第五章黃酮類化合物教學(xué)提綱課件

第五章黃酮類化合物Flavonoids第五章黃酮類化合物Flavonoids1本章內(nèi)容結(jié)構(gòu)研究實(shí)例檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定提取與分離理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)概述本章內(nèi)容結(jié)構(gòu)研究實(shí)例檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定提取與分離理化性質(zhì)與顯色2第五章黃酮類化合物教學(xué)提綱課件3第一節(jié)概述第一節(jié)概述4概述定義：

黃酮類化合物泛指兩個(gè)苯環(huán)通過(guò)中央三碳鏈連結(jié)而成的一系列化合物。123456781`2`3`4`5`6`C6-C3-C62-苯基色原酮概述定義：123456781`2`3`4`5`6`C6-C35概述黃酮類化合物為一類植物色素，分布廣，數(shù)量大，生物活性溫和而且多樣。天然黃酮類化合物常以苷類形式（包括氧苷與碳苷）存在，糖通常聯(lián)在A環(huán)6，8位。概述黃酮類化合物為一類植物色素，分布廣，數(shù)量大，生6重要的黃酮類化合物槲皮素Quercetin重要的黃酮類化合物槲皮素7重要的黃酮類化合物橙皮苷Hesperidin重要的黃酮類化合物橙皮苷8重要的黃酮類化合物兒茶素catechins表兒茶素Epicatechin重要的黃酮類化合物兒茶素表兒茶素9重要的黃酮類化合物大豆素Daidzein重要的黃酮類化合物大豆素10銀杏黃酮重要的黃酮類化合物銀杏黃酮重要的黃酮類化合物11多以苷的形式存在：O-苷和C-苷（見P73）苷中常見糖的種類：

單糖：D-葡萄糖，D-半乳糖，D-木糖，L-鼠李糖，L-阿拉伯糖，D-葡萄糖醛酸

雙糖：槐糖，龍膽二糖，蕓香糖（Rha1—

6Glc），新橙皮糖（Rha1—2Glc）等

三糖：龍膽三糖，槐三糖

?；牵?-乙酰葡萄糖，咖啡?；咸烟?、存在形式多以苷的形式存在：O-苷和C-苷（見P73）1、存在形式122、結(jié)構(gòu)分類（一）結(jié)構(gòu)分類分類的依據(jù)：1、三碳鏈的氧化程度；2、B環(huán)的連接位置；3、三碳鏈?zhǔn)欠癯森h(huán)。2、結(jié)構(gòu)分類（一）結(jié)構(gòu)分類13二、分類黃酮類黃酮醇類二氫黃酮類二氫黃酮醇類二、分類黃酮類14

二、分類異黃酮類二氫異黃酮類查耳酮類

花色素類二、分類異黃酮類15

二、分類黃烷-3-醇類二黃烷-3,4-二醇類二氫查耳酮類橙酮類二、分類黃烷-3-醇類16

二、分類高異黃酮類雙苯吡酮類（酮類）二、分類高異黃酮類17結(jié)構(gòu)分類黃酮類Flavone黃酮醇類二氫黃酮類二氫黃酮醇類異黃酮類高異黃酮查耳酮二氫查耳酮結(jié)構(gòu)分類黃酮類黃酮醇類二氫黃酮類二氫黃酮醇類異黃酮類高異黃酮18結(jié)構(gòu)分類魚藤酮類黃烷-3-醇類紫檀素類黃烷-3，4-二醇類花色素橙酮結(jié)構(gòu)分類魚藤酮類黃烷-3-醇類紫檀素類黃烷-3，4-二醇類193、生物活性

對(duì)心血管系統(tǒng)的作用：降低毛細(xì)血管脆性及異常通透性：蘆丁、橙皮苷擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，治療冠心病：葛根素降壓抑制血小板聚集及血栓形成3、生物活性對(duì)心血管系統(tǒng)的作用：20

抗肝毒作用：水飛薊素、（+）-兒茶素抗炎作用：二氫槲皮素雌激素樣作用：大豆素、染料木素等抗菌、抗病毒作用：木樨草素、黃芩苷、黃芩素槲皮素、山萘素、二氫槲皮素瀉下作用：營(yíng)石苷A

解痙作用：異甘草素、大豆素3、生物活性抗肝毒作用：水飛薊素、（+）-兒茶素3、生物活性21第二節(jié)黃酮類化合物的理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)第二節(jié)221.顏色交叉共軛體系的存在色原酮：無(wú)色黃酮（醇）：灰黃-黃色異黃酮：微黃色二氫黃酮（醇）：無(wú)色一、性狀1.顏色色原酮：無(wú)色黃酮（醇）：灰黃-黃色異黃酮：微黃色二23一、性狀1.顏色：

助色團(tuán)的引入，顏色加深

7,4'引入助色團(tuán)，對(duì)顏色影響較大一、性狀1.顏色：242.物態(tài)：多結(jié)晶性固體，少無(wú)定型粉末3.光學(xué)活性：

苷元：黃酮（醇），無(wú)光學(xué)活性二氫黃酮（醇）、黃烷醇，具光學(xué)活性苷：有光學(xué)活性一、性狀2.物態(tài)：多結(jié)晶性固體，少無(wú)定型粉末一、性狀25注意：花色素的顏色隨pH不同而不同紅（pH<7)~紫（pH=8.5)~藍(lán)（pH>8.5)注意：花色素的顏色隨pH不同而不同26二、溶解性（一）黃酮苷元多難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑（甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚）和稀堿液；1、平面型分子的水溶性小于非平面型分子；2、花色素以離子的形式存在，具有鹽的通性，水溶性反而最大；二、溶解性（一）黃酮苷元27（二）黃酮苷類：可溶于熱水、甲醇、乙醇、稀堿液，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。1、多糖苷>單糖苷；2、3-OH苷>7-OH苷；二、溶解性（二）黃酮苷類：可溶于熱水、甲醇、乙醇、稀堿液，難溶于親脂性28三、酸性與堿性（一）顯著的酸性羥基位置

酸性溶解性7，4＇-二羥基強(qiáng)弱溶于5%NaHCO37或4＇-羥基溶于5%Na2CO3一般酚羥基溶于0.2%NaOH5-羥基溶于4%NaOH三、酸性與堿性（一）顯著的酸性羥基位置酸性溶解性7，29三、酸堿性酸性：來(lái)源分子中的酚羥基；可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺。酸性強(qiáng)弱的比較：取決于羥基的數(shù)目和位置：

7,4′-OH>7-或4′-OH>一般OH>5-OH（可用于提取、分離及鑒定工作）7534'3'三、酸堿性酸性：來(lái)源分子中的酚羥基；（可用于提取、分離及鑒定30四、顯色反應(yīng)（見P75）四、顯色反應(yīng)（見P75）31還原試驗(yàn)1、鹽酸—鎂粉反應(yīng)（最常用）

黃酮（醇）類二氫黃酮（醇）類

陽(yáng)性（紅色）查耳酮兒茶素類異黃酮陰性注意：花色素、部分查耳酮等在濃HCl酸性下變紅，要做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，排除干擾。還原試驗(yàn)1、鹽酸—鎂粉反應(yīng)（最常用）黃酮（醇）類陽(yáng)32還原試驗(yàn)2、四氫硼鈉反應(yīng)：（專屬性）二氫黃酮（醇）

陽(yáng)性（紅色）其它黃酮陰性附：二氫黃酮類化合物可與磷鉬酸試劑反應(yīng)呈棕褐色。還原試驗(yàn)2、四氫硼鈉反應(yīng)：（專屬性）二氫黃酮（醇）陽(yáng)性（33金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)可以發(fā)生金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)的基團(tuán)：常見的金屬鹽類：鋁鹽、鎂鹽、鋯鹽等。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)可以發(fā)生金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)的基團(tuán)：常見的金屬341、三氯化鋁的顯色反應(yīng)：大多數(shù)黃酮顯黃色并有熒光。例外：4'-OH或7，4'-二OH黃酮醇顯天藍(lán)色熒光。用途：黃酮類化合物的定性定量分析。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)1、三氯化鋁的顯色反應(yīng)：金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)352、醋酸鉛的顯色反應(yīng)試劑：中性醋酸鉛或堿式醋酸鉛陽(yáng)性結(jié)果：生成黃～紅色沉淀作用部位：金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)2、醋酸鉛的顯色反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)363、鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)：用途：區(qū)別3-OH和/或5-OH的存在。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)H2O注意：3-羥基黃酮產(chǎn)生的絡(luò)合物穩(wěn)定性大于5-羥基黃酮。3、鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)：金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)H2O注意：3-37鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)區(qū)別3-OH或5-OH的存在樣品/MeOH2%ZrOCl2/MeOH溶液變黃有3-OH和/或5-OH2%枸櫞酸/MeOH仍顯黃色顯著褪色有3-OH無(wú)3-OH，有5-OH鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)區(qū)別3-OH或5-OH的存在樣品/Me384、醋酸鎂的顯色反應(yīng)二氫黃酮(醇)：天藍(lán)色熒光異黃酮、黃酮(醇)：黃~橙黃~褐色熒光5、氯化鍶（SrCl2）的顯色反應(yīng)具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物:綠~棕色~黑色沉淀金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)4、醋酸鎂的顯色反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)39（三）硼酸的顯色反應(yīng)具有結(jié)構(gòu)的化合物在酸性條件下與硼酸反應(yīng)生成亮黃色。例如：（三）硼酸的顯色反應(yīng)具有結(jié)構(gòu)的化合物在酸性條件下與硼酸反應(yīng)生40（四）堿性試劑顯色反應(yīng)1、二氫黃酮類遇堿變黃~橙色2、黃酮醇遇堿呈黃色，通入空氣變棕色。3、具有鄰二酚羥基或3，4′-二羥基取代時(shí)，在堿液中由黃-深紅-綠棕色沉淀。（四）堿性試劑顯色反應(yīng)1、二氫黃酮類遇堿變黃~橙色2、黃酮醇41第三節(jié)黃酮類化合物的提取與分離第三節(jié)42黃酮類化合物的提取與分離黃酮類化合物的提取與分離43（一）醇提法95%乙醇提取苷元60~70%乙醇提取苷類

注意：1.含雜質(zhì)多，可用石油醚去油脂、蠟、葉綠素等脂溶性雜質(zhì)。2.用炭粉吸附、酚/水洗脫的方法進(jìn)行苷類成分的精制（一）醇提法95%乙醇提取苷元注意：44藥材甲醇或乙醇提取，回收醇浸膏加水溶解水溶液分別以不同極性溶劑萃?。ㄊ兔?，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇）石油醚層（小極性）氯仿層（苷元）乙酸乙酯層（大極性苷元及單糖苷）正丁醇層（黃酮苷）水層（多糖等）第三節(jié)提取分離方法藥材甲醇或乙醇提取，回收醇浸膏加水溶解水溶液分別以不同極性溶45（二）沸水法適用于苷類和水溶性苷元的提取。注意：（1）酶的活性；（2）糊化和變質(zhì)；（3）加等量濃醇使蛋白質(zhì)、多糖等水溶性雜質(zhì)去除。（二）沸水法適用于苷類和水溶性苷元的提取。46原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出。堿：常用Ca(OH)2，或CaO水溶液。優(yōu)點(diǎn)：可使含酚羥基化合物成鹽溶解，另一方面可使含COOH的果膠、粘液質(zhì)、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)形成沉淀而除去。注意：堿性不宜過(guò)強(qiáng)，以免破壞黃酮母核；酸化時(shí)，酸性不宜過(guò)強(qiáng)，pH3~4即可，以免形成鹽而溶解。（三）堿提取酸沉淀法原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出。（三）堿提取酸沉淀47第三節(jié)提取分離方法堿提酸沉法攪拌下加入石灰乳加水300ml槐花米（15g）調(diào)節(jié)PH8-9直火加熱保持微沸30min雙層濾紙趁熱抽濾濾液殘?jiān)?0-70度下，用濃鹽酸調(diào)PH3-4靜置實(shí)例操作第三節(jié)提取分離方法堿提酸沉法攪拌下加入石灰乳加水300m48第三節(jié)提取分離方法4.炭粉吸附法藥材甲醇提取物分次加入活性炭，攪拌，靜置，檢查上清液有無(wú)黃酮反應(yīng)，過(guò)濾濾液吸附后活性炭粉依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、15%酚/醇洗脫沸水沸甲醇7%酚/水15%酚/醇濃縮，加乙醚乙醚層（酚）水層（黃酮苷）第三節(jié)提取分離方法4.炭粉吸附法藥材甲醇提取物分次加入活49二、分離

（一）采用各種色譜方法：硅膠色譜：按極性大小分離，主要分離極性小和中等極性的化合物。

聚酰胺色譜：原理：氫鍵吸附

葡聚糖凝膠色譜：原理：分子篩結(jié)合吸附

第三節(jié)提取分離方法二、分離（一）采用各種色譜方法：第三節(jié)提取分離方法50

應(yīng)用：分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元酸性比較：7,4’-OH>7-或4’-OH>一般OH>5-OH溶于NaHCO3Na2CO3

不同濃度的NaOH樣品乙醚乙醚液依次萃取5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH分別酸化各部分黃酮第三節(jié)提取分離方法（二）梯度pH萃取法應(yīng)用：分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元溶于NaHC51（二）分離

2.pH梯度萃取法

適用于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元的分離。（二）分離2.pH梯度萃取法適用于52提取分離方法實(shí)例1.黃芩苷的提取分離方法黃芩粗粉分別加10倍、8倍量沸水煎煮兩次，每次1小時(shí)，過(guò)濾藥渣濾液加鹽酸調(diào)pH1~2,80℃保溫30min靜置，離心沉淀濾液沉淀依次用水、50%EtOH洗滌95%EtOH重結(jié)晶黃芩苷提取分離方法實(shí)例1.黃芩苷的提取分離方法黃芩粗粉分別加10倍532.蘆丁的提取方法提取分離方法實(shí)例槐花米粗粉加6倍量水和適量的硼砂，煮沸邊攪拌邊加入石灰乳至pH8~9，微沸30min趁熱抽濾藥渣濾液在60~70℃條件下，加濃鹽酸調(diào)至pH5，靜置抽濾濾液沉淀（蘆丁粗品）2.蘆丁的提取方法提取分離方法實(shí)例槐花米粗粉加6倍量水和適量54第四節(jié)黃酮類化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定第四節(jié)55檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定56一、色譜法的應(yīng)用硅膠TLC聚酰胺TLC雙向紙色譜法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定一、色譜法的應(yīng)用第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定57第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定

第一向展開：分配作用，醇性溶劑為展開劑。如：n-BuOH-HAc-H2O上層溶液。

Rf：苷元>單糖苷>雙糖苷第二向展開：吸附作用。水性溶劑為展開劑。如：2~6%HAc，3%NaCl等。

Rf：(1)苷元在原點(diǎn)附近，糖鏈越長(zhǎng)，Rf越大；

(2)苷元：黃酮(醇)，查耳酮<二氫黃酮(醇)，二氫查耳酮雙向紙色譜法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定第一向展開：分配作用，醇性溶劑為58一、色譜法（二）TLC主要指吸附薄層，常用硅膠TLC，聚酰胺TLC。硅膠TLC：鑒定弱極性化合物。聚酰胺TLC：分離大多數(shù)黃酮及苷類，適用范圍廣，分離效果好。一、色譜法（二）TLC59二、紫外光譜法

黃酮存在桂皮酰基及苯甲?；M成的交叉共軛系統(tǒng)，在200~400nm間，有兩個(gè)主要的紫外吸收帶A環(huán)苯甲酰系統(tǒng)峰帶II，220~280nmB環(huán)桂皮?；到y(tǒng)峰帶I，300~400nm共性：

B環(huán)OH增加，峰帶I

紅移，特別是4‘-OH，紅移大；

A環(huán)OH增加，峰帶II紅移。（一）二、紫外光譜法黃酮存在桂皮?；氨郊柞；M成的601.黃酮、黃酮醇類帶I

：黃酮類304~350nm

黃酮醇（3-OH被取代）328~357

黃酮醇（3-OH游離）352~385帶II

：240~285nm第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定峰帶I和II強(qiáng)度相似nmIII1.黃酮、黃酮醇類帶I：黃酮類304~350n61黃酮及黃酮醇類化合物的紫外光譜帶（λMeOHmax，nm）槲皮素在甲醇中的紫外光譜黃酮及黃酮醇類化合物槲皮素在甲醇中的紫外光譜62查耳酮和橙酮在甲醇溶液中的UV光譜2，3，4—三羥基查耳酮3`，4`--二羥基橙酮200300400500查耳酮和橙酮在甲醇溶液中的UV光譜2，3，4—三羥基查耳酮363

取代基的影響：

帶I：母核上的－OH、-OCH3等供電基，可引起相應(yīng)吸收帶紅移。氧取代程度越高，帶I紅移越大。羥基甲基化或苷化，將引起紫移。

帶II：峰位主要受A-環(huán)氧取代程度的影響，氧取代程度越高，帶II越向紅移。B環(huán)的取代基只影響峰形。如：只有4'-OR時(shí)，為單峰；3',4'-OR時(shí)，為雙峰。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定取代基的影響：第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定642.查耳酮、橙酮類nmIII

查耳酮

帶I340~390nm(有裂分)帶II220~270nm

橙酮370~430nm(3~4個(gè)峰)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定帶I強(qiáng)，帶II次強(qiáng)峰2.查耳酮、橙酮類nmIII查耳酮65查耳酮---橙酮---異黃酮--二氫黃酮---查耳酮---異黃酮--66異黃酮和二氫黃酮在甲醇溶液中的UV光譜7-羥基異黃酮4`，7-二羥基二氫黃酮200300400500異黃酮和二氫黃酮在甲醇溶液中的UV光譜7-羥基異黃酮4`，767

總結(jié)二氫黃酮黃酮醇黃酮查耳酮橙酮異黃酮200300400(nm)總結(jié)二氫68Thankyou!Thankyou!69第五章黃酮類化合物Flavonoids第五章黃酮類化合物Flavonoids70本章內(nèi)容結(jié)構(gòu)研究實(shí)例檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定提取與分離理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)概述本章內(nèi)容結(jié)構(gòu)研究實(shí)例檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定提取與分離理化性質(zhì)與顯色71第五章黃酮類化合物教學(xué)提綱課件72第一節(jié)概述第一節(jié)概述73概述定義：

黃酮類化合物泛指兩個(gè)苯環(huán)通過(guò)中央三碳鏈連結(jié)而成的一系列化合物。123456781`2`3`4`5`6`C6-C3-C62-苯基色原酮概述定義：123456781`2`3`4`5`6`C6-C374概述黃酮類化合物為一類植物色素，分布廣，數(shù)量大，生物活性溫和而且多樣。天然黃酮類化合物常以苷類形式（包括氧苷與碳苷）存在，糖通常聯(lián)在A環(huán)6，8位。概述黃酮類化合物為一類植物色素，分布廣，數(shù)量大，生75重要的黃酮類化合物槲皮素Quercetin重要的黃酮類化合物槲皮素76重要的黃酮類化合物橙皮苷Hesperidin重要的黃酮類化合物橙皮苷77重要的黃酮類化合物兒茶素catechins表兒茶素Epicatechin重要的黃酮類化合物兒茶素表兒茶素78重要的黃酮類化合物大豆素Daidzein重要的黃酮類化合物大豆素79銀杏黃酮重要的黃酮類化合物銀杏黃酮重要的黃酮類化合物80多以苷的形式存在：O-苷和C-苷（見P73）苷中常見糖的種類：

單糖：D-葡萄糖，D-半乳糖，D-木糖，L-鼠李糖，L-阿拉伯糖，D-葡萄糖醛酸

雙糖：槐糖，龍膽二糖，蕓香糖（Rha1—

6Glc），新橙皮糖（Rha1—2Glc）等

三糖：龍膽三糖，槐三糖

酰化糖：2-乙酰葡萄糖，咖啡?；咸烟?、存在形式多以苷的形式存在：O-苷和C-苷（見P73）1、存在形式812、結(jié)構(gòu)分類（一）結(jié)構(gòu)分類分類的依據(jù)：1、三碳鏈的氧化程度；2、B環(huán)的連接位置；3、三碳鏈?zhǔn)欠癯森h(huán)。2、結(jié)構(gòu)分類（一）結(jié)構(gòu)分類82二、分類黃酮類黃酮醇類二氫黃酮類二氫黃酮醇類二、分類黃酮類83

二、分類異黃酮類二氫異黃酮類查耳酮類

花色素類二、分類異黃酮類84

二、分類黃烷-3-醇類二黃烷-3,4-二醇類二氫查耳酮類橙酮類二、分類黃烷-3-醇類85

二、分類高異黃酮類雙苯吡酮類（酮類）二、分類高異黃酮類86結(jié)構(gòu)分類黃酮類Flavone黃酮醇類二氫黃酮類二氫黃酮醇類異黃酮類高異黃酮查耳酮二氫查耳酮結(jié)構(gòu)分類黃酮類黃酮醇類二氫黃酮類二氫黃酮醇類異黃酮類高異黃酮87結(jié)構(gòu)分類魚藤酮類黃烷-3-醇類紫檀素類黃烷-3，4-二醇類花色素橙酮結(jié)構(gòu)分類魚藤酮類黃烷-3-醇類紫檀素類黃烷-3，4-二醇類883、生物活性

對(duì)心血管系統(tǒng)的作用：降低毛細(xì)血管脆性及異常通透性：蘆丁、橙皮苷擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，治療冠心?。焊鸶亟祲阂种蒲“寰奂把ㄐ纬?、生物活性對(duì)心血管系統(tǒng)的作用：89

抗肝毒作用：水飛薊素、（+）-兒茶素抗炎作用：二氫槲皮素雌激素樣作用：大豆素、染料木素等抗菌、抗病毒作用：木樨草素、黃芩苷、黃芩素槲皮素、山萘素、二氫槲皮素瀉下作用：營(yíng)石苷A

解痙作用：異甘草素、大豆素3、生物活性抗肝毒作用：水飛薊素、（+）-兒茶素3、生物活性90第二節(jié)黃酮類化合物的理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)第二節(jié)911.顏色交叉共軛體系的存在色原酮：無(wú)色黃酮（醇）：灰黃-黃色異黃酮：微黃色二氫黃酮（醇）：無(wú)色一、性狀1.顏色色原酮：無(wú)色黃酮（醇）：灰黃-黃色異黃酮：微黃色二92一、性狀1.顏色：

助色團(tuán)的引入，顏色加深

7,4'引入助色團(tuán)，對(duì)顏色影響較大一、性狀1.顏色：932.物態(tài)：多結(jié)晶性固體，少無(wú)定型粉末3.光學(xué)活性：

苷元：黃酮（醇），無(wú)光學(xué)活性二氫黃酮（醇）、黃烷醇，具光學(xué)活性苷：有光學(xué)活性一、性狀2.物態(tài)：多結(jié)晶性固體，少無(wú)定型粉末一、性狀94注意：花色素的顏色隨pH不同而不同紅（pH<7)~紫（pH=8.5)~藍(lán)（pH>8.5)注意：花色素的顏色隨pH不同而不同95二、溶解性（一）黃酮苷元多難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑（甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚）和稀堿液；1、平面型分子的水溶性小于非平面型分子；2、花色素以離子的形式存在，具有鹽的通性，水溶性反而最大；二、溶解性（一）黃酮苷元96（二）黃酮苷類：可溶于熱水、甲醇、乙醇、稀堿液，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。1、多糖苷>單糖苷；2、3-OH苷>7-OH苷；二、溶解性（二）黃酮苷類：可溶于熱水、甲醇、乙醇、稀堿液，難溶于親脂性97三、酸性與堿性（一）顯著的酸性羥基位置

酸性溶解性7，4＇-二羥基強(qiáng)弱溶于5%NaHCO37或4＇-羥基溶于5%Na2CO3一般酚羥基溶于0.2%NaOH5-羥基溶于4%NaOH三、酸性與堿性（一）顯著的酸性羥基位置酸性溶解性7，98三、酸堿性酸性：來(lái)源分子中的酚羥基；可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺。酸性強(qiáng)弱的比較：取決于羥基的數(shù)目和位置：

7,4′-OH>7-或4′-OH>一般OH>5-OH（可用于提取、分離及鑒定工作）7534'3'三、酸堿性酸性：來(lái)源分子中的酚羥基；（可用于提取、分離及鑒定99四、顯色反應(yīng)（見P75）四、顯色反應(yīng)（見P75）100還原試驗(yàn)1、鹽酸—鎂粉反應(yīng)（最常用）

黃酮（醇）類二氫黃酮（醇）類

陽(yáng)性（紅色）查耳酮兒茶素類異黃酮陰性注意：花色素、部分查耳酮等在濃HCl酸性下變紅，要做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，排除干擾。還原試驗(yàn)1、鹽酸—鎂粉反應(yīng)（最常用）黃酮（醇）類陽(yáng)101還原試驗(yàn)2、四氫硼鈉反應(yīng)：（專屬性）二氫黃酮（醇）

陽(yáng)性（紅色）其它黃酮陰性附：二氫黃酮類化合物可與磷鉬酸試劑反應(yīng)呈棕褐色。還原試驗(yàn)2、四氫硼鈉反應(yīng)：（專屬性）二氫黃酮（醇）陽(yáng)性（102金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)可以發(fā)生金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)的基團(tuán)：常見的金屬鹽類：鋁鹽、鎂鹽、鋯鹽等。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)可以發(fā)生金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)的基團(tuán)：常見的金屬1031、三氯化鋁的顯色反應(yīng)：大多數(shù)黃酮顯黃色并有熒光。例外：4'-OH或7，4'-二OH黃酮醇顯天藍(lán)色熒光。用途：黃酮類化合物的定性定量分析。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)1、三氯化鋁的顯色反應(yīng)：金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)1042、醋酸鉛的顯色反應(yīng)試劑：中性醋酸鉛或堿式醋酸鉛陽(yáng)性結(jié)果：生成黃～紅色沉淀作用部位：金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)2、醋酸鉛的顯色反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)1053、鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)：用途：區(qū)別3-OH和/或5-OH的存在。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)H2O注意：3-羥基黃酮產(chǎn)生的絡(luò)合物穩(wěn)定性大于5-羥基黃酮。3、鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)：金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)H2O注意：3-106鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)區(qū)別3-OH或5-OH的存在樣品/MeOH2%ZrOCl2/MeOH溶液變黃有3-OH和/或5-OH2%枸櫞酸/MeOH仍顯黃色顯著褪色有3-OH無(wú)3-OH，有5-OH鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)區(qū)別3-OH或5-OH的存在樣品/Me1074、醋酸鎂的顯色反應(yīng)二氫黃酮(醇)：天藍(lán)色熒光異黃酮、黃酮(醇)：黃~橙黃~褐色熒光5、氯化鍶（SrCl2）的顯色反應(yīng)具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物:綠~棕色~黑色沉淀金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)4、醋酸鎂的顯色反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)108（三）硼酸的顯色反應(yīng)具有結(jié)構(gòu)的化合物在酸性條件下與硼酸反應(yīng)生成亮黃色。例如：（三）硼酸的顯色反應(yīng)具有結(jié)構(gòu)的化合物在酸性條件下與硼酸反應(yīng)生109（四）堿性試劑顯色反應(yīng)1、二氫黃酮類遇堿變黃~橙色2、黃酮醇遇堿呈黃色，通入空氣變棕色。3、具有鄰二酚羥基或3，4′-二羥基取代時(shí)，在堿液中由黃-深紅-綠棕色沉淀。（四）堿性試劑顯色反應(yīng)1、二氫黃酮類遇堿變黃~橙色2、黃酮醇110第三節(jié)黃酮類化合物的提取與分離第三節(jié)111黃酮類化合物的提取與分離黃酮類化合物的提取與分離112（一）醇提法95%乙醇提取苷元60~70%乙醇提取苷類

注意：1.含雜質(zhì)多，可用石油醚去油脂、蠟、葉綠素等脂溶性雜質(zhì)。2.用炭粉吸附、酚/水洗脫的方法進(jìn)行苷類成分的精制（一）醇提法95%乙醇提取苷元注意：113藥材甲醇或乙醇提取，回收醇浸膏加水溶解水溶液分別以不同極性溶劑萃?。ㄊ兔?，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇）石油醚層（小極性）氯仿層（苷元）乙酸乙酯層（大極性苷元及單糖苷）正丁醇層（黃酮苷）水層（多糖等）第三節(jié)提取分離方法藥材甲醇或乙醇提取，回收醇浸膏加水溶解水溶液分別以不同極性溶114（二）沸水法適用于苷類和水溶性苷元的提取。注意：（1）酶的活性；（2）糊化和變質(zhì)；（3）加等量濃醇使蛋白質(zhì)、多糖等水溶性雜質(zhì)去除。（二）沸水法適用于苷類和水溶性苷元的提取。115原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出。堿：常用Ca(OH)2，或CaO水溶液。優(yōu)點(diǎn)：可使含酚羥基化合物成鹽溶解，另一方面可使含COOH的果膠、粘液質(zhì)、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)形成沉淀而除去。注意：堿性不宜過(guò)強(qiáng)，以免破壞黃酮母核；酸化時(shí)，酸性不宜過(guò)強(qiáng)，pH3~4即可，以免形成鹽而溶解。（三）堿提取酸沉淀法原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出。（三）堿提取酸沉淀116第三節(jié)提取分離方法堿提酸沉法攪拌下加入石灰乳加水300ml槐花米（15g）調(diào)節(jié)PH8-9直火加熱保持微沸30min雙層濾紙趁熱抽濾濾液殘?jiān)?0-70度下，用濃鹽酸調(diào)PH3-4靜置實(shí)例操作第三節(jié)提取分離方法堿提酸沉法攪拌下加入石灰乳加水300m117第三節(jié)提取分離方法4.炭粉吸附法藥材甲醇提取物分次加入活性炭，攪拌，靜置，檢查上清液有無(wú)黃酮反應(yīng)，過(guò)濾濾液吸附后活性炭粉依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、15%酚/醇洗脫沸水沸甲醇7%酚/水15%酚/醇濃縮，加乙醚乙醚層（酚）水層（黃酮苷）第三節(jié)提取分離方法4.炭粉吸附法藥材甲醇提取物分次加入活118二、分離

（一）采用各種色譜方法：硅膠色譜：按極性大小分離，主要分離極性小和中等極性的化合物。

聚酰胺色譜：原理：氫鍵吸附

葡聚糖凝膠色譜：原理：分子篩結(jié)合吸附

第三節(jié)提取分離方法二、分離（一）采用各種色譜方法：第三節(jié)提取分離方法119

應(yīng)用：分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元酸性比較：7,4’-OH>7-或4’-OH>一般OH>5-OH溶于NaHCO3Na2CO3

不同濃度的NaOH樣品乙醚乙醚液依次萃取5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH分別酸化各部分黃酮第三節(jié)提取分離方法（二）梯度pH萃取法應(yīng)用：分離酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元溶于NaHC120（二）分離

2.pH梯度萃取法

適用于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元的分離。（二）分離2.pH梯度萃取法適用于121提取分離方法實(shí)例1.黃芩苷的提取分離方法黃芩粗粉分別加10倍、8倍量沸水煎煮兩次，每次1小時(shí)，過(guò)濾藥渣濾液加鹽酸調(diào)pH1~2,80℃保溫30min靜置，離心沉淀濾液沉淀依次用水、50%EtOH洗滌95%EtOH重結(jié)晶黃芩苷提取分離方法實(shí)例1.黃芩苷的提取分離方法黃芩粗粉分別加10倍1222.蘆丁的提取方法提取分離方法實(shí)例槐花米粗粉加6倍量水和適量的硼砂，煮沸邊攪拌邊加入石灰乳至pH8~9，微沸30min趁熱抽濾藥渣濾液在60~70℃條件下，加濃鹽酸調(diào)至pH5，靜置抽濾濾液沉淀（蘆丁粗品）2.蘆丁的提取方法提取分離方法實(shí)例槐花米粗粉加6倍量水和適量123第四節(jié)黃酮類化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定第四節(jié)124檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定125一、色譜法的應(yīng)用硅膠TLC聚酰胺TLC雙向紙色譜法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定一、色譜法的應(yīng)用第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定126第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定

第一向展開：分配作用，醇性溶劑為展開劑。如：n-BuOH-HAc-H2O上層溶液。

Rf：苷元>單糖苷>雙糖苷第二向展開：吸附作用。水性溶劑為展開劑。如：2~6