PCR資格證考試試題

PCR資格證考試試題一、選擇題（共20題，每題2分）1、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是（A）①目的基因②引物③四種脫氧核甘酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖體A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、鎂離子在DNA或RNA體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為（D）A、0.3-lmmol/LB>0.5-lmmol/LC^0.3-2mmol/LD>0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物對(duì)為（D）A、一對(duì)引物B、半對(duì)引物C、兩對(duì)引物D、多對(duì)引物4、PCR是在引物、模板和4種脫氧核糖核甘酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)，其特異性決定因素為（B）A、模板B、引物C、dNTPD、鎂離子5、在PCR反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增的擴(kuò)增（C）A、TaqDNA聚合酶加量過(guò)多B、引物加量過(guò)多C、A、B都可D、緩沖液中鎂離子含量過(guò)高6、PCR技術(shù)的發(fā)明人是（A）A、MullisB、史蒂文.沙夫C、蘭德?tīng)?才木7、PCR產(chǎn)物短期存放可在（A）保存。A、4℃B、常溫C.-80℃D、高溫8、PCR產(chǎn)物長(zhǎng)期儲(chǔ)存最好置于（D）。A、4℃B、常溫C、16℃D.-20℃9、PCR的基本反應(yīng)過(guò)程包括（A）A、變性、退火、延伸B、變性、延伸C、變性、退火10、在實(shí)際工作中，基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室污染類型包括（D）A、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染B、天然基因組DNA的污染C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明（A）A、1983B>1971C、1987D>199312、TaqDNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（C）A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪種物質(zhì)在PCR反應(yīng)中不需要（D）A、TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、鎂離子D、RNA酶14、PCR檢測(cè)中，經(jīng)過(guò)n個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，拷貝數(shù)將增加（C）A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是（A）A、溫度控制系統(tǒng)B、熒光檢測(cè)系統(tǒng)C、軟件系統(tǒng)D、熱蓋16、以下哪項(xiàng)不是臨床PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則（A）A、各區(qū)合并B、注意風(fēng)向C、因地制宜D、方便工作17、PCR實(shí)驗(yàn)室一般包括（D）A、試劑準(zhǔn)備區(qū)B、標(biāo)本制備區(qū)C、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)D、A、B、C都含18、PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來(lái)了便利，而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的（D）。A、白細(xì)胞DNAB、病毒蛋白質(zhì)C、血漿抗體D、病毒核酸19、如果反應(yīng)體系中加入模板DNA分子100個(gè)，則經(jīng)過(guò)30個(gè)循環(huán)后,DNA分子的數(shù)量將達(dá)到（D）個(gè)。A、100x30B>100x30x2C>100x302D>100x23020、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有(D)A、凝膠電泳分析法B、點(diǎn)雜交法C、熒光探針定量PCR法D、A、B、C都是二、判斷題(共20題，每題2分)1、PCR引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間間取得平衡。(V)2、在PCR反應(yīng)中，dATP在DNA擴(kuò)增中可以提供能量，同時(shí)作為DNA合成的原料。(V)3、DNA擴(kuò)增過(guò)程未加解旋酶，可以通過(guò)先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵,使模板DNA解旋。(V)4、PCR反應(yīng)中，復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成。(V)5、PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。(V)6、PCR技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等。(V)7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。(x)8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。(V)9、核酸的復(fù)制是由5'——>3'方向進(jìn)行的。（V）10、配對(duì)的堿基總是A與T和G與C。（V）11、HBsAg轉(zhuǎn)陰性后一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的HBsAb,此段間隔期稱之為"窗口期"。（V）12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q基團(tuán)和報(bào)告基團(tuán)R基團(tuán)來(lái)標(biāo)記熒光定量PCR的探針。（V）13、PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用是促進(jìn)TaqDNA聚合酶活性。（V）14、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑（如甲醛），PH、離子強(qiáng)度、Mg2+等有較大改變都會(huì)影響Taq酶活性。（V）15、每個(gè)子代DNA分子中均保留一條親代DNA鏈和一條新合成的DNA鏈，這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。（V）16、發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì)PCR結(jié)果沒(méi)影響。（x）17、"平臺(tái)效應(yīng)”是描述PCR后期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和。（V）18逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reversetranscription-PCR,RT-PCR）就是在應(yīng)用PCR方法檢測(cè)RNA病毒時(shí)，以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成CDNA鏈，然后以cDNA為模板進(jìn)行正常的PCR循環(huán)擴(kuò)增。(V)19、在定量PCR中，72℃這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響，故去除,實(shí)際上55℃仍可充分延伸，完成擴(kuò)增復(fù)制。（V）20、PCR可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測(cè)三大方面（V）三、簡(jiǎn)答（共兩題，每題10分）1、PCR技術(shù)答：PCR技術(shù)是用一對(duì)寡聚核甘酸作為引物（要點(diǎn)1：2分），通過(guò)高溫變性、低溫退火、中溫延伸（要點(diǎn)2：5分）這一周期的多次循環(huán)，使特異