氨茶堿的血藥濃度測(cè)定及藥動(dòng)學(xué)

實(shí)驗(yàn)7.7

氨茶堿的血藥濃度測(cè)定及藥動(dòng)學(xué)研究【目的】學(xué)習(xí)氨茶堿血藥濃度的紫外測(cè)定方法，驗(yàn)證其藥動(dòng)學(xué)模型?！驹怼?.氨茶堿為臨床常用平喘藥，由茶堿與乙二胺縮合而成。在酸性條件下,可用有機(jī)溶劑從血清中提取出茶堿,再用堿液將茶堿從有機(jī)溶劑中提出。測(cè)量λ274和λ298處的吸光度（A274為茶堿和本底，即溶劑、血清的吸光度，A298為本底的吸光度），ΔA=A274-A298。茶堿吸收度曲線茶堿本底274298Aλ2.氨茶堿經(jīng)靜脈進(jìn)入血液，隨血液循環(huán)進(jìn)行組織分布，達(dá)到平衡后轉(zhuǎn)入消除相。時(shí)量曲線呈二房室動(dòng)力學(xué)模型。3.房室模型是抽象的數(shù)學(xué)模型，它的劃分與解剖學(xué)部位或生理學(xué)功能無關(guān)。藥物轉(zhuǎn)運(yùn)速率相同或相近的部位可劃分為同一房室。房室模型可以分為一室模型、二室模型、多室模型。大多數(shù)藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)和分布符合二室模型。即藥物靜脈注射入血后，首先快速進(jìn)入血流量大的組織，如心、肝、腎、肺、腦等，然后緩慢地向血流量小的組織，如脂肪組織、靜止的肌肉組織等轉(zhuǎn)移?！酒鞑呐c藥品】

754型紫外分光光度計(jì)，液體渦旋混和器，數(shù)學(xué)坐標(biāo)紙、半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙各一張。氨茶堿標(biāo)準(zhǔn)液，0.1mol/LHCl,0.1mol/LNaOH,異丙醇：氯仿抽提液（5:95）。【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】家兔【實(shí)驗(yàn)步驟】1．取體重2.5-3kg健康家兔1只，一耳緣靜脈注射氨茶堿15mg/kg，另一耳用銳利刀片切割取血。分別在給氨茶堿后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。2．分離血清，各管均取血清0.5ml于15ml試管中，加0.1mol/L鹽酸0.2ml、抽提液5ml，振搖混合，2500r/min離心10min。3．吸取下層氯仿液4ml置另一試管中，加入0.1mol/LNaOH溶液4ml，振搖混勻，2500r/min離心10min。4．吸取上層堿液，以0.1mol/LNaOH溶液作參比，測(cè)定其在λ274和λ298處的吸收度（A274和A298），計(jì)算△A。5.制作茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線：取5支試管，依次加入茶堿標(biāo)準(zhǔn)液20、40、60、80、100μl，各加入0.1mol/LNaOH溶液4ml，終濃度依次為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/ml，測(cè)定各管的A274和A298，計(jì)算△A。以茶堿濃度為橫坐標(biāo)，△A為縱坐標(biāo)描點(diǎn)繪圖，用Excel軟件求直線回歸方程，即為茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線方程（圖示）。①將茶堿濃度和吸光度的數(shù)據(jù)錄入Excel的工作表中。茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作②選取Excel表上任一格，點(diǎn)擊菜單“插入/圖表”，出現(xiàn)“圖表指南”，選取“XY散點(diǎn)圖”，進(jìn)行下一步。茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作③“數(shù)據(jù)區(qū)域”選取茶堿濃度和吸光度相關(guān)數(shù)據(jù)，“系列產(chǎn)生在－列”，直至完成。茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作④選取所得得圖形，，用右鍵鍵點(diǎn)擊5個(gè)散點(diǎn)中中任一點(diǎn)點(diǎn)，出現(xiàn)對(duì)話話框，點(diǎn)點(diǎn)選“添添加趨勢(shì)勢(shì)線”選選項(xiàng)。茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作⑤在“添加加趨勢(shì)線線”對(duì)話話框的““選項(xiàng)””一欄，，選中““顯示公公式”和“顯示示R平方值””，然后后“確定定”。茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作⑥標(biāo)準(zhǔn)曲線線的直線線方程和和R2值自動(dòng)出出現(xiàn)。R（相關(guān)系系數(shù)）表表示曲線線方程對(duì)對(duì)原始數(shù)數(shù)據(jù)擬合合的程度度。6.將測(cè)得血血清樣品品的△A代入標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)曲線的的方程，，求得相相應(yīng)的C，C×10即為茶堿堿的血藥藥濃度。。以時(shí)間間為橫坐坐標(biāo)，濃濃度對(duì)數(shù)數(shù)為縱坐坐標(biāo)，用用CAPP軟件描點(diǎn)點(diǎn)做圖，，判斷氨氨茶堿在在體內(nèi)代代謝的房房室模型型。時(shí)間（min）ΔAC（510203060120180300①將取血時(shí)時(shí)間和茶茶堿血藥藥濃度輸輸入CAPP軟件。②添加消除除相的數(shù)數(shù)據(jù)點(diǎn)，，點(diǎn)擊““更新曲曲線”。。③添加分布布相的數(shù)數(shù)據(jù)點(diǎn)，，點(diǎn)擊““更新曲曲線”。。④氨茶堿體體內(nèi)代謝謝的時(shí)量量曲線即即繪制完完成，曲曲線方程程和相關(guān)關(guān)的藥動(dòng)動(dòng)學(xué)參數(shù)數(shù)值亦同同時(shí)列出出?！咀⒁馐马?xiàng)項(xiàng)】1.紫外分光光光度計(jì)計(jì)使用前前需預(yù)熱熱30min并激發(fā)氫氫燈。2.振搖混勻勻藥液時(shí)時(shí)防止濺濺出并準(zhǔn)準(zhǔn)確加樣樣。3.樣品離心心前需配配平。4.測(cè)量時(shí)若若更換波波長(zhǎng)，必必須重新新調(diào)節(jié)0和100％?！居懻撜摗?.氨茶堿的的時(shí)量曲曲線呈幾幾房室模模型？為為什么？？2.為何要測(cè)測(cè)兩個(gè)波波長(zhǎng)下茶茶堿的吸吸光度并并取其