集過程和和方法等未未作詳細記記錄的；（（四四）新建、、改建或者者擴建一級級、二級實實驗室未向向設(shè)區(qū)的市市級人民政政府衛(wèi)生主主管部門或或者獸醫(yī)主主管部門備備案的；（（五五）未依照照規(guī)定定期期對工作人人員進行培培訓，或者者工作人員員考核不合合格允許其其上崗，或或者批準未未采取防護護措施的人人員進入實實驗室的；；（（六）實驗驗室工作人人員未遵守守實驗室生生物安全技技術(shù)規(guī)范和和操作規(guī)程程的；（（七））未依照規(guī)規(guī)定建立或或者保存實實驗檔案的的；（（八）未未依照規(guī)定定制定實驗驗室感染應應急處置預預案并備案案的。34醫(yī)療機構(gòu)臨臨床實驗室室監(jiān)督檢查查相關(guān)法規(guī)《醫(yī)療機構(gòu)構(gòu)臨床實驗驗室管理辦辦法》35醫(yī)療機構(gòu)臨臨床實驗室室管理的一一般規(guī)定第六條衛(wèi)生生行政部門門在核準醫(yī)醫(yī)療機構(gòu)的的醫(yī)學檢驗驗科診療科科目登記時時，應當明明確醫(yī)學檢檢驗科下設(shè)設(shè)專業(yè)。醫(yī)療機構(gòu)應應當按照衛(wèi)衛(wèi)生行政部部門核準登登記的醫(yī)學學檢驗科下下設(shè)專業(yè)診診療科目設(shè)設(shè)定臨床檢檢驗項目，，提供臨床床檢驗服務(wù)務(wù)。新增醫(yī)醫(yī)學檢驗科科下設(shè)專業(yè)業(yè)或超出已已登記的專專業(yè)范圍開開展臨床檢檢驗項目，，應當按照照《醫(yī)療機機構(gòu)管理條條例》的有有關(guān)規(guī)定辦辦理變更登登記手續(xù)。。36醫(yī)療機構(gòu)臨臨床實驗室室管理的一一般規(guī)定第十九條診診斷性性臨床檢驗驗報告應當當由執(zhí)業(yè)醫(yī)醫(yī)師出具。。鄉(xiāng)、民族鄉(xiāng)鄉(xiāng)、鎮(zhèn)的醫(yī)醫(yī)療機構(gòu)臨臨床實驗室室診斷性臨臨床檢驗報報告可以由由執(zhí)業(yè)助理理醫(yī)師出具具。37醫(yī)療機構(gòu)臨臨床實驗室室質(zhì)量管理理第二十五條條醫(yī)療療機構(gòu)臨床床實驗室應應當對開展展的臨床檢檢驗項目進進行室內(nèi)質(zhì)質(zhì)量控制，，繪制質(zhì)量控控制圖。出現(xiàn)質(zhì)量量失控現(xiàn)象象時，應當當及時查找找原因，采采取糾正措措施，并詳細記錄錄。第二十六條條醫(yī)療療機構(gòu)臨床床實驗室室室內(nèi)質(zhì)量控控制主要包包括質(zhì)控品的選選擇，質(zhì)控控品的數(shù)量量，質(zhì)控頻頻度，質(zhì)控控方法，失失控的判斷斷規(guī)則，失控時原因因分析及處處理措施，質(zhì)控數(shù)據(jù)據(jù)管理要求求等。第二十七條條醫(yī)療療機構(gòu)臨床床實驗室定定量測定項項目的室內(nèi)內(nèi)質(zhì)量控制制標準按照照《臨床實實驗室定量量測定室內(nèi)內(nèi)質(zhì)量控制制指南》（（GB/20032302-T-361）執(zhí)行行。38常見的檢驗驗科儀器全自動生化化儀血細胞分析析儀全自動化學學發(fā)光分析析儀39醫(yī)療機構(gòu)臨臨床實驗室室質(zhì)量管理理第二十八條條醫(yī)療療機構(gòu)臨床床實驗室應應當參加經(jīng)經(jīng)衛(wèi)生部認認定的室間間質(zhì)量評價價機構(gòu)組織織的臨床檢檢驗室間質(zhì)質(zhì)量評價。。第二十九條條醫(yī)療療機構(gòu)臨床床實驗室參參加室間質(zhì)質(zhì)量評價應應當按照常常規(guī)臨床檢檢驗方法與與臨床檢驗驗標本同時時進行，不不得另選檢檢測系統(tǒng)，，保證檢驗驗結(jié)果的真真實性。醫(yī)醫(yī)療機構(gòu)臨臨床實驗室室對于室間間質(zhì)量評價價不合格的的項目，應應當及時查查找原因，，采取糾正正措施。40醫(yī)療機構(gòu)構(gòu)臨床實實驗室安安全管理理第三十三三條醫(yī)醫(yī)療機機構(gòu)應當當加強臨臨床實驗驗室生物物安全管管理。醫(yī)療機構(gòu)構(gòu)臨床實實驗室生生物安全全管理要要嚴格執(zhí)執(zhí)行《病原微微生物實實驗室生生物安全全管理條條例》等有關(guān)規(guī)規(guī)定。41醫(yī)療機構(gòu)構(gòu)臨床實實驗室安安全管理理第四十二二條醫(yī)醫(yī)療機機構(gòu)臨床床實驗室室應當按按照《醫(yī)醫(yī)療廢物物管理條條例》和和《醫(yī)療療衛(wèi)生機機構(gòu)醫(yī)療療廢物管管理辦法法》相關(guān)關(guān)規(guī)定妥妥善處理理醫(yī)療廢廢物。42關(guān)于標本本的處理理《醫(yī)療廢物物管理條條例》第十九條條醫(yī)醫(yī)療衛(wèi)生生機構(gòu)應應當根據(jù)據(jù)就近集集中處置置的原則則，及時時將醫(yī)療療廢物交交由醫(yī)療療廢物集集中處置置單位處處置。醫(yī)療廢物物中病原原體的培培養(yǎng)基、、標本和和菌種、、毒種保保存液等等高危險險廢物，在交醫(yī)醫(yī)療廢物物集中處處置單位位處置前前應當就就地消毒毒。中華人民民共和國國國家標標準《實實驗室生生物安全全通用要要求》廢棄物處處置所有棄置置的實驗驗室生物物樣本、、培養(yǎng)物物和被污污染的廢廢棄物在在從實驗驗室中取取走之前前,應使使其達到到生物學學安全。。生生物學學安全可可通過高高壓消毒毒處理或或其他被被承認的的技術(shù)達達到。實實驗室室廢棄物物應置于于適當?shù)牡拿芊馇仪曳缆┤萑萜髦邪舶踩\出出實驗室室。43關(guān)于標本本的處理理標本處理理：⑷可可重復使使用的物物品和污污染的器器具應置置于裝有有次氯酸酸鈉1:10稀稀釋液或或其他合合適的消消毒劑的的不銹鋼鋼容器內(nèi)內(nèi)，然后后進行高高壓滅菌菌、清洗洗和再次次滅菌。。⑸對醫(yī)醫(yī)療廢棄棄物處理理的管理理應遵守守有關(guān)法法規(guī)?！杜R床實實驗室安安全準則則》44監(jiān)督管理理第四十五五條醫(yī)醫(yī)療機機構(gòu)有下下列情形形之一的的，由縣縣級以上上地方衛(wèi)衛(wèi)生行政政部門按按照《醫(yī)醫(yī)療機