臨床微生物標(biāo)本采集與實(shí)驗(yàn)室分析課件

臨床微生物標(biāo)本采集與實(shí)驗(yàn)室分析陶傳敏四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科臨床微生物室.1臨床微生物標(biāo)本采集.1主要內(nèi)容臨床常見感染相關(guān)的病原菌、定植菌微生物標(biāo)本送檢率及采集與運(yùn)送要點(diǎn)

正確解讀臨床微生物室報(bào)告

.2主要內(nèi)容.2與臨床各科密切相關(guān)是醫(yī)院感染重要組成部分醫(yī)院感染耐藥細(xì)菌引起者多見治療棘手,病死率高臨床微生物實(shí)驗(yàn)室參與診治細(xì)菌感染.3與臨床各科密切相關(guān)細(xì)菌感染.3經(jīng)驗(yàn)治療

循證治療

empiricaltherapyevidence-basedtherapy

感染發(fā)生基礎(chǔ)感染病情程度疑為細(xì)菌感染肯定細(xì)菌感染可能病原菌陽性病原菌目前耐藥情況菌株耐藥情況.4經(jīng)驗(yàn)治療循證治療

empirica臨床常見感染相關(guān)的病原菌

不同部位的常見定植菌.5臨床常見感染相關(guān)的病原菌

不同部位的常見定植菌.5非細(xì)胞型

原核單細(xì)胞型

真核多細(xì)胞型

病毒

細(xì)菌、支原體、衣原體

真菌

螺旋體、立克次體、放線菌

微生物.6非細(xì)胞型原核單細(xì)胞型無細(xì)胞壁：立克次體、衣原體支原體

有細(xì)胞壁：細(xì)菌、螺旋體、放線菌

細(xì)菌感染病原菌.7無細(xì)胞壁：立克次體、衣原體支原體細(xì)菌感染病原

G+菌：葡萄球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬常見細(xì)菌.8G+菌：葡萄球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬常見細(xì)菌.8G+球菌：葡萄球菌屬—金黃色葡萄球菌S.aureus凝固酶陰性葡萄球菌CoNS

鏈球菌屬--肺炎鏈球菌S.pneumoniae化膿性鏈球菌S.pyogenic

腸球菌屬--糞腸球菌E.faecalis屎腸球菌E.faecium

臨床常見細(xì)菌.9G+球菌：葡萄球菌屬—金黃色葡萄球菌S.aureus臨G+桿菌：棒狀桿菌屬-J-K棒狀桿菌C.Jeikeium

李斯特菌屬-產(chǎn)單核李斯特菌

L.monocytogenes

芽孢桿菌屬–炭疽芽孢桿菌B、antrax陰道加特納菌--

臨床常見細(xì)菌.10G+桿菌：棒狀桿菌屬-J-K棒狀桿菌C.JeikeG-球菌：

奈瑟菌屬—淋病奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌莫拉菌屬--卡他莫拉菌臨床常見細(xì)菌.11G-球菌：臨床常見細(xì)菌.11G-桿菌：腸桿菌科（22屬）埃希菌屬—大腸埃希菌E.coli沙門菌屬—傷寒沙門菌S.typhi

克雷伯菌屬—肺炎克雷伯菌腸桿菌屬–陰溝腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌臨床常見細(xì)菌.12G-桿菌：腸桿菌科（22屬）臨床常見細(xì)菌.12G-桿菌：

非腸桿菌科不動(dòng)桿菌屬假單胞菌屬產(chǎn)堿桿菌屬軍團(tuán)桿菌屬臨床常見細(xì)菌.13G-桿菌：非腸桿菌科臨床常見細(xì)菌.13.14.14下呼吸道感染常見

病原菌

定植菌CAP：肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、肺炎支原體、衣原體、軍團(tuán)菌、呼吸道病毒、厭氧菌（吸入）需氧菌：草綠色鏈球菌、葡萄球菌、奈瑟菌、棒狀桿菌、微球菌、支原體等HAP：G-桿菌、金葡菌、肺炎鏈球菌、真菌厭氧菌：韋榮球菌、消化鏈球菌、擬桿菌、丙酸桿菌、雙極桿菌等真菌：念珠菌屬.15下呼吸道感染常見

下呼吸道標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003N=7910華西醫(yī)院2005年1-5月N=826銅綠假單胞菌11%銅綠假單胞菌32%金黃色葡萄球菌10%鮑曼不動(dòng)桿菌14%流感嗜血桿菌7%金黃色葡萄球菌12%.16下呼吸道標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003尿路感染的常見

病原菌定植菌80%陰性桿菌：大腸桿菌70%，其余未變形桿菌、綠膿桿菌、克雷伯菌等需氧菌：腸球菌、腸桿菌、棒狀桿菌、鏈球菌、非致病性奈瑟菌、不動(dòng)桿菌20%為陽性球菌，以腸球菌多見厭氧菌：擬桿菌、梭菌等真菌：念珠菌屬.17尿路感染的常見

尿液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年N=9682華西醫(yī)院2005年1-5月N=48大腸桿菌39%大腸桿菌60%腸球菌屬11%糞腸球菌10%克雷伯菌屬10%銅綠假單胞菌10%.18尿液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年華西醫(yī)院血液感染的常見病原菌：需氧菌：CONS、金葡、肺鏈、腸球菌、腸桿菌科、綠膿桿菌、流感嗜血桿菌等厭氧菌：脆弱擬桿菌真菌：念珠菌等.19血液感染的常見病原菌：.19血液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年N=2097華西醫(yī)院2005年1-5月N=37大腸桿菌22%大腸桿菌32%凝固酶陰性葡萄球菌17%銅綠假單胞菌14%金黃色葡萄球菌9%金黃色葡萄球菌8%凝固酶陰性葡萄球菌8%.20血液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年華西醫(yī)院傷口分泌物標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年

華西醫(yī)院2005年1-5月N=170無統(tǒng)計(jì)金黃色葡萄球菌25%無統(tǒng)計(jì)表皮葡萄球菌15%無統(tǒng)計(jì)銅綠假單胞菌8%鮑曼假單胞菌8%.21傷口分泌物標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年華西醫(yī)微生物標(biāo)本采集與運(yùn)送要點(diǎn)一般原則抗生素使用前采集采集后及時(shí)送檢避免正常菌群的污染適當(dāng)?shù)臉?biāo)本類型：反應(yīng)感染部位、厭氧標(biāo)本標(biāo)本量足夠?qū)Ｓ门囵B(yǎng)杯.22微生物標(biāo)本采集與運(yùn)送要點(diǎn)一般原則.22感染病原學(xué)診斷臨床微生物室——提高細(xì)菌培養(yǎng)藥敏檢測(cè)質(zhì)量臨床醫(yī)生——送合格標(biāo)本

——準(zhǔn)確解讀報(bào)告單.23感染病原學(xué)診斷.23抗菌藥物濫用和亂用原因?病原學(xué)診斷不明確

重視不夠標(biāo)本質(zhì)量低就診前或留取標(biāo)本前使用抗生素率高病原學(xué)檢測(cè)質(zhì)量不高檢出率低準(zhǔn)確性差報(bào)告方式遲后報(bào)告信息不全藥敏試驗(yàn)欠規(guī)范.24抗菌藥物濫用和亂用原因?病原學(xué)診斷不明確.24病原標(biāo)本送檢率(開始用藥前)內(nèi)科系統(tǒng):68.1%.25病原標(biāo)本送檢率(開始用藥前)內(nèi)科系統(tǒng):68.1%.25病原標(biāo)本送檢率(用藥期間)內(nèi)科系統(tǒng):87.7%.26病原標(biāo)本送檢率(用藥期間)內(nèi)科系統(tǒng):87.7%.26幾種重要微生物標(biāo)本的

采集時(shí)期及采集要點(diǎn)

.27幾種重要微生物標(biāo)本的

采集時(shí)期及采集要點(diǎn)

.27血培養(yǎng).28血培養(yǎng).28美國CUMITECH規(guī)定病人：發(fā)熱380C體溫下降：360CWBC：10.0X109個(gè)/LWBC：1.0X109個(gè)/L以上4條任意一條符合，送血培養(yǎng).29美國CUMITECH規(guī)定病人：.29【血行感染及其分期】

（BloodstreamInfection，BSI）

▲菌血癥期

—血培養(yǎng)陽性bacteremia▲敗血癥期

—全身感染中毒癥狀和體征

septicemia▲敗血癥綜合征期--全身感染中毒癥、征+臟器損害

sepsis▲敗血癥休克期--休克+上述表現(xiàn)septicshock.30【血行感染及其分期】

（BloodstreamInfe%死亡率.31%死亡率.31血培養(yǎng)的目的及意義1，敗血癥唯一的確診手段2，協(xié)助感染性疾病的診斷病原菌感染部位（全身、局部）3，判斷預(yù)后4，指導(dǎo)治療

合理選擇抗生素控制耐藥菌的傳播.32血培養(yǎng)的目的及意義1，敗血癥唯一的確診手段.32不同抗感染治療方案的療效分析A=正確抗感染治療方案

I=不正確抗感染治療方案ClinInfecDis24:584-602,1997.33不同抗感染治療方案的療效分析A=正確抗感染治療方案.3血培養(yǎng)系統(tǒng)傳統(tǒng)血培養(yǎng)血培養(yǎng)系統(tǒng)每天肉眼觀察自動(dòng)監(jiān)測(cè)，10分鐘一次普通孵育振蕩孵育盲目傳種自動(dòng)繪制生長曲線，陽性自動(dòng)報(bào)警只能做血培養(yǎng)血、無菌體液需氧培養(yǎng)需氧＋厭氧＋L菌＋結(jié)核菌.34血培養(yǎng)系統(tǒng)傳統(tǒng)血培養(yǎng)血培養(yǎng)系統(tǒng).34檢測(cè)原理細(xì)菌生長繁殖時(shí)產(chǎn)生CO2，通過各種手段檢測(cè)CO2來判斷陰陽性放射性標(biāo)記檢測(cè)特殊感受器pH或氧化還原電勢(shì)均質(zhì)熒光技術(shù).35檢測(cè)原理細(xì)菌生長繁殖時(shí)產(chǎn)生CO2，通過各種手段檢測(cè)CO2來判生長曲線.36生長曲線.361998-2001年血培養(yǎng)的評(píng)價(jià)7124份標(biāo)本，陽性率11.5%，污染率0.3%陽性檢出時(shí)間24hr內(nèi)檢出占69.9%48hr內(nèi)檢出占87.3%72hr內(nèi)檢出占91.3%陶傳敏等.華西醫(yī)學(xué).2002;17(3):366.371998-2001年血培養(yǎng)的評(píng)價(jià)7124份標(biāo)本，陽性率11.三級(jí)報(bào)告制度一級(jí)：陽性報(bào)警的當(dāng)天直接涂片報(bào)告二級(jí)：第二天的直接藥敏試驗(yàn)報(bào)告改為48hr的陰性報(bào)告（2005年）三級(jí)：第三天的正式報(bào)告.38三級(jí)報(bào)告制度一級(jí)：陽性報(bào)警的當(dāng)天直接涂片報(bào)告.381998-2005年血培養(yǎng)送檢情況.391998-2005年血培養(yǎng)送檢情況.39采血量與檢出率的關(guān)系.40采血量與檢出率的關(guān)系.40影響陽性標(biāo)本檢出的因素采血量—陽性檢出率的關(guān)鍵每增加1ml血量=增加3%-5%靈敏度成人:8-10ml/培養(yǎng)瓶兒童:0.5-3ml/培養(yǎng)瓶盡量避免采血量不足.41影響陽性標(biāo)本檢出的因素采血量—陽性檢出率的關(guān)鍵.41采血時(shí)間選擇第一組：發(fā)熱峰值前2.5–12小時(shí)第二組：發(fā)熱峰值前30分鐘–2.5小時(shí)第三組：發(fā)熱峰值后30分鐘–1小時(shí)第四組：發(fā)熱峰值后1–12小時(shí).42采血時(shí)間選擇第一組：發(fā)熱峰值前2.5–12小時(shí).42標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)理論:寒戰(zhàn)高熱前1小時(shí)一般原則:發(fā)熱初期或高峰時(shí)抗生素應(yīng)用前已用藥而不能中止者，在下次用藥前.43標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)理論:寒戰(zhàn)高熱前1小時(shí).43采血次數(shù)與陽性率的關(guān)系.44采血次數(shù)與陽性率的關(guān)系.44采血次數(shù)：成人一般為2~3次提高菌血癥的檢出率彌補(bǔ)采血量的不足幫助判斷是感染菌還是污染菌.45采血次數(shù)：成人一般為2~3次.45解決的方法－－

正確的皮膚消毒方法70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒以上1%2%碘酊作用30秒或10%碘伏60秒70%酒精脫碘.46解決的方法－－

正確的皮膚消毒方法70%酒精擦拭靜

血液標(biāo)本的采集要點(diǎn)抗生素使用前發(fā)熱初期或高峰時(shí)采血量：成人:8-10ml/瓶，兒童:0.5-3ml/瓶采血次數(shù)：成人一般為2~3次防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物引起的污染原則上每次采樣應(yīng)需氧和厭氧同時(shí)抽盡量不在靜動(dòng)脈導(dǎo)管中取血培養(yǎng)標(biāo)本.47血液標(biāo)本的采集要點(diǎn)抗生素使用前.47菌血癥或敗血癥:10分鐘不同的兩處采血急性心內(nèi)膜炎:1-2小時(shí)內(nèi)分別在3處采血亞急性心內(nèi)膜炎:每隔15分鐘分別從3個(gè)部位取血,24小時(shí)后如為陰性,再取3個(gè)標(biāo)本不明原因發(fā)熱:間隔1小時(shí)以上在不同部位取血2-3份,24小時(shí)后如為陰性再取血2-3份懷疑菌血癥或真菌血癥：結(jié)果持續(xù)陰性，提醒微生物室進(jìn)行有針對(duì)性培養(yǎng)，以便獲得罕見或苛養(yǎng)微生物

血液標(biāo)本的采集要點(diǎn).48菌血癥或敗血癥:10分鐘不同的兩處采血血液標(biāo)本的采集要點(diǎn).4痰標(biāo)本的正確采集在醫(yī)生或護(hù)士指導(dǎo)下取樣囑病人漱口三遍以除去淺表固有定植菌指導(dǎo)病人深咳以取得下呼吸道標(biāo)本（而不是鼻后粘液）置于一無菌容器

注意:咳痰不能做厭氧培養(yǎng)!!!.49痰標(biāo)本的正確采集在醫(yī)生或護(hù)士指導(dǎo)下取樣.49細(xì)胞學(xué)篩選標(biāo)本不合格標(biāo)本

指唾液或唾液嚴(yán)重污染的痰標(biāo)本，含鱗狀上皮細(xì)胞多，而白細(xì)胞少

合格標(biāo)本應(yīng)是從下呼吸道咳出的痰，內(nèi)含頰部鱗狀上皮細(xì)胞少，而白細(xì)胞較多.50細(xì)胞學(xué)篩選標(biāo)本不合格標(biāo)本合格標(biāo)本.50原始培養(yǎng)生長菌落實(shí)現(xiàn)標(biāo)本退檢制度.51原始培養(yǎng)生長菌落實(shí)現(xiàn)標(biāo)本退檢制度.51

2005年3-5月全院痰標(biāo)本細(xì)胞學(xué)篩查合格率調(diào)查表

合格:每低倍鏡視野上皮細(xì)胞<10個(gè),白細(xì)胞>25基本合格:每低倍鏡視野上皮細(xì)胞>10個(gè),白細(xì)胞>25個(gè)不合格:每低倍鏡視野上皮細(xì)胞>10個(gè),白細(xì)胞<25個(gè)標(biāo)本合格基本合格標(biāo)本不合格總計(jì)標(biāo)本分比24.6%27.3%48.1%.522005年3-5月全院痰標(biāo)本細(xì)胞學(xué)

標(biāo)本合格基本合格標(biāo)3-5月我院各病房痰標(biāo)本合格率調(diào)查表

A病房B病房C病房合格24515基本合格331012不合格711421不合格率55.5%48.3%45.8%.533-5月我院各病房痰標(biāo)本合格率

A病房B病房C病房合格清潔中段尿標(biāo)本的正確采集要點(diǎn)培養(yǎng)前最好停用抗生素48-72小時(shí)晨尿最佳采集標(biāo)本前,清潔尿道口。棄去前段尿，留取中段尿于專用培養(yǎng)杯中，蓋嚴(yán)培養(yǎng)杯，2小時(shí)內(nèi)送檢注意:清潔中段尿不適合做厭氧培養(yǎng)!!!.54清潔中段尿標(biāo)本的正確采集要點(diǎn)培養(yǎng)前最好停用抗生素48-72小

標(biāo)本的及時(shí)運(yùn)送苛養(yǎng)菌中除卡他莫拉菌外，流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌對(duì)干燥、對(duì)寒冷的抵抗力均較弱，在標(biāo)本離開機(jī)體后其存活率十分低。對(duì)環(huán)境抵抗強(qiáng)的病原菌（綠膿及其它G-菌，葡萄球菌、念珠菌等），2-4h后繁殖數(shù)代，影響定量結(jié)果。.55標(biāo)本的及時(shí)運(yùn)送苛養(yǎng)菌中除卡他莫拉菌外，流感嗜血桿菌和肺炎正確解讀臨床微生物室報(bào)告

了解細(xì)菌體外藥敏試驗(yàn)方法認(rèn)識(shí)幾種重要的耐藥模式.56正確解讀臨床微生物室報(bào)告

了解細(xì)菌體外藥敏試驗(yàn)方法.56病原學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告的解釋有無陽性檢測(cè)結(jié)果感染，污染？耐藥藥物可供選用的治療藥物.57病原學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告的解釋有無陽性檢測(cè)結(jié)果.57抗生素敏感試驗(yàn)方法K-B法（紙片瓊脂擴(kuò)散法）稀釋法（肉湯試管稀釋法、微量肉湯稀釋法、瓊脂平板稀釋法）E-test法手工法：自行制訂藥敏菜單自動(dòng)化藥敏分析系統(tǒng)全自動(dòng)：VITEK-AMS、MicroScan、Phoenix、SENSITITRE

半自動(dòng)：VITEK-ATB、AutoScan-4、AutoReader.58抗生素敏感試驗(yàn)方法K-B法（紙片瓊脂擴(kuò)散法）手工法：自行制訂KB法藥敏試驗(yàn)流程.59KB法藥敏試驗(yàn)流程.59KB紙片法藥敏結(jié)果.60KB紙片法藥敏結(jié)果.60K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法優(yōu)點(diǎn)操作簡單（需要的設(shè)備簡單）、成本低根據(jù)需要聯(lián)合藥敏（臨床耐藥菌增加）判斷兩藥是（無關(guān)、協(xié)同、累加、拮抗）細(xì)菌濃度影響藥敏的程度略小能檢出接種菌中的異型耐藥菌株或混合菌藥物選擇靈活.61K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法優(yōu)點(diǎn)操作簡單（需要的設(shè)備簡單）、成本低.間接測(cè)出MIC（定性）不適合擴(kuò)散慢的藥物不適合生長慢的細(xì)菌勞動(dòng)量大K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法的缺點(diǎn)加強(qiáng)紙片管理（做好包藏、質(zhì)控）、瓊脂厚度及細(xì)菌濃度的控制，對(duì)部分有爭議的藥敏結(jié)合MIC法.62間接測(cè)出MIC（定性）K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法的缺點(diǎn)加強(qiáng)紙片管理試管稀釋法（MICug/ml）

0.1250.250.51248

16

3264

.63試管稀釋法（MICug/ml）0.1250.25A＝抗生素EFBCADMIC.64A＝抗生素EFBCADMIC.64肺炎鏈球菌E-TEST結(jié)果.65肺炎鏈球菌E-TEST結(jié)果.65綠膿桿菌鑒定藥敏板條結(jié)果生化反應(yīng)區(qū)藥敏測(cè)試區(qū).66綠膿桿菌鑒定藥敏板條結(jié)果生化反應(yīng)區(qū)藥敏測(cè)試區(qū).66稀釋法藥敏試驗(yàn)（MIC）

臨床常用自動(dòng)化儀器優(yōu)點(diǎn)定量（直接測(cè)MIC），稀釋法特別是瓊脂稀釋法被譽(yù)為金標(biāo)準(zhǔn)。敏感度高、出結(jié)果快勞動(dòng)量相對(duì)小現(xiàn)在的自動(dòng)化儀器（DADE、VITEK-ATB、VITEK-2、Phoenix）都帶有專家系統(tǒng)協(xié)助判斷藥敏.67稀釋法藥敏試驗(yàn)（MIC）

臨床常用自動(dòng)化儀器優(yōu)點(diǎn)定抗生素敏感試驗(yàn)藥敏結(jié)果≠臨床療效：

敏感——有效耐藥——無效敏感——無效（假敏感）耐藥——有效（假耐藥）臨床醫(yī)師正確評(píng)價(jià)藥敏試驗(yàn)結(jié)果的同時(shí)，必須參考病人機(jī)體狀況、臨床治療效果以及藥動(dòng)學(xué)、藥物毒副作用和藥物價(jià)格以及本地區(qū)本醫(yī)院等細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)合理選用藥物。

.68抗生素敏感試驗(yàn)藥敏結(jié)果≠臨床療效：.68微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單

標(biāo)本號(hào)20030827XJS212姓名金雨困性別男年齡77歲住院號(hào)392745病區(qū)重監(jiān)病房ICU床號(hào)15診斷腦梗塞伴肺部感染標(biāo)本痰部位

檢驗(yàn)?zāi)康募?xì)菌檢測(cè)（套）送檢醫(yī)師蘇立達(dá)日期2003/08/27接收醫(yī)師徐志剛?cè)掌?003/08/27直接涂片鏡檢評(píng)價(jià)：備注S-敏感I-中介R-耐藥細(xì)菌名混叢，多

陰溝腸桿菌藥敏結(jié)果（KB法）抗生素

結(jié)果抗生素

結(jié)果氨芐西林R<6頭孢吡肟S27哌拉西林R16亞胺培南S23頭孢夫辛R<6美羅培南S24頭孢西丁R<6慶大霉素S19頭孢噻肟R14阿米卡星S20頭孢曲松R13環(huán)丙沙星S32

頭孢他定R10氨曲南R15

阿莫西林/克拉維酸R<6

哌拉西林/他唑巴坦R16頭孢哌酮/舒巴坦I18第1張共2張報(bào)告單報(bào)告日期2003-08-30檢驗(yàn)醫(yī)師：審核：.69微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單

標(biāo)本號(hào)20030409XJS045姓名襯丙丙性別男年齡59歲住院號(hào)384802病區(qū)重監(jiān)病房ICU床號(hào)8診斷多發(fā)傷伴肺部感染標(biāo)本痰部位

檢驗(yàn)?zāi)康碾娔X細(xì)菌檢測(cè)（套）送檢醫(yī)師李立斌日期2003/04/09接收醫(yī)師徐志剛?cè)掌?003/04/09直接涂片鏡檢評(píng)價(jià)：備注S-敏感I-中介R-耐藥細(xì)菌名混叢，多大腸桿菌

藥敏結(jié)果抗生素

結(jié)果MIC氨芐西林>16R哌拉西林>64R頭孢夫辛>16R復(fù)方新諾明<2/38S頭孢噻肟<4S頭孢曲松<4S

頭孢他定<8S氨曲南<8S

亞胺培南<4S第1張共2張報(bào)告單報(bào)告日期2003-04-12檢驗(yàn)醫(yī)師：徐志剛審核：原雙晉.70微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單SeriousinfectionstestingpositiveforMRSAisolatesamonghospitalizedpatients

(1997SENTRYdata)Patients(%)0305010Pneumonia2040UTIWoundBloodstreamInfectiontypeJones.Chest2001;119:397S–404SUTIUTI=urinarytractinfection.71Seriousinfectionstestingpos據(jù)NCCLS（2004）標(biāo)準(zhǔn)：

苯唑西林

MIC≥4mg/LMRSAMIC≤2mg/LMSSA頭孢西丁30μg/片≤19mmMRSA≤24mmMRCoNS凡MRS菌:不管其實(shí)驗(yàn)結(jié)果MIC值或抑菌環(huán)大小如何，實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)報(bào)告該細(xì)菌對(duì)所有β-內(nèi)酰胺類耐藥以免誤導(dǎo)臨床用藥。

MRSA的確定.72據(jù)NCCLS（2004）標(biāo)準(zhǔn)：MRSA的確定.72MRSA分離率41.2%24.2%2.4%60%0%50%100%日本(1999)5歐洲(1993)4韓國(1988)2美國(NNIS)(1975)1日本(1993)356%1、Data:FileonLillyLaboratory,Indianapolis,U.S.A. 2、JKoreanMedSci,1998;3:45~50.3、JDermatology,1993;20:193~197 4、Vincentetal.JAMA,1995;274(8):639~644.5、Morimotok,KansenshogakuZasshi-JournaloftheJapaneseAssociationforInfectiousDisease73(6):584~92,1999Jan.73MRSA分離率41.2%24.2%2.4%60%0%50%1華西醫(yī)院MRSA的檢出率資料：四川大學(xué)華西醫(yī)院.74華西醫(yī)院MRSA的檢出率資料：四川大學(xué)華西醫(yī)院.74StructurallymodifiedantibiotictargetsiteInterioroforganismCellwallTargetsiteBindingAntibioticAntibioticsnormallybindtospecificbindingproteinsonthebacterialcellsurface.75StructurallymodifiedantibiotStructurallymodifiedantibiotictargetsiteInterioroforganismCellwallModifiedtargetsiteAntibioticChangedsite:blockedbindingAntibioticsarenolongerabletobindtomodifiedbindingproteinsonthebacterialcellsurface.76Structurallymodifiedantibiot用藥選擇：

全身性感染：首選萬古霉素、去甲萬古、替考拉寧可聯(lián)用利福平、氨基糖苷類,

鏈陽菌素類、惡唑烷酮類.77用藥選擇：.77Patientswhofailedcephalosporin

therapyforseriousinfectionsduetoESBL-producingorganismsPatersonetal.JClinMicrobiol2001;39:2206–2212Clinicalfailurerate(%)0601002014080248CephalosporinMIC(μg/mL).78Patientswhofailedcephalospo常見ESBLs產(chǎn)生菌及藥敏特點(diǎn)：腸桿菌科：常見克雷伯菌屬、大腸埃希菌

對(duì)PNC類、1-4代頭孢R，多為MDR

頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟或氨曲南的抑菌圈減小

加克拉維酸（棒酸）可使抑菌圈擴(kuò)大≥5mm.79常見ESBLs產(chǎn)生菌及藥敏特點(diǎn)：腸桿菌科：常見克雷伯菌ESBLs篩選試驗(yàn)

確認(rèn)試驗(yàn)

（紙片法）紙片

頭孢他定30μg頭孢他定/棒酸30/10μg

頭孢噻肟30μg頭孢噻肟/棒酸30/10μg接種MHA標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法，孵育35℃，空氣，16-18h結(jié)果

頭孢他定≤22mm加棒酸后抑菌圈直徑頭孢噻肟≤27mm≥5mm為ESBL株

.80ESBLs篩選試驗(yàn)確認(rèn)試驗(yàn)

（紙片法）紙片頭孢他定ESBL確證實(shí)驗(yàn).81ESBL確證實(shí)驗(yàn).81ESBLS分離率國外10%-40%國內(nèi)30%-45%華西醫(yī)院：.82ESBLS分離率國外10%-40%.82MechanismofESBLactivityParent-lactamaseThird-generation

cephalosporinNofit;therefore,noenzymaticdestructionofantibiotic.83MechanismofESBLactivityPareMechanismofESBLactivityThird-generation

cephalosporinESBLEnzymefitleadstodestructionofantibiotic由質(zhì)粒介導(dǎo)，系窄譜β-內(nèi)酰胺酶基因突變而來

TEM-1，TEM-2和SHV-1等.84MechanismofESBLactivityThir謝謝大家！聯(lián)系電話：85422618E.mail:taochuanmin@.85謝謝大家！聯(lián)系電話：85422618.85臨床微生物標(biāo)本采集與實(shí)驗(yàn)室分析陶傳敏四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科臨床微生物室.86臨床微生物標(biāo)本采集.1主要內(nèi)容臨床常見感染相關(guān)的病原菌、定植菌微生物標(biāo)本送檢率及采集與運(yùn)送要點(diǎn)

正確解讀臨床微生物室報(bào)告

.87主要內(nèi)容.2與臨床各科密切相關(guān)是醫(yī)院感染重要組成部分醫(yī)院感染耐藥細(xì)菌引起者多見治療棘手,病死率高臨床微生物實(shí)驗(yàn)室參與診治細(xì)菌感染.88與臨床各科密切相關(guān)細(xì)菌感染.3經(jīng)驗(yàn)治療

循證治療

empiricaltherapyevidence-basedtherapy

感染發(fā)生基礎(chǔ)感染病情程度疑為細(xì)菌感染肯定細(xì)菌感染可能病原菌陽性病原菌目前耐藥情況菌株耐藥情況.89經(jīng)驗(yàn)治療循證治療

empirica臨床常見感染相關(guān)的病原菌

不同部位的常見定植菌.90臨床常見感染相關(guān)的病原菌

不同部位的常見定植菌.5非細(xì)胞型

原核單細(xì)胞型

真核多細(xì)胞型

病毒

細(xì)菌、支原體、衣原體

真菌

螺旋體、立克次體、放線菌

微生物.91非細(xì)胞型原核單細(xì)胞型無細(xì)胞壁：立克次體、衣原體支原體

有細(xì)胞壁：細(xì)菌、螺旋體、放線菌

細(xì)菌感染病原菌.92無細(xì)胞壁：立克次體、衣原體支原體細(xì)菌感染病原

G+菌：葡萄球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬常見細(xì)菌.93G+菌：葡萄球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬常見細(xì)菌.8G+球菌：葡萄球菌屬—金黃色葡萄球菌S.aureus凝固酶陰性葡萄球菌CoNS

鏈球菌屬--肺炎鏈球菌S.pneumoniae化膿性鏈球菌S.pyogenic

腸球菌屬--糞腸球菌E.faecalis屎腸球菌E.faecium

臨床常見細(xì)菌.94G+球菌：葡萄球菌屬—金黃色葡萄球菌S.aureus臨G+桿菌：棒狀桿菌屬-J-K棒狀桿菌C.Jeikeium

李斯特菌屬-產(chǎn)單核李斯特菌

L.monocytogenes

芽孢桿菌屬–炭疽芽孢桿菌B、antrax陰道加特納菌--

臨床常見細(xì)菌.95G+桿菌：棒狀桿菌屬-J-K棒狀桿菌C.JeikeG-球菌：

奈瑟菌屬—淋病奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌莫拉菌屬--卡他莫拉菌臨床常見細(xì)菌.96G-球菌：臨床常見細(xì)菌.11G-桿菌：腸桿菌科（22屬）埃希菌屬—大腸埃希菌E.coli沙門菌屬—傷寒沙門菌S.typhi

克雷伯菌屬—肺炎克雷伯菌腸桿菌屬–陰溝腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌臨床常見細(xì)菌.97G-桿菌：腸桿菌科（22屬）臨床常見細(xì)菌.12G-桿菌：

非腸桿菌科不動(dòng)桿菌屬假單胞菌屬產(chǎn)堿桿菌屬軍團(tuán)桿菌屬臨床常見細(xì)菌.98G-桿菌：非腸桿菌科臨床常見細(xì)菌.13.99.14下呼吸道感染常見

病原菌

定植菌CAP：肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、肺炎支原體、衣原體、軍團(tuán)菌、呼吸道病毒、厭氧菌（吸入）需氧菌：草綠色鏈球菌、葡萄球菌、奈瑟菌、棒狀桿菌、微球菌、支原體等HAP：G-桿菌、金葡菌、肺炎鏈球菌、真菌厭氧菌：韋榮球菌、消化鏈球菌、擬桿菌、丙酸桿菌、雙極桿菌等真菌：念珠菌屬.100下呼吸道感染常見

下呼吸道標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003N=7910華西醫(yī)院2005年1-5月N=826銅綠假單胞菌11%銅綠假單胞菌32%金黃色葡萄球菌10%鮑曼不動(dòng)桿菌14%流感嗜血桿菌7%金黃色葡萄球菌12%.101下呼吸道標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003尿路感染的常見

病原菌定植菌80%陰性桿菌：大腸桿菌70%，其余未變形桿菌、綠膿桿菌、克雷伯菌等需氧菌：腸球菌、腸桿菌、棒狀桿菌、鏈球菌、非致病性奈瑟菌、不動(dòng)桿菌20%為陽性球菌，以腸球菌多見厭氧菌：擬桿菌、梭菌等真菌：念珠菌屬.102尿路感染的常見

尿液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年N=9682華西醫(yī)院2005年1-5月N=48大腸桿菌39%大腸桿菌60%腸球菌屬11%糞腸球菌10%克雷伯菌屬10%銅綠假單胞菌10%.103尿液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年華西醫(yī)院血液感染的常見病原菌：需氧菌：CONS、金葡、肺鏈、腸球菌、腸桿菌科、綠膿桿菌、流感嗜血桿菌等厭氧菌：脆弱擬桿菌真菌：念珠菌等.104血液感染的常見病原菌：.19血液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年N=2097華西醫(yī)院2005年1-5月N=37大腸桿菌22%大腸桿菌32%凝固酶陰性葡萄球菌17%銅綠假單胞菌14%金黃色葡萄球菌9%金黃色葡萄球菌8%凝固酶陰性葡萄球菌8%.105血液標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年華西醫(yī)院傷口分泌物標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年

華西醫(yī)院2005年1-5月N=170無統(tǒng)計(jì)金黃色葡萄球菌25%無統(tǒng)計(jì)表皮葡萄球菌15%無統(tǒng)計(jì)銅綠假單胞菌8%鮑曼假單胞菌8%.106傷口分泌物標(biāo)本分離的前三位細(xì)菌香港瑪麗醫(yī)院2003年華西醫(yī)微生物標(biāo)本采集與運(yùn)送要點(diǎn)一般原則抗生素使用前采集采集后及時(shí)送檢避免正常菌群的污染適當(dāng)?shù)臉?biāo)本類型：反應(yīng)感染部位、厭氧標(biāo)本標(biāo)本量足夠?qū)Ｓ门囵B(yǎng)杯.107微生物標(biāo)本采集與運(yùn)送要點(diǎn)一般原則.22感染病原學(xué)診斷臨床微生物室——提高細(xì)菌培養(yǎng)藥敏檢測(cè)質(zhì)量臨床醫(yī)生——送合格標(biāo)本

——準(zhǔn)確解讀報(bào)告單.108感染病原學(xué)診斷.23抗菌藥物濫用和亂用原因?病原學(xué)診斷不明確

重視不夠標(biāo)本質(zhì)量低就診前或留取標(biāo)本前使用抗生素率高病原學(xué)檢測(cè)質(zhì)量不高檢出率低準(zhǔn)確性差報(bào)告方式遲后報(bào)告信息不全藥敏試驗(yàn)欠規(guī)范.109抗菌藥物濫用和亂用原因?病原學(xué)診斷不明確.24病原標(biāo)本送檢率(開始用藥前)內(nèi)科系統(tǒng):68.1%.110病原標(biāo)本送檢率(開始用藥前)內(nèi)科系統(tǒng):68.1%.25病原標(biāo)本送檢率(用藥期間)內(nèi)科系統(tǒng):87.7%.111病原標(biāo)本送檢率(用藥期間)內(nèi)科系統(tǒng):87.7%.26幾種重要微生物標(biāo)本的

采集時(shí)期及采集要點(diǎn)

.112幾種重要微生物標(biāo)本的

采集時(shí)期及采集要點(diǎn)

.27血培養(yǎng).113血培養(yǎng).28美國CUMITECH規(guī)定病人：發(fā)熱380C體溫下降：360CWBC：10.0X109個(gè)/LWBC：1.0X109個(gè)/L以上4條任意一條符合，送血培養(yǎng).114美國CUMITECH規(guī)定病人：.29【血行感染及其分期】

（BloodstreamInfection，BSI）

▲菌血癥期

—血培養(yǎng)陽性bacteremia▲敗血癥期

—全身感染中毒癥狀和體征

septicemia▲敗血癥綜合征期--全身感染中毒癥、征+臟器損害

sepsis▲敗血癥休克期--休克+上述表現(xiàn)septicshock.115【血行感染及其分期】

（BloodstreamInfe%死亡率.116%死亡率.31血培養(yǎng)的目的及意義1，敗血癥唯一的確診手段2，協(xié)助感染性疾病的診斷病原菌感染部位（全身、局部）3，判斷預(yù)后4，指導(dǎo)治療

合理選擇抗生素控制耐藥菌的傳播.117血培養(yǎng)的目的及意義1，敗血癥唯一的確診手段.32不同抗感染治療方案的療效分析A=正確抗感染治療方案

I=不正確抗感染治療方案ClinInfecDis24:584-602,1997.118不同抗感染治療方案的療效分析A=正確抗感染治療方案.3血培養(yǎng)系統(tǒng)傳統(tǒng)血培養(yǎng)血培養(yǎng)系統(tǒng)每天肉眼觀察自動(dòng)監(jiān)測(cè)，10分鐘一次普通孵育振蕩孵育盲目傳種自動(dòng)繪制生長曲線，陽性自動(dòng)報(bào)警只能做血培養(yǎng)血、無菌體液需氧培養(yǎng)需氧＋厭氧＋L菌＋結(jié)核菌.119血培養(yǎng)系統(tǒng)傳統(tǒng)血培養(yǎng)血培養(yǎng)系統(tǒng).34檢測(cè)原理細(xì)菌生長繁殖時(shí)產(chǎn)生CO2，通過各種手段檢測(cè)CO2來判斷陰陽性放射性標(biāo)記檢測(cè)特殊感受器pH或氧化還原電勢(shì)均質(zhì)熒光技術(shù).120檢測(cè)原理細(xì)菌生長繁殖時(shí)產(chǎn)生CO2，通過各種手段檢測(cè)CO2來判生長曲線.121生長曲線.361998-2001年血培養(yǎng)的評(píng)價(jià)7124份標(biāo)本，陽性率11.5%，污染率0.3%陽性檢出時(shí)間24hr內(nèi)檢出占69.9%48hr內(nèi)檢出占87.3%72hr內(nèi)檢出占91.3%陶傳敏等.華西醫(yī)學(xué).2002;17(3):366.1221998-2001年血培養(yǎng)的評(píng)價(jià)7124份標(biāo)本，陽性率11.三級(jí)報(bào)告制度一級(jí)：陽性報(bào)警的當(dāng)天直接涂片報(bào)告二級(jí)：第二天的直接藥敏試驗(yàn)報(bào)告改為48hr的陰性報(bào)告（2005年）三級(jí)：第三天的正式報(bào)告.123三級(jí)報(bào)告制度一級(jí)：陽性報(bào)警的當(dāng)天直接涂片報(bào)告.381998-2005年血培養(yǎng)送檢情況.1241998-2005年血培養(yǎng)送檢情況.39采血量與檢出率的關(guān)系.125采血量與檢出率的關(guān)系.40影響陽性標(biāo)本檢出的因素采血量—陽性檢出率的關(guān)鍵每增加1ml血量=增加3%-5%靈敏度成人:8-10ml/培養(yǎng)瓶兒童:0.5-3ml/培養(yǎng)瓶盡量避免采血量不足.126影響陽性標(biāo)本檢出的因素采血量—陽性檢出率的關(guān)鍵.41采血時(shí)間選擇第一組：發(fā)熱峰值前2.5–12小時(shí)第二組：發(fā)熱峰值前30分鐘–2.5小時(shí)第三組：發(fā)熱峰值后30分鐘–1小時(shí)第四組：發(fā)熱峰值后1–12小時(shí).127采血時(shí)間選擇第一組：發(fā)熱峰值前2.5–12小時(shí).42標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)理論:寒戰(zhàn)高熱前1小時(shí)一般原則:發(fā)熱初期或高峰時(shí)抗生素應(yīng)用前已用藥而不能中止者，在下次用藥前.128標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)理論:寒戰(zhàn)高熱前1小時(shí).43采血次數(shù)與陽性率的關(guān)系.129采血次數(shù)與陽性率的關(guān)系.44采血次數(shù)：成人一般為2~3次提高菌血癥的檢出率彌補(bǔ)采血量的不足幫助判斷是感染菌還是污染菌.130采血次數(shù)：成人一般為2~3次.45解決的方法－－

正確的皮膚消毒方法70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒以上1%2%碘酊作用30秒或10%碘伏60秒70%酒精脫碘.131解決的方法－－

正確的皮膚消毒方法70%酒精擦拭靜

血液標(biāo)本的采集要點(diǎn)抗生素使用前發(fā)熱初期或高峰時(shí)采血量：成人:8-10ml/瓶，兒童:0.5-3ml/瓶采血次數(shù)：成人一般為2~3次防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物引起的污染原則上每次采樣應(yīng)需氧和厭氧同時(shí)抽盡量不在靜動(dòng)脈導(dǎo)管中取血培養(yǎng)標(biāo)本.132血液標(biāo)本的采集要點(diǎn)抗生素使用前.47菌血癥或敗血癥:10分鐘不同的兩處采血急性心內(nèi)膜炎:1-2小時(shí)內(nèi)分別在3處采血亞急性心內(nèi)膜炎:每隔15分鐘分別從3個(gè)部位取血,24小時(shí)后如為陰性,再取3個(gè)標(biāo)本不明原因發(fā)熱:間隔1小時(shí)以上在不同部位取血2-3份,24小時(shí)后如為陰性再取血2-3份懷疑菌血癥或真菌血癥：結(jié)果持續(xù)陰性，提醒微生物室進(jìn)行有針對(duì)性培養(yǎng)，以便獲得罕見或苛養(yǎng)微生物

血液標(biāo)本的采集要點(diǎn).133菌血癥或敗血癥:10分鐘不同的兩處采血血液標(biāo)本的采集要點(diǎn).4痰標(biāo)本的正確采集在醫(yī)生或護(hù)士指導(dǎo)下取樣囑病人漱口三遍以除去淺表固有定植菌指導(dǎo)病人深咳以取得下呼吸道標(biāo)本（而不是鼻后粘液）置于一無菌容器

注意:咳痰不能做厭氧培養(yǎng)!!!.134痰標(biāo)本的正確采集在醫(yī)生或護(hù)士指導(dǎo)下取樣.49細(xì)胞學(xué)篩選標(biāo)本不合格標(biāo)本

指唾液或唾液嚴(yán)重污染的痰標(biāo)本，含鱗狀上皮細(xì)胞多，而白細(xì)胞少

合格標(biāo)本應(yīng)是從下呼吸道咳出的痰，內(nèi)含頰部鱗狀上皮細(xì)胞少，而白細(xì)胞較多.135細(xì)胞學(xué)篩選標(biāo)本不合格標(biāo)本合格標(biāo)本.50原始培養(yǎng)生長菌落實(shí)現(xiàn)標(biāo)本退檢制度.136原始培養(yǎng)生長菌落實(shí)現(xiàn)標(biāo)本退檢制度.51

2005年3-5月全院痰標(biāo)本細(xì)胞學(xué)篩查合格率調(diào)查表

合格:每低倍鏡視野上皮細(xì)胞<10個(gè),白細(xì)胞>25基本合格:每低倍鏡視野上皮細(xì)胞>10個(gè),白細(xì)胞>25個(gè)不合格:每低倍鏡視野上皮細(xì)胞>10個(gè),白細(xì)胞<25個(gè)標(biāo)本合格基本合格標(biāo)本不合格總計(jì)標(biāo)本分比24.6%27.3%48.1%.1372005年3-5月全院痰標(biāo)本細(xì)胞學(xué)

標(biāo)本合格基本合格標(biāo)3-5月我院各病房痰標(biāo)本合格率調(diào)查表

A病房B病房C病房合格24515基本合格331012不合格711421不合格率55.5%48.3%45.8%.1383-5月我院各病房痰標(biāo)本合格率

A病房B病房C病房合格清潔中段尿標(biāo)本的正確采集要點(diǎn)培養(yǎng)前最好停用抗生素48-72小時(shí)晨尿最佳采集標(biāo)本前,清潔尿道口。棄去前段尿，留取中段尿于專用培養(yǎng)杯中，蓋嚴(yán)培養(yǎng)杯，2小時(shí)內(nèi)送檢注意:清潔中段尿不適合做厭氧培養(yǎng)!!!.139清潔中段尿標(biāo)本的正確采集要點(diǎn)培養(yǎng)前最好停用抗生素48-72小

標(biāo)本的及時(shí)運(yùn)送苛養(yǎng)菌中除卡他莫拉菌外，流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌對(duì)干燥、對(duì)寒冷的抵抗力均較弱，在標(biāo)本離開機(jī)體后其存活率十分低。對(duì)環(huán)境抵抗強(qiáng)的病原菌（綠膿及其它G-菌，葡萄球菌、念珠菌等），2-4h后繁殖數(shù)代，影響定量結(jié)果。.140標(biāo)本的及時(shí)運(yùn)送苛養(yǎng)菌中除卡他莫拉菌外，流感嗜血桿菌和肺炎正確解讀臨床微生物室報(bào)告

了解細(xì)菌體外藥敏試驗(yàn)方法認(rèn)識(shí)幾種重要的耐藥模式.141正確解讀臨床微生物室報(bào)告

了解細(xì)菌體外藥敏試驗(yàn)方法.56病原學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告的解釋有無陽性檢測(cè)結(jié)果感染，污染？耐藥藥物可供選用的治療藥物.142病原學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告的解釋有無陽性檢測(cè)結(jié)果.57抗生素敏感試驗(yàn)方法K-B法（紙片瓊脂擴(kuò)散法）稀釋法（肉湯試管稀釋法、微量肉湯稀釋法、瓊脂平板稀釋法）E-test法手工法：自行制訂藥敏菜單自動(dòng)化藥敏分析系統(tǒng)全自動(dòng)：VITEK-AMS、MicroScan、Phoenix、SENSITITRE

半自動(dòng)：VITEK-ATB、AutoScan-4、AutoReader.143抗生素敏感試驗(yàn)方法K-B法（紙片瓊脂擴(kuò)散法）手工法：自行制訂KB法藥敏試驗(yàn)流程.144KB法藥敏試驗(yàn)流程.59KB紙片法藥敏結(jié)果.145KB紙片法藥敏結(jié)果.60K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法優(yōu)點(diǎn)操作簡單（需要的設(shè)備簡單）、成本低根據(jù)需要聯(lián)合藥敏（臨床耐藥菌增加）判斷兩藥是（無關(guān)、協(xié)同、累加、拮抗）細(xì)菌濃度影響藥敏的程度略小能檢出接種菌中的異型耐藥菌株或混合菌藥物選擇靈活.146K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法優(yōu)點(diǎn)操作簡單（需要的設(shè)備簡單）、成本低.間接測(cè)出MIC（定性）不適合擴(kuò)散慢的藥物不適合生長慢的細(xì)菌勞動(dòng)量大K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法的缺點(diǎn)加強(qiáng)紙片管理（做好包藏、質(zhì)控）、瓊脂厚度及細(xì)菌濃度的控制，對(duì)部分有爭議的藥敏結(jié)合MIC法.147間接測(cè)出MIC（定性）K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法的缺點(diǎn)加強(qiáng)紙片管理試管稀釋法（MICug/ml）

0.1250.250.51248

16

3264

.148試管稀釋法（MICug/ml）0.1250.25A＝抗生素EFBCADMIC.149A＝抗生素EFBCADMIC.64肺炎鏈球菌E-TEST結(jié)果.150肺炎鏈球菌E-TEST結(jié)果.65綠膿桿菌鑒定藥敏板條結(jié)果生化反應(yīng)區(qū)藥敏測(cè)試區(qū).151綠膿桿菌鑒定藥敏板條結(jié)果生化反應(yīng)區(qū)藥敏測(cè)試區(qū).66稀釋法藥敏試驗(yàn)（MIC）

臨床常用自動(dòng)化儀器優(yōu)點(diǎn)定量（直接測(cè)MIC），稀釋法特別是瓊脂稀釋法被譽(yù)為金標(biāo)準(zhǔn)。敏感度高、出結(jié)果快勞動(dòng)量相對(duì)小現(xiàn)在的自動(dòng)化儀器（DADE、VITEK-ATB、VITEK-2、Phoenix）都帶有專家系統(tǒng)協(xié)助判斷藥敏.152稀釋法藥敏試驗(yàn)（MIC）

臨床常用自動(dòng)化儀器優(yōu)點(diǎn)定抗生素敏感試驗(yàn)藥敏結(jié)果≠臨床療效：

敏感——有效耐藥——無效敏感——無效（假敏感）耐藥——有效（假耐藥）臨床醫(yī)師正確評(píng)價(jià)藥敏試驗(yàn)結(jié)果的同時(shí)，必須參考病人機(jī)體狀況、臨床治療效果以及藥動(dòng)學(xué)、藥物毒副作用和藥物價(jià)格以及本地區(qū)本醫(yī)院等細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)合理選用藥物。

.153抗生素敏感試驗(yàn)藥敏結(jié)果≠臨床療效：.68微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單

標(biāo)本號(hào)20030827XJS212姓名金雨困性別男年齡77歲住院號(hào)392745病區(qū)重監(jiān)病房ICU床號(hào)15診斷腦梗塞伴肺部感染標(biāo)本痰部位

檢驗(yàn)?zāi)康募?xì)菌檢測(cè)（套）送檢醫(yī)師蘇立達(dá)日期2003/08/27接收醫(yī)師徐志剛?cè)掌?003/08/27直接涂片鏡檢評(píng)價(jià)：備注S-敏感I-中介R-耐藥細(xì)菌名混叢，多

陰溝腸桿菌藥敏結(jié)果（KB法）抗生素

結(jié)果抗生素

結(jié)果氨芐西林R<6頭孢吡肟S27哌拉西林R16亞胺培南S23頭孢夫辛R<6美羅培南S24頭孢西丁R<6慶大霉素S19頭孢噻肟R14阿米卡星S20頭孢曲松R13環(huán)丙沙星S32

頭孢他定R10氨曲南R15

阿莫西林/克拉維酸R<6

哌拉西林/他唑巴坦R16頭孢哌酮/舒巴坦I18第1張共2張報(bào)告單報(bào)告日期2003-08-30檢驗(yàn)醫(yī)師：審核：.154微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單

標(biāo)本號(hào)20030409XJS045姓名襯丙丙性別男年齡59歲住院號(hào)384802病區(qū)重監(jiān)病房ICU床號(hào)8診斷多發(fā)傷伴肺部感染標(biāo)本痰部位

檢驗(yàn)?zāi)康碾娔X細(xì)菌檢測(cè)（套）送檢醫(yī)師李立斌日期2003/04/09接收醫(yī)師徐志剛?cè)掌?003/04/09直接涂片鏡檢評(píng)價(jià)：備注S-敏感I-中介R-耐藥細(xì)菌名混叢，多大腸桿菌

藥敏結(jié)果抗生素

結(jié)果MIC氨芐西林>16R哌拉西林>64R頭孢夫辛>16R復(fù)方新諾明<2/38S頭孢噻肟<4S頭孢曲松<4S

頭孢他定<8S氨曲南<8S

亞胺培南<4S第1張共2張報(bào)告單報(bào)告日期2003-04-12檢驗(yàn)醫(yī)師：徐志剛審核：原雙晉.155微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告單SeriousinfectionstestingpositiveforMRSAisolatesamonghospitalizedpatients

(1997SENTRYdata)Patients(%)0305010Pneumonia2040UTIWoundBloodstreamInfectiontypeJones.Chest2001;119:397S–404SUTIUTI=urinarytractinfection.156Seriousinfectionstestingpos據(jù)NCCLS（2004）標(biāo)準(zhǔn)：

苯唑西林

MIC≥4mg/LMRSAMIC≤2mg/LMSSA頭孢西丁30μg/