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幾種食物多糖的溶液行為及小尺寸效應(yīng)教授多糖及其綴合物因具有多種多樣的生物功能,在生命現(xiàn)象中參與了細(xì)胞的多種活動(dòng),目前成為國際熱門課題而引起人們極大的興趣與關(guān)注。在對(duì)多糖及其綴合物的研究中,探討結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,多糖溶液行為的研究有極其重要的理論意義。多糖在溶液中呈現(xiàn)不同形態(tài),即鏈構(gòu)象,賦予多糖各種不同的性能、功能及生物活性。多糖作為一種高分子,其溶液行為的研究主要有兩方面,一是利用溶液理論方法測(cè)定多糖分子的重要參數(shù),包括分子量、鏈的支化度、鏈的構(gòu)象、分子尺寸、分子形態(tài)、相轉(zhuǎn)變及其它分子特性;另一方面是從多糖分子溶液性質(zhì)的變化預(yù)測(cè)多糖鏈構(gòu)象的轉(zhuǎn)變,為獲得最佳活性多糖作理論基礎(chǔ)。在分子內(nèi),糖蛋白鏈影響蛋白質(zhì)的折疊、溶解度、半衰期、抗原性及生物活性等;在分子間,通過糖綴合物糖鏈與蛋白質(zhì)的相互作用介導(dǎo)細(xì)胞的專一性識(shí)別和調(diào)控生命過程。糖脂的糖鏈不僅是蛋白質(zhì)受體的配體,其本身也是信號(hào)傳導(dǎo)分子。糖與糖的相互作用介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞相互作用也被證實(shí),新近又發(fā)現(xiàn)整合數(shù)α5β1介導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞與層粘連蛋白間的黏附也是由糖鏈和糖鏈間的相互作用調(diào)控的。糖鏈在這些生命和疾病過程中起特異性的識(shí)別和介導(dǎo)作用。天然多糖溶液行為的表征技術(shù)應(yīng)用于多糖溶液行為的表征技術(shù)主要有粘度法(Vis)、光散射法(LS)、中子散射法、電子顯微鏡(包括SEM&TEM)及原子力顯微鏡(AFM)、核磁共振法(NMR)、旋光色散法(ORD)和圓二色譜法(CD)、拉曼光譜(RS)及紫外光譜法(UV)等。另外還有多糖特定構(gòu)象的特征反應(yīng),如剛果紅絡(luò)合反應(yīng)及碘-碘化鉀反應(yīng)等。而研究多糖與其它生物大分子的相互作用,主要方法包括中子散射法(NS)、光散射法(LS)、電子顯微鏡(EM)及多維核磁共振波譜法(NMR)、激光掃描共聚焦顯微鏡(LSCM)。影響多糖溶液行為的因素多糖的鏈構(gòu)象多糖的簇集與空間構(gòu)象多糖分子的自卷曲多糖的場(chǎng)效應(yīng)多糖的場(chǎng)環(huán)境多糖與溶劑的相互作用溶劑的結(jié)構(gòu)與簇集多糖溶液行為研究最重要的溶劑水

長(zhǎng)程氫鍵的壽命(τ>2ns),其它氫鍵壽命較短如在300K時(shí),為1ps,在230K時(shí)為180ps。分子間相互作用(氫鍵、離子鍵、疏水相互作用)局部有序結(jié)構(gòu)從分子到宏觀結(jié)構(gòu)的過渡C60水分子網(wǎng)絡(luò)水分子簇與糖水分子簇水分子簇簡(jiǎn)介除了四聚體和八聚體之外,小的水分子簇還有五聚體和三元環(huán)狀十聚體等相對(duì)穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。由以上一系列小的水分子簇通過相互作用可以形成較大的由280個(gè)水分子組成的分子簇。在動(dòng)力學(xué)上存在開放的低密度結(jié)構(gòu)和緊密結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)于1998年首次提出,并在2001年通過x射線衍射在納米水滴中發(fā)現(xiàn)了這種結(jié)構(gòu)。通過氫鍵的彎曲,水的簇團(tuán)結(jié)構(gòu)可以在低密度態(tài)和高密度態(tài)之間相互轉(zhuǎn)變。隨溫度的升高,分子簇的大小、完整性和低密度態(tài)的比例都會(huì)下降。Waterclusterequilibria

水分子的這種結(jié)構(gòu)可以解釋水的許多奇特的性質(zhì)。如水的溫度密度和壓力黏度行為,徑向分布模式,由五元環(huán)和六元環(huán)交替組成的結(jié)構(gòu),超冷水的特殊性質(zhì),離子、疏水分子、碳水化合物、高分子的溶劑化和水合作用。有些糖類分子能夠適合水分子簇的二十面體結(jié)構(gòu),并通過氫鍵代替椅式的六元水環(huán)。糖環(huán)中處于e鍵上的羥基能與臨近的水分子形成氫鍵,即作為氫鍵的受體又作為氫鍵的供體。17OSpinlatticerelaxationtimes證實(shí)肌糖是與水相互作用最強(qiáng)的單糖。水分子與糖極性因素(離子因素)Na+、K+、Ca2+、Mg2+分別能結(jié)合4、2、12、13個(gè)水分子,a-D-galacturonicacid(半乳糖醛酸)的鹽溶液的水合主要取決于這些離子。氫鍵的強(qiáng)弱(空間因素)較強(qiáng)的氫鍵需要同一個(gè)水分子的氧原子和氫原子與多糖分子形成兩個(gè)氫鍵,而這受到糖分子立體結(jié)構(gòu)的影響。分子的疏水性有些多糖如纖維素等,在氫鍵的邊緣有兩個(gè)疏水面,從而阻止了強(qiáng)氫鍵的形成。多糖水合的影響因素溶液行為綠茶多糖1.分子鏈形態(tài)

綠茶多糖的均方根旋轉(zhuǎn)半徑與相對(duì)分子質(zhì)量:

<S2>1/2=0.25Mw0.45

[η]=0.0416Mw0.49cm3g-1β=0.45,說明綠茶多糖分子為半柔順性無規(guī)線團(tuán)。α值小于0.5,說明茶多糖鏈?zhǔn)前肴犴樻湥叶嗵欠肿拥闹Щ龋ǚ种Ф龋┖芨?。與高碘酸氧化的結(jié)果一致。1.0×10-3mg/mL聚集成球狀1.0×10-4mg/mL形成無規(guī)線團(tuán)和島嶼狀1.0×10-5mg/mL相互纏繞的分子。與糖醛酸含量高有關(guān)2.粒度分布溫度效應(yīng)

有效直徑:520nm→1260nm分散度:0.365→0.005條件:綠茶多糖稀溶液(1.0×10-5mg/ml)煮沸30min,冷卻至室溫。T↑,TPS4-1峰值↓,260nm峰紅移。具有很少有序構(gòu)象,T↑,向無規(guī)線團(tuán)轉(zhuǎn)變。(程序升溫:1—35℃,2—55℃,3—75℃,4—95℃)溫度效應(yīng)12431132pH效應(yīng)(1—pH6,2—pH2,3—pH12)(1—pH6,2—pH2,3—pH12)-3080050180350200250300CDWavelength[nm]絡(luò)合物對(duì)茶多糖構(gòu)象的影響

綠茶多糖TPS4-1可與剛果紅產(chǎn)生較弱的絡(luò)合反應(yīng),但不存在多股螺旋構(gòu)象。

(1—TPS4-1,2—TPS4-1andCongo,3—Congo)(1—TPS4-1,2—TPS4-1andCongo,3—Congo)123配位效應(yīng)

綠茶多糖與硼酸產(chǎn)生較弱的絡(luò)合,但構(gòu)象未突變。(1—TPS4-1,2—TPS4-1andH3BO4)(1—TPS4-1,2—TPS4-1andH3BO4)12配位效應(yīng)結(jié)晶性能

綠茶多糖為無定型形態(tài),與多糖復(fù)雜的一級(jí)結(jié)構(gòu)和三元糖綴有關(guān)。濃度對(duì)OTPS2-1園二色譜的影響-416051015180300200250CDWavelength[nm]酸堿度對(duì)OTPS2-1園二色譜的影響鈣和銅離子對(duì)OTPS2-1園二色譜的影響EDTA對(duì)OTPS2-1園二色譜的影響AFM圖(pH6.5)三維AFM圖(pH6.5)AFM圖(pH2.0)三維AFM圖(pH2.0)AFM圖(pH12.0)三維AFM圖(pH12.0)烏龍茶多糖激光共聚焦顯微圖

pH12pH6.5pH2.0空間構(gòu)象及尺寸效應(yīng)魔芋葡甘聚糖微細(xì)化淀粉小尺寸效應(yīng)

微細(xì)化淀粉粒度分布SampleMST-1MST-2MST-3MST-4d50(nm)7120456031703030Distribution0.0390.0330.0430.046(a)MST(×300)原淀粉(b)MST(×600)微細(xì)化后(c)MST-4(×1000)微細(xì)化后

原淀粉和微細(xì)化淀粉偏光顯微鏡照片

淀粉光學(xué)顯微鏡照片原淀粉微細(xì)化淀粉

掃描電鏡照片

原淀粉不同粒度微細(xì)化淀粉原淀粉和微細(xì)化淀粉的X-射線衍射圖

原淀粉微細(xì)化淀粉Amylopectin;IntermatialFractionAmylose

原淀粉及微細(xì)化淀粉分子量分布光電子能譜

原淀粉

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