枯草芽胞桿菌染色劑課件

三、實(shí)驗(yàn)器材菌種:枯草芽胞桿菌染色劑：5％孔雀綠水溶液，0.5％沙黃(石炭酸番紅)水溶液其他：小試管、滴管、燒杯、試管夾、載玻片、顯微鏡等三、實(shí)驗(yàn)器材四、實(shí)驗(yàn)步驟：1.制片:制備菌涂片、干燥及固定2.加熱染色:向載玻片滴加數(shù)滴5%孔雀綠染液覆蓋涂菌部位,用夾子夾住載玻片在微火上加熱至染液冒汽并維持5min,及時(shí)補(bǔ)充染液,切勿讓涂片干涸。3.脫色:水洗脫色至水流無色為止。4.復(fù)染:沙黃（0.5%番紅)復(fù)染2－3min。5.水洗：水洗無色為止。6.鏡檢將載玻片晾干后油鏡鏡檢。注意：菌液要濃四、實(shí)驗(yàn)步驟：枯草芽胞桿菌枯草芽胞桿菌巨大芽胞桿菌巨大芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌肉毒梭菌肉毒梭菌炭疽桿菌炭疽桿菌五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析繪制觀察到的枯草芽胞桿菌形態(tài)視野圖，并注明放大倍數(shù)。2.進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)六霉菌的形態(tài)觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征實(shí)驗(yàn)六霉菌的形態(tài)觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理

霉菌可產(chǎn)生分枝或不分枝的菌絲體，分基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長(zhǎng)到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢子的形態(tài)特征是識(shí)別不同種類霉菌的重要依據(jù)。觀察霉菌的形態(tài)有多種方法，常用的有下列三種：直接制片觀察法：是將培養(yǎng)物置于乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液中，制成霉菌制片鏡檢。載玻片培養(yǎng)觀察法：用無菌操作將培養(yǎng)基瓊脂薄層置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)，霉菌即在載玻片和蓋玻片之間的有限空間內(nèi)沿蓋玻片橫向生長(zhǎng)。培養(yǎng)一定時(shí)間后，將載玻片上的培養(yǎng)物置于顯微鏡下觀察。玻璃培養(yǎng)觀察法：霉菌的玻璃紙培養(yǎng)觀察方法與放線菌的玻璃紙培養(yǎng)觀察方法相似。這種方法用于觀察不同生長(zhǎng)階段霉菌的形態(tài)，也可獲得良好的效果。二、實(shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)器材菌種黑曲霉(Aspergillussp.)，青霉，黑根霉(Rhizopussp.)和毛霉（Mucorsp.）培養(yǎng)2-5d的馬鈴薯瓊脂平板培養(yǎng)物。培養(yǎng)基：土豆瓊脂或察氏培養(yǎng)基溶液或試劑：乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液其他：無菌吸管、平皿、載玻片、蓋玻片、顯微鏡等三、實(shí)驗(yàn)器材四、實(shí)驗(yàn)步驟直接制片觀察法:1.在載玻片上加一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液，用解剖針從霉菌菌落邊緣處挑取少量已產(chǎn)孢子的霉菌菌絲；2.先置于50％乙醇中浸一下以洗去脫落的孢子，再放在載玻片上的染液中，用解剖針小心地將菌絲分散開。3.蓋上蓋玻片，置低倍鏡下觀察，必要時(shí)換高倍鏡觀察。注意：挑菌和制片時(shí)要細(xì)心，盡可能保持霉菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)；加蓋玻片時(shí)勿壓入氣泡，以免影響觀察。菌液要濃四、實(shí)驗(yàn)步驟曲霉（分生孢子）曲霉（分生孢子）青霉（分生孢子）青霉（分生孢子）根霉（孢囊孢子）根霉（孢囊孢子）根霉（接合孢子）根霉（接合孢子）毛霉（孢囊孢子）毛霉（孢囊孢子）五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析1.結(jié)果繪圖說明四種霉菌的形態(tài)特征。2.思考題（1）你主要根據(jù)哪些形態(tài)特征來區(qū)分上述四種霉菌？（2）根據(jù)載玻片培養(yǎng)觀察方法的基本原理，你認(rèn)為上述操作過程中的哪些步驟可以根據(jù)具體情況作一些改進(jìn)或可用其他的替代方法？（3）你認(rèn)為在顯微鏡下，細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌的主要區(qū)別是什么？五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析三、實(shí)驗(yàn)器材菌種:枯草芽胞桿菌染色劑：5％孔雀綠水溶液，0.5％沙黃(石炭酸番紅)水溶液其他：小試管、滴管、燒杯、試管夾、載玻片、顯微鏡等三、實(shí)驗(yàn)器材四、實(shí)驗(yàn)步驟：1.制片:制備菌涂片、干燥及固定2.加熱染色:向載玻片滴加數(shù)滴5%孔雀綠染液覆蓋涂菌部位,用夾子夾住載玻片在微火上加熱至染液冒汽并維持5min,及時(shí)補(bǔ)充染液,切勿讓涂片干涸。3.脫色:水洗脫色至水流無色為止。4.復(fù)染:沙黃（0.5%番紅)復(fù)染2－3min。5.水洗：水洗無色為止。6.鏡檢將載玻片晾干后油鏡鏡檢。注意：菌液要濃四、實(shí)驗(yàn)步驟：枯草芽胞桿菌枯草芽胞桿菌巨大芽胞桿菌巨大芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌破傷風(fēng)梭狀芽胞桿菌肉毒梭菌肉毒梭菌炭疽桿菌炭疽桿菌五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析繪制觀察到的枯草芽胞桿菌形態(tài)視野圖，并注明放大倍數(shù)。2.進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)六霉菌的形態(tài)觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征實(shí)驗(yàn)六霉菌的形態(tài)觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理

霉菌可產(chǎn)生分枝或不分枝的菌絲體，分基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長(zhǎng)到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢子的形態(tài)特征是識(shí)別不同種類霉菌的重要依據(jù)。觀察霉菌的形態(tài)有多種方法，常用的有下列三種：直接制片觀察法：是將培養(yǎng)物置于乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液中，制成霉菌制片鏡檢。載玻片培養(yǎng)觀察法：用無菌操作將培養(yǎng)基瓊脂薄層置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)，霉菌即在載玻片和蓋玻片之間的有限空間內(nèi)沿蓋玻片橫向生長(zhǎng)。培養(yǎng)一定時(shí)間后，將載玻片上的培養(yǎng)物置于顯微鏡下觀察。玻璃培養(yǎng)觀察法：霉菌的玻璃紙培養(yǎng)觀察方法與放線菌的玻璃紙培養(yǎng)觀察方法相似。這種方法用于觀察不同生長(zhǎng)階段霉菌的形態(tài)，也可獲得良好的效果。二、實(shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)器材菌種黑曲霉(Aspergillussp.)，青霉，黑根霉(Rhizopussp.)和毛霉（Mucorsp.）培養(yǎng)2-5d的馬鈴薯瓊脂平板培養(yǎng)物。培養(yǎng)基：土豆瓊脂或察氏培養(yǎng)基溶液或試劑：乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液其他：無菌吸管、平皿、載玻片、蓋玻片、顯微鏡等三、實(shí)驗(yàn)器材四、實(shí)驗(yàn)步驟直接制片觀察法:1.在載玻片上加一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液，用解剖針從霉菌菌落邊緣處挑取少量已產(chǎn)孢子的霉菌菌絲；2.先置于50％乙醇中浸一下以洗去脫落的孢子，再放在載玻片上的染液中，用解剖針小心地將菌絲分散開。3.蓋上蓋玻片，置低倍鏡下觀察，必要時(shí)換高倍鏡觀察。注意：挑菌和制片時(shí)要細(xì)心，盡可能保持霉菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)；加蓋玻片時(shí)勿壓入氣泡，以免影響觀察。菌液要濃四、實(shí)驗(yàn)步驟曲霉（分生孢子）曲霉（分生孢子）青霉（分生孢子）青霉（分生孢子）根霉（孢囊孢子）根霉（孢囊孢子）根霉（接合孢子）根霉（接合孢子）毛霉（孢囊孢子）毛霉（孢囊孢子）五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析1.結(jié)果繪圖說明四種霉菌的形態(tài)特征。2