微生物大腸桿菌實(shí)驗(yàn)課件

實(shí)驗(yàn)七、八食品微生物檢查總綱實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵髮?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)儀器和試劑實(shí)驗(yàn)步驟附：附1.

MPN檢索表.doc實(shí)驗(yàn)七、食品菌落總數(shù)的檢驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)原理菌落總數(shù)是指食品經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1g或1ml檢樣中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判別食品被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。菌落總數(shù)并不表示樣品中實(shí)際存在的所有細(xì)菌總數(shù)，菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類，所以有時(shí)被稱為雜菌數(shù)，需氧菌數(shù)等。三、儀器和試劑

儀器:微量移液器、錐形瓶、量筒、天平、剪刀、玻璃珠、鑰匙、研磨缽、平皿、材料:17棟涼皮1份試劑:無(wú)菌水,營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基四.實(shí)驗(yàn)步驟

(一).菌落總數(shù)的測(cè)定:1.基本操作過(guò)程：

樣品稱量→→樣品稀釋→→倒平板→→培養(yǎng)48小時(shí)→→計(jì)數(shù)報(bào)告。

2.樣品的稀釋:稱樣品25g→225ml無(wú)菌水(帶玻璃珠)→振蕩5-10分鐘,即為1:10的樣品稀釋液3.10倍稀釋:10-1取1ml→放到9ml無(wú)菌水稀釋管中,即為10-2的稀釋液,10-2取1ml→放到9ml無(wú)菌水稀釋管中,即為10-3的稀釋液4.稀釋倒平板:取10-3、10-2、10-1三個(gè)稀釋液各1ml,分別接入相應(yīng)標(biāo)號(hào)的平皿,每個(gè)稀釋度接兩個(gè)平皿,然后,每個(gè)平皿分別倒入約15ml已融化并冷至50度左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,輕輕搖勻,凝固后即成菌落總數(shù)測(cè)定的平板用,另外用1ml無(wú)菌水作空白對(duì)照試驗(yàn)，做1個(gè)平皿。5.培養(yǎng):

在36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)倒置培養(yǎng)48h后取出

,立即計(jì)算每個(gè)平皿內(nèi)菌落數(shù)目，計(jì)算每個(gè)梯度平行皿的平均值。實(shí)驗(yàn)八大腸菌群總數(shù)的測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?/p>

1、了解大腸菌群的測(cè)定的方法和意義。

2、了解食品質(zhì)量與大腸菌群數(shù)量的重要關(guān)系。

3、通過(guò)實(shí)驗(yàn),初步掌握食品污染的活細(xì)菌計(jì)數(shù)方法,以判別食品的衛(wèi)生質(zhì)量。

三、儀器和試劑:儀器:微量移液器、錐形瓶、量筒、天平、玻璃珠、鑰匙、平皿、材料:17棟涼皮試劑:無(wú)菌水,乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂平板、革蘭氏染色液

（1）將待檢樣品（10-1取10ml雙料、10-1取1ml單料、10-2取1ml單料）接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，每一稀釋度接種3管，置36±1度溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2小時(shí)。（2）如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣不產(chǎn)酸，則可報(bào)告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣產(chǎn)酸者，則按下列程序進(jìn)行，將產(chǎn)氣產(chǎn)酸的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，置36±1度溫箱內(nèi),培養(yǎng)18-24小時(shí)，然后取出。（3）在上述平板上，挑取可疑的大腸菌群（深紫色）1-2個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色，觀察若革蘭氏染色為陰性的無(wú)芽孢桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性，根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的管數(shù)，查MPN檢索表，報(bào)告每100g大腸菌群的MPN值。附1.依據(jù)國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)GB2714-