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文檔簡介

實驗六

IMViC與硫化氫試驗實驗目的：學習掌握IMViC與硫化氫試驗原理了解IMViC與硫化氫試驗反應的原理及其在腸道菌鑒定中的意義與方法IMViC是吲哚（indol）、甲基紅（methylredtest）、伏-普（Voges-Prokauertest）和檸檬酸鹽（citratetest）四個實驗的縮寫，主要用于快速鑒別大腸桿菌和產氣腸桿菌，多用于水細菌學檢查。硫化氫試驗也是檢查腸道桿菌的生化試驗。大腸桿菌雖非致病菌，但在飲用水中超過一定數量，則表示受糞便污染，產氣腸桿菌也廣泛存在于自然界中，因此檢查水時要將兩者分開。實驗原理：色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚

吲哚試劑大腸桿菌＋產氣桿菌－葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇甲基紅-葡萄糖→丙酮酸甲基紅+大腸桿菌＋產氣桿菌－b.MethylRed(MR)Test甲基紅試驗甲基紅試驗是用于檢測由葡萄糖產生有機酸如甲酸、乙酸、乳酸等，當細菌分解糖產酸，培養(yǎng)基中的甲基紅指示劑由橘黃（pH6.3）變?yōu)榧t色（pH4.2），即甲基紅反應。c.Voges-Proskauer(V－P)Test

伏－普試驗是用以檢測某些細菌利用葡萄糖產生非酸性或中性末端產物的能力，例如丙酮酸，丙酮酸縮合、脫羧生成乙酰甲基甲醇，在堿性條件下能被空氣中的氧氣氧化生成二乙酰，后者與蛋白胨中的胍基作用生成紅色化合物。葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙?！t色化合物+胍基化合物葡萄糖→丙酮酸

大腸桿菌－產氣桿菌＋IMViC試驗VPtestCitrateutilizationtestIndoltestMethyltest

I

M

Vi

C大腸桿菌++——產氣腸桿菌——++常用于腸道桿菌的鑒定

操作步驟（1）接種與培養(yǎng)用接種針將大腸桿菌、普通變形桿菌分別穿刺接種于2支醋酸鉛培養(yǎng)基中，置于37℃培養(yǎng)48h。（硫化氫試驗）用接種環(huán)將大腸桿菌、產氣腸桿菌分別接種于2支蛋白胨水培養(yǎng)基（吲哚試驗），2支葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基（甲基紅試驗），2支葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基（伏－普試驗），37℃培養(yǎng)48h。思考題1．討論IMViC試驗在醫(yī)學檢驗上的意義。2．解釋在細菌培養(yǎng)中吲哚檢測的化學原理，為什么在這個試驗中用吲哚的存在作為色氨酸酶活性的指示劑，而不用丙酮酸？3．為什么大腸桿菌是甲基紅反應陽性，而產氣腸桿菌為陰性？這個試驗

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