磺胺嘧啶在不同病理生理狀態(tài)的藥代動力學研究及生物利用測定講課課件

教學目的及實驗內容

1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。2．掌握藥代動力學重要參數意義及測定方法，了解藥代動力學研究在新藥研究中的作用與意義。3．學習動物試驗基本技術—家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法4．通過觀察不同病理情況下，磺胺嘧啶藥物代謝動力學的變化，進一步理解影響藥物體內過程的因素。5．通過觀察NaHCO3對磺胺嘧啶體內過程的影響，進一步理解藥物相互作用在臨床合理用藥中的重要性。實驗內容：家兔血藥濃度測定及藥代動力學參數計算。教學目的及實驗內容1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。1藥代動力研究的基本內容藥代動力學（Pharmacokenetics）是用數學方式定量地研究藥物在體內的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機體模擬為數學模型，以藥代動力學參數反映機體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力學研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內的變化規(guī)律，同時可指導新藥研究過程中先導化合物的設計與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導改進藥物劑型。藥代動力研究的基本內容藥代動力學（Pharmacokenet2藥代動力學重要參數（一）半衰期（halflife,T1/2）：藥物在體內消除一半所需的時間?？赏ㄟ^測定藥物在血漿或血清中濃度的衰變求出。半衰期反映藥物自體內消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數和間隔的重要依據之一。T1/2=0.693/ke（二）表觀分布容積（apparentvolumeofdistribution,Vd）：體內藥量和血藥濃度的比值，此參數的意義在于表示藥物在組織中的分布范圍廣不廣，結合程度高不高。C越高，Vd就越低。Vd在0.14～0.29L/kg，表明藥物主要在細胞外分布，如磺胺類藥物。Vd在0.3～0.4L/kg，表明藥物主要在細胞內分布。Vd=Dose/C（三）血藥濃度-時間曲線下面積（AUC）：指血藥濃度對時間做圖后所的曲線下面積，可用梯形法和樣條函數法計算。該參數是計算生物利用度和其他動力學參數重要的基礎。（四）生物利用度（bioavailability，F）：藥物吸收入體循環(huán)的速度及程度的量度。目前均采用血藥濃度作為生物利用度指標，分為絕對生物利用度和相對生物利用度：絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈相對生物利用度F=AUC受試制劑/AUC標準制劑（五）清除率（clearance,CL）：單位時間內從體內清除的藥量CL=Vd×ke或0.693×Vd/T1/2（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內藥物與血中濃度達到穩(wěn)態(tài)，Css=AUC/T(間隔時間)（七）首過效應（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應”。首過效應的程度可以用Gibaldi等公式表示：藥代動力學重要參數（一）半衰期（halflife,T1/3動物試驗基本技術

——家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法

1、2、3均為不正確的抓取方法（1．可損傷兩腎，2．可造成皮下出血，3．可傷兩耳）

4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓，并用手托兔體。動物試驗基本技術

——家兔不同給藥途徑的4靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠端刺入，移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入（圖10），然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內5動物實驗內容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動力學研究及生物利用度測定動物實驗內容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動6磺胺嘧啶【劑量與用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次2g；兒童每日150mg/kg。治療流腦，口服，成人每日0.1g/kg，分4次服用；兒童每日0.1g～0.2g/kg；肌注，成人1g～2g/次，3～4次/日；兒童每日0.1g～0.2g/kg，分3～4次。靜注用量與肌注相當，每日1次。

【作用于用途】

本品為治療全身感染的中效磺胺，抗菌譜廣，對大多數革蘭氏陽性菌和陰性菌均有抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌淋球菌、溶血性鏈球菌的抑制作用較強，能通過血腦屏障滲入腦脊液。

臨床主要用于流腦，為治療流腦的首選藥，也可治療上述敏感菌所致其他感染。磺胺嘧啶【劑量與用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次7根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或藥代動力學研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內的變化規(guī)律，同時可指導新藥研究過程中先導化合物的設計與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導改進藥物劑型。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型7ml的試管中，搖勻。1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。5．健康家兔+NaHCO3治療流腦，口服，成人每日0.抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；通過血腦屏障滲入腦脊液。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。藥代動力學（Pharmacokenetics）是用數學方式定量地研究藥物在體內的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機體模擬為數學模型，以藥代動力學參數反映機體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力研究的基本內容絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈治療流腦，口服，成人每日0.根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。6．健康家兔+NaHCO3家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.不同時間點磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數據2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或通過血腦屏障滲入腦脊液。根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：不同時間血藥濃度OD值（三）學生試驗報告結果處理如果有8個試驗組，還可以統(tǒng)一上下班的數據，分析性別對藥物體內過程的影響。（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內藥物與血中濃度達到穩(wěn)態(tài)，皮厚可以抓，并用手托兔體。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型家兔肝損傷制備方法：取家兔，以0.8ml/kg體重皮下注射50%的四氯化碳（用大豆油稀釋），正常飼養(yǎng)24h即成。家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.5ml/kg體重劑量皮下分點注射1%氯化汞，正常飼養(yǎng)24h即成。根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：藥代動力研究的基本內8教學試驗安排及內容

教學試驗安排及內容9（一）教學分組在一個教學單元內，根據學生人數，將學生分為4組或8組，每組2～5人。取健康家兔4只或8只，如果分為4組，最好選用同一性別家兔，以避免性別對藥代動力學的影響，如果分為8組，可分為上下半班，4個組為一個組合，家兔則雌雄各半，上班選雌性，下班選雄性，可探討性別對動力學參數的影響。（一）教學分組在一個教學單元內，根據學生人數，將學生分為4組10（二）試驗方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；2．第2組的2號健康家兔，經口給予同等劑量的磺胺嘧啶；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；各組均按設計的時間點采血，計算藥代動力學參數。（二）試驗方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射11（三）學生試驗報告結果處理根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；根據1號、3號的數據，分析機體在病理條件下，對藥物代謝的影響；根據1號、4號家兔的數據，藥物是否產生相互作用。如果有8個試驗組，還可以統(tǒng)一上下班的數據，分析性別對藥物體內過程的影響。（三）學生試驗報告結果處理根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一12（四）試驗藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD）片，磺胺嘧啶鈉注射液，75%酒精，稀釋液（0.5%NaCl+0.4%NaOH），生理鹽水用于沖洗灌胃管，磺胺嘧啶貯備液為100μg/ml，0.1%SD標準液，7.5%三氯醋酸，0.5%亞硝酸鈉，0.5%麝香草酚（用20%NaOH配制），1000U/ml肝素生理鹽水，蒸餾水。（四）試驗藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD13（五）試驗器材兔盒、手術刀片、抗凝離心管、5ml離心管7個/組、試管、50ml容量瓶5個/組、10ml試管架、2ml吸管、1ml微量加樣器、5ml注射器、6號針頭、7號針頭、手術燈、動脈夾，吸耳球、擦鏡紙、棉球、臺式離心機、石英比色皿、紫外分光光度計。（五）試驗器材145．健康家兔+NaHCO38ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉/min的旋轉速度離心10min，分別取上清液。如果有8個試驗組，還可以統(tǒng)一上下班的數據，分析性別對藥物體內過程的影響。首過效應的程度可以用Gibaldi等公式表示：家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或不同病理，生理狀態(tài)的動物模型2g/kg，分3～4次。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；（六）試驗步驟1．動物及血樣處理方法：①取血：取家兔，稱重，放入兔盒內。從一側耳緣靜脈注射給1000U/ml肝素0.5ml/kg。5min后從一側耳緣靜脈取空白血樣0.4m1，分別放入1號管（對照管）和2號管（標準管）各0.2m1，搖勻靜置。然后1、3、4組從同側耳緣靜脈注射給藥磺胺嘧啶鈉注射液（10%，2ml/kg），2組通過灌胃途徑給藥磺胺嘧啶懸濁液（10%，2ml/kg）。給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側耳緣靜脈取血0.4ml。準確取血0.2ml加到含有7.5%三氯醋酸2.7ml的試管中，搖勻。標準管中加入0.1％SD標準液0.1ml，其余各管加蒸餾水0.1ml，搖勻。②顯色：將上述各管離心5min（1500～3000rpm），取上清液1.5m1，加入0.5%亞硝酸鈉0.5ml，搖勻，再加入0.5%麝香草酚1ml，搖勻后為橙色。③測定：于分光光度計上在525nm波長下測定各樣品管的光密度值。④計算血中藥物濃度：根據同一種溶液濃度與光密度成正比的原理，可用空白血樣標準管濃度及其光密度值求算出其他樣品管的磺胺藥物濃度。公式如下：樣品管濃度＝[樣品管光密度（OD）/標準管光密度（OD）]/標準管濃度5．健康家兔+NaHCO3（六）試驗步驟1．動物及血樣處理方15磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標準管對照管測定管7.5%三氯醋酸ml）2.72.72.7抗凝全血血樣（ml）0.20.20.2蒸餾水（ml）0.10.1標準液（ml）0.1充分搖勻離心5min取上清夜1.5ml0.5%亞硝酸鈉ml）0.50.50.50.5%麝香草酚ml）1.01.01.0磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標準管對照管測定16（五）試驗結果的原始記錄表2不同時間點磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數據編號性別不同時間血藥濃度OD值5min15min30min60min90min150min12345678（五）試驗結果的原始記錄表2性別不同時間血藥濃度OD值5m17時間（min）5min15min30min60min90min150minOD值C血（μg/ml）表4不同給藥途徑、不同病理狀態(tài)的家兔磺胺嘧啶藥代動力學參數組別性別給藥途徑動力學參數AUCT1/2VdCmaxTmax1．健康家兔♂iv2．健康家兔♀iv3．健康家兔♂ig4．健康家兔♀ig5．健康家兔+NaHCO3♂Iv6．健康家兔+NaHCO3♀iv7．肝損傷家兔♂Iv8．肝損傷家兔♀iv時間（min）5min15min30min60min90mi18試驗報告內容及格式要求試驗報告內容及格式要求19試驗報告內容及格式要求兒童每日150mg/kg。半衰期反映藥物自體內消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數和間隔的重要依據之一。（三）學生試驗報告結果處理在一個教學單元內，根據學生人數，將學生分為4組或8組，每組2～5人。藥代動力學（Pharmacokenetics）是用數學方式定量地研究藥物在體內的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機體模擬為數學模型，以藥代動力學參數反映機體對藥物的處置（Disposition）。根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；不同時間血藥濃度OD值家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.（七）首過效應（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應”。絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈不同時間點磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數據該參數是計算生物利用度和其他動力學參數重要的基礎。（一）題目根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：1．“磺胺嘧啶生物利用度研究”或2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或3．“同時給予NaHCO3對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或5．自定。試驗報告內容及格式要求（一）題目根據你的理解或興趣，可將報告20（二）研究背景及意義根據選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進行研究，為什么要設計以上試驗，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進制劑目的等）。（二）研究背景及意義根據選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺21（三）注意事項：1．取血前應盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝血，影響采血。2．離心時應將血管平衡后對稱置入，以免損壞離心機。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。4．每吸取一個血樣時，必須更換吸管，若只用一支吸管時，必須將其中的殘液用生理鹽水沖凈。5．將血樣加到三氯醋酸試管中應立即搖勻，否則易出現血凝塊。（三）注意事項：1．取血前應盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝22附：紫外分光光度法測定SD血藥濃度1．試驗方法：動物處理及給藥方法同前。準確吸取靜脈血0.2ml，加入到含有4.8ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉/min的旋轉速度離心10min，分別取上清液。2．磺胺嘧啶標準曲線測定：配制磺胺嘧啶貯備液100μg/ml，試驗時稀釋成16、12、8、4、2μg/ml、磺胺嘧啶標準溶液。256nm波長比色測定吸光度值，以濃度與光密度值做直線回歸，得標準曲線直線回歸方程。3．樣品血藥濃度測定：取上清液，256nm波長比色測定，利用回歸方程計算血中磺胺嘧啶濃度。(此方法對儀器與試劑的要求小，實驗室可根據自身情況選用此檢測方法)附：紫外分光光度法測定SD血藥濃度1．試驗方法：動物處理及給23本章結束本章結束24（七）首過效應（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應”。（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內藥物與血中濃度達到穩(wěn)態(tài)，②顯色：將上述各管離心5min（1500～3000rpm），取上清液1.絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈【作用于用途】

本品為治療全身感染的中效磺胺，抗菌家兔肝損傷制備方法：取家兔，以0.動物試驗基本技術

——家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法根據選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進行研究，為什么要設計以上試驗，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進制劑目的等）。給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側耳緣靜脈取血0.給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側耳緣靜脈取血0.8ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉/min的旋轉速度離心10min，分別取上清液。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟1ml，其余各管加蒸餾水0.藥代動力研究的基本內容藥代動力學（Pharmacokenetics）是用數學方式定量地研究藥物在體內的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機體模擬為數學模型，以藥代動力學參數反映機體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力學研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內的變化規(guī)律，同時可指導新藥研究過程中先導化合物的設計與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導改進藥物劑型。（七）首過效應（firstpasseffect）：口服給25教學試驗安排及內容

教學試驗安排及內容26（三）學生試驗報告結果處理根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；根據1號、3號的數據，分析機體在病理條件下，對藥物代謝的影響；根據1號、4號家兔的數據，藥物是否產生相互作用。如果有8個試驗組，還可以統(tǒng)一上下班的數據，分析性別對藥物體內過程的影響。（三）學生試驗報告結果處理根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一27磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標準管對照管測定管7.5%三氯醋酸ml）2.72.72.7抗凝全血血樣（ml）0.20.20.2蒸餾水（ml）0.10.1標準液（ml）0.1充分搖勻離心5min取上清夜1.5ml0.5%亞硝酸鈉ml）0.50.50.50.5%麝香草酚ml）1.01.01.0磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標準管對照管測定28（五）試驗結果的原始記錄表2不同時間點磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數據編號性別不同時間血藥濃度OD值5min15min30min60min90min150min12345678（五）試驗結果的原始記錄表2性別不同時間血藥濃度OD值5m29（二）研究背景及意義根據選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進行研究，為什么要設計以上試驗，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進制劑目的等）。（二）研究背景及意義根據選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺30教學目的及實驗內容

1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。2．掌握藥代動力學重要參數意義及測定方法，了解藥代動力學研究在新藥研究中的作用與意義。3．學習動物試驗基本技術—家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法4．通過觀察不同病理情況下，磺胺嘧啶藥物代謝動力學的變化，進一步理解影響藥物體內過程的因素。5．通過觀察NaHCO3對磺胺嘧啶體內過程的影響，進一步理解藥物相互作用在臨床合理用藥中的重要性。實驗內容：家兔血藥濃度測定及藥代動力學參數計算。教學目的及實驗內容1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。31藥代動力研究的基本內容藥代動力學（Pharmacokenetics）是用數學方式定量地研究藥物在體內的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機體模擬為數學模型，以藥代動力學參數反映機體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力學研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內的變化規(guī)律，同時可指導新藥研究過程中先導化合物的設計與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導改進藥物劑型。藥代動力研究的基本內容藥代動力學（Pharmacokenet32藥代動力學重要參數（一）半衰期（halflife,T1/2）：藥物在體內消除一半所需的時間?？赏ㄟ^測定藥物在血漿或血清中濃度的衰變求出。半衰期反映藥物自體內消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數和間隔的重要依據之一。T1/2=0.693/ke（二）表觀分布容積（apparentvolumeofdistribution,Vd）：體內藥量和血藥濃度的比值，此參數的意義在于表示藥物在組織中的分布范圍廣不廣，結合程度高不高。C越高，Vd就越低。Vd在0.14～0.29L/kg，表明藥物主要在細胞外分布，如磺胺類藥物。Vd在0.3～0.4L/kg，表明藥物主要在細胞內分布。Vd=Dose/C（三）血藥濃度-時間曲線下面積（AUC）：指血藥濃度對時間做圖后所的曲線下面積，可用梯形法和樣條函數法計算。該參數是計算生物利用度和其他動力學參數重要的基礎。（四）生物利用度（bioavailability，F）：藥物吸收入體循環(huán)的速度及程度的量度。目前均采用血藥濃度作為生物利用度指標，分為絕對生物利用度和相對生物利用度：絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈相對生物利用度F=AUC受試制劑/AUC標準制劑（五）清除率（clearance,CL）：單位時間內從體內清除的藥量CL=Vd×ke或0.693×Vd/T1/2（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內藥物與血中濃度達到穩(wěn)態(tài)，Css=AUC/T(間隔時間)（七）首過效應（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應”。首過效應的程度可以用Gibaldi等公式表示：藥代動力學重要參數（一）半衰期（halflife,T1/33動物試驗基本技術

——家兔不同給藥途徑的給藥方法及采血方法

1、2、3均為不正確的抓取方法（1．可損傷兩腎，2．可造成皮下出血，3．可傷兩耳）

4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓，并用手托兔體。動物試驗基本技術

——家兔不同給藥途徑的34靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠端，無名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號針頭盡量從靜脈的遠端刺入，移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液注入（圖10），然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。靜脈注射兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動物，耳外緣為靜脈。內35動物實驗內容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動力學研究及生物利用度測定動物實驗內容------磺胺嘧啶在不同病理、生理狀態(tài)的藥代動36磺胺嘧啶【劑量與用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次2g；兒童每日150mg/kg。治療流腦，口服，成人每日0.1g/kg，分4次服用；兒童每日0.1g～0.2g/kg；肌注，成人1g～2g/次，3～4次/日；兒童每日0.1g～0.2g/kg，分3～4次。靜注用量與肌注相當，每日1次。

【作用于用途】

本品為治療全身感染的中效磺胺，抗菌譜廣，對大多數革蘭氏陽性菌和陰性菌均有抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌淋球菌、溶血性鏈球菌的抑制作用較強，能通過血腦屏障滲入腦脊液。

臨床主要用于流腦，為治療流腦的首選藥，也可治療上述敏感菌所致其他感染?；前粪奏ぁ緞┝颗c用法】

口服，成人1g/次，2次/日，首次37根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或藥代動力學研究不僅可以描繪藥物在動物及人體內的變化規(guī)律，同時可指導新藥研究過程中先導化合物的設計與篩選、優(yōu)化給藥途徑、指導改進藥物劑型。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型7ml的試管中，搖勻。1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。5．健康家兔+NaHCO3治療流腦，口服，成人每日0.抑制作用，對腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；通過血腦屏障滲入腦脊液。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；1．了解血藥濃度測定的基本技術及程序。藥代動力學（Pharmacokenetics）是用數學方式定量地研究藥物在體內的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機體模擬為數學模型，以藥代動力學參數反映機體對藥物的處置（Disposition）。藥代動力研究的基本內容絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈治療流腦，口服，成人每日0.根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。6．健康家兔+NaHCO3家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.不同時間點磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數據2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或通過血腦屏障滲入腦脊液。根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：不同時間血藥濃度OD值（三）學生試驗報告結果處理如果有8個試驗組，還可以統(tǒng)一上下班的數據，分析性別對藥物體內過程的影響。（六）平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度（steadystate,SS）：臨床常用藥物大部分是多次給藥，并固定給藥間隔和劑量，使得體內藥物與血中濃度達到穩(wěn)態(tài)，皮厚可以抓，并用手托兔體。不同病理，生理狀態(tài)的動物模型家兔肝損傷制備方法：取家兔，以0.8ml/kg體重皮下注射50%的四氯化碳（用大豆油稀釋），正常飼養(yǎng)24h即成。家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.5ml/kg體重劑量皮下分點注射1%氯化汞，正常飼養(yǎng)24h即成。根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：藥代動力研究的基本內38教學試驗安排及內容

教學試驗安排及內容39（一）教學分組在一個教學單元內，根據學生人數，將學生分為4組或8組，每組2～5人。取健康家兔4只或8只，如果分為4組，最好選用同一性別家兔，以避免性別對藥代動力學的影響，如果分為8組，可分為上下半班，4個組為一個組合，家兔則雌雄各半，上班選雌性，下班選雄性，可探討性別對動力學參數的影響。（一）教學分組在一個教學單元內，根據學生人數，將學生分為4組40（二）試驗方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；2．第2組的2號健康家兔，經口給予同等劑量的磺胺嘧啶；3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；各組均按設計的時間點采血，計算藥代動力學參數。（二）試驗方案1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射41（三）學生試驗報告結果處理根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；根據1號、3號的數據，分析機體在病理條件下，對藥物代謝的影響；根據1號、4號家兔的數據，藥物是否產生相互作用。如果有8個試驗組，還可以統(tǒng)一上下班的數據，分析性別對藥物體內過程的影響。（三）學生試驗報告結果處理根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一42（四）試驗藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD）片，磺胺嘧啶鈉注射液，75%酒精，稀釋液（0.5%NaCl+0.4%NaOH），生理鹽水用于沖洗灌胃管，磺胺嘧啶貯備液為100μg/ml，0.1%SD標準液，7.5%三氯醋酸，0.5%亞硝酸鈉，0.5%麝香草酚（用20%NaOH配制），1000U/ml肝素生理鹽水，蒸餾水。（四）試驗藥品肝素，磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD43（五）試驗器材兔盒、手術刀片、抗凝離心管、5ml離心管7個/組、試管、50ml容量瓶5個/組、10ml試管架、2ml吸管、1ml微量加樣器、5ml注射器、6號針頭、7號針頭、手術燈、動脈夾，吸耳球、擦鏡紙、棉球、臺式離心機、石英比色皿、紫外分光光度計。（五）試驗器材445．健康家兔+NaHCO38ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉/min的旋轉速度離心10min，分別取上清液。如果有8個試驗組，還可以統(tǒng)一上下班的數據，分析性別對藥物體內過程的影響。首過效應的程度可以用Gibaldi等公式表示：家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或不同病理，生理狀態(tài)的動物模型2g/kg，分3～4次。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：3．第3組的3號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液，同時給予等量的NaHCO3；根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或4．第4組4號肝損傷或腎損傷家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；（六）試驗步驟1．動物及血樣處理方法：①取血：取家兔，稱重，放入兔盒內。從一側耳緣靜脈注射給1000U/ml肝素0.5ml/kg。5min后從一側耳緣靜脈取空白血樣0.4m1，分別放入1號管（對照管）和2號管（標準管）各0.2m1，搖勻靜置。然后1、3、4組從同側耳緣靜脈注射給藥磺胺嘧啶鈉注射液（10%，2ml/kg），2組通過灌胃途徑給藥磺胺嘧啶懸濁液（10%，2ml/kg）。給藥后5、15、30、60、90、150min時分別從另一側耳緣靜脈取血0.4ml。準確取血0.2ml加到含有7.5%三氯醋酸2.7ml的試管中，搖勻。標準管中加入0.1％SD標準液0.1ml，其余各管加蒸餾水0.1ml，搖勻。②顯色：將上述各管離心5min（1500～3000rpm），取上清液1.5m1，加入0.5%亞硝酸鈉0.5ml，搖勻，再加入0.5%麝香草酚1ml，搖勻后為橙色。③測定：于分光光度計上在525nm波長下測定各樣品管的光密度值。④計算血中藥物濃度：根據同一種溶液濃度與光密度成正比的原理，可用空白血樣標準管濃度及其光密度值求算出其他樣品管的磺胺藥物濃度。公式如下：樣品管濃度＝[樣品管光密度（OD）/標準管光密度（OD）]/標準管濃度5．健康家兔+NaHCO3（六）試驗步驟1．動物及血樣處理方45磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標準管對照管測定管7.5%三氯醋酸ml）2.72.72.7抗凝全血血樣（ml）0.20.20.2蒸餾水（ml）0.10.1標準液（ml）0.1充分搖勻離心5min取上清夜1.5ml0.5%亞硝酸鈉ml）0.50.50.50.5%麝香草酚ml）1.01.01.0磺胺類藥物血藥濃度測定的步驟試管編號標準管對照管測定46（五）試驗結果的原始記錄表2不同時間點磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數據編號性別不同時間血藥濃度OD值5min15min30min60min90min150min12345678（五）試驗結果的原始記錄表2性別不同時間血藥濃度OD值5m47時間（min）5min15min30min60min90min150minOD值C血（μg/ml）表4不同給藥途徑、不同病理狀態(tài)的家兔磺胺嘧啶藥代動力學參數組別性別給藥途徑動力學參數AUCT1/2VdCmaxTmax1．健康家兔♂iv2．健康家兔♀iv3．健康家兔♂ig4．健康家兔♀ig5．健康家兔+NaHCO3♂Iv6．健康家兔+NaHCO3♀iv7．肝損傷家兔♂Iv8．肝損傷家兔♀iv時間（min）5min15min30min60min90mi48試驗報告內容及格式要求試驗報告內容及格式要求49試驗報告內容及格式要求兒童每日150mg/kg。半衰期反映藥物自體內消除（代謝、排泄）的快慢速度，是臨床確定給藥次數和間隔的重要依據之一。（三）學生試驗報告結果處理在一個教學單元內，根據學生人數，將學生分為4組或8組，每組2～5人。藥代動力學（Pharmacokenetics）是用數學方式定量地研究藥物在體內的吸收（Absorption）、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)、排泄(Excrection)的動態(tài)過程，尤其是按照血藥濃度的變化規(guī)律，將機體模擬為數學模型，以藥代動力學參數反映機體對藥物的處置（Disposition）。根據4個組，4只家兔的數據進行統(tǒng)一的綜合處理與分析。1．第1組的1號健康家兔，靜脈注射磺胺嘧啶注射液；根據1號、2號家兔的試驗數據，計算生物利用度；不同時間血藥濃度OD值家兔腎損傷制備方法：取家兔，以1.（七）首過效應（firstpasseffect）：口服給藥時，藥物首先通過門靜脈進入肝臟，在肝臟被代謝掉一部分，使進入體循環(huán)的藥量減少，稱為“首過效應”。絕對生物利用度F=AUC血管外/AUC靜脈不同時間點磺胺嘧啶血漿濃度測定的原始數據該參數是計算生物利用度和其他動力學參數重要的基礎。（一）題目根據你的理解或興趣，可將報告題目擬定為：1．“磺胺嘧啶生物利用度研究”或2．“肝、腎損傷對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或3．“同時給予NaHCO3對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或4．“性別對磺胺嘧啶藥代動力學的影響”或5．自定。試驗報告內容及格式要求（一）題目根據你的理解或興趣，可將報告50（二）研究背景及意義根據選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺胺嘧啶進行研究，為什么要設計以上試驗，目的及意義何在（臨床合理用藥目的、改進制劑目的等）。（二）研究背景及意義根據選擇的題目，說明研究意義（為什么選磺51（三）注意事項：1．取血前應盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝血，影響采血。2．離心時應將血管平衡后對稱置入，以免損壞離心機。3．每次取血前要先將插管中的殘血放掉。4．每吸取一個血樣時，必須更換吸管，若只用一支吸管時，必須將其中的殘液用生理鹽水沖凈。5．將血樣加到三氯醋酸試管中應立即搖勻，否則易出現血凝塊。（三）注意事項：1．取血前應盡量剔除兔耳周圍的毛，以免引起凝52附：紫外分光光度法測定SD血藥濃度1．試驗方法：動物處理及給藥方法同前。準確吸取靜脈血0.2ml，加入到含有4.8ml稀釋液（生理鹽水），振搖，1500轉/min的旋轉速度離心10min，分別取上清液。2．磺胺嘧啶標準曲線測定：配制磺胺嘧啶貯備液100μg