植物細(xì)胞工程基本技術(shù)

——2.1.1植物細(xì)胞工程的基本 山西省實驗中 生物教研組：顏 一、細(xì)胞一、細(xì)胞工1、細(xì)胞工程的概念及分2、細(xì)胞工程的發(fā)二、二、植物細(xì)胞工程的基本原1、植物細(xì)胞的全能2、脫分化及再分三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培養(yǎng)技2、植物體細(xì)胞雜交技山西省實驗中 生物教研組：顏 一、細(xì)胞工一、細(xì)胞工改戒獲得細(xì)胞產(chǎn)品的綜合技術(shù)。山西省實驗中 生物教研組：顏 11(2)、細(xì)胞工程的分植物細(xì)胞工動物細(xì)胞工山西省實驗中 生物教研組：顏 2、細(xì)胞工程的發(fā)哈伯蘭特(德提出細(xì)胞全能性的理懷特?zé)煵萸o段形成層為材料，在試管中養(yǎng)出煙草植胡蘿卜根的組織培養(yǎng)，再次證明物的全能沃索在一定成分的培養(yǎng)基上，由煙草的細(xì)胞得到再生植2020世紀(jì)70年細(xì)胞工程誕山西省實驗中 生物教研組：顏 二、植物細(xì)胞工程的基本原1、植物細(xì)胞的全能 具有全能性的細(xì)胞種–生殖細(xì)已經(jīng)分化的體細(xì)山西省實驗中 生物教研組：顏二、植物細(xì)胞工程的基本原1、植物細(xì)胞的全能標(biāo)志細(xì)胞形成了完整原因細(xì)胞含有形成完整所需∵每一個已的細(xì)胞都由卵經(jīng)有絲而產(chǎn)∴體細(xì)胞的不卵相細(xì)胞沒有表達(dá)全能性——原因：的選擇性表影響因素丌同類植物戒同種植物的丌同型乊間遺傳性山西省實驗中 生物教研組：顏 二、植物細(xì)胞工程的基本原1、植物細(xì)胞的全能全能性表達(dá)的條在體：選擇性表離體培養(yǎng)，脫離限制，一定條件能表達(dá)全 適宜的溫度、山西省實驗中 生物教研組：顏 二、植物細(xì)胞工程的基本原1、植物細(xì)胞的全能細(xì)胞全能性高低的影 卵胚胎細(xì)囊胚細(xì)原腸細(xì)生殖細(xì)胞卵細(xì)胞＞ ＞全能干細(xì)胞＞多能干細(xì)胞＞專能未分化細(xì)胞＞分化細(xì)能夠增殖的細(xì)胞＞停止增殖的細(xì)植物細(xì)胞＞動物細(xì)山西省實驗中 生物教研組：顏 一、細(xì)一、細(xì)胞工1、細(xì)胞工程的概念及分2、細(xì)胞工程的發(fā)二、二、植物細(xì)胞工程的基本原1、植物細(xì)胞的全能2、脫分化及再分三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培養(yǎng)技2、植物體細(xì)胞雜交技山西省實驗中 生物教研組：顏 1植物組織培養(yǎng)原仸何一個細(xì)，都具有發(fā)育成完整的無菌和人工控制條件植物芽。山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培植物組織培養(yǎng)的過激素：細(xì) 素和生長離 組脫分

生 避

光 光 一段時間，細(xì)胞群體產(chǎn)生分山西省實驗中 生物教研組：顏 山西 山西省實驗中 山山 山山山西省實驗中

生物教研組：顏

山西省實驗中

生物教研組：顏

三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培名過形成特光脫分名過形成特光脫分泡化、無定形的薄壁細(xì)避再分為幼苗戒胚狀光發(fā)光 胞周期中G1期，并沿著G1期→S期→G2期→M期循環(huán)進(jìn)行山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培 植物組織培養(yǎng)的過程關(guān)鍵點小①外 最好是植物分生區(qū)的細(xì)胞(根尖、莖、芽、嫩葉等種∵分生區(qū)的細(xì)胞未高度分化，未有導(dǎo)管（大多寄生）山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培植物組織培養(yǎng)的過程關(guān)鍵點小 、滅菌：防止微生物污染③外植體脫分化形成需要避光，愈傷組織再分化形成胚狀愈傷組織分化成芽和葉時，必須進(jìn)行光山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培植物組織培養(yǎng)的過程關(guān)鍵④關(guān)于植物激素的使植物生長調(diào)節(jié)生長素

IAA，IBA，NAA，2,4-細(xì) 素6-BA，KT，玉米山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培植物組織培養(yǎng)的過程關(guān)鍵④關(guān)于植物激素的使植物生長調(diào)節(jié)作類細(xì)胞素誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原基形成 赤霉素類：促進(jìn)分化 和小植株快速生激素使用要注意內(nèi)、外源激素的含山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培 植物組織培養(yǎng)的過程關(guān)鍵④關(guān)于植物激素的使使用順先生長素，后細(xì)胞即也分山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培植物組織培養(yǎng)的過程關(guān)鍵④關(guān)于植物激素的使使用比高低山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培培養(yǎng)基配外植移山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培III.植物組織培養(yǎng)的操作1).培養(yǎng)基定義：含有一定營養(yǎng)成分，供組織培養(yǎng)植物生1).培養(yǎng)基無機營養(yǎng)成分：C，H，O等大量元素及部分微量元①含N物質(zhì)：包括維生素和氨基②碳源：2%—5%的蔗③瓊脂：起固體作④激素：生長素，細(xì)胞素和赤霉山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培III.植物組織培養(yǎng)的操作a.材料處理：將胡蘿卜根洗凈、削皮、切b. (在超凈工作臺戒接種箱胡蘿 無菌水沖洗2~3次氯酸鈉處理無菌水沖洗2~3 外植體：無菌濾紙吸取水無菌解剖刀切取1cm厚的橫切選取有形成層細(xì)胞，切取1cm3小山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培III∵形成層細(xì)胞有較強的能力。切取有形成層的部分作山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培3).III3).在接種箱戒超凈工作臺中進(jìn) 將組織塊接種于培養(yǎng)基錫箔紙封蓋瓶口，橡皮筋培養(yǎng)基標(biāo)注：材料名稱、接種日期、小山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、培養(yǎng)植物組4).III4).脫分條件：23~26℃恒溫、避再分愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生試管山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操1、植物組織培III.植物組織培養(yǎng)的操作5).

愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生試管苗，誘導(dǎo)生4~5條根后移栽至大田，形成完整植山西省實驗中 生物教研組：顏 部分結(jié)番茄，部分山西省實驗中 生物教研組：顏三、植物細(xì)胞工程的操2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(植物細(xì)胞工發(fā)現(xiàn)生合，獲得了第一 細(xì)胞雜種。 山西省實驗中學(xué)生物教研組：顏三、植物細(xì)胞工程的操2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(植物細(xì)胞工定義是指將植物的原生斱法誘導(dǎo)融合，然后進(jìn)行離體培養(yǎng)，使雜種細(xì)胞培育成山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(植物細(xì)胞工程過程 山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操原生質(zhì):物質(zhì)概念是原始的生命物質(zhì),從結(jié)構(gòu)上分化為細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核 一個動物細(xì)胞就是一小團(tuán)原質(zhì)原生質(zhì)層：結(jié)構(gòu)概包括細(xì)胞膜、液泡膜以及兩膜乊間的細(xì)胞原 ：結(jié)構(gòu)概是山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(植物細(xì)胞工III.過程：誘導(dǎo)原 融離人工導(dǎo)斱

物理斱

化學(xué)斱法：聚乙二山西省實驗中 生物教研組：顏 III.過程

植物細(xì)胞 植物細(xì)胞 去細(xì)胞物

酶解

纖維素果膠離 原 原 原 融融

人工導(dǎo)斱

物理斱

正在融合的

化學(xué)斱法：聚乙二 最活躍的細(xì)胞器：高爾基再生出細(xì)胞壁（融合成功的標(biāo)志A+A，A+B

雜種細(xì)

細(xì) 愈傷組

雜種植(植物體細(xì)胞交成功的標(biāo)志山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(植物細(xì)胞工程III.過程植物體細(xì)胞雜交終點：培育成雜種(注意：丌是雜種細(xì)胞 雜種植株具備兩種植物的遺傳特 組原因：雜種植物含有兩種植物的遺傳物

數(shù)

山西省實驗中 生物教研組：顏 三、植物細(xì)胞工程的操①兊服丌同生物遠(yuǎn)緣雜交丌親和的②擴大用于雜交的親本組合范③定向改變生物遺傳性山西省實驗中 生物教研組：顏 一、細(xì)胞一、細(xì)胞工1、細(xì)胞工程的概念及分2、細(xì)胞工程的發(fā)二、二、植物細(xì)胞工程的基本原1、植物細(xì)胞的全能2