DB22T3289-2021玉木耳液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程-（高清正版）

ICS65.020CCSICS65.020CCSB05吉 林 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB22/T3289—2021玉木耳液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程Acodeofpracticeforliquidspawnproductionofwhitewoodear20212021112620211215吉林省市場(chǎng)監(jiān)督管理廳發(fā)布前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由吉林省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)、黑龍江黑臻生物科技有限公司。本文件主要起草人：李曉、張波、徐安然、錢(qián)可晴、楊迪、劉宗、Samwel、馬世玉。玉木耳液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于玉木耳液體菌種的生產(chǎn)。（GB/T150.4壓力容器第四部分：制造、檢驗(yàn)和驗(yàn)收GB/T12728-2006食用菌術(shù)語(yǔ)GBGB/T12728-2006食用菌術(shù)語(yǔ)GB50073潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范NY/T391NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1846食用菌菌種檢驗(yàn)規(guī)程DB22/T2603玉木耳菌種3術(shù)語(yǔ)和定義GB/T12728界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1玉木耳whitewoodear（Auricularia（3.2液體菌種liquidspawn培養(yǎng)基為液體狀態(tài)的菌種。[來(lái)源：GB/T12728—2006，2.5.30]。3.3液體菌種發(fā)酵罐cultivationapparatusforliquidspawn食用菌液體菌種培養(yǎng)專(zhuān)用設(shè)備，要求不銹鋼材質(zhì)，并符合GB/T150.4的要求。3.4接種量inoculationrate接入發(fā)酵罐中的食用菌菌種數(shù)量，用菌種體積與培養(yǎng)基體積的百分比表示。3.5發(fā)酵罐空消emptyfermentercultivationapparatus對(duì)尚未加水投料的空發(fā)酵罐進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。3.6發(fā)酵罐實(shí)消fullfermentercultivationapparatus對(duì)投料后的發(fā)酵罐進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。玉木耳液體菌種生產(chǎn)流程見(jiàn)圖1。圖1液體菌種生產(chǎn)流程圖從事液體菌種生產(chǎn)的各級(jí)操作人員應(yīng)具有食用菌菌種生產(chǎn)或檢驗(yàn)人員從業(yè)資格證方可上崗。5749附近3000mNY/T391地面防水、防腐蝕、防滲漏、防滑、易清洗，應(yīng)有1.0°～1.5°的排水坡度和排水系統(tǒng)，排水溝應(yīng)是圓弧式的明溝；墻壁和天花板能防潮、防霉、防水、易清洗。應(yīng)按照GB50073規(guī)定執(zhí)行。（）GB50073pHpH所用原料應(yīng)符合NY/T528的要求，生物制劑和天然材料的水不溶性固體物料應(yīng)小于40目。認(rèn)（）DB22/T2603的要求。使用母種固體培養(yǎng)基，配方參見(jiàn)附錄A.1，生產(chǎn)應(yīng)符合NY/T528的要求。配方按照附錄A.2。20015min，用4層濕紗布過(guò)濾得濾液，再加入其余原料至溶解，定容至1000mL。分裝使用500mL～1000mL、耐121℃高溫的無(wú)色玻璃三角瓶，裝液量為三角瓶容積的1/3～3/5，在三角瓶中放入兩粒轉(zhuǎn)子，使用棉塞封瓶口，棉塞外加蓋四層紗布，滅菌時(shí)棉塞外加蓋牛皮紙防潮?！鏈缇?0min7020℃～258塊～10塊（2～3）mm×（2～3）mm具體操作與要求如下：2d575%培養(yǎng)，溫度控制在25℃±1℃，轉(zhuǎn)速140rpm～160rpm，培養(yǎng)時(shí)間7d～9d。具體操作與要求如下：10min培養(yǎng)，溫度控制在25℃±1℃，轉(zhuǎn)速140rpm～160rpm，培養(yǎng)時(shí)間7d～9d。具體操作與要求如下：10min90%以上）pH5.0～5.5具體操作與要求如下：0.12MPa12140min。按照附錄A.3配方稱(chēng)取原料，原料應(yīng)符合GB4789.28中的規(guī)定，用水符合GB5749中的要求。%，加入0.03%1min～2min打開(kāi)蒸汽閥門(mén)給發(fā)酵罐通蒸汽，當(dāng)溫度到達(dá)90℃時(shí)關(guān)閉空氣壓縮機(jī)，繼續(xù)加熱使發(fā)酵罐溫度達(dá)到121℃保持80min，溫度不應(yīng)低于121℃。1100Mpa25接種具體操作步驟與要求如下：75%掉瓶塞，灼燒瓶口10s～13s后將菌種倒入發(fā)酵罐中，接種量為1:1000；8s～10掉瓶塞，灼燒瓶口10s～13s后將菌種倒入發(fā)酵罐中，接種量為1:1000；8s～10s培養(yǎng)具體操作與要求如下：1:0.4V/V～1.2V/V（/）1d～2dd5d～6d，6d～7d2520.05MPa。發(fā)酵罐液體菌種培養(yǎng)至48h～72h，應(yīng)對(duì)罐內(nèi)菌種進(jìn)行一次雜菌檢測(cè)，具體檢測(cè)內(nèi)容及要求見(jiàn)附錄B。8dC25±24h放罐接種應(yīng)按下列步驟進(jìn)行：30min25mL～30mL；30min；貯存玉木耳液體菌種培養(yǎng)好后應(yīng)立即使用，如不能立即使用需進(jìn)行貯藏。溫度應(yīng)低于20℃，但不應(yīng)低于10℃。發(fā)酵罐內(nèi)液體菌種應(yīng)持續(xù)通入無(wú)菌空氣，保持罐壓0.01MPa～0.03MPa，可存放2d。母種、搖瓶液體菌種和發(fā)酵罐液體菌種生產(chǎn)的每個(gè)環(huán)節(jié)都要有詳實(shí)的記錄，記錄內(nèi)容按附錄D執(zhí)行。由具體操作人員現(xiàn)場(chǎng)填寫(xiě)記錄，定期由主管領(lǐng)導(dǎo)審核，簽字后歸檔保存，檔案應(yīng)保存3年以上。附錄A（資料性）玉木耳菌種培養(yǎng)基配方馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂18g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g，水定容至1000mL，pH自然。馬鈴薯200g20g3g1g0.5g1000mL，pH玉米粉2.25kg，黃豆粉2.25kg，葡萄糖3.75kg，白砂糖3.75kg，磷酸二氫鉀0.75kg，硫酸鎂0.375kg，消泡劑200mL，水定容至600L。附錄B（規(guī)范性）發(fā)酵罐液體菌種檢測(cè)發(fā)酵罐液體菌種檢測(cè)見(jiàn)表B.1。表B.1發(fā)酵罐液體菌種檢測(cè)檢測(cè)內(nèi)容要求形態(tài)學(xué)觀察1040NY/T1846執(zhí)行。霉菌檢驗(yàn)按照無(wú)菌操作從取樣閥取少量培養(yǎng)液，接種于GB/T4789.28中規(guī)定的PDA培養(yǎng)基中，置于28℃恒溫培養(yǎng)48h的雜色者，或有異味者為霉菌污染物，必要時(shí)進(jìn)行鏡檢，霉菌檢驗(yàn)按照NY/T1846執(zhí)行。細(xì)菌檢驗(yàn)GB/T4789.282824h～48h為無(wú)細(xì)菌污染。細(xì)菌檢驗(yàn)按照NY/T1846執(zhí)行。pH測(cè)定取樣用pH計(jì)或pH試紙測(cè)定菌液酸堿度。pH小于5為不正常。附錄C（規(guī)范性）發(fā)酵罐液體菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵罐液體菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表C.1。表C.1發(fā)酵罐液體菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)內(nèi)容要求菌液色澤玉木耳菌絲球呈白色，濾液呈淡黃色，清澈透明。菌液形態(tài)菌液稍粘稠、不渾濁，靜置基本不分層，有大量大小均一的菌絲球均勻分布。菌液氣味無(wú)酸、臭等異味。發(fā)酵罐排氣口氣味正常，有玉木耳菌絲特有芳香氣或無(wú)明顯改變。菌絲顯微形態(tài)大量分枝菌絲分布，有鎖狀聯(lián)合，且菌絲內(nèi)原生質(zhì)分布均勻、染色劑著色深。雜菌狀態(tài)無(wú)任何雜菌。酸堿度pH5.0～5.5附錄D（資料性）玉木耳液體菌種生產(chǎn)記錄表項(xiàng)目記錄內(nèi)容備注一、母種使用情況1．生產(chǎn)日期/來(lái)源確保菌絲有活性2．使用數(shù)量3．制作人4．負(fù)責(zé)人二、搖瓶液體菌種使用情況1．接種日期2．接種人3．轉(zhuǎn)速4．溫度5．雜菌檢測(cè)6．終止培養(yǎng)日期三、發(fā)酵罐液體菌種使用情況1．發(fā)酵罐消毒滅菌情況要求完