BET-72細菌內(nèi)毒素測定儀標準操作規(guī)程

標題：BET-72細菌內(nèi)毒素測定儀標準操作規(guī)程起草部1T頒發(fā)部門GM叨公室頒發(fā)日期制定人制定日期文件編號審核人審核日期批準人批準日期執(zhí)行日期分發(fā).目的為保證BET-72型細菌內(nèi)毒素測定儀的正常、安全使用，制定本規(guī)程，適用于BET-72型細菌內(nèi)毒素測定儀的操作、維護與保養(yǎng)。.適用范圍適用于天津市天大天發(fā)科技有限公司BET-72型細菌內(nèi)毒素測定儀。.責任者儀器操作員：嚴格按SOP操作儀器，保持儀器的干凈整潔；確保儀器能夠正常運行，確認儀器是否在計量效期內(nèi)。質(zhì)量總監(jiān)：相關(guān)儀器文件的審批，儀器使用的管理。.相關(guān)定義無.工作程序準備開機前檢查檢查樣品室每次開機前應(yīng)檢查樣品室應(yīng)潔凈、無異物。檢查儀器是否在檢定效期內(nèi)。檢查電源：BET-72型細菌內(nèi)毒素測定儀應(yīng)有良好的接地，并配有220V(±10%)電壓，電流2A,可靠接地，每次開機前應(yīng)檢查插頭與插座吻合是否正常。檢查放置環(huán)境：BET-72型細菌內(nèi)毒素測定儀應(yīng)放置在潔凈無塵的房間內(nèi)，試驗環(huán)境避免空氣流通而引入細菌內(nèi)毒素污染；放置環(huán)境應(yīng)避免強光直射；需放置在穩(wěn)定、無振動的位置，同一臺面避免放置離心機、渦旋混合器等震動大的設(shè)備；周圍環(huán)境溫度應(yīng)在10C~30C、相對濕度不超過80%RH的范圍內(nèi)。儀器使用記錄填寫

檢查上述項目，沒有不符合項判定為正常狀態(tài)，有不符合項判定為不正常狀操作啟動打開儀器的電源開關(guān)，雙擊軟件圖標，顯示用戶登錄框，登陸過的用戶選好檢驗員，輸入密碼，點擊確定即可進入；沒登陸過的用戶輸入檢驗員名稱，設(shè)置好密碼點擊“添加新檢驗員”即可及進入。添加新檢驗員姓名被貯存，再次登陸時可在用戶登錄框中找到。在用戶登錄框中找到。登錄成功后，如果連機成功則啟動畫面上顯示“searching???ok”，稍后其自動隱藏，然后進入主界面，并且在主界面右上角顯示溫度及ON字樣，如果啟動畫面顯示“searching?-Fail”，則連機失敗，啟動畫面也不隱藏，并且主界面右上角顯示未連接及OFF字樣顯示未連接及OFF字樣處理方法:單機啟動畫面，然后單機右上角顯示未連接及OFF字樣的綠方框，進入儀器設(shè)定界面，在右上角“儀器類型”處選擇儀器型號，在“通訊端口”處重新選擇com接口，如現(xiàn)在為com1,則改為com2（如計算機主機有擴展串口com3、com4,可根據(jù)用口電纜接入情況對應(yīng)選擇）。選定后，點擊下方“關(guān)閉”，重回到啟動界面“重新連接”鍵即可重新連接。進入主畫面：待儀器右上角溫度顯示為37±0.3C時，即可進行試驗設(shè)置和檢測。測?！蔽募芾頇凇庇伞爱斍按蜷_的檢品文件”和“檢品管理中心”組成。菜單欄包括：“退出”、“數(shù)據(jù)合并”、“新實驗”及“網(wǎng)站鏈接”。參數(shù)設(shè)定:a.光源的切換：打開儀器電源，進入軟件，點擊右上角圖標，進入儀器設(shè)置，如下圖:I位胃圖:I位胃界面中在檢測波長欄中可選擇光源波長，分為紅光660nm,藍光450nm。選擇后點擊關(guān)閉鍵，軟件即可自動切換。一般有色檢品如動物血清使用紅色光源較好，其他檢品使用藍色光源為佳。b.【選擇通訊端口】和【選擇儀器型號】選在連機時設(shè)置。c.【默認零化期時間】所選時間以“秒”為單位，表示在此時間以后采集的數(shù)據(jù)才進行處理，默認值為260秒。d.【報告記錄修改情況】選記錄則表示實驗數(shù)據(jù)修改后打印出的報告上會有“修改”字樣標記。數(shù)據(jù)合并：其功能可對任意多個數(shù)據(jù)進行合并，處理數(shù)據(jù)。但前提是索要合并的試驗，所用內(nèi)毒素、邕試劑、檢測用水的批號是不變的，否則合并數(shù)據(jù)無實際意義。a.單擊下方左邊“打開新的數(shù)據(jù)文件”，在彈出的對話框中選中所需要合并的一個數(shù)據(jù)文件并打開，具文件內(nèi)容會出現(xiàn)在“待選數(shù)據(jù)框”中；b.通過左邊“全選”或“全不選”鍵對其進行選擇，也可單擊所需要的合并數(shù)據(jù)，在其前方框打選中。c.選擇所需數(shù)據(jù)后單機左邊”將選中的項目合并”鍵，所選中的數(shù)據(jù)便會上傳到該界面上方“選中的數(shù)據(jù)”框中；d.重復（1）至（3）,直至把要合并的數(shù)據(jù)全部傳到界面上部“選中的數(shù)據(jù)”框中；單機左邊“合并后的數(shù)據(jù)”選項，在彈出的對話框選擇保存路徑，輸入文件名。e.回到主界面，單擊“檢品管理中心”下方刷新，即可在保存路徑下找到保存的文件。新實驗標準曲線的可靠性試驗（1）標準品系列濃度溶液準備：在進行標準系列的制備時，2至10倍的稀釋方法都可以使用，將細菌內(nèi)毒素標準品用細菌內(nèi)毒素檢查用水按等比例稀釋（如2倍稀釋，5倍稀釋等，制備成一個至少包含三個標準濃度的標準系列溶液，例如，0.5、0.25、0.125、0.06、0.03Eu/ml系列或5、1、0.2、0.04Eu/ml系歹U）,每個標準濃度在檢測時最少要做三個平行管，稀釋步驟參照凝膠法標準品稀釋步驟。

(2)檢測軟件設(shè)置：用鼠標點擊【新試驗】出現(xiàn)【試驗設(shè)置向?qū)А慨嬅?，首先填寫邕試劑批號、?nèi)毒素批號、檢查用水批號，選中【做新標準曲線】，填寫初始濃度、稀釋梯度、濃度點數(shù)、平行管數(shù)，然后用鼠標點擊【自動設(shè)置標準曲線］，在表格中出現(xiàn)所設(shè)置的數(shù)據(jù)。鼠標點擊【陰陽性對照】畫面，選中【陰性對照】，填鼠標點擊【試管位置選擇】，點擊【自動選擇】后點擊【開始檢測】，程序設(shè)置完畢，該文件存在【檢品管理中心】的標準曲線內(nèi)，該標準曲線以【邕試劑批號】+【內(nèi)毒素批號】+【當前時間】作為文件名存盤，也可在畫面底列【保存文件名】處改動，自行輸入名稱，但要事先建好該文件夾。出現(xiàn)如下畫面:該文件存在【檢品管理中心】的標準曲線內(nèi)。該標準曲線以【邕試劑批號】+【內(nèi)毒素批號】+【當前時間】作為文件名存盤，也可在畫面底列【保存文件名】處改動，自行輸入名稱，但要事先建好該文件夾。

(3)試驗檢測：a.溶解分狀裝邕試劑：根據(jù)用量溶解邕試劑，如使用多支邕試劑，將溶解的邕試劑混合在一起，分裝到無熱原的儀器專用檢測管內(nèi)，每支檢測管內(nèi)0.1ml(要求沒有氣泡)。b.加樣：取稀釋好的內(nèi)毒素系列濃度溶液，根據(jù)所設(shè)定管數(shù)分別加入有邕試劑的小試管中0.1ml,注意加樣前應(yīng)混合溶液30秒，且每個濃度點加樣前應(yīng)更換加樣頭。另取細菌內(nèi)毒素檢查用水做陰性對照。c.檢測：每個濃度點在加完樣后應(yīng)立即用封口膜封口，放入細菌內(nèi)毒素測定儀設(shè)定位置，儀器自動開始檢測。待標準曲線最后一個濃度的OD值超過預設(shè)值后，用鼠標點擊【手動停止檢測】，停止數(shù)據(jù)采集。點擊標準曲線坐標畫面，生成并儲存標準曲線，計算出相關(guān)系數(shù)。d.試驗報告打印點擊【報告打印預覽】，在報告打印預覽畫面點擊【打印】即可用茵為宙黑制定-［空白親制日期_派|淄轆】卜軟昵函］砥1[JI0董了簞是野信息序述詞以下網(wǎng)寸:IflTlMI的I現(xiàn)1魴儲露冠：ME:11「山，r~r■北＞b1建ETJ3T.PC|用茵為宙黑制定-［空白親制日期_派|淄轆】卜軟昵函］砥1[JI0董了簞是野信息序述詞以下網(wǎng)寸:IflTlMI的I現(xiàn)1魴儲露冠：ME:11「山，r~r■北＞b1建ETJ3T.PC|報用打E卷益當翻開檢品工件件原地記豪廣蝴「息*I?邛E7調(diào)可向整黑當0嗓建庫_|空白羲格汨鞏21?lTi9Yi益白褰格4三陛制藥"風隹死輕低落啰|潟姆反左睇戈當打印Ea理BET細菌內(nèi)毒素檢測報告文件檢品昔理中心+4「二,防**|--3空白表儕!i51MH&口廂M2DkT5W12D.I1H日版綱H|I日即_加氣I日ILedoh日版幽HII日觀?OH」即m-.-f.三件名空白表格田城J00L4EL燧1DKT植葭日息3XH血巡什疝定母工：妻反應(yīng)時目法宣試*HU號詢購標準曲91口修網(wǎng)心型曲好)iJS范圍37口_37口七耳同口信口口優(yōu)*親批M$301相翁某氮尸Q9992等St期珂間劃B拴忖?批號地編律度范圍：0(|1.血陶知向泰舌反反對同口口口口艮曬間斷t瑪防六勝H-9-S正在4位，虐安祭西，己恐t；】如(EUfsil)ItUojmnm戈潴若尋；b?i?2tfl-34-9J]5M眈1C7010671S0G1S36物9丁用jJ15:03供試品干擾預試驗(1)供試品溶液制備：將供試品溶液用細菌內(nèi)毒素檢查用水稀釋成所選擇的系列濃度，同時制備系列濃度的供試品陽性管和陽性管，供試品陽性管外加內(nèi)毒素標準品濃度和陽性管標準品濃度相同，標準品濃度為所選用標準曲線的中間濃度。(2)檢測軟件設(shè)置：用鼠標點擊【新實驗】出現(xiàn)試驗向?qū)М嬅?，首先填寫邕試劑批號、?nèi)毒素批號、檢查用水批號，點擊【供試品設(shè)置】，選擇供試品名稱，所做供試品管的稀釋倍數(shù)；填寫供試品批號、稀釋倍數(shù)（所選擇的系列濃度最小稀釋倍數(shù)）、平行管數(shù)。選中【回收率管】，填寫外加內(nèi)毒素濃度、供試品稀釋組數(shù)、稀釋梯度，點擊自動設(shè)置，在表格中出現(xiàn)所設(shè)置數(shù)據(jù)，例如【稀釋倍數(shù)】為10;【供試品稀釋梯度】為2;【供試品稀釋組數(shù)】為4。那表格顯示供試品10,20,40,80四個稀釋倍數(shù)下回收率管及供試品管的試驗設(shè)置。如測定單一濃度的試驗，【供試品稀釋組數(shù)】填寫【1】。鼠標點擊【陰陽性對照】畫面，選中【陰性對照】，填寫平行管數(shù)，選中【陽性對照】，填寫平行管數(shù)。鼠標點擊【試管位置選擇】，點擊【自動選擇】后點擊【開始檢測】，程序設(shè)置完畢。文件存在所選的【供試品名稱】目錄下，以【供試品批號+當前時間】為該試驗文件名。標準曲線試驗可以和供試品試驗一同進行，在軟件設(shè)置時，進入新試驗畫面后，首先按照標準曲線試驗設(shè)置，再進入供試品設(shè)置。（3）試驗檢測：根據(jù)用量溶解邕試劑，如使用多只邕試劑將溶解的邕試劑混合在一起，分裝到無熱原的儀器專用檢測管內(nèi)，每只檢測管內(nèi)0.1ml（要求沒有氣泡）取稀釋好的供試品系列濃度溶液、供試品陽性系列溶液、陽性標準品溶液，根據(jù)所設(shè)定平行管數(shù)分別加入有邕試劑的小試管中0.2ml（沒有氣泡），注意加樣前應(yīng)混合溶液30秒，且每個濃度點加樣前應(yīng)更換加樣頭。另取細菌內(nèi)毒素檢查用水做陰性對照，每個濃度點在加完樣后應(yīng)立即用封口膜封口，放入分析儀設(shè)定位置，儀器自動開始檢測。試驗完成后，用鼠標點擊【手動停止檢測】，停止數(shù)據(jù)采集。在【標準曲線】處選擇標準曲線后，計算機自動計算出結(jié)果。(4)試驗報告打?。菏髽它c擊【報告打印預覽】,在報告打印預覽畫面點擊【打印】即可。5.2.3.4供試品檢查測定(1)供試品溶液制備：根據(jù)干擾預試驗結(jié)果，將供試品稀釋到無干擾濃度，同時制備該濃度的供試品陽性溶液和陽性標準品溶液，供試品陽性溶液外加內(nèi)毒素標準品濃度和陽性標準品濃度相同，標準品濃度為所選用標準曲線的中間濃度。(2)檢測軟件設(shè)置：點擊【新試驗】出現(xiàn)試驗向?qū)М嬅?，首先填寫邕試劑批號、?nèi)毒素批號、檢查用水批號，點擊【供試品設(shè)置】，選擇供試品名稱，所做供試品管的稀釋倍數(shù)；填寫供試品批號、稀釋倍數(shù)平行管數(shù)。選中【回收率管】，填寫外加內(nèi)毒素濃度、供試品稀釋組數(shù)、【供試品稀釋組數(shù)】填寫“1”。，點擊自動設(shè)置，在表格中出現(xiàn)所設(shè)置數(shù)據(jù)。如果有兩個或兩個以上批號供試品同時檢測，在第一個批號設(shè)置完成后，更改供試品批號，點擊自動設(shè)置，重復以上步驟至所有批號供試品設(shè)置完成。如果有兩個或兩個以上不同供試品同時檢測，在第一個批號設(shè)置完成后，更改供試品名稱、批號、稀釋倍數(shù)，點擊自動設(shè)置，重復以上步驟至所有供試品設(shè)置完成。鼠標點擊【陰陽性對照】畫面，選中【陰性對照】，填寫平行管數(shù)，選中【陽性對照】，填寫平行管數(shù)。鼠標點擊【試管位置選擇】，點擊【自動選擇】后點擊【開始檢測】，程序設(shè)置完畢。文件存在最后設(shè)置的【供試品名稱】目錄下，以【供試品批號+當前時間】為該試驗文件名。(3)試驗檢測：a.溶解分裝邕試劑：根據(jù)用量溶解邕試劑，將溶解的邕試劑混合在一起，分裝到無熱原的儀器專用檢測管內(nèi)，每只檢測管內(nèi)0.1ml（沒有氣泡）。b.加樣：取稀釋好的供試品溶液、供試品陽性溶液、陽性標準品溶液，根據(jù)所設(shè)定平行管數(shù)分別加入有邕試劑的小試管中0.1ml或0.2ml（沒有氣泡），注意加樣前應(yīng)混合溶液30秒，且每個濃度加樣前應(yīng)更換加樣頭。另取細菌內(nèi)毒素檢查用水做陰性對照。c.檢測：每個供試品在加完樣后應(yīng)立即用封口膜封口，放入細菌內(nèi)毒素測定儀設(shè)定位置，儀器自動開始檢測。試驗完成后，點擊【手動停止檢測】，停止數(shù)據(jù)采集。在【標準曲線】處選擇標準曲線后，計算機自動計算出結(jié)果。d.試驗報告打?。河檬髽它c擊【報告打印預覽】，在報告打印預覽畫面點擊【打印】即可。多任務(wù)同時工作：EasyBET檢測軟件內(nèi)毒素分析儀檢測孔位足夠時，可以同時進行多個試驗。在一個試驗完成設(shè)置后，可以重新開始另一個試驗的設(shè)置。在試驗運行過程中，還可以打開以前的試驗數(shù)據(jù)進行分析查看。儀器參數(shù)設(shè)置：在主畫面中點擊右上角的儀器溫度顯示圖片，進入儀器設(shè)置畫面，在該畫面中還可以對儀器作3Q認證等試驗，如圖9所示，選擇儀器型號和通信端口，如果該兩項的內(nèi)容錯誤將無法進行試驗。根據(jù)所檢測的供試品的顏色決定選擇檢測波長，如果為無色透明的供試品選擇450nm,如果供試品帶有黃色可以選if?660nm,消除供試品顏色對檢測的干擾。觀察分析反應(yīng)曲線：在試驗的過程中和試驗結(jié)束后數(shù)據(jù)分析時可以觀察每一個試管的反應(yīng)曲線，圖10中的