苯乙胺類似腎上腺素藥物的分析

（優(yōu)選）苯乙胺類似腎上腺素藥物的分析第一頁，共四十五頁?；緝?nèi)容一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)二、鑒別試驗三、特殊雜質(zhì)與檢查四、含量測定五、體內(nèi)藥物分析第二頁，共四十五頁。（一）基本結(jié)構(gòu)：苯乙胺或兒茶酚胺類*第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第三頁，共四十五頁。鹽酸克侖特羅代表藥物（二）化學性質(zhì)（1）弱堿性：具有脂烴胺側(cè)鏈，其氮為仲胺氮。（2）酚羥基特性：具有鄰苯二酚或苯酚結(jié)構(gòu)，酚易氧化，多元酚更易氧化顯色。（3）光學活性：本類藥物大多具手性碳原子，具有旋光性。（4）芳伯氨基特性第四頁，共四十五頁。第二節(jié)鑒別試驗一、與三氯化鐵反應(yīng)具有酚羥基的本類藥物高鐵離子價有多高？第五頁，共四十五頁。第二節(jié)鑒別試驗二、與甲醛-硫酸反應(yīng)具有酚羥基的本類藥物請看具體例子第六頁，共四十五頁。第二節(jié)鑒別試驗一、與三氯化鐵反應(yīng)、與甲醛－硫酸反應(yīng)藥物三氯化鐵甲醛－硫酸腎上腺素0.1mol/L鹽酸液中顯翠綠色，加氨試液顯紫色，紫紅色紅色重酒石酸去甲腎上腺素翠綠色，加碳酸氫鈉試液顯藍色，紅色淡紅色鹽酸去氧腎上腺素紫色玫瑰紅，橙紅，深棕紅鹽酸異丙腎上腺素深綠色，滴加新制5%碳酸氫鈉液，顯藍紫色，紅色棕色，暗紫色鹽酸多巴胺墨綠色，滴加1%氨溶液，顯紫紅色第七頁，共四十五頁。第二節(jié)鑒別試驗三、氧化反應(yīng)酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀氧化呈現(xiàn)不同顏色腎上腺素碘或過氧化氫中性或酸性腎上腺素紅放置棕紅色多聚體鹽酸異丙腎上腺素偏酸性條件碘異丙腎上腺素紅硫代硫酸鈉淡紅色溶液重酒石酸去甲腎上腺素酒石酸氫鉀飽和液pH3.56碘試液放置5min硫代硫酸鈉溶液為無色或僅顯微紅色或淡紫色腎上腺素或鹽酸異丙腎上腺素明顯的紅棕色或紫色書上說的是還原性反應(yīng)第八頁，共四十五頁。四、雙縮脲反應(yīng)是鑒別芳環(huán)氨基醇的特殊反應(yīng)；可用于鹽酸麻黃堿，鹽酸偽麻黃堿鑒別：D＋CuSO4+NaOH顯藍紫色＋乙醚，醚層(紫紅色)水層(藍色)鹽酸麻黃堿第二節(jié)鑒別試驗第九頁，共四十五頁。五、與亞硝基鐵氰化鈉的反應(yīng)重酒石酸間羥胺

紅紫色亞硝基鐵氰化鈉試液丙酮（無甲醛）、碳酸氫鈉

脂肪族伯胺的專屬反應(yīng)（Rimini反應(yīng)）第十頁，共四十五頁。第二節(jié)鑒別試驗六、UV和IR藥物溶劑濃度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)重酒石酸間羥胺水0.10272鹽酸異丙腎上腺素水0.052800.50鹽酸多巴胺0.5%硫酸0.03280鹽酸芬氟拉明0.1mol/L鹽酸0.25263,270鹽酸苯乙雙胍水0.012340.60鹽酸克倫特羅0.1mol/L鹽酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274鹽酸偽麻黃堿水0.50251,257,263第十一頁，共四十五頁。一、酮體檢查第三節(jié)特殊雜質(zhì)與檢查

雜質(zhì)來源原料殘存檢查方法含量測定法（UV法）第十二頁，共四十五頁。一、酮體檢查生產(chǎn)工藝：酮體氫化還原制得，若氫化不完全則引入酮體雜質(zhì)。降解產(chǎn)物腎上腺素紅多聚體第十三頁，共四十五頁。三、Detectionofspecificimpurities通過UV光譜檢測第十四頁，共四十五頁。

檢查原理：利用酮體在310nm波長處有最大吸收，而藥物本身在此波長處幾乎沒有吸收，規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長處的吸收度限制酮體的量。例如：腎上腺素本項檢查配2.0mg/mlλ=310nmA≤0.05

鹽酸去氧腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA≤0.02鹽酸異丙腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA≤0.15

第十五頁，共四十五頁。藥物雜質(zhì)溶劑C(mg/ml)λ(nm)

A腎上腺素腎上腺酮HCl(9→2000)

2.0

310≤0.05鹽酸去氧腎上腺素酮體水

2.0

310≤0.20重酒石酸去甲腎上腺素去甲腎上腺酮水

2.0

310≤0.05鹽酸異丙腎上腺素酮體水

2.0

310≤0.15鹽酸甲氧明酮胺水

1.5

347≤0.06紫外分光光度法檢查酮體的條件及要求第十六頁，共四十五頁。例中國藥典（2010年版）規(guī)定腎上腺素中檢查酮體的方法為：取本品，加鹽酸溶液（9→2000）制成每1ml中含2.0mg的溶液，于310nm波長處測定，吸光度不得過0.05，已知酮體在310nm波長處的百分吸收系數(shù)為453，腎上腺素在該波長處無吸收。計算腎上腺素中酮體的限量。第十七頁，共四十五頁。光學純度檢查光學純度檢查：藥物溶劑C(mg/ml)比旋度腎上腺素HCl(9→2000)

20

-50.0~-53.5鹽酸去氧腎上腺素水

20

-42~-47重酒石酸去甲腎上腺素水

50

-10.0~-12.0鹽酸麻黃堿水

50

-33~-35.5鹽酸偽麻黃堿水

50

+61.0~+62.5手性碳原子第十八頁，共四十五頁。高低濃度對比法:1mg/ml,2μg/ml單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積（0.2%)；各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的2.5倍（0.5%).1.腎上腺素采用HPLC法。有關(guān)物質(zhì)檢查第十九頁，共四十五頁。2.鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查－PC法樣品制備：本品甲醇溶解即得展開：7.5×50cm，EtOAc-ethanol-water(6:3:1)顯色：10％鐵氰化鉀＋10％亞硝基鐵氰化鈉＋10％NaOH檢測：剪下顯色斑點后甲醇萃取用UV法測定第二十頁，共四十五頁。一、非水溶液滴定法利用本類藥物分子中的芳伯氨基和側(cè)鏈脂烴胺的堿性，在冰醋酸溶液中，用高氯酸液的滴定，以結(jié)晶紫為指示劑，也可用電位法指示終點。第四節(jié)含量測定第二十一頁，共四十五頁。非水溶液滴定法(弱堿性)為什么要應(yīng)用非水滴定法？這是因為本類藥物多為弱堿性，在水溶液中用酸堿滴定液直接滴定沒有明顯的突躍，終點難以觀測，常不能獲得滿意的測定結(jié)果。而在非水酸性溶劑中，只要在水溶液中的pKb<10，均可以被冰醋酸均化到溶劑醋酸根水平，相對堿度顯著增強。因而可使弱堿性的藥物都能順利進行滴定。第二十二頁，共四十五頁。(一)基本原理當HA酸性較強時，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測定條件。第二十三頁，共四十五頁。(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml高氯酸滴定液滴定以空白試驗校正以消耗標準液8ml計算結(jié)果指示劑：結(jié)晶紫第二十四頁，共四十五頁。(三）討論Kb為10-8~10-10選冰醋酸作溶劑Kb為10-10~10-12選冰醋酸和醋酐作溶劑Kb﹤10-12選醋酐作溶劑①

適用范圍Kb﹤10-8的有機堿鹽。第二十五頁，共四十五頁。＊HA不同，對滴定反應(yīng)的影響也不同。②

鹽的滴定置換滴定，即用強酸（HClO4）置換出與生物堿結(jié)合的較弱的酸（HA）。HClO4、HBr、HCl、H2SO4、HNO3在HAc中酸強度不相同。HClO4＞HBr＞H2SO4＞HCl＞HNO3＞其它弱酸在水中酸強度相等第二十六頁，共四十五頁。a.

氫鹵酸鹽的測定排除方法：加入過量的HgAc2/HAc溶液氫鹵酸HAc中酸性較強，對滴定有影響。第二十七頁，共四十五頁。b.硫酸鹽的測定，如硫酸特布他林。直接滴定法注意硫酸鹽的結(jié)構(gòu)，正確判斷反應(yīng)的摩爾比。第二十八頁，共四十五頁。c.

硝酸鹽的測定＊HNO3在冰HAc中為弱酸，不影響滴定突躍。＊HNO3具有氧化性，應(yīng)采用電位法指示終點或?qū)NO3破壞分解后再進行測定。d.

磷酸鹽及有機酸鹽的測定磷酸、有機酸為弱酸，不干擾滴定。第二十九頁，共四十五頁。最常用的指示劑是結(jié)晶紫CrystalViolet（CV）紫

藍

藍綠

黃綠

黃（堿性區(qū)）—————→（酸性區(qū)）終點的顏色應(yīng)用電位法校準。③

終點指示方法第三十頁，共四十五頁。④

注意事項a.

水分的影響及排除(CH3CO)2O+H2O→2CH3COOHb.

標準溶液的穩(wěn)定性第三十一頁，共四十五頁。二、溴量法重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素原料藥基本原理：第三十二頁，共四十五頁。基本操作：供試品→精密稱定→加水溶解后精密加溴滴定液＋鹽酸→放置并振搖→加碘化鉀→振搖→用Na2S2O3滴定至近終點→加淀粉指示液→繼續(xù)滴定至藍色消失。第三十三頁，共四十五頁。①游離溴及碘極易揮散，操作過程中防逸失②不能加入太過量的溴液，以防酚羥基氧化或溴化。一般以過量2％為宜。③平行條件作空白，校正操作中溴及碘揮發(fā)。第三十四頁，共四十五頁。三、亞硝酸鈉法鹽酸克倫特羅，芳伯氨基，重氮化，永停滴定法指示終點第三十五頁，共四十五頁。四、紫外分光光度法：苯乙胺類藥物分子具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)具有特征的紫外吸收，Chp2015采用這種方法測定多種紫類藥物。如鹽酸甲氧明注射液，重酒石酸間羥胺注射液。比色法：分子中具有芳伯胺基的藥物采用重氮化-偶合反應(yīng)顯色，分子中含有酚羥基可與亞鐵離子顯色，然后進行比色測定。Chp2015采用比色法測定鹽酸克倫羅特栓和鹽酸異丙腎上腺素。第三十六頁，共四十五頁。四、Assay四、UV和比色法五、HPLC瘦肉精第三十七頁，共四十五頁。六、體內(nèi)藥物分析(GC-MS)動物組織中的鹽酸克倫羅特殘留的測定鹽酸克倫特羅是腎上腺類神經(jīng)興奮劑?？藗愄亓_在家畜和人體內(nèi)吸收好，而且與其它β-興奮劑相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克倫特羅的豬肉出現(xiàn)中毒。又稱“瘦肉精”應(yīng)用GC-MS法進行測定。（衍生化）第三十八頁，共四十五頁。練習與思考[A型題]1．鹽酸普魯卡因注射液中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚C.水楊酸D.對氨基苯甲酸E.氨基酚2．對乙酰氨基酚中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚C.對氨基酚D.苯甲酸E.苯酚3．腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚C.對氨基酚D.酮體E.苯甲酸第三十九頁，共四十五頁。4、下列藥物中不能用亞硝酸鈉滴定法測定含量者（A）A.乙酰水楊酸B.對氨基水楊酸鈉C.對乙酰氨基酚D.普魯卡因E.苯佐卡因第四十頁，共四十五頁。5、亞硝酸鈉滴定法中，可用于指示終點的方法有（BCDE）A.自身指示劑法B.內(nèi)指示劑法C.永停法D.外指示劑法E.電位法第四十一頁，共四十五頁。6、亞硝酸鈉滴定法測定對氨基水楊酸鈉的含量時，指示滴定終點的方法為（C）A.自身指示終點法B.電位法指示終點C.永停滴定法D.氧化還原指示劑法E.酸堿指示劑法第四十二頁，共四十五頁。7、鹽酸普魯卡因采用亞硝酸鈉滴定法測定含量時的反應(yīng)條件是（ABCDE）A.強酸B.加入適量溴化鉀C.室溫（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面