2023學(xué)年柳州市柳江中學(xué)高考生物押題試卷（含答案解析）

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項的答案信息點涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．有關(guān)核酸是遺傳物質(zhì)證據(jù)的實驗中，下列敘述正確的是（）A．S型菌和R型菌的結(jié)構(gòu)不同是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果B．S型菌的DNA單獨侵染小鼠不會使小鼠得敗血癥C．煙草花葉病毒的RNA單獨侵染煙草，煙草不會出現(xiàn)病斑D．噬菌體侵染細(xì)菌過程中，細(xì)菌裂解后子代仍舊是噬菌體，這種現(xiàn)象是遺傳變異的結(jié)果2．下列各項的結(jié)果中，不可能出現(xiàn)3：1比值的是（）A．15N標(biāo)記的DNA在14N培養(yǎng)液中復(fù)制三次，子代中不含15N與含15N的DNA數(shù)量之比B．黃色圓粒豌豆（YyRr）與黃色圓粒豌豆（YyRR）雜交子代的性狀分離之比C．酵母菌同時進(jìn)行需氧呼吸與厭氧呼吸，并消耗相同葡萄糖時，吸入的O2與產(chǎn)生的CO2總量之比D．動物的一個初級卵母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的極體與卵細(xì)胞的數(shù)目之比3．蛋白質(zhì)分子的功能與其結(jié)構(gòu)相關(guān)，下列敘述正確的是（）A．酶與底物結(jié)合后，兩者的形狀均發(fā)生改變B．酶在最適溫度下其空間結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定C．受體與遞質(zhì)結(jié)合后形狀不會發(fā)生改變D．載體與被轉(zhuǎn)運分子結(jié)合后發(fā)生形狀改變需要消耗ATP4．某T2噬菌體DNA含1000個堿基對，某科學(xué)工作者用35S標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌，最終形成100個子代T2噬菌體。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．子代T2噬菌體中含35S的占1/50B．T2噬菌體利用大腸桿菌的RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄形成RNAC．T2噬菌體繁殖過程中消耗脫氧核苷酸1．98×105個D．T2噬菌體利用大腸桿菌的核糖體合成自身的蛋白質(zhì)5．經(jīng)過半個世紀(jì)的改造，勞動者將塞罕壩荒漠改造成了綠色林場，創(chuàng)造了荒漠變林場的人間奇跡。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．在一定條件下，人類活動可改變?nèi)郝溲萏娴姆较蚝退俣菳．荒漠生態(tài)系統(tǒng)的組成成分是生產(chǎn)者、消費者和分解者C．隨著森林覆蓋率的上升，塞罕壩林場固定的太陽能逐漸增加D．森林對水土的保持作用體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值6．某雄性動物的基因型為AaBb。下圖是其一個精原細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的兩個不同時期細(xì)胞的分裂圖像。相關(guān)敘述正確的是（）A．甲細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂，稱為次級精母細(xì)胞，細(xì)胞中含有6條染色單體B．四分體時期發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)變異，導(dǎo)致A和a出現(xiàn)在姐妹染色單體同一位置C．圖示該精原細(xì)胞整個減數(shù)分裂過程中，細(xì)胞中最多時可能含有四個B基因D．該細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的四個精子，其基因型可能分別為AB、Ab、ab、aB7．生物膜將真核細(xì)胞內(nèi)的空間包圍分隔成不同區(qū)域，使細(xì)胞內(nèi)的不同代謝反應(yīng)在這些區(qū)域中高效有序進(jìn)行。下列關(guān)于這些區(qū)域的敘述，正確的是（）A．由雙層膜包圍成的區(qū)域均可產(chǎn)生ATP，也可消耗ATPB．口腔上皮細(xì)胞內(nèi)由單層膜包圍成的區(qū)域的種類比葉肉細(xì)胞的少C．植物細(xì)胞的色素分子只儲存于雙層膜包圍成的區(qū)域中D．蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂質(zhì)的合成均發(fā)生于由膜包圍成的區(qū)域中8．（10分）關(guān)于遺傳和變異，下列說法錯誤的是（）A．基因突變的方向與環(huán)境沒有明確的因果關(guān)系B．基因重組雖然不能產(chǎn)生新基因，但可以形成多樣化基因組合的子代，有利于適應(yīng)多變的環(huán)境，對生物進(jìn)化有重要意義C．生物體的遺傳與變異，往往以細(xì)胞內(nèi)基因的傳遞和變化為基礎(chǔ)D．貓叫綜合征是人的第5號染色體缺失引起的遺傳病二、非選擇題9．（10分）癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。（4）將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，檢測細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細(xì)胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是_________________________。10．（14分）環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯（C12H10-xClx）難以降解，受其污染的土壤中常有重金屬污染同時存在。研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯降解的關(guān)鍵酶?；卮鹣铝袉栴}：（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為__________，該培養(yǎng)基屬于__________（填“選擇”或“鑒定”）培養(yǎng)基。（2）若要對所分離的菌種進(jìn)行計數(shù)，除顯微鏡直接計數(shù)法以外還常用_______________法接種來進(jìn)行活菌計數(shù)，其原理是__________________________。（3）若從聯(lián)苯降解菌中分離并得到純度較高的聯(lián)苯水解酶（蛋白質(zhì)），分離該酶常用的方法是_______法，采用該方法先分離出的是相對分子質(zhì)量______（填“較大”或“較小”）的蛋白質(zhì)。（4）聯(lián)苯降解酶在實驗室里的降解率很高，但是實際污染環(huán)境的治理中降解率很低，這可能是因為________________。11．（14分）某種細(xì)菌可以分解石油殘存物(含有C、H、O元素)，現(xiàn)要分離、培養(yǎng)該細(xì)菌，操作步驟為：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布樣品到培養(yǎng)基→選擇菌落。請據(jù)此回答：（1）細(xì)菌與真菌最主要的區(qū)別在于：細(xì)菌___________________________________。（2）石油殘存物可以為該種細(xì)菌提供的營養(yǎng)物質(zhì)是________________，分離該細(xì)菌的培養(yǎng)基從功能上叫做_____________培養(yǎng)基。（3）取樣時用到的一切工具均需要__________________。梯度稀釋、涂布樣品到培養(yǎng)基則必須在_____________________(填場所)進(jìn)行。（4）若需要對細(xì)菌計數(shù)，常用的簡便方法是_______________，該方法測得的數(shù)目往往比實際值________________(填“大”或“小”)。12．科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖1所示，圖2、圖3分別表示了干擾素基因及質(zhì)粒的相關(guān)信息。（1）在圖1治療過程中是否體現(xiàn)細(xì)胞的全能性____（是/否），為什么？________________________。（2）圖1步驟③將基因?qū)隕S細(xì)胞而不是導(dǎo)入到上皮細(xì)胞是因為ES細(xì)胞具有__________________。（3）據(jù)圖2、圖3，對干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時，可選用的限制酶組合為________________。（4）為了得到實驗所需的大量干擾素基因，研究人員利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。由于DNA復(fù)制時，子鏈只能由5′向3′方向延伸，因此可以從下圖A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取_____________作為引物。若要將1個干擾素基因復(fù)制4次，則需要在緩沖液中至少加入_______個引物。（5）將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā)_____________色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達(dá)，可以采用_____________方法進(jìn)行檢測。

2023學(xué)年模擬測試卷參考答案（含詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【答案解析】

R型和S型肺炎雙球菌的區(qū)別是前者沒有莢膜（菌落表現(xiàn)粗糙），后者有莢膜（菌落表現(xiàn)光滑）。

由肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗可知，只有S型菌有毒，會導(dǎo)致小鼠死亡，S型菌的DNA才會使R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌。

肺炎雙球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗：R型細(xì)菌→小鼠→存活；S型細(xì)菌→小鼠→死亡；加熱殺死的S型細(xì)菌→小鼠→存活；加熱殺死的S型細(xì)菌+R型細(xì)菌→小鼠→死亡?！绢}目詳解】A、S型菌與R型菌的結(jié)構(gòu)不同是由于遺傳物質(zhì)有差異而表現(xiàn)的，A錯誤；B、用S型菌的DNA單獨去侵染小鼠，小鼠細(xì)胞膜具有選擇透過性，且小鼠與S型菌親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，S型菌的DNA不能注入小鼠體內(nèi)，不會使小鼠得敗血癥，B正確；C、由于煙草花葉病毒的RNA是遺傳物質(zhì)，所以用從煙草花葉病毒分離出的RNA侵染煙草，煙草會感染出現(xiàn)病斑，C錯誤；D、噬菌體侵染細(xì)菌過程中，細(xì)菌裂解后子代仍舊是噬菌體，這種現(xiàn)象是遺傳的結(jié)果，D錯誤。故選B。2、C【答案解析】

1、基因分離的實質(zhì)是減數(shù)分裂形成配子時，控制一對相對性狀的等位基因隨著同源染色體的分開而分離，分別進(jìn)入子細(xì)胞中；2、酵母菌細(xì)胞有氧呼吸的反應(yīng)式是：C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O+能量;無氧呼吸反應(yīng)式是C6H12O62C2H5OH+2CO2+少量能量；3、卵細(xì)胞的形成過程：1個卵原細(xì)胞減數(shù)第一次分裂間期1個初級卵母細(xì)胞→減數(shù)第一次分裂1個次級卵母細(xì)胞+1個極體→減數(shù)第二次分裂1個卵細(xì)胞+3個極體；4、DNA復(fù)制方式為半保留復(fù)制?！绢}目詳解】A、15N標(biāo)記的DNA在14N培養(yǎng)液中復(fù)制三次，根據(jù)DNA半保留復(fù)制特點，子代中含15N的DNA分子為2個，所以不含15N的DNA與含15N的DNA數(shù)量比=(8-2):2=3:1；A正確；B、Yy×Yy→3Y_、1yy，Rr×RR→1R_，所以后代表現(xiàn)性為黃色圓粒：綠色圓粒=3：1，B正確；C、酵母菌進(jìn)行有氧呼吸時分解1mol葡萄糖需消耗6molO2，并生成6molCO2，進(jìn)行無氧呼吸時消耗1mol葡萄糖生成2molCO2，所以有氧呼吸與無氧呼吸消耗葡萄糖量相同時吸入O2的量與兩者產(chǎn)生的CO2總量之比6:(6+2)=3:4，C錯誤；D、動物的一個初級卵母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成1個卵細(xì)胞和3個極體，因此形成的極體與卵細(xì)胞的數(shù)目之比3:1，D正確。故選C。【答案點睛】結(jié)合基因分離的實質(zhì)、有氧呼吸的過程、卵細(xì)胞的形成和DNA的復(fù)制方式分析選項是解題的關(guān)鍵。3、A【答案解析】

蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)多樣性決定了蛋白質(zhì)功能的多樣性，蛋白質(zhì)的功能包括：①構(gòu)成細(xì)胞和生物體的重要物質(zhì)，即結(jié)構(gòu)蛋白，如羽毛、頭發(fā)、蛛絲、肌動蛋白；②催化作用：如絕大多數(shù)酶；③傳遞信息，即調(diào)節(jié)作用：如胰島素、生長激素；④免疫作用：如免疫球蛋白（抗體）；⑤運輸作用：如紅細(xì)胞中的血紅蛋白?！绢}目詳解】A、酶與底物結(jié)合后，酶和底物的形狀均會發(fā)生改變，A正確；B、最適宜溫度條件下，酶活性最高，但是穩(wěn)定性較低，而較低溫度下酶的結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定，B錯誤；C、受體與遞質(zhì)結(jié)合后形狀會發(fā)生改變，C錯誤；D、載體與被轉(zhuǎn)運分子結(jié)合后發(fā)生形狀改變不需要消耗ATP，D錯誤。故選A。4、A【答案解析】

本題考查噬菌體侵染細(xì)菌實驗、DNA分子復(fù)制等知識，要求考生識記噬菌體侵染細(xì)菌的過程；識記DNA分子復(fù)制方式，能運用其延伸規(guī)律進(jìn)行計算。噬菌體DNA由1000個堿基對組成，其中腺嘌呤占全部堿基的20%，即A=1000×2×20%=400個，根據(jù)堿基互補配對原則，A=T=400個，C=G=600個?！绢}目詳解】A、T2噬菌體侵染大腸桿菌時，蛋白質(zhì)外殼沒有進(jìn)入大腸桿菌中，則子代T2噬菌體不含35S，A錯誤；B、T2噬菌體侵染大腸桿菌時，只有DNA進(jìn)入大腸桿菌，則其轉(zhuǎn)錄形成RNA時需要的RNA聚合酶來自大腸桿菌，B正確；C、DNA復(fù)制是半保留復(fù)制，則子代噬菌體合成需要的脫氧核苷酸數(shù)量為(100-1)×2000=1．98×105，C正確；D、T2噬菌體屬于病毒，無核糖體，侵入大腸桿菌內(nèi)利用大腸桿菌的核糖體合成自身的蛋白質(zhì)，D正確。故選A。5、B【答案解析】

種群是指占有一定空間和時間的同一物種的集合體，群落是指在一定空間內(nèi)所有生物種群的集合體，生態(tài)系統(tǒng)是由生物群落（生產(chǎn)者、消費者、分解者）及非生物環(huán)境（無機(jī)物、有機(jī)物、氣候、能源）所構(gòu)成的一個生態(tài)學(xué)功能系統(tǒng)。群落演替是指隨著時間的推移一個群落被另一個群落代替的過程?？煞譃樵萏媾c次生演替。生物多樣性包括生態(tài)系統(tǒng)多樣性、遺傳多樣性、物種多樣性。關(guān)于生物多樣性的價值，科學(xué)家一般概括為以下三方面：一是目前人類尚不清楚的潛在價值，二是對生態(tài)系統(tǒng)起著重要調(diào)節(jié)功能的潛在價值（也叫做生態(tài)功能，如森林和草地對水土的保護(hù)作用，濕地在蓄洪防旱、調(diào)節(jié)氣候等方面的作用），三是對人類有食用、藥用和工業(yè)原料等實用意義的，以及有旅游觀賞、科學(xué)研究和文學(xué)藝術(shù)創(chuàng)作等非實用意義的直接價值?！绢}目詳解】A、在一定條件下，人類活動可以促進(jìn)演替也可以破壞演替，可改變?nèi)郝溲萏娴姆较蚝退俣?，A正確；B、荒漠生態(tài)系統(tǒng)的組成成分包括生物成分和非生物成分，生物成分是生產(chǎn)者、消費者和分解者，B錯誤；C、隨著森林覆蓋率的上升，生產(chǎn)者增多，生產(chǎn)者固定的太陽能逐漸增加，C正確；D、森林對水土的保持作用體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值，D正確。故選B。6、D【答案解析】

分析題圖：圖示是其一個精原細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的兩個不同時期細(xì)胞分裂圖象，這兩個細(xì)胞都不含同源染色體，前者出于減數(shù)第二次分裂前期，后者處于減數(shù)第二次分裂末期?！绢}目詳解】A、甲細(xì)胞中含4條染色體，每條染色體含有2條染色單體，因此該細(xì)胞含有8條染色單體，A錯誤；B、四分體時期染色體發(fā)生交叉互換，由此引起的變異屬于基因重組，B錯誤；C、由于該細(xì)胞的基因型是AaBb，只含有1個B基因，所以在減數(shù)分裂過程中，由于復(fù)制，細(xì)胞中最多含有兩個B基因，C錯誤；D、該細(xì)胞經(jīng)由于發(fā)生了交叉互換，所以減數(shù)分裂形成的四個精子，其基因型分別為AB、aB、Ab、ab，D正確。故選D?！敬鸢更c睛】本題需要考生分析出圖中細(xì)胞所處時期，關(guān)鍵點是看出細(xì)胞發(fā)生了交叉互換。7、B【答案解析】

1．生物膜系統(tǒng)：細(xì)胞中的細(xì)胞器膜、細(xì)胞膜和核膜等結(jié)構(gòu)共同構(gòu)成了細(xì)胞的生物膜系統(tǒng)。2．生物膜系統(tǒng)功能如下：（1）細(xì)胞膜不僅使細(xì)胞具有一個相對穩(wěn)定的內(nèi)部環(huán)境，同時，在細(xì)胞與外部環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)運輸、能量轉(zhuǎn)換和信息傳遞的過程中起著決定性作用；（2）許多重要的化學(xué)反應(yīng)都在生物膜上進(jìn)行，這些化學(xué)反應(yīng)需要酶的參與，廣闊的膜面積為多種酶提供了大量的附著位點；（3）細(xì)胞內(nèi)的生物膜把各種細(xì)胞器分隔開，如同一個小小的區(qū)室，這樣就使得細(xì)胞內(nèi)能夠同時進(jìn)行多種化學(xué)反應(yīng)，而不會互相干擾，保證了細(xì)胞生命活動高效有序的進(jìn)行?！绢}目詳解】A、由雙層膜包圍成的區(qū)域包括線粒體、葉綠體和細(xì)胞核，其中葉綠體和線粒體均可產(chǎn)生ATP，也可消耗ATP，但細(xì)胞核只能消耗ATP，A錯誤；B、口腔上皮細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的代謝比較簡單，而葉肉細(xì)胞擔(dān)負(fù)著制造有機(jī)物的功能，根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點推測口腔上皮細(xì)胞內(nèi)由單層膜包圍成的區(qū)域的種類比葉肉細(xì)胞的少，B正確；C、植物細(xì)胞的色素分子存在于液泡和葉綠體中，但只有葉綠體是雙層膜包圍成的區(qū)域，C錯誤；D、蛋白質(zhì)的合成發(fā)生在核糖體上，核糖體是無膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，D錯誤；故選B。8、D【答案解析】

可遺傳的變異包括基因突變、基因重組和染色體變異：（1）基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換，這會導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)的改變，進(jìn)而產(chǎn)生新基因；（2）基因重組是指在生物體進(jìn)行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，包括兩種類型：①自由組合型：減數(shù)第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合；②交叉互換型：減數(shù)第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。此外，某些細(xì)菌（如肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗）和在人為作用（基因工程）下也能產(chǎn)生基因重組；（3）染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異（重復(fù)、缺失、易位、倒位）和染色體數(shù)目變異?！绢}目詳解】A、基因突變是不定向的，與環(huán)境沒有明確的因果關(guān)系，A正確；B、基因重組雖然不能產(chǎn)生新基因，但可以形成多樣化基因組合的子代，從而使得后代有了更大的變異性，有利于適應(yīng)多變的環(huán)境，對生物進(jìn)化有重要意義，B正確；C、生物體的遺傳與變異，往往以細(xì)胞內(nèi)基因的傳遞和變化為基礎(chǔ)，進(jìn)而表現(xiàn)出生物體性狀上的差異，C正確；D、貓叫綜合征是人的第5號染色體部分缺失引起的遺傳病，屬于染色體結(jié)構(gòu)變異，D錯誤。故選D。二、非選擇題9、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復(fù)制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【答案解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達(dá)載體?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，可以檢測細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細(xì)胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設(shè)置對照實驗，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，因為不含PD-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?！敬鸢更c睛】題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識在新的情景材料下分析運用。10、唯一碳源選擇稀釋涂布平板在稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面的一個菌落來源于（稀釋液中的）一個活菌凝膠色譜較大實際污染環(huán)境中多聚聯(lián)苯不是唯一碳源，或其他環(huán)境條件導(dǎo)致聯(lián)苯水解酶的活性降低【答案解析】

1、培養(yǎng)基按功能分：選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率，如加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌；鑒別培養(yǎng)基：加入某種試劑或化學(xué)藥品依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物，如伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌。2、凝膠色譜法的原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離?！绢}目詳解】（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，應(yīng)該用以多聚聯(lián)苯作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。（2）在對所分離的菌種進(jìn)行計數(shù)時，除用顯微鏡直接計數(shù)法以外還常用稀釋涂布平板法接種來進(jìn)行活菌計數(shù)，因為在稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面的一個菌落可認(rèn)為來源于（稀釋液中的）一個活菌。（3）純化該酶常用的方法是凝膠色譜法，該方法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此采用該方法先分離出分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)。（4）由于在實際污染環(huán)境中多聚聯(lián)苯不是唯一碳源，或其他環(huán)境條件導(dǎo)致聯(lián)苯水解酶的活性降低，因此會出現(xiàn)聯(lián)苯降解酶在實驗室里的降解率很高，但是實際污染環(huán)境的治理中降解率很低的現(xiàn)象。【答案點睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、蛋白質(zhì)的提取和分離等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的種類及功能，掌握平板劃線法的具體操作；識記蛋白質(zhì)提取和分離實驗的原理，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。11、沒有以核膜為界限的細(xì)胞核碳源選擇滅菌酒精燈火焰旁稀釋涂布平板法小【答案解析】

常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌；微生物的分離是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要環(huán)節(jié)。土壤中的微生物很多，要從土壤中獲得分解石油的細(xì)菌，接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落，用途：一般多用于從菌種的純化；稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細(xì)胞，計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個細(xì)胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)?！绢}目詳解】（1）原核生物和真核生物的本質(zhì)區(qū)別是有無以核膜為界的細(xì)胞核，細(xì)菌屬于原核生物，真菌屬于真核生物，因此細(xì)菌與真菌相比的區(qū)別在于細(xì)菌沒有以核膜為界限的細(xì)胞核。（2）微生物的生長需要碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，石油可為該細(xì)菌的生長繁殖提供碳源。分離細(xì)菌的培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基。（3）微生物培養(yǎng)需要無菌環(huán)境，因此取樣時用到的一切工具需要進(jìn)行滅菌處理，使用稀釋涂布平板法對微生物進(jìn)行分離培養(yǎng)時，梯度稀釋、涂布樣品到培養(yǎng)基等操作需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行。（4）對細(xì)菌計數(shù)，常用的簡便方法是稀釋涂布平板法，由于兩個或多個細(xì)菌連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落，因此該方法統(tǒng)計到的菌落數(shù)往往比實際值偏小?！敬鸢更c睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、測定某種微生物的數(shù)量等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分；能采用稀釋涂布平板法對微生物進(jìn)行計數(shù)，并