雜質(zhì)研究結(jié)構(gòu)解析上傳課件

化學(xué)藥物雜質(zhì)研究

結(jié)構(gòu)解析化學(xué)藥物雜質(zhì)研究

結(jié)構(gòu)解析1化學(xué)藥物中雜質(zhì)的研究1234化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)和貯存）化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（定義和分類）化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的重要性有關(guān)物質(zhì)研究基本思路和分析方法5有關(guān)物質(zhì)限度的制定（原料、制劑、遺傳毒性雜質(zhì)）化學(xué)藥物中雜質(zhì)的研究1234化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)和貯存）化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（定義）《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》任何影響藥物純度的物質(zhì)ICH（人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會）

化學(xué)結(jié)構(gòu)與新藥不一樣的任何成分從雜質(zhì)定義的本質(zhì)看

在概念和范疇上一致化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（定義）化學(xué)藥物雜質(zhì)概述雜質(zhì)的研究是藥品研發(fā)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，貫穿于藥品研發(fā)的整個(gè)過程

選擇合適的分析方法準(zhǔn)確地分辨與測定雜質(zhì)的含量綜合藥學(xué)、毒理及臨床研究的結(jié)果確定雜質(zhì)的合理限度藥品在臨床使用中產(chǎn)生的不良反應(yīng)

藥品本身的藥理活性

藥品中存在的雜質(zhì)

規(guī)范地進(jìn)行雜質(zhì)研究，將其控制在一個(gè)安全、合理的限度范圍之內(nèi)

直接關(guān)系到上市藥品的質(zhì)量及安全性化學(xué)藥物雜質(zhì)概述雜質(zhì)的研究是藥品研發(fā)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，貫穿于藥化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（分類）按理化性質(zhì)分為：

有機(jī)雜質(zhì)、無機(jī)雜質(zhì)、殘留溶劑按照其來源分為：工藝雜質(zhì)（包括合成中未反應(yīng)完全的反應(yīng)物及試劑、中間體、副產(chǎn)物等）、降解產(chǎn)物、從反應(yīng)物及試劑中混入的雜質(zhì)等按照其毒性分為：毒性雜質(zhì)和普通雜質(zhì)等雜質(zhì)還可按化學(xué)結(jié)構(gòu)分為：

如其它甾體、其它生物堿、幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體和聚合物等?；瘜W(xué)藥物雜質(zhì)概述（分類）按理化性質(zhì)分為：化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

原料不純或者原料反應(yīng)未完全，以及反應(yīng)的中間產(chǎn)物、反應(yīng)的副產(chǎn)物等造成藥品原料中雜質(zhì)的存在，如：原料不純阿帕替尼化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，也能產(chǎn)生新的雜質(zhì)。緩釋片口服液海藻酸鈉羥苯甲酯

羥苯丙酯

三氯蔗糖紫外吸收較小制成制劑及穩(wěn)定性放樣中該類雜質(zhì)有所增加且紫外吸收大大增強(qiáng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中擬按加校正因子的自身對照法進(jìn)行限度控制普瑞巴林化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應(yīng)的溶媒、催化劑等溶劑的殘留也會造成藥物中雜質(zhì)的存在。

有機(jī)溶劑殘留（有機(jī)溶媒因結(jié)合情況和干燥條件的不同，存在不同程度的殘留）另外，由于使用的金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具，都可能使產(chǎn)品中引入砷鹽，以及鉛、鐵、銅等金屬雜質(zhì)。

化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應(yīng)的溶媒化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫度、濕度、日光、空氣等外界條件的影響或者受微生物的作用發(fā)生水合、氧化、環(huán)開裂等降解反應(yīng)而產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。如前述7056酸藥物制劑中處方的輔料成分也可能帶來藥物的雜質(zhì)。如前述普瑞巴林緩釋片和口服液此外也有一些其它原因引入的雜質(zhì)

如放射性藥品中的衰減

生物制品中異常表達(dá)的蛋白質(zhì)

手性化合物的光學(xué)異構(gòu)體

中草藥制劑中的殘留農(nóng)藥化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的重要性（兩方面）雜質(zhì)的研究是保證產(chǎn)品安全性的需要

藥物的整個(gè)研究階段，安全性是最重要的研究內(nèi)容雜質(zhì)研究涉及藥學(xué)研究的全過程

藥物的雜質(zhì)來源、檢測方法、限度以及可能存在潛在的安全性隱患，這些由雜質(zhì)帶來的因素，對于劑型選擇、處方組成、工藝確定、分析方法的研究以及產(chǎn)品的儲存等均產(chǎn)生較大的影響。雜質(zhì)應(yīng)是藥物質(zhì)量研究、質(zhì)量控制和安全性研究的重點(diǎn)。雜質(zhì)研究直接體現(xiàn)藥物的研究水平?；瘜W(xué)藥物雜質(zhì)研究的重要性（兩方面）雜質(zhì)的研究是保證產(chǎn)品安全性殘留溶劑、無機(jī)雜質(zhì)各國藥典都收載了經(jīng)典、簡便、有效的檢測方法，故可采用藥典的相關(guān)方法對其進(jìn)行控制金屬雜質(zhì)USP和ICH策略（明年）

ICH（Q3D）：GuidelineformetalimpurityUSP<232>：ElementalImpurity(Metals)Tests殘留溶劑、無機(jī)雜質(zhì)EMEA：GuidelineonthespecificationlimitsforresiduesofmetalcatalystsormetalreagentsEMEA：Guidelineonthespecific有機(jī)雜質(zhì)包括工藝中引入的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知的、揮發(fā)性的或不揮發(fā)性的，由于這類雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)一般與活性成分類似或具淵源關(guān)系，故通常又可稱之為有關(guān)物質(zhì)與無機(jī)雜質(zhì)及殘留溶劑比較，有關(guān)物質(zhì)研究與控制要復(fù)雜在雜質(zhì)的分離鑒定、雜質(zhì)來源分析、雜質(zhì)安全性研究、雜質(zhì)限度確定等方面，都需要結(jié)合藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、制備工藝、貯藏穩(wěn)定性、臨床應(yīng)用特點(diǎn)等進(jìn)行大量深入細(xì)致的研究工作雖然關(guān)于有關(guān)物質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則已于2005年頒布，但由于研究工作難度較大，且企業(yè)重視程度不夠

有關(guān)物質(zhì)的研究與控制仍然是目前國內(nèi)

藥品研究工作中的主要薄弱環(huán)節(jié)之一有機(jī)雜質(zhì)包括工藝中引入的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知有關(guān)物質(zhì)研究基本思路已頒布的雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則重點(diǎn)針對創(chuàng)新藥有關(guān)物質(zhì)研究進(jìn)行討論該指導(dǎo)原則涉及的一般性原則和要求同樣適用于仿制藥1.需要對原料藥合成工藝進(jìn)行研究雜質(zhì)的產(chǎn)生與工藝路線密切相關(guān)合成路線和合成工藝決定終產(chǎn)品中雜質(zhì)種類和數(shù)量，

不同生產(chǎn)工藝可能形成不同的雜質(zhì)原料藥工藝研究在雜質(zhì)控制中意義重大有關(guān)物質(zhì)研究基本思路已頒布的雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則2.雜質(zhì)譜分析，即雜質(zhì)來源分析

對工藝過程產(chǎn)生的雜質(zhì)和儲存過程的降解產(chǎn)物進(jìn)行分離對可能結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。分清楚哪些雜質(zhì)是由工藝帶進(jìn)，哪些雜質(zhì)是由降解產(chǎn)生

對于降解產(chǎn)物的產(chǎn)生機(jī)理和降解途徑進(jìn)行必要的了解

通過雜質(zhì)譜的分析，了解雜質(zhì)產(chǎn)生的原因以及雜質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，為雜質(zhì)的定性、定量分析提供實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備雜質(zhì)研究結(jié)構(gòu)解析上傳課件

3.根據(jù)工藝、結(jié)構(gòu)特征和降解途徑等雜質(zhì)譜分析結(jié)果，研究建立可靠的檢測方法。

方法的靈敏度（檢測限）、專屬性、定量限、線性、耐用性等應(yīng)符合要求。4.對雜質(zhì)檢查結(jié)果進(jìn)行綜合分析

結(jié)合指導(dǎo)原則對報(bào)告限度、鑒定限度、質(zhì)控限度的要求，確定合理的雜質(zhì)控制限度。3.根據(jù)工藝、結(jié)構(gòu)特征和降解途徑等雜質(zhì)譜分析結(jié)果，研究建有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，分析了解其形成過程

合成時(shí)可設(shè)法避免該雜質(zhì)的形成，或經(jīng)純化使之降至可接受的水平。通過該雜質(zhì)的毒性實(shí)驗(yàn)（包括遺傳毒性）或檢索毒性物質(zhì)數(shù)據(jù)庫獲知該雜質(zhì)的毒性數(shù)據(jù)

為其限度的確定提供有力的依據(jù)。定性研究也是分析方法確定的重要參考，對貯藏條件的確定也有指導(dǎo)意義。藥物的有關(guān)物質(zhì)定性研究受到越來越多的重視，近年來很多文獻(xiàn)都做了相關(guān)的研究。如果不了解有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，后續(xù)的研究將無法繼續(xù)進(jìn)行。有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，分析了有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義對藥物中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性分析也是我國新藥研究與國際接軌的需要按照ICHQ3A/Q3B指導(dǎo)原則以及SFDA《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則的要求

對藥物中超過鑒定限度的有關(guān)物質(zhì)皆應(yīng)明確其來源

并推測可能的結(jié)構(gòu)有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義對藥物中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性分析有關(guān)物質(zhì)研究分析方法分析方法的選擇直接關(guān)系到雜質(zhì)測定結(jié)果的專屬性與準(zhǔn)確性因此，在進(jìn)行雜質(zhì)研究時(shí)首要問題是選擇合適的雜質(zhì)分析方法。隨著分離、檢測技術(shù)的發(fā)展與更新，高效、快速的分離技術(shù)與靈敏、穩(wěn)定、準(zhǔn)確、適用的檢測手段相結(jié)合，幾乎所有的有機(jī)雜質(zhì)均能在合適的條件下得到很好的分離與檢測應(yīng)根據(jù)藥物及雜質(zhì)的理化性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)的控制要求等確定適宜的檢測方法，由于各種分析方法均具有一定的局限性

應(yīng)注意不同原理的分析方法間的相互補(bǔ)充與驗(yàn)證

如HPLC與TLC及HPLC與CE的互相補(bǔ)充，反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)的相互補(bǔ)充，HPLC不同檢測器檢測結(jié)果的相互補(bǔ)充等有關(guān)物質(zhì)研究分析方法分析方法的選擇直接關(guān)系到雜質(zhì)測定結(jié)果的專有關(guān)物質(zhì)定量方法不加校正因子的主成分自身對照法加校正因子的主成分自身對照法(f：0.2～5.0)外標(biāo)法國內(nèi)新藥申報(bào)對雜質(zhì)定量分析的基本要求有關(guān)物質(zhì)定量方法不加校正因子的主成分自身對照法有關(guān)物質(zhì)限度的制定雜質(zhì)的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影響，如何制定雜質(zhì)的限度也是藥物研發(fā)過程中一個(gè)非常敏感的問題目前國內(nèi)在藥物雜質(zhì)研究中存在的主要問題是“雜質(zhì)限度制訂的依據(jù)不充分”研制單位通常是根據(jù)多批樣品的研究結(jié)果確定，或憑所謂的“經(jīng)驗(yàn)”制訂。特別是方法學(xué)研究不全面，沒有對雜質(zhì)進(jìn)行有效地分析，并進(jìn)行定性研究，導(dǎo)致雜質(zhì)研究不完善，成品與國外產(chǎn)品的質(zhì)量差別較大一般情況下參照ICH和化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則的相關(guān)要求制訂雜質(zhì)限度

有關(guān)物質(zhì)限度的制定雜質(zhì)的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影關(guān)于原料藥（Activepharmaceuticalingredients，APIs）的雜質(zhì)限度要求：ICHQ3A(R)雜質(zhì)限度僅與藥物的每日攝入量相關(guān)

當(dāng)藥物的每日攝入量加大，表明雜質(zhì)的攝入量也加大，因此每日攝入量≥2g時(shí)，雜質(zhì)限度也相應(yīng)降低。當(dāng)雜質(zhì)量達(dá)到質(zhì)控限度（Qualificationthreshold）時(shí)，藥物研究者就有義務(wù)對這些雜質(zhì)做安全性評價(jià)。關(guān)于原料藥（ActivepharmaceuticalinICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系列的藥理毒理及臨床研究來驗(yàn)證該藥品的安全有效性，而研究所用的樣品本身包含有超出質(zhì)控限度的該雜質(zhì)，所以如果在這些研究中并未反映出與雜質(zhì)有關(guān)的毒副作用，即使這些雜質(zhì)的含量超出了上表的質(zhì)控限度，仍可認(rèn)為這些雜質(zhì)的含量已經(jīng)通過了安全性的驗(yàn)證，此時(shí)根據(jù)試驗(yàn)樣品中雜質(zhì)的含量所確定的限度可認(rèn)為是合理的如果超出質(zhì)控限度的雜質(zhì)同時(shí)也是藥物在動(dòng)物或人體中的主要代謝產(chǎn)物，則對該雜質(zhì)可不考慮其安全性，但需制訂合理的限度。上述情況也表明，如果用于臨床前和臨床研究的藥物雜質(zhì)含量符合要求，則當(dāng)已上市產(chǎn)品中的雜質(zhì)含量小于或等于臨床前和臨床研究用藥物中的雜質(zhì)含量時(shí)，認(rèn)為上市產(chǎn)品的雜質(zhì)含量也符合要求。指導(dǎo)原則還表示，當(dāng)一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時(shí)所用藥物中雜質(zhì)的絕對量大于使用上市藥物時(shí)該雜質(zhì)的攝入量時(shí)，即使上市藥物中的雜質(zhì)含量高于研發(fā)時(shí)所用藥物中該雜質(zhì)的含量，則仍可認(rèn)為該上市藥物雜質(zhì)含量符合要求。ICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限度以下，或是公開發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)上能提供雜質(zhì)的安全性數(shù)據(jù)時(shí)，不需進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實(shí)現(xiàn)，那么必須進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性試驗(yàn)。這一系列試驗(yàn)一般包括基因突變試驗(yàn)（通常為細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)，即“Ames試驗(yàn)”），染色體損傷試驗(yàn)（細(xì)胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動(dòng)物14到90天的重復(fù)劑量全身毒性試驗(yàn)（大鼠常為28天）。由于雜質(zhì)本身的特征，可能會要求進(jìn)行一些其他試驗(yàn)。指導(dǎo)原則表示，某些情況下，當(dāng)?shù)弥s質(zhì)具有特殊毒性，則需將該雜質(zhì)的限量降低；或當(dāng)?shù)弥s質(zhì)無毒性時(shí)，可以適當(dāng)將該雜質(zhì)的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限度以下，或是公開發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)上能提供雜質(zhì)的安全性數(shù)據(jù)時(shí)，不需進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實(shí)現(xiàn)，那么必須進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性試驗(yàn)。這一系列試驗(yàn)一般包括基因突變試驗(yàn)（通常為細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)，即“Ames試驗(yàn)”），染色體損傷試驗(yàn)（細(xì)胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動(dòng)物14到90天的重復(fù)劑量全身毒性試驗(yàn)（大鼠常為28天）。由于雜質(zhì)本身的特征，可能會要求進(jìn)行一些其他試驗(yàn)。指導(dǎo)原則表示，某些情況下，當(dāng)?shù)弥s質(zhì)具有特殊毒性，則需將該雜質(zhì)的限量降低；或當(dāng)?shù)弥s質(zhì)無毒性時(shí)，可以適當(dāng)將該雜質(zhì)的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限ICHQ3A(R)指導(dǎo)原則中最具爭議的部分可能為允許使用含有雜質(zhì)的藥物進(jìn)行安全性評價(jià)以確定雜質(zhì)質(zhì)控限度。經(jīng)過一些粗略的分析認(rèn)為該法不夠靈敏，甚至是對一些高毒性雜質(zhì)來說，比如在Ames基因突變試驗(yàn)中，當(dāng)含有雜質(zhì)的藥物只表現(xiàn)出一些伴隨的毒性時(shí)，可能還是會認(rèn)為含有該雜質(zhì)的藥物無致突變作用，最終就導(dǎo)致整個(gè)試驗(yàn)檢測遺傳毒性的靈敏度降低。

很多毒理學(xué)家還是優(yōu)先選擇雜質(zhì)純品進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)ICHQ3A(R)指導(dǎo)原則中最具爭議的部分可能為ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學(xué)藥物）制劑中的雜質(zhì)為主藥的降解產(chǎn)物，或主藥與輔料和/或一次性包裝材料的反應(yīng)產(chǎn)物制劑中雜質(zhì)的限度標(biāo)準(zhǔn)決策與原料藥雜質(zhì)限度標(biāo)準(zhǔn)決策一致ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學(xué)藥物）當(dāng)在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗(yàn)證該制劑并未反映出與某一降解產(chǎn)物有關(guān)的毒副作用，此時(shí)即使制劑中該降解產(chǎn)物的量大于質(zhì)控限度，仍可認(rèn)為該制劑中所含降解產(chǎn)物的量已經(jīng)通過了安全性的驗(yàn)證，根據(jù)試驗(yàn)樣品中雜質(zhì)的含量所確定的限度可認(rèn)為是合理的。同樣，當(dāng)一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時(shí)所用產(chǎn)品中含有某降解產(chǎn)物雜質(zhì)的絕對量大于使用上市產(chǎn)品時(shí)該雜質(zhì)的攝入量時(shí)，這時(shí)盡管上市產(chǎn)品中該雜質(zhì)的含量高于研發(fā)時(shí)所用產(chǎn)品中該雜質(zhì)的含量，仍可認(rèn)為該上市產(chǎn)品雜質(zhì)含量符合要求。其余情況下，當(dāng)制劑中某雜質(zhì)超出質(zhì)控限度時(shí)，須將超出指控限度的雜質(zhì)降至指控限度以下，或者通過公開發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)上的安全性數(shù)據(jù)或安全性試驗(yàn)證明該雜質(zhì)限度是合理的。Q3B(R)與Q3A(R)中的毒理學(xué)研究過程一致。當(dāng)在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗(yàn)證該制劑并未反映出與某一遺傳毒性雜質(zhì)的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)就藥物和制劑中有關(guān)物質(zhì)的限度控制已達(dá)成了一致意見，但并沒有能包含所有的重要方面

ICH中沒有對藥物中遺傳毒性雜質(zhì)（Genotoxicimpurities，GTIs）的限度進(jìn)行規(guī)定。藥物中遺傳毒性雜質(zhì)指藥物中可能引起基因突變，染色體斷裂或染色體重排，以及具有致癌潛力的雜質(zhì)因此，即使藥物中含有極少量的遺傳毒性雜質(zhì)可能也會引起較大的毒理學(xué)擔(dān)憂，如果不妥善處理，可能在藥物臨床研究中遇到瓶頸，或是管理機(jī)構(gòu)不予認(rèn)證。遺傳毒性雜質(zhì)的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)潛在遺傳毒性雜質(zhì)的代表性結(jié)構(gòu)其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代烴、磺酸烷基等相關(guān)結(jié)構(gòu)化合物最為常見。這類物質(zhì)可能在藥物合成過程中用作反應(yīng)試劑或者是反應(yīng)產(chǎn)物。潛在遺傳毒性雜質(zhì)的代表性結(jié)構(gòu)其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質(zhì)的生成；然而，一般情況下不可能做到完全不用這類化合物或者是完全避免這類DNA反應(yīng)活性雜質(zhì)的生成。因此，也應(yīng)對這些遺傳毒性雜質(zhì)存在的限度進(jìn)行控制，以使臨床受試者或病人在藥物使用過程中不會承擔(dān)明顯的風(fēng)險(xiǎn)。作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質(zhì)的生成；然而，一EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質(zhì)的“毒理學(xué)擔(dān)憂閾值”（Thresholdoftoxicologicalconcern，TTC）TTC為化合物不引起明顯致癌風(fēng)險(xiǎn)（相當(dāng)于10-5的終生患癌風(fēng)險(xiǎn)）的一個(gè)暴露量。EMEA和美國FDA將每個(gè)雜質(zhì)的這個(gè)暴露量設(shè)為1.5μg/人/日，作為藥物批準(zhǔn)上市的一個(gè)可被接受的質(zhì)控限度。在臨床研究階段，采用階段性TTC（StagedTTC）給藥期縮短，則雜質(zhì)的每日攝入量可相應(yīng)增加EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證1234測試樣品的要求結(jié)構(gòu)確證研究方案的制訂一般藥物的結(jié)構(gòu)確證參考文獻(xiàn)和結(jié)構(gòu)確證用對照品對結(jié)構(gòu)確證的意義及要求5藥物的名稱、結(jié)構(gòu)式及理化常數(shù)結(jié)構(gòu)確證1234測試樣品的要求結(jié)構(gòu)確證研究方案的制訂一般藥物結(jié)構(gòu)確證申報(bào)資料中涉及結(jié)構(gòu)確證有兩塊1.9#資料：主藥的結(jié)構(gòu)確證《化學(xué)藥物原料藥制備和結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》常用測試方法：元素分析、UV、IR、NMR、MS、DSC-TGA，

X-射線粉末衍射，X-射線單晶衍射2.8#資料附件2：雜質(zhì)的制備及結(jié)構(gòu)解析IR、NMR、MS結(jié)構(gòu)確證申報(bào)資料中涉及結(jié)構(gòu)確證有兩塊結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)指導(dǎo)原則

原料藥結(jié)構(gòu)確證研究的基本內(nèi)容1、研究方案的制訂藥物結(jié)構(gòu)千差萬別，制備（獲得）方法也各不相同，應(yīng)根據(jù)藥物的自身結(jié)構(gòu)特征和制備（獲得）方法制訂出合理、可行的結(jié)構(gòu)確證方案，才能有效地進(jìn)行藥物的結(jié)構(gòu)研究。結(jié)構(gòu)確證的方案應(yīng)根據(jù)藥物自身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)制訂，以下對不同類型藥物的測試方案作一簡要概述。一般藥物采用常規(guī)方法，如元素分析（必要時(shí)采用高分辨質(zhì)譜）、UV、IR、NMR、MS、熱分析（差熱或熱重）、粉末X-衍射（XRPD）等即可確證藥物的結(jié)構(gòu)。對于結(jié)構(gòu)比較特殊的藥物，也可采用制備衍生物的方法間接證明藥物的結(jié)構(gòu)。對于存在順反異構(gòu)的藥物，在一般結(jié)構(gòu)確證的基礎(chǔ)上，應(yīng)增加順反結(jié)構(gòu)的研究。結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)指導(dǎo)原則

原料藥結(jié)構(gòu)確證研究的基本內(nèi)容1、手性藥物：

除進(jìn)行上述各項(xiàng)化學(xué)結(jié)構(gòu)確證和比旋度測定外，還應(yīng)采用其它有效的方法進(jìn)行研究。

單一對映體比旋度測定、手性柱色譜、核磁共振（NMR）、單晶X-衍射（XRSD）以及旋光色散（ORD）、圓二色譜（CD）等藥物分子中含有多個(gè)不對稱因素

應(yīng)對其絕對構(gòu)型、對映體純度（非對映體純度）進(jìn)行相關(guān)的研究，并盡可能提供更多的構(gòu)型確證信息。立體異構(gòu)混合物外消旋體或富集對映體手性藥物：不含金屬元素的有機(jī)鹽類或復(fù)合物根據(jù)結(jié)構(gòu)確證的需要，可提供成鹽前后的兩套波譜和試驗(yàn)數(shù)據(jù)。對于某些波譜測定有困難或不易說明藥物結(jié)構(gòu)的鹽或復(fù)合物，測定藥物的酸根或堿基的波譜，并結(jié)合其它試驗(yàn)項(xiàng)目亦可對其結(jié)構(gòu)確證提供有效的信息。金屬鹽類和絡(luò)合物在進(jìn)行一般要求的各項(xiàng)測試基礎(chǔ)上，考慮以適當(dāng)手段反映藥物中金屬元素的種類、存在形式和含量的確證試驗(yàn)。不適于或不能測試金屬鹽本身的項(xiàng)目，可考慮以成鹽前的酸分子或配位體的相應(yīng)測試結(jié)果進(jìn)行佐證。半合成藥物

分子中母核的結(jié)構(gòu)為已知并在可提供明確證據(jù)證明原分子母核結(jié)構(gòu)在半合成全過程中未發(fā)生改變的前提下，適當(dāng)簡化對母核部分結(jié)構(gòu)的確證工作，僅對新引入的基團(tuán)結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。不含金屬元素的有機(jī)鹽類或復(fù)合物多晶型藥物藥物晶型測定常用方法為粉末X-衍射（XRPD）、紅外吸收光譜、熔點(diǎn)、熱分析、光學(xué)顯微鏡等。新化學(xué)實(shí)體的藥物是否存在多種晶型的研究。已有文獻(xiàn)報(bào)道存在多晶型的藥物

應(yīng)明確藥物晶型的類型和純度含有結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑的藥物

熱分析結(jié)合干燥失重、水分或單晶X-衍射（XRSD）等，基本上可以達(dá)到對藥物中結(jié)晶水/溶劑以及吸附水/溶劑進(jìn)行定性、定量的目的多晶型藥物合成多肽藥物

通過氨基酸分析、質(zhì)譜測定、序列分析以及肽圖測繪（含有20個(gè)以上的氨基酸殘基藥物）等實(shí)驗(yàn)可基本獲得合成多肽藥物的結(jié)構(gòu)信息。藥物結(jié)構(gòu)中如有半胱氨酸，應(yīng)明確其狀態(tài)（氧化態(tài)或還原態(tài)），對含有多個(gè)半胱氨酸的多肽藥物，應(yīng)明確二硫鍵的正確連接位點(diǎn)。如各步中間體均進(jìn)行了質(zhì)譜測定，可根據(jù)相關(guān)中間體的結(jié)構(gòu)信息，推測出進(jìn)行反應(yīng)的氨基酸的種類。

質(zhì)譜是多肽藥物結(jié)構(gòu)確證的重要手段，紫外、紅外、核磁共振、多種流動(dòng)相HPLC、比旋度測定等方法亦可對肽的結(jié)構(gòu)確證提供幫助。對于多肽藥物，應(yīng)對目標(biāo)物的化學(xué)純度和對映體或非對映體純度進(jìn)行研究。合成多肽藥物多糖類藥物通過對單糖組成、分子量、糖苷鍵連接方法和連接位置等的分析，可獲得多糖類藥物的基本結(jié)構(gòu)信息。多組份藥物

應(yīng)明確各組份的組成比例，對其主要成分應(yīng)進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證，具體方法可參照本指導(dǎo)原則的相關(guān)要求。其它

上述未提及的具有特殊結(jié)構(gòu)，需特殊方法進(jìn)行說明、確證的藥物，可根據(jù)其結(jié)構(gòu)特征，制訂能反映藥物自身結(jié)構(gòu)特征的方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究。多糖類藥物測試樣品的要求在結(jié)構(gòu)確證的研究中，測試樣品的純度需要進(jìn)行一定的控制，只有使用符合要求的測試品進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究，才能獲得藥物正確的結(jié)構(gòu)信息。一般情況下，應(yīng)采用原料藥制備工藝中產(chǎn)品的精制方法對樣品進(jìn)行精制，并采用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的方法測其純度和雜質(zhì)，供試樣品的純度應(yīng)大于99.0%，雜質(zhì)含量應(yīng)小于0.5%。測試樣品的要求在結(jié)構(gòu)確證的研究中，測試樣品的純度需要進(jìn)行一定一般藥物的結(jié)構(gòu)確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。這種方法可獲得組成藥物的元素種類及含量，經(jīng)比較測試結(jié)果與理論結(jié)果差值的大?。ㄒ话阋笳`差不超過0.3％），即可初步判定供試品與目標(biāo)物的分子組成是否一致。對于因藥物自身結(jié)構(gòu)特征而難于進(jìn)行元素分析時(shí)，在保證高純度情況下可采用高分辨質(zhì)譜方法獲得藥物元素組成的相關(guān)信息。一般藥物的結(jié)構(gòu)確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同波長處吸收度的測定和吸收系數(shù)（尤其是摩爾吸收系數(shù)）的計(jì)算，以及對主要吸收譜帶進(jìn)行歸屬（如K帶、R帶、E帶、B帶），可獲得藥物結(jié)構(gòu)中可能含有的發(fā)色團(tuán)、助色團(tuán)種類以及初步的連接方式等信息，同時(shí)對藥物的鑒別亦有指導(dǎo)意義。對于發(fā)色團(tuán)上存在酸性或堿性基團(tuán)的藥物，通過在酸或堿溶液中（常用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH）最大吸收波長的測試，觀察其紫移或紅移現(xiàn)象，可為上述酸性或堿性基團(tuán)的存在提供進(jìn)一步的支持。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進(jìn)行紅外吸收光譜測試，可推測出藥物中可能存在的化學(xué)鍵、所含的官能團(tuán)及其初步的連接方式，亦可給出藥物的幾何構(gòu)型、晶型、立體構(gòu)象等信息。固態(tài)藥物紅外測試可分為壓片法、糊法、薄膜法，液態(tài)藥物可采用液膜法測試，氣態(tài)藥物則可采用氣體池測定。部分含多晶型藥物在研磨和壓片過程中，其晶型可能發(fā)生變化，可改用糊法測定，同時(shí)應(yīng)根據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)對糊劑的種類進(jìn)行選擇。鹽酸鹽藥物在采用KBr壓片時(shí)可能會發(fā)生離子交換現(xiàn)象，應(yīng)分別對氯化鉀壓片和溴化鉀壓片法測得的結(jié)果進(jìn)行比較，并根據(jù)結(jié)果選擇適宜的壓片基質(zhì)。紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進(jìn)行紅外吸收光譜測試，可推測核磁共振（NMR）本項(xiàng)測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中的類型、數(shù)目、相互連接方式、周圍化學(xué)環(huán)境、甚至空間排列等信息，進(jìn)而推測出化合物相應(yīng)官能團(tuán)的連接狀況及其初步的結(jié)構(gòu)。常用的有氫核磁共振譜（1H-NMR）和碳核磁共振譜（13C-NMR）等。核磁共振測試的重要參數(shù)有化學(xué)位移（δ）、偶合常數(shù)（J值）、峰形、積分面積等。溶劑峰或部分溶劑中的溶劑化水峰可能會對藥物結(jié)構(gòu)中部分信號有干擾，因此測試時(shí)應(yīng)選擇適宜的溶劑和方法，以使藥物所有信號得到充分顯示。核磁共振（NMR）本項(xiàng)測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中

氫核磁共振譜（1H-NMR）該項(xiàng)測試可提供供試品結(jié)構(gòu)中氫原子的數(shù)目、周圍化學(xué)環(huán)境、相互間關(guān)系、空間排列等信息。此外，屬于1H-NMR測試的NOE（NuclearOverhausereffect）或NOESY試驗(yàn)，還可給出某些官能團(tuán)在分子中位置、優(yōu)勢構(gòu)象及構(gòu)型。對含有活潑氫的藥物必需進(jìn)行氘代實(shí)驗(yàn)，以提供活潑氫的存在以及位置的信息。碳核磁共振譜（13C-NMR）該項(xiàng)測試可提供供試品結(jié)構(gòu)中不同碳原子的類型以及所處的不同化學(xué)環(huán)境信息。DEPT譜可進(jìn)一步明確區(qū)分碳原子的類型，對于結(jié)構(gòu)復(fù)雜的藥物，DEPT譜對結(jié)構(gòu)解析可給予更加有力的支持。氫核磁共振譜（1H-NMR）二維核磁共振譜

常用的二維核磁共振測試包括H-H-cosy（H-HCorrelatedspectroscopy）、HMBC（1H-detectedmultiple-bondheteronuclearmultiple-quantumcoherence）、HMQC（1H-detectedheteronuclearmultiple-quantumcoherence）等，對于結(jié)構(gòu)復(fù)雜或用一般NMR方法難以進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證的化合物，進(jìn)行二維譜測試可更有效地確證藥物的結(jié)構(gòu)。其它核磁共振譜

分子式中含F(xiàn)、P等元素的藥物，進(jìn)行相應(yīng)的F、P譜測試，除可提供相應(yīng)元素的種類、在分子中所處的化學(xué)環(huán)境等信息外，對藥物元素組成測試亦有佐證作用.二維核磁共振譜質(zhì)譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或定量的分析，重要參數(shù)有分子離子峰、碎片峰、豐度等。分子離子峰是確證藥物分子式的有力證據(jù)，應(yīng)根據(jù)藥物自身結(jié)構(gòu)特性選擇適宜的離子源和強(qiáng)度，同時(shí)盡可能地獲得分子離子峰和較多的、可反映出藥物結(jié)構(gòu)特征的碎片峰。對含有同位素元素（如Cl、Br等）的藥物，利用分子離子峰及其相關(guān)峰豐度間的關(guān)系，可以判斷藥物中部分組成元素的種類、數(shù)量。高分辨質(zhì)譜是通過精確測定分子量確定藥物分子式，但它不能反映藥物的純度和結(jié)晶水、結(jié)晶溶劑、殘留溶劑等情況。隨著科學(xué)的發(fā)展，在藥物研究中也采用了GC－MS、MS－MS、LC-MS等方法，研發(fā)者應(yīng)根據(jù)藥物的組成和結(jié)構(gòu)特征選擇適宜的方法。質(zhì)譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或粉末X-衍射（XRPD）可用于固態(tài)單一化合物的鑒別與晶型確定，晶態(tài)與非晶態(tài)物質(zhì)的判斷，多種化合物組成的多相（組分）體系中的組分（物相）分析（定性或定量），原料藥（晶型）的穩(wěn)定性研究等。粉末X-衍射（XRPD）可用于固態(tài)單一化合物的鑒別與晶型確手性藥物的結(jié)構(gòu)確證應(yīng)在上述一般研究的基礎(chǔ)上，對其絕對構(gòu)型進(jìn)行確證。常用方法有單晶X-衍射（XRSD）、核磁共振譜（NMR）、圓二色譜（CD）、旋光光譜（ORD）以及前述的NOESY或NOE譜（主要適用于具有剛性結(jié)構(gòu)的藥物）等。其中單晶X－衍射（XRSD）為直接方法，后三種為間接方法。手性藥物的結(jié)構(gòu)確證應(yīng)在上述一般研究的基礎(chǔ)上，對其絕對構(gòu)型進(jìn)行藥物晶型的研究在藥物研發(fā)過程中，多晶型現(xiàn)象是普遍存在的，其中有部分藥物因晶型不同具有不同的生物利用度和/或生物活性，特別是水溶性差的口服固體藥物。對于新化學(xué)實(shí)體的藥物，應(yīng)對其在不同結(jié)晶條件下（溶劑、溫度、結(jié)晶速率等）的晶型進(jìn)行研究；通過不同晶型對藥物活性和毒性等影響的研究可為其臨床應(yīng)用晶型的選擇提供依據(jù)。對于仿制已上市的藥物，應(yīng)進(jìn)行自制藥物的晶型與已上市藥物晶型比較的研究，以保證自制品晶型的正確性。進(jìn)行連續(xù)多批樣品晶型一致性的研究，是判斷藥物制備工藝是否穩(wěn)定的依據(jù)之一。藥物晶型測定方法通常有粉末X-衍射、紅外光譜、熱分析、熔點(diǎn)、光學(xué)顯微鏡法等。藥物晶型的研究在藥物研發(fā)過程中，多晶型現(xiàn)象是普遍存在的，其藥物結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑的分析對于含有結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑的藥物，應(yīng)對藥物中的水分/溶劑進(jìn)行分析。常用分析方法為熱重、差熱分析、干燥失重、水分測定、核磁共振以及單晶X-衍射（XRSD）等。以上分析方法均有各自的優(yōu)、缺點(diǎn)，在藥物的結(jié)構(gòu)確證研究中應(yīng)根據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)特征，選擇適宜的方法，同時(shí)也可利用不同方法所得結(jié)果進(jìn)行相互補(bǔ)充、佐證，以確定存在藥物中水或溶劑的種類、數(shù)量和形式。藥物結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑的分析對于含有結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑的藥物，應(yīng)其他具有特殊結(jié)構(gòu)藥物的結(jié)構(gòu)確證結(jié)構(gòu)中含有金屬離子以及F、P等元素的藥物，可進(jìn)行相應(yīng)金屬原子吸收以及F、P等元素的測定。原子發(fā)射光譜法和原子吸收分光光度法（AES、AAS）可用于含有多種金屬離子的藥物中無機(jī)微量元素的含量分析。絡(luò)合金屬離子存在方式的檢測對于分子中含有順磁性金屬離子的藥物，常用的核磁共振（NMR）方法不能得到金屬離子在藥物中存在方式的確切信息，可采用單晶X-衍射等方法進(jìn)行檢測。其他具有特殊結(jié)構(gòu)藥物的結(jié)構(gòu)確證結(jié)構(gòu)中含有金屬離子以及F、P參考文獻(xiàn)和結(jié)構(gòu)確證用對照品

對結(jié)構(gòu)確證的意義及要求參考文獻(xiàn)和結(jié)構(gòu)確證用對照品對結(jié)構(gòu)確證具有重要的佐證意義，但不是藥物結(jié)構(gòu)確證研究的必要條件。所用的參考文獻(xiàn)應(yīng)引自國內(nèi)外權(quán)威雜志或?qū)＠?，但?yīng)注意的是不同的測試條件所得到的測試結(jié)果亦可能有所差異。藥物不同研發(fā)階段的參考文獻(xiàn)對藥物結(jié)構(gòu)確證所起到的佐證作用可能不同。參考文獻(xiàn)和結(jié)構(gòu)確證用對照品

對結(jié)構(gòu)確證的意義及要求參考文獻(xiàn)和結(jié)構(gòu)確證用對照品

對結(jié)構(gòu)確證的意義及要求構(gòu)確證用對照品的結(jié)構(gòu)信息對藥物的結(jié)構(gòu)確證亦具有重要的佐證作用不同來源的結(jié)構(gòu)確證用對照品對藥物結(jié)構(gòu)確證的佐證程度不同對于從制劑中提取、精制所得的結(jié)構(gòu)確證用對照品，如未能驗(yàn)證在提取過程中晶型是否變化，此結(jié)構(gòu)確證用對照品不能作為晶型測定和與晶型有關(guān)的其它圖譜（如IR、粉末X—射線衍射）以及理化性質(zhì)（如熔點(diǎn)、差熱分析、熱重分析）檢測的對照依據(jù)。結(jié)構(gòu)確證用對照品和測試樣品應(yīng)在同一儀器上采用相同的測試條件進(jìn)行測試，其純度應(yīng)不低于精制品純度，以保證結(jié)構(gòu)確證用對照品對藥物結(jié)構(gòu)確證的支持。結(jié)構(gòu)確證用對照品

對結(jié)構(gòu)確證的意義及要求構(gòu)確證用對照品的結(jié)構(gòu)綜合解析以上每一種方法僅對藥物的結(jié)構(gòu)研究提供相對分散的部分信息，需要通過綜合解析對這些信息進(jìn)行綜合并全面分析，才能得到目的物完整的結(jié)構(gòu)情況，綜合解析不應(yīng)是對各項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果的羅列。對于新化學(xué)實(shí)體的藥物，由于沒有相關(guān)的文獻(xiàn)和對照品，單一的信息往往不能證明藥物的結(jié)構(gòu)，需要對各種方法所得結(jié)果進(jìn)行綜合分析，才能準(zhǔn)確的解析藥物結(jié)構(gòu)，包括絕對構(gòu)型以及晶型、結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑的情況。對于已有文獻(xiàn)報(bào)道的藥物，結(jié)構(gòu)確證工作可相對簡單，特別是文獻(xiàn)數(shù)據(jù)或?qū)φ掌返臄?shù)據(jù)對結(jié)構(gòu)確證具有一定的參考價(jià)值。綜合解析以上每一種方法僅對藥物的結(jié)構(gòu)研究提供相對分散的部分信綜合解析對原料藥制備工藝的分析可為藥物的結(jié)構(gòu)確證提供間接的依據(jù)。綜合解析應(yīng)遵循簡明扼要、有機(jī)、合理、深入的原則。簡明扼要即是以簡潔的語言給出不同方法對藥物結(jié)構(gòu)確證的結(jié)果，應(yīng)避免過多的基本理論解說和繁雜的推導(dǎo)；有機(jī)是對不同方法所得的同一藥物結(jié)構(gòu)不同方面信息的綜合歸納，以求獲得藥物較完整的結(jié)構(gòu)信息；合理即是對數(shù)據(jù)進(jìn)行合理的歸屬、解析，不牽強(qiáng)附會；深入即是在現(xiàn)有解析結(jié)果的基礎(chǔ)上，根據(jù)相互間的關(guān)系，獲得與藥物結(jié)構(gòu)有關(guān)的更深層次的信息，以求得對藥物結(jié)構(gòu)的完整認(rèn)識。綜合解析對原料藥制備工藝的分析可為藥物的結(jié)構(gòu)確證提供間接的依藥物基本信息

名稱、結(jié)構(gòu)式及理化常數(shù)藥物的名稱是藥物結(jié)構(gòu)的正確反映，提供正確的、符合要求的藥物名稱有利于對藥物結(jié)構(gòu)的認(rèn)識和信息交流，藥物研發(fā)者在藥物研發(fā)的起始階段必須對所研制藥物的名稱有正確的認(rèn)識，這里所述的藥物的名稱包括化學(xué)名稱和通用名稱。藥物的化學(xué)名稱

藥物的化學(xué)名稱分為英文名稱和中文名稱，其名稱的制訂建議遵循IUPAC規(guī)則。藥物的通用名稱

藥物的英文通用名稱應(yīng)盡可能地參照國際非專利藥名（INN）確定；對INN未報(bào)道的藥品，可采用其他合適的英文名稱，但對結(jié)構(gòu)與已報(bào)道或已上市的藥品結(jié)構(gòu)屬同類藥物，通用名稱（后綴）應(yīng)基本一致。中文通用名稱應(yīng)與國家制訂并頒布的名稱一致。藥物基本信息

名稱、結(jié)構(gòu)式及理化常數(shù)藥物的名稱是藥物結(jié)構(gòu)的正分子式和分子量分子式分子式可提供藥物元素組成信息，為制訂適宜的元素分析方法提供依據(jù)，如藥物分子中含有結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑，應(yīng)以適宜的形式注明。分子量分子量既可對分子式進(jìn)行驗(yàn)證并作為元素分析的基礎(chǔ)，也有助于質(zhì)譜的解析，其精確程度應(yīng)根據(jù)所測試質(zhì)譜的類型而定。分子式和分子量分子式結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式是藥物結(jié)構(gòu)的具體存在形式，提供正確的結(jié)構(gòu)式是結(jié)構(gòu)確證研究的目的，有助于深入理解藥物的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和測試方案的制訂。對于存在異構(gòu)體、含有結(jié)晶水或溶劑、手性中心、絡(luò)合離子、酸根和堿基的藥物，應(yīng)在結(jié)構(gòu)式中注明其異構(gòu)的形式、手性中心的絕對構(gòu)型、絡(luò)合位置/方式、酸根/堿基和結(jié)晶水或溶劑的位置。結(jié)構(gòu)式結(jié)構(gòu)式是藥物結(jié)構(gòu)的具體存在形式，提供正確的結(jié)構(gòu)式是結(jié)構(gòu)綜上所述為結(jié)構(gòu)確證基本的技術(shù)要求，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，必然會出現(xiàn)新方法和新手段，因此，在藥物結(jié)構(gòu)確證研究中，不應(yīng)機(jī)械地照搬指導(dǎo)原則的方法，應(yīng)結(jié)合藥物的結(jié)構(gòu)特征，采用有效的手段與方法，以達(dá)到對藥物結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確確證的目的。綜上所述為結(jié)構(gòu)確證基本的技術(shù)要求，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，必然會ThankYou!Moresuggestions!ThankYou!Moresuggestions!63化學(xué)藥物雜質(zhì)研究

結(jié)構(gòu)解析化學(xué)藥物雜質(zhì)研究

結(jié)構(gòu)解析64化學(xué)藥物中雜質(zhì)的研究1234化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)和貯存）化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（定義和分類）化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的重要性有關(guān)物質(zhì)研究基本思路和分析方法5有關(guān)物質(zhì)限度的制定（原料、制劑、遺傳毒性雜質(zhì)）化學(xué)藥物中雜質(zhì)的研究1234化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)和貯存）化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（定義）《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》任何影響藥物純度的物質(zhì)ICH（人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會）

化學(xué)結(jié)構(gòu)與新藥不一樣的任何成分從雜質(zhì)定義的本質(zhì)看

在概念和范疇上一致化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（定義）化學(xué)藥物雜質(zhì)概述雜質(zhì)的研究是藥品研發(fā)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，貫穿于藥品研發(fā)的整個(gè)過程

選擇合適的分析方法準(zhǔn)確地分辨與測定雜質(zhì)的含量綜合藥學(xué)、毒理及臨床研究的結(jié)果確定雜質(zhì)的合理限度藥品在臨床使用中產(chǎn)生的不良反應(yīng)

藥品本身的藥理活性

藥品中存在的雜質(zhì)

規(guī)范地進(jìn)行雜質(zhì)研究，將其控制在一個(gè)安全、合理的限度范圍之內(nèi)

直接關(guān)系到上市藥品的質(zhì)量及安全性化學(xué)藥物雜質(zhì)概述雜質(zhì)的研究是藥品研發(fā)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，貫穿于藥化學(xué)藥物雜質(zhì)概述（分類）按理化性質(zhì)分為：

有機(jī)雜質(zhì)、無機(jī)雜質(zhì)、殘留溶劑按照其來源分為：工藝雜質(zhì)（包括合成中未反應(yīng)完全的反應(yīng)物及試劑、中間體、副產(chǎn)物等）、降解產(chǎn)物、從反應(yīng)物及試劑中混入的雜質(zhì)等按照其毒性分為：毒性雜質(zhì)和普通雜質(zhì)等雜質(zhì)還可按化學(xué)結(jié)構(gòu)分為：

如其它甾體、其它生物堿、幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體和聚合物等?；瘜W(xué)藥物雜質(zhì)概述（分類）按理化性質(zhì)分為：化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

原料不純或者原料反應(yīng)未完全，以及反應(yīng)的中間產(chǎn)物、反應(yīng)的副產(chǎn)物等造成藥品原料中雜質(zhì)的存在，如：原料不純阿帕替尼化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）合成藥物的生產(chǎn)過程中

化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）7056化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，也能產(chǎn)生新的雜質(zhì)。緩釋片口服液海藻酸鈉羥苯甲酯

羥苯丙酯

三氯蔗糖紫外吸收較小制成制劑及穩(wěn)定性放樣中該類雜質(zhì)有所增加且紫外吸收大大增強(qiáng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中擬按加校正因子的自身對照法進(jìn)行限度控制普瑞巴林化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）藥物在制成制劑的過程中，化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應(yīng)的溶媒、催化劑等溶劑的殘留也會造成藥物中雜質(zhì)的存在。

有機(jī)溶劑殘留（有機(jī)溶媒因結(jié)合情況和干燥條件的不同，存在不同程度的殘留）另外，由于使用的金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具，都可能使產(chǎn)品中引入砷鹽，以及鉛、鐵、銅等金屬雜質(zhì)。

化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（生產(chǎn)過程中引入）原料生產(chǎn)過程中反應(yīng)的溶媒化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫度、濕度、日光、空氣等外界條件的影響或者受微生物的作用發(fā)生水合、氧化、環(huán)開裂等降解反應(yīng)而產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。如前述7056酸藥物制劑中處方的輔料成分也可能帶來藥物的雜質(zhì)。如前述普瑞巴林緩釋片和口服液此外也有一些其它原因引入的雜質(zhì)

如放射性藥品中的衰減

生物制品中異常表達(dá)的蛋白質(zhì)

手性化合物的光學(xué)異構(gòu)體

中草藥制劑中的殘留農(nóng)藥化學(xué)藥物雜質(zhì)的來源（貯存過程中引入）藥物在貯存過程中由于受溫化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的重要性（兩方面）雜質(zhì)的研究是保證產(chǎn)品安全性的需要

藥物的整個(gè)研究階段，安全性是最重要的研究內(nèi)容雜質(zhì)研究涉及藥學(xué)研究的全過程

藥物的雜質(zhì)來源、檢測方法、限度以及可能存在潛在的安全性隱患，這些由雜質(zhì)帶來的因素，對于劑型選擇、處方組成、工藝確定、分析方法的研究以及產(chǎn)品的儲存等均產(chǎn)生較大的影響。雜質(zhì)應(yīng)是藥物質(zhì)量研究、質(zhì)量控制和安全性研究的重點(diǎn)。雜質(zhì)研究直接體現(xiàn)藥物的研究水平?；瘜W(xué)藥物雜質(zhì)研究的重要性（兩方面）雜質(zhì)的研究是保證產(chǎn)品安全性殘留溶劑、無機(jī)雜質(zhì)各國藥典都收載了經(jīng)典、簡便、有效的檢測方法，故可采用藥典的相關(guān)方法對其進(jìn)行控制金屬雜質(zhì)USP和ICH策略（明年）

ICH（Q3D）：GuidelineformetalimpurityUSP<232>：ElementalImpurity(Metals)Tests殘留溶劑、無機(jī)雜質(zhì)EMEA：GuidelineonthespecificationlimitsforresiduesofmetalcatalystsormetalreagentsEMEA：Guidelineonthespecific有機(jī)雜質(zhì)包括工藝中引入的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知的、揮發(fā)性的或不揮發(fā)性的，由于這類雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)一般與活性成分類似或具淵源關(guān)系，故通常又可稱之為有關(guān)物質(zhì)與無機(jī)雜質(zhì)及殘留溶劑比較，有關(guān)物質(zhì)研究與控制要復(fù)雜在雜質(zhì)的分離鑒定、雜質(zhì)來源分析、雜質(zhì)安全性研究、雜質(zhì)限度確定等方面，都需要結(jié)合藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、制備工藝、貯藏穩(wěn)定性、臨床應(yīng)用特點(diǎn)等進(jìn)行大量深入細(xì)致的研究工作雖然關(guān)于有關(guān)物質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則已于2005年頒布，但由于研究工作難度較大，且企業(yè)重視程度不夠

有關(guān)物質(zhì)的研究與控制仍然是目前國內(nèi)

藥品研究工作中的主要薄弱環(huán)節(jié)之一有機(jī)雜質(zhì)包括工藝中引入的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知有關(guān)物質(zhì)研究基本思路已頒布的雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則重點(diǎn)針對創(chuàng)新藥有關(guān)物質(zhì)研究進(jìn)行討論該指導(dǎo)原則涉及的一般性原則和要求同樣適用于仿制藥1.需要對原料藥合成工藝進(jìn)行研究雜質(zhì)的產(chǎn)生與工藝路線密切相關(guān)合成路線和合成工藝決定終產(chǎn)品中雜質(zhì)種類和數(shù)量，

不同生產(chǎn)工藝可能形成不同的雜質(zhì)原料藥工藝研究在雜質(zhì)控制中意義重大有關(guān)物質(zhì)研究基本思路已頒布的雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則2.雜質(zhì)譜分析，即雜質(zhì)來源分析

對工藝過程產(chǎn)生的雜質(zhì)和儲存過程的降解產(chǎn)物進(jìn)行分離對可能結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。分清楚哪些雜質(zhì)是由工藝帶進(jìn)，哪些雜質(zhì)是由降解產(chǎn)生

對于降解產(chǎn)物的產(chǎn)生機(jī)理和降解途徑進(jìn)行必要的了解

通過雜質(zhì)譜的分析，了解雜質(zhì)產(chǎn)生的原因以及雜質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，為雜質(zhì)的定性、定量分析提供實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備雜質(zhì)研究結(jié)構(gòu)解析上傳課件

3.根據(jù)工藝、結(jié)構(gòu)特征和降解途徑等雜質(zhì)譜分析結(jié)果，研究建立可靠的檢測方法。

方法的靈敏度（檢測限）、專屬性、定量限、線性、耐用性等應(yīng)符合要求。4.對雜質(zhì)檢查結(jié)果進(jìn)行綜合分析

結(jié)合指導(dǎo)原則對報(bào)告限度、鑒定限度、質(zhì)控限度的要求，確定合理的雜質(zhì)控制限度。3.根據(jù)工藝、結(jié)構(gòu)特征和降解途徑等雜質(zhì)譜分析結(jié)果，研究建有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，分析了解其形成過程

合成時(shí)可設(shè)法避免該雜質(zhì)的形成，或經(jīng)純化使之降至可接受的水平。通過該雜質(zhì)的毒性實(shí)驗(yàn)（包括遺傳毒性）或檢索毒性物質(zhì)數(shù)據(jù)庫獲知該雜質(zhì)的毒性數(shù)據(jù)

為其限度的確定提供有力的依據(jù)。定性研究也是分析方法確定的重要參考，對貯藏條件的確定也有指導(dǎo)意義。藥物的有關(guān)物質(zhì)定性研究受到越來越多的重視，近年來很多文獻(xiàn)都做了相關(guān)的研究。如果不了解有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，后續(xù)的研究將無法繼續(xù)進(jìn)行。有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義獲得有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，分析了有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義對藥物中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性分析也是我國新藥研究與國際接軌的需要按照ICHQ3A/Q3B指導(dǎo)原則以及SFDA《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則的要求

對藥物中超過鑒定限度的有關(guān)物質(zhì)皆應(yīng)明確其來源

并推測可能的結(jié)構(gòu)有關(guān)物質(zhì)的定性研究具有重要意義對藥物中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性分析有關(guān)物質(zhì)研究分析方法分析方法的選擇直接關(guān)系到雜質(zhì)測定結(jié)果的專屬性與準(zhǔn)確性因此，在進(jìn)行雜質(zhì)研究時(shí)首要問題是選擇合適的雜質(zhì)分析方法。隨著分離、檢測技術(shù)的發(fā)展與更新，高效、快速的分離技術(shù)與靈敏、穩(wěn)定、準(zhǔn)確、適用的檢測手段相結(jié)合，幾乎所有的有機(jī)雜質(zhì)均能在合適的條件下得到很好的分離與檢測應(yīng)根據(jù)藥物及雜質(zhì)的理化性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)的控制要求等確定適宜的檢測方法，由于各種分析方法均具有一定的局限性

應(yīng)注意不同原理的分析方法間的相互補(bǔ)充與驗(yàn)證

如HPLC與TLC及HPLC與CE的互相補(bǔ)充，反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)的相互補(bǔ)充，HPLC不同檢測器檢測結(jié)果的相互補(bǔ)充等有關(guān)物質(zhì)研究分析方法分析方法的選擇直接關(guān)系到雜質(zhì)測定結(jié)果的專有關(guān)物質(zhì)定量方法不加校正因子的主成分自身對照法加校正因子的主成分自身對照法(f：0.2～5.0)外標(biāo)法國內(nèi)新藥申報(bào)對雜質(zhì)定量分析的基本要求有關(guān)物質(zhì)定量方法不加校正因子的主成分自身對照法有關(guān)物質(zhì)限度的制定雜質(zhì)的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影響，如何制定雜質(zhì)的限度也是藥物研發(fā)過程中一個(gè)非常敏感的問題目前國內(nèi)在藥物雜質(zhì)研究中存在的主要問題是“雜質(zhì)限度制訂的依據(jù)不充分”研制單位通常是根據(jù)多批樣品的研究結(jié)果確定，或憑所謂的“經(jīng)驗(yàn)”制訂。特別是方法學(xué)研究不全面，沒有對雜質(zhì)進(jìn)行有效地分析，并進(jìn)行定性研究，導(dǎo)致雜質(zhì)研究不完善，成品與國外產(chǎn)品的質(zhì)量差別較大一般情況下參照ICH和化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則的相關(guān)要求制訂雜質(zhì)限度

有關(guān)物質(zhì)限度的制定雜質(zhì)的存在對藥物的安全性和有效性有很大的影關(guān)于原料藥（Activepharmaceuticalingredients，APIs）的雜質(zhì)限度要求：ICHQ3A(R)雜質(zhì)限度僅與藥物的每日攝入量相關(guān)

當(dāng)藥物的每日攝入量加大，表明雜質(zhì)的攝入量也加大，因此每日攝入量≥2g時(shí)，雜質(zhì)限度也相應(yīng)降低。當(dāng)雜質(zhì)量達(dá)到質(zhì)控限度（Qualificationthreshold）時(shí)，藥物研究者就有義務(wù)對這些雜質(zhì)做安全性評價(jià)。關(guān)于原料藥（ActivepharmaceuticalinICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系列的藥理毒理及臨床研究來驗(yàn)證該藥品的安全有效性，而研究所用的樣品本身包含有超出質(zhì)控限度的該雜質(zhì)，所以如果在這些研究中并未反映出與雜質(zhì)有關(guān)的毒副作用，即使這些雜質(zhì)的含量超出了上表的質(zhì)控限度，仍可認(rèn)為這些雜質(zhì)的含量已經(jīng)通過了安全性的驗(yàn)證，此時(shí)根據(jù)試驗(yàn)樣品中雜質(zhì)的含量所確定的限度可認(rèn)為是合理的如果超出質(zhì)控限度的雜質(zhì)同時(shí)也是藥物在動(dòng)物或人體中的主要代謝產(chǎn)物，則對該雜質(zhì)可不考慮其安全性，但需制訂合理的限度。上述情況也表明，如果用于臨床前和臨床研究的藥物雜質(zhì)含量符合要求，則當(dāng)已上市產(chǎn)品中的雜質(zhì)含量小于或等于臨床前和臨床研究用藥物中的雜質(zhì)含量時(shí)，認(rèn)為上市產(chǎn)品的雜質(zhì)含量也符合要求。指導(dǎo)原則還表示，當(dāng)一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時(shí)所用藥物中雜質(zhì)的絕對量大于使用上市藥物時(shí)該雜質(zhì)的攝入量時(shí)，即使上市藥物中的雜質(zhì)含量高于研發(fā)時(shí)所用藥物中該雜質(zhì)的含量，則仍可認(rèn)為該上市藥物雜質(zhì)含量符合要求。ICHQ3A(R)規(guī)定，在創(chuàng)新藥物的研究過程中，需通過一系ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限度以下，或是公開發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)上能提供雜質(zhì)的安全性數(shù)據(jù)時(shí)，不需進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實(shí)現(xiàn)，那么必須進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性試驗(yàn)。這一系列試驗(yàn)一般包括基因突變試驗(yàn)（通常為細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)，即“Ames試驗(yàn)”），染色體損傷試驗(yàn)（細(xì)胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動(dòng)物14到90天的重復(fù)劑量全身毒性試驗(yàn)（大鼠常為28天）。由于雜質(zhì)本身的特征，可能會要求進(jìn)行一些其他試驗(yàn)。指導(dǎo)原則表示，某些情況下，當(dāng)?shù)弥s質(zhì)具有特殊毒性，則需將該雜質(zhì)的限量降低；或當(dāng)?shù)弥s質(zhì)無毒性時(shí)，可以適當(dāng)將該雜質(zhì)的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限度以下，或是公開發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)上能提供雜質(zhì)的安全性數(shù)據(jù)時(shí)，不需進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性研究。如果上述兩種情況都不能實(shí)現(xiàn)，那么必須進(jìn)行該雜質(zhì)的安全性試驗(yàn)。這一系列試驗(yàn)一般包括基因突變試驗(yàn)（通常為細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)，即“Ames試驗(yàn)”），染色體損傷試驗(yàn)（細(xì)胞分裂中期分析或小鼠淋巴瘤TK+/-測定）和對單一種屬動(dòng)物14到90天的重復(fù)劑量全身毒性試驗(yàn)（大鼠常為28天）。由于雜質(zhì)本身的特征，可能會要求進(jìn)行一些其他試驗(yàn)。指導(dǎo)原則表示，某些情況下，當(dāng)?shù)弥s質(zhì)具有特殊毒性，則需將該雜質(zhì)的限量降低；或當(dāng)?shù)弥s質(zhì)無毒性時(shí)，可以適當(dāng)將該雜質(zhì)的限量提高。ICHQ3A(R)也表示，當(dāng)可以實(shí)現(xiàn)將雜質(zhì)的含量降至質(zhì)控限ICHQ3A(R)指導(dǎo)原則中最具爭議的部分可能為允許使用含有雜質(zhì)的藥物進(jìn)行安全性評價(jià)以確定雜質(zhì)質(zhì)控限度。經(jīng)過一些粗略的分析認(rèn)為該法不夠靈敏，甚至是對一些高毒性雜質(zhì)來說，比如在Ames基因突變試驗(yàn)中，當(dāng)含有雜質(zhì)的藥物只表現(xiàn)出一些伴隨的毒性時(shí)，可能還是會認(rèn)為含有該雜質(zhì)的藥物無致突變作用，最終就導(dǎo)致整個(gè)試驗(yàn)檢測遺傳毒性的靈敏度降低。

很多毒理學(xué)家還是優(yōu)先選擇雜質(zhì)純品進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)ICHQ3A(R)指導(dǎo)原則中最具爭議的部分可能為ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學(xué)藥物）制劑中的雜質(zhì)為主藥的降解產(chǎn)物，或主藥與輔料和/或一次性包裝材料的反應(yīng)產(chǎn)物制劑中雜質(zhì)的限度標(biāo)準(zhǔn)決策與原料藥雜質(zhì)限度標(biāo)準(zhǔn)決策一致ICHQ3B(R)ICHQ3B(R)規(guī)定藥物（化學(xué)藥物）當(dāng)在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗(yàn)證該制劑并未反映出與某一降解產(chǎn)物有關(guān)的毒副作用，此時(shí)即使制劑中該降解產(chǎn)物的量大于質(zhì)控限度，仍可認(rèn)為該制劑中所含降解產(chǎn)物的量已經(jīng)通過了安全性的驗(yàn)證，根據(jù)試驗(yàn)樣品中雜質(zhì)的含量所確定的限度可認(rèn)為是合理的。同樣，當(dāng)一系列的藥理毒理及臨床研究證明安全時(shí)所用產(chǎn)品中含有某降解產(chǎn)物雜質(zhì)的絕對量大于使用上市產(chǎn)品時(shí)該雜質(zhì)的攝入量時(shí)，這時(shí)盡管上市產(chǎn)品中該雜質(zhì)的含量高于研發(fā)時(shí)所用產(chǎn)品中該雜質(zhì)的含量，仍可認(rèn)為該上市產(chǎn)品雜質(zhì)含量符合要求。其余情況下，當(dāng)制劑中某雜質(zhì)超出質(zhì)控限度時(shí)，須將超出指控限度的雜質(zhì)降至指控限度以下，或者通過公開發(fā)表的科學(xué)文獻(xiàn)上的安全性數(shù)據(jù)或安全性試驗(yàn)證明該雜質(zhì)限度是合理的。Q3B(R)與Q3A(R)中的毒理學(xué)研究過程一致。當(dāng)在一系列的藥理毒理及臨床研究中已驗(yàn)證該制劑并未反映出與某一遺傳毒性雜質(zhì)的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)就藥物和制劑中有關(guān)物質(zhì)的限度控制已達(dá)成了一致意見，但并沒有能包含所有的重要方面

ICH中沒有對藥物中遺傳毒性雜質(zhì)（Genotoxicimpurities，GTIs）的限度進(jìn)行規(guī)定。藥物中遺傳毒性雜質(zhì)指藥物中可能引起基因突變，染色體斷裂或染色體重排，以及具有致癌潛力的雜質(zhì)因此，即使藥物中含有極少量的遺傳毒性雜質(zhì)可能也會引起較大的毒理學(xué)擔(dān)憂，如果不妥善處理，可能在藥物臨床研究中遇到瓶頸，或是管理機(jī)構(gòu)不予認(rèn)證。遺傳毒性雜質(zhì)的限度要求盡管ICHQ3A(R)和Q3B(R)潛在遺傳毒性雜質(zhì)的代表性結(jié)構(gòu)其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代烴、磺酸烷基等相關(guān)結(jié)構(gòu)化合物最為常見。這類物質(zhì)可能在藥物合成過程中用作反應(yīng)試劑或者是反應(yīng)產(chǎn)物。潛在遺傳毒性雜質(zhì)的代表性結(jié)構(gòu)其中有一類叫做烷基化試劑，如鹵代作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質(zhì)的生成；然而，一般情況下不可能做到完全不用這類化合物或者是完全避免這類DNA反應(yīng)活性雜質(zhì)的生成。因此，也應(yīng)對這些遺傳毒性雜質(zhì)存在的限度進(jìn)行控制，以使臨床受試者或病人在藥物使用過程中不會承擔(dān)明顯的風(fēng)險(xiǎn)。作為藥物研發(fā)人員必須盡量避免這些遺傳毒性雜質(zhì)的生成；然而，一EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質(zhì)的“毒理學(xué)擔(dān)憂閾值”（Thresholdoftoxicologicalconcern，TTC）TTC為化合物不引起明顯致癌風(fēng)險(xiǎn)（相當(dāng)于10-5的終生患癌風(fēng)險(xiǎn)）的一個(gè)暴露量。EMEA和美國FDA將每個(gè)雜質(zhì)的這個(gè)暴露量設(shè)為1.5μg/人/日，作為藥物批準(zhǔn)上市的一個(gè)可被接受的質(zhì)控限度。在臨床研究階段，采用階段性TTC（StagedTTC）給藥期縮短，則雜質(zhì)的每日攝入量可相應(yīng)增加EMEA：歐洲藥事管理委員會提出了遺傳毒性雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證1234測試樣品的要求結(jié)構(gòu)確證研究方案的制訂一般藥物的結(jié)構(gòu)確證參考文獻(xiàn)和結(jié)構(gòu)確證用對照品對結(jié)構(gòu)確證的意義及要求5藥物的名稱、結(jié)構(gòu)式及理化常數(shù)結(jié)構(gòu)確證1234測試樣品的要求結(jié)構(gòu)確證研究方案的制訂一般藥物結(jié)構(gòu)確證申報(bào)資料中涉及結(jié)構(gòu)確證有兩塊1.9#資料：主藥的結(jié)構(gòu)確證《化學(xué)藥物原料藥制備和結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》常用測試方法：元素分析、UV、IR、NMR、MS、DSC-TGA，

X-射線粉末衍射，X-射線單晶衍射2.8#資料附件2：雜質(zhì)的制備及結(jié)構(gòu)解析IR、NMR、MS結(jié)構(gòu)確證申報(bào)資料中涉及結(jié)構(gòu)確證有兩塊結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)指導(dǎo)原則

原料藥結(jié)構(gòu)確證研究的基本內(nèi)容1、研究方案的制訂藥物結(jié)構(gòu)千差萬別，制備（獲得）方法也各不相同，應(yīng)根據(jù)藥物的自身結(jié)構(gòu)特征和制備（獲得）方法制訂出合理、可行的結(jié)構(gòu)確證方案，才能有效地進(jìn)行藥物的結(jié)構(gòu)研究。結(jié)構(gòu)確證的方案應(yīng)根據(jù)藥物自身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)制訂，以下對不同類型藥物的測試方案作一簡要概述。一般藥物采用常規(guī)方法，如元素分析（必要時(shí)采用高分辨質(zhì)譜）、UV、IR、NMR、MS、熱分析（差熱或熱重）、粉末X-衍射（XRPD）等即可確證藥物的結(jié)構(gòu)。對于結(jié)構(gòu)比較特殊的藥物，也可采用制備衍生物的方法間接證明藥物的結(jié)構(gòu)。對于存在順反異構(gòu)的藥物，在一般結(jié)構(gòu)確證的基礎(chǔ)上，應(yīng)增加順反結(jié)構(gòu)的研究。結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)指導(dǎo)原則

原料藥結(jié)構(gòu)確證研究的基本內(nèi)容1、手性藥物：

除進(jìn)行上述各項(xiàng)化學(xué)結(jié)構(gòu)確證和比旋度測定外，還應(yīng)采用其它有效的方法進(jìn)行研究。

單一對映體比旋度測定、手性柱色譜、核磁共振（NMR）、單晶X-衍射（XRSD）以及旋光色散（ORD）、圓二色譜（CD）等藥物分子中含有多個(gè)不對稱因素

應(yīng)對其絕對構(gòu)型、對映體純度（非對映體純度）進(jìn)行相關(guān)的研究，并盡可能提供更多的構(gòu)型確證信息。立體異構(gòu)混合物外消旋體或富集對映體手性藥物：不含金屬元素的有機(jī)鹽類或復(fù)合物根據(jù)結(jié)構(gòu)確證的需要，可提供成鹽前后的兩套波譜和試驗(yàn)數(shù)據(jù)。對于某些波譜測定有困難或不易說明藥物結(jié)構(gòu)的鹽或復(fù)合物，測定藥物的酸根或堿基的波譜，并結(jié)合其它試驗(yàn)項(xiàng)目亦可對其結(jié)構(gòu)確證提供有效的信息。金屬鹽類和絡(luò)合物在進(jìn)行一般要求的各項(xiàng)測試基礎(chǔ)上，考慮以適當(dāng)手段反映藥物中金屬元素的種類、存在形式和含量的確證試驗(yàn)。不適于或不能測試金屬鹽本身的項(xiàng)目，可考慮以成鹽前的酸分子或配位體的相應(yīng)測試結(jié)果進(jìn)行佐證。半合成藥物

分子中母核的結(jié)構(gòu)為已知并在可提供明確證據(jù)證明原分子母核結(jié)構(gòu)在半合成全過程中未發(fā)生改變的前提下，適當(dāng)簡化對母核部分結(jié)構(gòu)的確證工作，僅對新引入的基團(tuán)結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。不含金屬元素的有機(jī)鹽類或復(fù)合物多晶型藥物藥物晶型測定常用方法為粉末X-衍射（XRPD）、紅外吸收光譜、熔點(diǎn)、熱分析、光學(xué)顯微鏡等。新化學(xué)實(shí)體的藥物是否存在多種晶型的研究。已有文獻(xiàn)報(bào)道存在多晶型的藥物

應(yīng)明確藥物晶型的類型和純度含有結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑的藥物

熱分析結(jié)合干燥失重、水分或單晶X-衍射（XRSD）等，基本上可以達(dá)到對藥物中結(jié)晶水/溶劑以及吸附水/溶劑進(jìn)行定性、定量的目的多晶型藥物合成多肽藥物

通過氨基酸分析、質(zhì)譜測定、序列分析以及肽圖測繪（含有20個(gè)以上的氨基酸殘基藥物）等實(shí)驗(yàn)可基本獲得合成多肽藥物的結(jié)構(gòu)信息。藥物結(jié)構(gòu)中如有半胱氨酸，應(yīng)明確其狀態(tài)（氧化態(tài)或還原態(tài)），對含有多個(gè)半胱氨酸的多肽藥物，應(yīng)明確二硫鍵的正確連接位點(diǎn)。如各步中間體均進(jìn)行了質(zhì)譜測定，可根據(jù)相關(guān)中間體的結(jié)構(gòu)信息，推測出進(jìn)行反應(yīng)的氨基酸的種類。

質(zhì)譜是多肽藥物結(jié)構(gòu)確證的重要手段，紫外、紅外、核磁共振、多種流動(dòng)相HPLC、比旋度測定等方法亦可對肽的結(jié)構(gòu)確證提供幫助。對于多肽藥物，應(yīng)對目標(biāo)物的化學(xué)純度和對映體或非對映體純度進(jìn)行研究。合成多肽藥物多糖類藥物通過對單糖組成、分子量、糖苷鍵連接方法和連接位置等的分析，可獲得多糖類藥物的基本結(jié)構(gòu)信息。多組份藥物

應(yīng)明確各組份的組成比例，對其主要成分應(yīng)進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證，具體方法可參照本指導(dǎo)原則的相關(guān)要求。其它

上述未提及的具有特殊結(jié)構(gòu)，需特殊方法進(jìn)行說明、確證的藥物，可根據(jù)其結(jié)構(gòu)特征，制訂能反映藥物自身結(jié)構(gòu)特征的方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究。多糖類藥物測試樣品的要求在結(jié)構(gòu)確證的研究中，測試樣品的純度需要進(jìn)行一定的控制，只有使用符合要求的測試品進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究，才能獲得藥物正確的結(jié)構(gòu)信息。一般情況下，應(yīng)采用原料藥制備工藝中產(chǎn)品的精制方法對樣品進(jìn)行精制，并采用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的方法測其純度和雜質(zhì)，供試樣品的純度應(yīng)大于99.0%，雜質(zhì)含量應(yīng)小于0.5%。測試樣品的要求在結(jié)構(gòu)確證的研究中，測試樣品的純度需要進(jìn)行一定一般藥物的結(jié)構(gòu)確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。這種方法可獲得組成藥物的元素種類及含量，經(jīng)比較測試結(jié)果與理論結(jié)果差值的大?。ㄒ话阋笳`差不超過0.3％），即可初步判定供試品與目標(biāo)物的分子組成是否一致。對于因藥物自身結(jié)構(gòu)特征而難于進(jìn)行元素分析時(shí)，在保證高純度情況下可采用高分辨質(zhì)譜方法獲得藥物元素組成的相關(guān)信息。一般藥物的結(jié)構(gòu)確證（藥物元素組成）通常采用元素分析法。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同波長處吸收度的測定和吸收系數(shù)（尤其是摩爾吸收系數(shù)）的計(jì)算，以及對主要吸收譜帶進(jìn)行歸屬（如K帶、R帶、E帶、B帶），可獲得藥物結(jié)構(gòu)中可能含有的發(fā)色團(tuán)、助色團(tuán)種類以及初步的連接方式等信息，同時(shí)對藥物的鑒別亦有指導(dǎo)意義。對于發(fā)色團(tuán)上存在酸性或堿性基團(tuán)的藥物，通過在酸或堿溶液中（常用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH）最大吸收波長的測試，觀察其紫移或紅移現(xiàn)象，可為上述酸性或堿性基團(tuán)的存在提供進(jìn)一步的支持。紫外吸收光譜（UV）通過對藥物溶液在可見-紫外區(qū)域內(nèi)在不同紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進(jìn)行紅外吸收光譜測試，可推測出藥物中可能存在的化學(xué)鍵、所含的官能團(tuán)及其初步的連接方式，亦可給出藥物的幾何構(gòu)型、晶型、立體構(gòu)象等信息。固態(tài)藥物紅外測試可分為壓片法、糊法、薄膜法，液態(tài)藥物可采用液膜法測試，氣態(tài)藥物則可采用氣體池測定。部分含多晶型藥物在研磨和壓片過程中，其晶型可能發(fā)生變化，可改用糊法測定，同時(shí)應(yīng)根據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)對糊劑的種類進(jìn)行選擇。鹽酸鹽藥物在采用KBr壓片時(shí)可能會發(fā)生離子交換現(xiàn)象，應(yīng)分別對氯化鉀壓片和溴化鉀壓片法測得的結(jié)果進(jìn)行比較，并根據(jù)結(jié)果選擇適宜的壓片基質(zhì)。紅外吸收光譜（IR）通過對藥物進(jìn)行紅外吸收光譜測試，可推測核磁共振（NMR）本項(xiàng)測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中的類型、數(shù)目、相互連接方式、周圍化學(xué)環(huán)境、甚至空間排列等信息，進(jìn)而推測出化合物相應(yīng)官能團(tuán)的連接狀況及其初步的結(jié)構(gòu)。常用的有氫核磁共振譜（1H-NMR）和碳核磁共振譜（13C-NMR）等。核磁共振測試的重要參數(shù)有化學(xué)位移（δ）、偶合常數(shù)（J值）、峰形、積分面積等。溶劑峰或部分溶劑中的溶劑化水峰可能會對藥物結(jié)構(gòu)中部分信號有干擾，因此測試時(shí)應(yīng)選擇適宜的溶劑和方法，以使藥物所有信號得到充分顯示。核磁共振（NMR）本項(xiàng)測試可獲得藥物組成的某些元素在分子中

氫核磁共振譜（1H-NMR）該項(xiàng)測試可提供供試品結(jié)構(gòu)中氫原子的數(shù)目、周圍化學(xué)環(huán)境、相互間關(guān)系、空間排列等信息。此外，屬于1H-NMR測試的NOE（NuclearOverhausereffect）或NOESY試驗(yàn)，還可給出某些官能團(tuán)在分子中位置、優(yōu)勢構(gòu)象及構(gòu)型。對含有活潑氫的藥物必需進(jìn)行氘代實(shí)驗(yàn)，以提供活潑氫的存在以及位置的信息。碳核磁共振譜（13C-NMR）該項(xiàng)測試可提供供試品結(jié)構(gòu)中不同碳原子的類型以及所處的不同化學(xué)環(huán)境信息。DEPT譜可進(jìn)一步明確區(qū)分碳原子的類型，對于結(jié)構(gòu)復(fù)雜的藥物，DEPT譜對結(jié)構(gòu)解析可給予更加有力的支持。氫核磁共振譜（1H-NMR）二維核磁共振譜

常用的二維核磁共振測試包括H-H-cosy（H-HCorrelatedspectroscopy）、HMBC（1H-detectedmultiple-bondheteronuclearmultiple-quantumcoherence）、HMQC（1H-detectedheteronuclearmultiple-quantumcoherence）等，對于結(jié)構(gòu)復(fù)雜或用一般NMR方法難以進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證的化合物，進(jìn)行二維譜測試可更有效地確證藥物的結(jié)構(gòu)。其它核磁共振譜

分子式中含F(xiàn)、P等元素的藥物，進(jìn)行相應(yīng)的F、P譜測試，除可提供相應(yīng)元素的種類、在分子中所處的化學(xué)環(huán)境等信息外，對藥物元素組成測試亦有佐證作用.二維核磁共振譜質(zhì)譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或定量的分析，重要參數(shù)有分子離子峰、碎片峰、豐度等。分子離子峰是確證藥物分子式的有力證據(jù)，應(yīng)根據(jù)藥物自身結(jié)構(gòu)特性選擇適宜的離子源和強(qiáng)度，同時(shí)盡可能地獲得分子離子峰和較多的、可反映出藥物結(jié)構(gòu)特征的碎片峰。對含有同位素元素（如Cl、Br等）的藥物，利用分子離子峰及其相關(guān)峰豐度間的關(guān)系，可以判斷藥物中部分組成元素的種類、數(shù)量。高分辨質(zhì)譜是通過精確測定分子量確定藥物分子式，但它不能反映藥物的純度和結(jié)晶水、結(jié)晶溶劑、殘留溶劑等情況。隨著科學(xué)的發(fā)展，在藥物研究中也采用了GC－MS、MS－MS、LC-MS等方法，研發(fā)者應(yīng)根據(jù)藥物的組成和結(jié)構(gòu)特征選擇適宜的方法。質(zhì)譜（MS）用于原子量和分子量的測定、同位素的分析、定性或粉末X-衍射（XRPD）可用于固態(tài)單一化合物的鑒別與晶型確定，晶態(tài)與非晶態(tài)物質(zhì)的判斷，多種化合物組成的多相（組分）體系中的組分（物相）分析（