微生物各論第十一章等used

第十一章支原體/霉形體

(Mycoplasma)夏春中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)學(xué)2012.04.27AM10:10p2281霉形體（Mycoplasma）

霉形體又譯作支原體，是一類無細(xì)胞壁的細(xì)菌，是目前已知能在無生命的培養(yǎng)基中繁殖的最小微生物。2概述

霉形體又稱支原體(望梅止渴)；是一類無細(xì)胞壁的原核單細(xì)胞微生物；多形性，能通過細(xì)菌濾器，是目前所知的能夠在無生命人工培養(yǎng)基中生長繁殖的最小微生物?；蚪M?。?.58-1.35Mb），含有DNA和RNA，二分裂或芽生方式繁殖；GC含量低（E.coli1/5）。3一、主要特征⑴缺乏細(xì)胞壁；三層結(jié)構(gòu)C膜，C外胞漿膜。⑵在固體培養(yǎng)基上形成“煎荷包蛋”狀菌落；⑶能通過200-450nm的細(xì)菌濾器；⑷基因組富含A、T；⑸在任何條件下不能回復(fù)為具有細(xì)胞壁的細(xì)菌.

（與L型細(xì)菌/Amp有本質(zhì)上的區(qū)別

）4無細(xì)胞壁，故具有多形性和濾過性。常呈球狀、兩極狀、環(huán)狀、桿狀和絲狀，球狀細(xì)胞直徑在300nm以內(nèi)。革蘭氏染色呈陰性。姬姆薩染色呈淡紫色。C膜1,形態(tài)染色52,培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高

培養(yǎng)基中除基礎(chǔ)營養(yǎng)外，需牛心浸液，酵母膏，輔酶I、氨基酸等，有的需要加10％-20％的動物血清。為抑制細(xì)菌生長，常加入青霉素、醋酸鉈、疊氮鈉等藥物。培養(yǎng)時間較長

在瓊脂培養(yǎng)基(1-1.5%)上孵育2-6d，才長出低倍顯微鏡下可見的

微小菌落（10-600m）。培養(yǎng)條件有氧生長良好，但用固體培養(yǎng)基基分離培養(yǎng)時，在5％CO2和95％N2的環(huán)境中，生長為佳。適宜溫度為36℃。菌落特征典型菌落呈“煎荷包蛋狀”?？稍陔u胚卵黃囊或絨毛尿囊膜上生長，也能在細(xì)胞培養(yǎng)中生長。6生長緩慢，菌落呈“荷包蛋狀”（豬肺炎霉形體除外），菌落中心深入培養(yǎng)基中，致密、色暗；周圍長在培養(yǎng)基表面，較透明。73,生理生化特性

根據(jù)對糖類分解能力，分為兩群。一群能分解多種糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，稱發(fā)酵型。另一群不能分解糖，稱為非發(fā)酵型，但能利用精氨酸作為碳素和能量來源。某些菌株在含血液的培養(yǎng)基中其菌落周圍可形成β型或α型溶血。禽敗血支原體、肺炎支原體的菌落能吸附禽類紅細(xì)胞?！案郊t細(xì)胞體”84，抗原與分型主要抗原：膜蛋白、類脂

交叉很少、簽定

ELISAPCR95、生態(tài)自生熱原體是嚴(yán)格自生共生專性厭氧的厭氧原體棲息于牛羊瘤胃內(nèi)寄生

支原體廣泛寄生于人體、動物和植物。多種支原體能侵染人類和畜禽的消化道、呼吸道、泌尿生殖道和關(guān)節(jié)等部位，引起各種炎癥和流產(chǎn)、不育等。支原體的粘附能力相當(dāng)強，營粘附式“外寄生”，很少侵染到血液和組織內(nèi)。106,抵抗力支原體對理化因素敏感。對熱敏感。對醋酸鉈、結(jié)晶紫等有較強的抵抗力。

對青霉素、先鋒霉素有抵抗作用；對影響蛋白質(zhì)合成的抗生素敏感:如泰樂菌素、強力霉素、紅霉素、支原凈等。117,微生物學(xué)診斷分離培養(yǎng) 將無污染病料用液體培養(yǎng)基稀釋，稀釋至10-5-10-6，37℃培養(yǎng)2-7d。初代培養(yǎng)未發(fā)生顏色變化時可盲目傳代2-3次。初代分離時在含有5％-10％CO2的環(huán)境中生長更佳。

固體培養(yǎng)基接種后須置高濕環(huán)境培養(yǎng)。生理生化性狀測定 毛地黃苷敏感性測定、葡萄糖、精氨酸分解試驗。直接鏡檢意義不大12血清學(xué)鑒定

生長抑制試驗(GIT)

支原體在固體培養(yǎng)基上生長可被相應(yīng)的抗血清所抑制，常用圓紙片法。表面免疫熒光法(ep-IF)

用已知抗血清制成熒光抗體，直接染色瓊脂塊上的支原體菌落，在熒光顯微鏡下觀察菌落的特異性熒光。代謝抑制試驗(MIT)

支原體的代謝活性可被相應(yīng)的抗血清抑制。常用的有精氨酸、脲酶代謝抑制試驗以及發(fā)酵抑制試驗。13一、禽類支原體根據(jù)病原性差異，可將禽支原體分為三組：明顯具有病原性

雞毒支原體

M.gallisepticum;

慢性呼吸道疾病（CRD),難以根除新城疫（ND）,E.coli

繼發(fā)具有N毒素。p237

滑液支原體M.synoviae;

火雞支原體M.meleagridis。

在某些情況下具有致病性的支原體雞支原體、鴨支原體、萊氏無膽甾原體、尿原體

和鵝支原體；14二、豬支原體豬肺炎支原體

（M.hyopneumoniae）豬地方流行性肺炎.“豬喘氣病”豬鼻支原體

小豬呼吸道，特別是鼻腔的正常寄居菌，某些條件下能從肺組織中發(fā)現(xiàn)，主要是起繼發(fā)性病原菌作用。豬滑液支原體

引起關(guān)節(jié)炎其他動物支原體，如牛、羊、馬、實驗動物等15二、豬支原體豬肺炎支原體

（M.hyopneumoniae）豬地方流行性肺炎.“豬喘氣病”豬鼻支原體

小豬呼吸道，特別是鼻腔的正常寄居菌，某些條件下能從肺組織中發(fā)現(xiàn)，主要是起繼發(fā)性病原菌作用。豬滑液支原體

引起關(guān)節(jié)炎其他動物支原體，如牛、羊、馬、實驗動物等16豬肺炎支原體

（M.hyopneumoniae）豬地方流行性肺炎.“豬喘氣病”17三、嗜血支原體

附紅細(xì)胞體（Eperythrozoon）嗜血巴通體（Haemobartonella）

16SrRNA與肺炎支原體密切；新定為嗜血支原體。附紅細(xì)胞表面、昆蟲媒介、多無臨床癥狀。豬、犬、附紅細(xì)胞體，貓血巴通體更名為豬支原體、犬血支原體、貓血支原體。p24018

附紅細(xì)胞體（Eperythrozoon）嗜血巴通體（Haemobartonella）

自身性免疫病、貧血Romanovsky-type藍紫色吖啶橙19附紅細(xì)胞體（Eperythrozoon）嗜血巴通體（Haemobartonella）PCR法

20第十二章立克次體與衣原體p243立克次體和衣原體都是專性細(xì)胞內(nèi)寄生的原核微生物，結(jié)構(gòu)及繁殖方式與細(xì)菌類似，生長要求類似病毒。介于細(xì)菌與病毒之間的微生物。21

立克次體首先由美國醫(yī)師HowardTaylorRicketts發(fā)現(xiàn)，為紀(jì)念他在研究斑疹傷寒時不幸感染而獻身，故以他的名字命名。22第一節(jié)立克次體（Rickettsia）

立克次體是一類嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生、介于細(xì)菌和病毒之間的原核細(xì)胞型微生物。主要寄生于節(jié)肢動物，以其為傳播媒介。許多成員對動物和人有致病性傳染.

如Q熱、斑疹傷寒、恙蟲病等。23共性

1.多數(shù)為專性細(xì)胞內(nèi)寄生、以二分裂方式繁殖；

2.含有RNA和DNA3.多形，G-,大小介于細(xì)菌和病毒之間；

4.節(jié)肢動物作為寄生宿主，或儲存宿主，或同時為傳播媒介。

5.多種抗生素敏感等。24一、生物學(xué)特性

1.多形性，主要是球桿狀。2.大小介于細(xì)菌和病毒之間，多數(shù)不能通過細(xì)菌濾器。3.革蘭氏陰性，有細(xì)胞壁4.專性細(xì)胞內(nèi)寄生5.以二分裂方式繁殖6.對理化因素抵抗力不強，尤對熱敏感7.主要寄生于節(jié)肢動物中，通過叮咬感染人和動物25電鏡26二、培養(yǎng)特性

大多數(shù)只能在活的宿主細(xì)胞內(nèi)生長

（嚴(yán)格的真核細(xì)胞內(nèi)寄生）。

立克次體酶系統(tǒng)不夠完整，必須依賴于宿主細(xì)胞提供

ATP、輔酶I、輔酶A、NAD等才能生長繁殖。

（書：羅沙利馬體和巴通體可以在培育基中生長）

常用的培養(yǎng)方法有動物接種：豚鼠、大鼠、小鼠

雞胚（卵黃囊）接種：傳代

細(xì)胞培養(yǎng)

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三、抗原結(jié)構(gòu)

立克次體有兩種主要抗原：

群特異性抗原和型特異性抗原

1.群特異性抗原—脂多糖：為可溶性抗原，耐熱，與細(xì)胞壁表面的粘液層有關(guān)；

2.型特異性抗原—外膜蛋白：為顆粒性抗原（外膜），不耐熱，與細(xì)胞壁成分有關(guān)。28動物的淋巴細(xì)胞，紅色的是寄生的立克次氏體四、診斷防治

菌血癥、血管內(nèi)皮細(xì)胞壞死。1、特異性預(yù)防接種滅活疫苗2、滅虱、蚤、螨、鼠和注意個人衛(wèi)生3、治療用廣譜抗生素4、磺胺類藥物能刺激立克次體生長29五、微生物學(xué)診斷

一）病原檢查

1.將病料制成血片或組織抹片，染色鏡檢或熒光抗體法檢查；

2.病料培養(yǎng)后，利用熒光抗體技術(shù)、血清中和實驗或補體結(jié)合實驗等。二）抗體檢查

1.特異性試驗可應(yīng)用可溶性抗原和/或顆粒性抗原進行補體結(jié)合試驗和/或凝集試驗。

2.非特異性試驗：魏-斐二氏反應(yīng)（Weil-Felixreaction)30第二節(jié)衣原體（Chlamydia）

一類能通過細(xì)菌濾器、嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，并經(jīng)獨特發(fā)育周期的原核細(xì)胞型微生物。

P25231一、主要特性1.革蘭氏陰性，圓形或橢圓形；2.含DNA和RNA以及核糖體；3.具有由黏肽組成的細(xì)胞壁，其結(jié)構(gòu)和組成類似于

G-，但細(xì)胞壁酸缺少或只含微量；4.有較復(fù)雜的、能進行一定代謝活動的酶系統(tǒng)，但

不能合成帶高能鍵的化合物，須利用宿主細(xì)胞的三磷酸鹽和中間代謝產(chǎn)物作為能量來源，必須在活細(xì)胞內(nèi)生存；5.具有獨特的發(fā)育周期，并以二等分裂方式繁殖，形成包涵體。6.對許多抗生素、磺胺藥敏感，能抑制生長。32二、生物學(xué)特征（一）形態(tài)結(jié)構(gòu)與發(fā)育周期

在光學(xué)顯微鏡下可見到兩種不同的顆粒衣原體：

1.較小的稱元體（EB）/原體：直徑約為0.3μm，卵圓形，電子密度大，是有感染性的形態(tài)。有致密的類核結(jié)構(gòu)，有胞壁，發(fā)育成熟。

Giemsa-紫色，Macchiavello-紅色，無繁殖能力，胞外穩(wěn)定性強。（馬基維洛）

2.較大的稱為網(wǎng)狀體(RB)

：直徑約0.5-0.3μm，呈圓形或不規(guī)則形，電子密度較小，是無感染性形態(tài)，也稱為始體。體大電子致密度較低，無胞壁。Macchiavello-藍色。代謝活潑，以二分裂方式繁殖。胞外穩(wěn)定性弱。333.包涵體：

指在易感細(xì)胞內(nèi)含增殖的網(wǎng)狀體和子代元體的空泡。由于發(fā)育時期不同，包涵體的形態(tài)和大小都有差別。成熟的包涵體含有大量的元體。

含有繁殖型始體和子代原體的膜包裹吞噬體或胞漿吞噬泡稱為衣原體包涵體。34

姬姆薩染色油鏡10×100見到一個大單核細(xì)胞，胞漿內(nèi)有球形和橢圓形的包涵體——衣原體衣原體包涵體Giemsa染色衣原體包涵體熒光顯示包涵體含糖原，被碘液染為棕褐色35（二）培養(yǎng)特性

對衣原體的培養(yǎng)目前仍只能用雞胚（鴨胚）或細(xì)胞培養(yǎng)及動物接種3種方法。（三）抵抗力

1.衣原體對熱、脂溶劑和去污劑以及常用的消毒藥

液均十分敏感。

2.對煤酚類化合物及石炭酸等一般較能抵抗。

3.

對利福平、四環(huán)素、紅霉素、磺胺敏感;

對青霉素不敏感

治療選用利福平、強力霉素等36

其中較重要的衣原體有：

1.沙眼衣原體

2.鸚鵡熱親衣原體;“鳥疫”

3.牛羊親衣原體

4.肺炎親衣原體三、分類人肺炎37四、所至疾病流產(chǎn)綜合癥衣原體肺炎反芻動物衣原體腸道感染衣原體性