食用菌栽培技術(shù)第三章菌種的生產(chǎn)與保藏

第三章菌種的生產(chǎn)與保藏菌種，好比農(nóng)作物的種子，是食用菌生產(chǎn)的根本，其優(yōu)劣直接影響食用菌的產(chǎn)量和質(zhì)量。因此，從事食用菌菌種工作的單位都必須認真做好菌種的培育和保藏工作。一、菌種培育技術(shù)

人工培育的菌種有母種、原種和栽培種之分。1）母種（一級菌種）：用孢子分離或組織分離等培育的菌絲體稱為母種。2）原種（二級菌種）：把母種擴大到木屑、棉籽殼等為主的培養(yǎng)料上的菌種稱為原種。3）栽培種（三級菌種）：由原種擴大培養(yǎng)成為生產(chǎn)上使用的菌種稱為栽培種。4）菌種：實質(zhì)上就是經(jīng)過人工培養(yǎng)并進一步繁殖的食用菌的純菌絲體。食用菌的制種程序組織分離接種→母種（一級）

接種→→原種（二級）

接種→→栽培種（三級）種菇孢子分離經(jīng)過這樣三級培養(yǎng)，食用菌菌絲數(shù)量大大增加。一般1支試管菌種可繁殖4~6瓶原種，每瓶原種又可擴大繁殖60~100瓶栽培種。培養(yǎng)培養(yǎng)母種原種、栽培種栽培種食用菌的制種程序菌種生產(chǎn)必須在嚴格的無菌條件下進行。為了保證制種的成功，除必須掌握制種技術(shù)外，還需要一些基本的設(shè)備和用品。1、接種設(shè)備⑴接種室要求:

①關(guān)閉嚴密，便于熏蒸、消毒；②空間不宜過大，一般長、寬、高均為2m即可;③接種室外面最好有一個緩沖室；④墻壁、天花板和地面都要平整、光潔；⑤內(nèi)裝有紫外燈和日光燈。(一)菌種生產(chǎn)常用的設(shè)備和用具1、接種設(shè)備⑵接種箱

當菌種生產(chǎn)量不大時，可在接種箱內(nèi)進行。它是用木條作成框架，以3mm厚的玻璃作箱壁。要求：①關(guān)閉嚴密，便于熏蒸；②裝有日光燈和紫外燈。優(yōu)點：搬動方便，操作人員不會受有毒氣體危害。缺點：容量小。

1、接接種種設(shè)設(shè)備備⑶超超凈凈工工作作臺臺原理理：：超凈凈工工作作臺臺是是利利用用過過濾濾除除菌菌的的原原理理，，先先將將空空氣氣過過濾濾，，得得到到無無菌菌空空氣氣，，然然后后將將無無菌菌空空氣氣從從風風洞洞打打出出，，使使工工作作臺臺范范圍圍內(nèi)內(nèi)成成為為無無菌菌狀狀態(tài)態(tài)。。要求求：：放置置工工作作臺臺的的房房間間要要清清潔潔，，空空氣氣流流動動小小，，最最好好安安裝裝滅滅菌菌燈燈。。優(yōu)點點：：有效效可可靠靠，，操操作作使使用用方方便便，，在在夏夏季季接接種種時時，，使使操操作作人人員員感感到到舒舒適適。。每臺臺3000元元左左右右，，有有條條件件的的食食用用菌菌專專業(yè)業(yè)戶戶，，可可選選用用這這種種先先進進的的接接種種設(shè)設(shè)備備。。超凈凈工工作作臺臺(一一)菌菌種種生生產(chǎn)產(chǎn)常常用用的的設(shè)設(shè)備備和和用用具具2、、滅滅菌菌設(shè)設(shè)備備1））手手提提式式：：容量量小小，，適適于于斜斜面面試試管管及及玻玻璃璃器器皿皿等等；；2））立立式式：容容量量大大，，投投資資大大；；3））臥臥式式：容容量量大大，，投投資資大大；；4））家家用用24或或26cm壓壓力力鍋鍋：：母種種、、原原種種培培養(yǎng)養(yǎng)基基。。Ⅰ高高壓壓蒸蒸氣氣滅滅菌菌鍋鍋優(yōu)點點：：省省時時、、省省燃燃料料、、效效果果好好2））、、3））一一般般在在菌菌種種場場或或研研究究所所應(yīng)應(yīng)用用。。滅菌菌設(shè)設(shè)備備Ⅰ高高壓壓蒸蒸氣氣滅滅菌菌鍋鍋(一一)菌菌種種生生產(chǎn)產(chǎn)常常用用的的設(shè)設(shè)備備和和用用具具2、滅菌菌設(shè)備Ⅱ常壓壓滅菌鍋鍋目前農(nóng)村村生產(chǎn)栽栽培種的的必備設(shè)設(shè)備，實實際上是是一種大大型蒸籠籠式煮灶灶。底部部為鑄鐵鐵大鍋，，上部為為圓形木木桶，桶桶內(nèi)裝數(shù)數(shù)層供放放培養(yǎng)基基的格架架。桶蓋蓋裝有活活絡(luò)搭及及密閉的的橡皮圈圈，由于于鍋內(nèi)溫溫度最高高是100℃，，所以滅滅菌時間間需維持持10~12h，才能達達到滅菌菌效果。。(一)菌菌種生生產(chǎn)常用用的設(shè)備備和用具具3、培養(yǎng)養(yǎng)設(shè)備⑴培養(yǎng)養(yǎng)室大?。翰灰诉^大大，一般般以20℃~25℃，，培養(yǎng)5000~6000瓶瓶菌種為為宜，太太大不易易保溫和和管理。。要求：干凈、通通風、保保溫，應(yīng)應(yīng)設(shè)有調(diào)調(diào)溫設(shè)備備，使室室溫保持持在20℃~25℃。。門窗應(yīng)應(yīng)設(shè)鐵紗紗，以防防鼠、蟲蟲為害。。⑵生化化培養(yǎng)箱箱是專業(yè)工工廠生產(chǎn)產(chǎn)的恒溫溫電器設(shè)設(shè)備，用用于培養(yǎng)養(yǎng)母種或或少量原原種，可可以根據(jù)據(jù)需要任任意溫度度調(diào)節(jié)。。(一)菌菌種生生產(chǎn)常用用的設(shè)備備和用具具4、培養(yǎng)養(yǎng)菌種的的容器母種：試管，，常用規(guī)規(guī)格20×180~200mm，18×180mm等。。原種、栽培種菌種瓶：鹽水瓶、罐頭瓶菌種袋聚丙稀袋聚乙稀袋規(guī)格有：：12~15××30~35cm，，17××35~45cm母種-試試管原種、栽栽培種——菌種瓶瓶或塑料料袋菌種瓶(一)菌菌種生生產(chǎn)常用用的設(shè)備備和用具具5、接種種工具移植菌種種于培養(yǎng)養(yǎng)基上的的工具稱稱接種工工具，主主要有以以下幾種種：接種針、、環(huán)、刀刀、鉤、、鏟、鋤鋤、槍等等；(一)菌菌種生生產(chǎn)常用用的設(shè)備備和用具具6、常用用的消毒毒藥品⑴70%酒精精：一般用于于手、種種菇表面面消毒；；⑵0.1%升升汞：常用于玻玻璃器皿皿、非金金屬器械械及種菇菇表面消消毒；⑶0.1%KMnO4：一般用于于用具、、器皿消消毒；(一)菌菌種生生產(chǎn)常用用的設(shè)備備和用具具6、常用用的消毒毒藥品⑷5%石炭酸酸：噴灑墻壁壁、地面面及擦洗洗桌面等等，也可可用來蘇蘇爾代替替；⑸2%來蘇爾爾、新潔潔爾滅：：用法同上上；⑹甲醛（（福爾馬馬林）：：用于菇房房和接種種箱等空空氣消毒毒；方法：關(guān)關(guān)閉門窗窗消毒，，自行氣氣化；用量：10ml甲醛＋＋5gKMnO4／立方米米。(一)菌菌種生生產(chǎn)常用用的設(shè)備備和用具具(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)1、母種種培養(yǎng)基基食用菌母母種培養(yǎng)養(yǎng)基的種種類繁多多，由于于不同營營養(yǎng)類型型的食用用菌對營營養(yǎng)物質(zhì)質(zhì)的要求求不同，，所以，，在培養(yǎng)養(yǎng)不同食食用菌母母種時，，應(yīng)選擇擇適宜該該菌種的的培養(yǎng)基基。母種培養(yǎng)養(yǎng)基要求求營養(yǎng)豐豐富、完完全、氮氮源、維維生素的的比例應(yīng)應(yīng)高?，F(xiàn)將食用用菌常用用的母種種培養(yǎng)基基列舉如如下：(一)菌菌種生生產(chǎn)常用用的設(shè)備備和用具具(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)⑴配方方①馬鈴薯薯葡萄糖糖瓊脂培培養(yǎng)基（（PDA）馬鈴薯200g、葡萄萄糖（或或蔗糖））20g、瓊脂脂20g、H2O1000mL、pH6.5。。適用于一一般食用用菌母種種分離與與培養(yǎng)，，但草菇菇、猴頭頭菌等在在此培養(yǎng)養(yǎng)基上生生長不良良。(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)②綜合馬馬鈴薯培培養(yǎng)基馬鈴薯200g、葡萄萄糖（或或蔗糖））20g、KH2PO42g、MgSO40.5g、維生生素B110mg、瓊脂脂20g、H2O1000mL、pH自然然。適合培養(yǎng)養(yǎng)草菇、、猴頭菌菌、靈芝芝及各種種食用菌菌菌種分分離、保保藏。(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)③胡蘿卜卜葡萄糖糖瓊脂培培養(yǎng)基胡蘿卜200g、葡萄萄糖（或或蔗糖））18~20g、瓊脂脂20g、H2O1000mL、pH自然然。(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)④玉米粉粉培養(yǎng)基基玉米粉40g、、葡萄糖糖（或蔗蔗糖）10g、、瓊脂20g、、H2O1000ml、pH自然然；適用于大大多數(shù)食食用菌菌菌絲的生生長。⑤馬鈴薯薯、葡萄萄糖、蛋蛋白胨、、瓊脂培培養(yǎng)基馬鈴薯200g、葡萄萄糖（或或蔗糖））20g、蛋白白胨10g、瓊瓊脂20g、H2O1000ml、pH自然然；適用于培培養(yǎng)和保保藏多種種食用菌菌。(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)⑥黃豆芽芽、松針針培養(yǎng)基基黃豆芽250g、松針針50g、葡萄萄糖（或或蔗糖））20g、瓊脂脂20g、H2O1000ml、pH5~5.5。將松針、、黃豆芽芽按量稱稱好，加加水煮30min，取取濾液，，加入葡葡萄糖、、瓊脂，，充分攪攪拌，使使瓊脂熔熔化，補補水至1000ml，，即分裝裝試管。。主要用于于培養(yǎng)竹竹蓀母種種。(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)⑦蘋果汁汁培養(yǎng)基基蘋果100g、、蛋白胨胨2g、、蔗糖20g、、瓊脂20g、、H2O1000ml；主要用于于草菇培培養(yǎng)（配制方方法同PDA））⑴配方方⑵配制制方法（（以PDA為例例）馬鈴薯（（去皮、、去芽眼眼）→切切成片→→稱取200g＋1000mLH2O→煮沸沸→雙層層紗布過過濾→取取濾液并并補足1000mL＋＋瓊脂→→熔化＋＋其它營營養(yǎng)物質(zhì)質(zhì)→調(diào)節(jié)節(jié)pH（（用HCl或NaOH）→分分裝試管管→滅菌菌（高壓壓蒸氣滅滅菌15-30min）→制制成斜面面→檢查查滅菌效效果（即即28~30℃℃培養(yǎng)2~3d）其它天然然培養(yǎng)基基或綜合合培養(yǎng)基基，如：：玉米粉粉、黃豆豆粉、胡胡蘿卜、、麩皮等等原料，，加適量量水煮汁汁過濾，，取濾液液與其它它成分混混合。(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)2、母種種分離母種分離離方法孢子分離離組織分離離基質(zhì)分離離有性無性⑴孢子分分離法利用孢子子在適宜宜培養(yǎng)基基上形成成菌絲來來獲得純純菌種的的方法。。孢子分離法1）單孢子分離法：培養(yǎng)基上只接種1個擔孢子，使它萌發(fā)成菌絲體而獲得純菌種的方法。如：雙孢蘑菇、草菇單個孢子分離得到菌絲便能結(jié)實。（一個孢子→萌發(fā)→菌絲體→純種）2）多孢子分離法：許多孢子接種于同一培養(yǎng)基上，使它們萌發(fā)自由交配來獲得純菌種的方法。如：香菇、平菇、金針菇、毛木耳等。（多個孢子→萌發(fā)→菌絲體→純種）(二)母母種生生產(chǎn)技術(shù)術(shù)下面先解解釋二個個基本概概念1）同宗宗配合：：同一擔子子孢子萌萌發(fā)產(chǎn)生生的兩條條菌絲之之間進行行結(jié)合便便能生育育（自交交親合、、可孕，，類似于于高等植植物自花花授粉）），可用用單孢子子分離。。如：：雙雙孢孢蘑蘑菇菇、、草草菇菇2））異異宗宗配配合合：：同一一性性別別菌菌絲絲之之間間不不親親合合，，只只有有兩兩條條性性別別不不同同的的菌菌絲絲交交配配才才能能產(chǎn)產(chǎn)生生子子實實體體。。大多多數(shù)數(shù)食食用用菌菌屬屬此此類類型型，，需需用用多多孢孢子子分分離離法法。。(二二)母母種種生生產(chǎn)產(chǎn)技技術(shù)術(shù)擔子子菌菌亞亞門門中中，，約約10%菌菌類類屬屬同同宗宗結(jié)結(jié)合合，，90%以以上上是是異異宗宗配配合合，，所所以以單單孢孢子子分分離離對對大大多多數(shù)數(shù)食食用用菌菌不不適適用用，，只只有有育育種種時時才才采采用用。。此法法技技術(shù)術(shù)復(fù)復(fù)雜雜，，生生產(chǎn)產(chǎn)上上很很少少采采用用，，在在此此不不作作詳詳述述。。(二二)母母種種生生產(chǎn)產(chǎn)技技術(shù)術(shù)多孢孢子子分分離離簡簡單單易易行行，，生生產(chǎn)產(chǎn)上上經(jīng)經(jīng)常常采采用用，，多多孢孢子子分分離離的的具具體體操操作作方方法法有有以以下下幾幾種種：：①整整菇菇插插種種法法：傘傘菌菌常常用用此此法法采采得得孢孢子子。。即選選擇擇成成熟熟度度適適當當?shù)牡膬?yōu)優(yōu)良良種種菇菇，，在在無無菌菌操操作作下下，，插插入入無無菌菌孢孢子子采采集集器器內(nèi)內(nèi)，，置置適適溫溫下下讓讓其其自自然然彈彈散散孢孢子子。。用用接接種種環(huán)環(huán)取取少少量量孢孢子子，，放放入入試試管管斜斜面面上上培培養(yǎng)養(yǎng)。。種菇菇選選擇擇：：菌絲絲生生長長健健壯壯，，無無病病蟲蟲雜雜菌菌，，出出菇菇均均勻勻，，轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)潮潮較較快快，，菇菇形形圓圓整整，，菌菌蓋蓋肥肥厚厚，，達達八八九九成成熟熟。。參見見P48(二二)母母種種生生產(chǎn)產(chǎn)技技術(shù)術(shù)孢子子采采集集器器是是用用來來采采集集食食用用菌菌孢孢子子的的一一種種裝裝置置。。孢子采集器搪瓷盤（大號培養(yǎng)皿）培養(yǎng)皿種菇支架玻璃鐘罩（大漏斗）參見見P48②懸懸釣釣法法此法法主主要要用用于于耳耳類類（（黑黑木木耳耳、、毛毛木木耳耳、、銀銀耳耳等等））孢孢子子的的采采集集。。耳片片（（表表面面消消毒毒））→→懸懸掛掛于于培培養(yǎng)養(yǎng)基基上上方方→→培培養(yǎng)養(yǎng)→→→→取取出出掛掛鉤鉤與與耳耳片片→→培培養(yǎng)養(yǎng)→→挑挑取取先先端端菌菌絲絲→→轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)管管純純化化→→母母種種12~24h培養(yǎng)基耳片參見見P48組織織分分離離：：指通通過過菇菇體體組組織織分分離離純純種種。。優(yōu)點點：：操作作簡簡便便、、取取材材廣廣泛泛、、不不易易變變異異，，保保持持原原菌菌種種優(yōu)優(yōu)良良種種性性。。方法法：：①選選擇擇種種菇菇（（出出菇菇早早、、無無病病蟲蟲害害、、柄柄短短、、肉肉厚厚、、大大小小適適中中、、5~6分分成成熟熟））②組組織織分分離離⑵組組織織分分離離法法參見見P45選擇擇種種菇菇→→表表面面消消毒毒（（75%酒酒精精或或0.1%升升汞汞））→→撕撕成成兩兩半半→→取取菌菌柄柄菌菌蓋蓋交交界界處處→→小小塊塊菌菌肉肉→→移移入入PDA→→培培養(yǎng)養(yǎng)→→觀觀察察→→轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)管管→→純純種種上述述分分離離物物在在25℃℃下下，，經(jīng)經(jīng)3d~5d可可看看到到分分離離物物表表面面長長出出白白色色絨絨毛毛狀狀絲絲，，每每隔隔1d~2d檢檢查查1次次，，隨隨時時淘淘汰汰霉霉菌菌、、細細菌菌污污染染的的培培養(yǎng)養(yǎng)物物，，培培養(yǎng)養(yǎng)10d~15d，，再再作作1次次轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)管管即即得得到到純純種種。。⑵組組織織分分離離法法參見見P45-46注：：⑴取取組組織織塊塊不不要要貪貪大大，，因因組組織織塊塊小小易易定定植植;⑵有有些些食食用用菌菌不不易易用用組組織織分分離離法法獲獲純純種種；；⑶不不同同的的食食用用菌菌切切取取部部位位和和消消毒毒方方法法不不同同。。如：：1））紅紅菇菇、、乳乳菇菇等等，，因因它它們們菇菇體體細細胞胞已已泡泡囊囊化化，，再再生生能能力力極極弱弱；；又如如：：2））銀銀耳耳和和木木耳耳等等膠膠質(zhì)質(zhì)菌菌，，它它們們子子實實體體中中菌菌絲絲含含量量極極少少，，組組織織分分離離法法不不易易成成功功。。而而只只能能取取其其生生長長的的基基質(zhì)質(zhì)即即菇菇木木、、耳耳木木分分離離。。⑵組組織織分分離離法法概念念：：由菇菇木木、、耳耳木木、、培培養(yǎng)養(yǎng)料料等等食食用用菌菌生生長長基基質(zhì)質(zhì)中中的的菌菌絲絲分分離離培培養(yǎng)養(yǎng)而而成成。。這這是是利利用用潛潛在在于于寄寄主主組組織織內(nèi)內(nèi)的的菌菌絲絲體體獲獲得得純純種種的的方方法法。。（常常用用于于銀銀耳耳及及木木耳耳菌菌種種分分離離））⑶基基內(nèi)內(nèi)菌菌絲絲分分離離法法（（基基質(zhì)質(zhì)分分離離法法））參見見P46-47段木木內(nèi)內(nèi)菌菌絲絲分分離離法法：：取1~2cm菇菇木木、、耳耳木木（（子子實實體體著著生生部部位位））→→去去皮皮→→消消毒毒（（75%酒酒精精或或0.1%升升汞汞浸浸泡泡1min））→→切切去去四四周周木木塊塊→→切切成成火火柴柴桿桿粗粗細細，，0.5cm長長的的小小木木梗?！∪?根根放放入入試試管管斜斜面面上上→→培培養(yǎng)養(yǎng)→→取取菌菌絲絲→→轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)管管純純化化⑶基基內(nèi)內(nèi)菌菌絲絲分分離離法法（（基基質(zhì)質(zhì)分分離離法法））參見見P46-47(二二)母母種種生生產(chǎn)產(chǎn)技技術(shù)術(shù)3、、菌菌種種提提純純與與擴擴大大繁繁殖殖用孢孢子子、、組組織織或或基基質(zhì)質(zhì)分分離離法法得得到到的的菌菌種種，，一一般般不不宜宜直直接接用用于于生生產(chǎn)產(chǎn)，，必必須須經(jīng)經(jīng)過過提提純純方方可可應(yīng)應(yīng)用用。。⑴提提純純：：選稀稀疏疏單單菌菌落落→→邊邊緣緣取取菌菌→→接接種種試試管管斜斜面面（（3~5支支））→→培培養(yǎng)養(yǎng)→→純純菌菌種種。。⑵擴擴大大繁繁殖殖：提純的母母種或從有有關(guān)單位引引進的母種種，數(shù)量均均很少，應(yīng)應(yīng)擴大繁殖殖后再用。。在母種繁殖殖時，最好好一次多移移些，不易易多次轉(zhuǎn)管管，以免影影響出菇率率，降低產(chǎn)產(chǎn)量和質(zhì)量量。一支斜面母母種可移接接40支左左右斜面試試管。4、質(zhì)量檢檢驗對分離、引引進或轉(zhuǎn)管管擴大的菌菌種，應(yīng)經(jīng)經(jīng)過質(zhì)量鑒鑒定，選優(yōu)優(yōu)去劣，方方可使用。。1）檢驗方方法①外觀鑒定定優(yōu)良菌種：：菌絲濃白、、粗壯、富富有彈性，，則生命力力強。如有有子實體或或茶褐色被被膜，只要要除去仍可可使用。老化菌種：：菌種已收縮縮、干燥或或菌絲體自自溶產(chǎn)生了了大量紅褐褐色液體，，說明生活活力弱，不不可使用。。(二)母母種生產(chǎn)技技術(shù)②顯微鏡檢檢驗挑取少許菌菌絲于載玻玻片上，加加蒸餾水1滴，蓋上上蓋玻片，，觀察菌絲絲形態(tài)是否否為培育的的菌種。③菌絲生長長速度將其接種到到適宜斜面面培養(yǎng)基上上，在適溫溫下培養(yǎng)。。凡菌絲生生長較快、、整齊、濃濃密而健壯壯的就是優(yōu)優(yōu)良母種。。參見52(二)母母種生產(chǎn)技技術(shù)②顯微鏡檢檢驗③菌絲生長長速度④出菇試驗驗進行子實體體產(chǎn)量和品品質(zhì)評比。。經(jīng)以上檢驗驗，通過綜綜合評比，，選出菌絲絲生長速度度較快，子子實體生長長健壯、品品質(zhì)好、產(chǎn)產(chǎn)量高的母母種，即可可供生產(chǎn)上上使用。參見52(二)母母種生產(chǎn)技技術(shù)(二)母母種生產(chǎn)技技術(shù)2）檢驗標標準①首先要辨辨認分離或或引進的是是不是所需需要的菌種種；②有無雜菌菌污染，是是否老化。。(二)母母種生產(chǎn)技技術(shù)(三)原原種和栽培培種的生產(chǎn)產(chǎn)技術(shù)原種和栽培培種的生產(chǎn)產(chǎn)，無論是是培養(yǎng)基成成分，配制制方法和滅滅菌方法基基本上是相相同的。1）原種：：是由試管管斜面培養(yǎng)養(yǎng)基培養(yǎng)的的母種作種種源接種而而成，主要要用于繁殖殖栽培種，，也可直接接用于生產(chǎn)產(chǎn)。（母種→原原種）2）栽培種種：由原種種作種源擴擴大而成，，只能用于于生產(chǎn)。（原種→栽栽培種)(三)原原種和栽培培種的生產(chǎn)產(chǎn)技術(shù)1、常用培培養(yǎng)料的配配方和配制制方法培養(yǎng)料木屑——米糠培養(yǎng)料：木生菇類，如：木耳、銀耳、香菇；草莖或草糞——廄肥培養(yǎng)料：草生菇類，如：蘑菇、草菇；棉籽殼——米糠培養(yǎng)料：多種菇類。⑴糞草培養(yǎng)養(yǎng)基（適用用于蘑菇））稻草或麥秸秸20kg、糞肥（（干）30kg、石石膏500g、水適適量。方法：稻草草切成2cm長＋糞糞肥→混合合發(fā)酵＋石石膏→調(diào)水水→裝瓶→→滅菌⑵稻草麩皮皮培養(yǎng)基（（草菇）干稻草78%、麩皮皮或米糠20%、蔗蔗糖1%、、過磷酸鈣鈣1%、水水適量方法：稻草草切成2cm長→發(fā)發(fā)酵→＋蔗蔗糖＋麩皮皮＋過磷酸酸鈣1、常用培培養(yǎng)料的配配方和配制制方法⑶木屑米糠糠培養(yǎng)基（香菇、木木耳、猴頭頭、平菇等等）木屑78%、麩皮或或米糠20%、石膏膏1%、蔗蔗糖1%、、水適量。。⑷木屑、麩麩皮、黃豆豆粉培養(yǎng)基基（銀耳））木屑50kg、麩皮皮15kg、黃豆粉粉1kg、、蔗糖0.75kg、MgSO40.25kg、水70~75kg。⑸棉籽殼培培養(yǎng)基（平平菇、猴頭頭、金針菇菇）棉籽殼99.7%、、蔗糖0.1%、石石膏0.2%、水適適量。1、常用培培養(yǎng)料的配配方和配制制方法(三)原原種和栽培培種的生產(chǎn)產(chǎn)技術(shù)2、培養(yǎng)基基（料）配配制原則⑴掌握碳氮氮比例食用菌對碳碳和氮的需需要有一個個比例，簡簡稱碳氮比比（C／ＮＮ）。菌絲體生長長階段：C／Ｎ=20∶1；；子實體形成成階段：C／Ｎ=30~40∶1；C／Ｎ過過高，菌絲絲體生長過過旺，而子子實體小、、產(chǎn)量低。。2、培養(yǎng)基基（料）配配制原則⑵選好培培養(yǎng)材料①首先選不不含殺菌物物質(zhì)的木屑屑杉、松、樟樟等樹種，，含酚、酯酯、精油等等殺菌物質(zhì)質(zhì)，會抑制制食用菌生生長。要用用必須經(jīng)過過處理，如如：蒸煮、、曬等。②根據(jù)食用用菌的喜好好選木屑如：培養(yǎng)香香菇用樺木木屑就比椴椴木屑好；；培養(yǎng)金針菇菇用構(gòu)，楮楮等木屑就就比用榆、、槐等木屑屑好。⑶注意物物理性狀培養(yǎng)原料要要注意顆粒粒粗細、質(zhì)質(zhì)地軟硬程程度，以及及持水性能能等物理性性狀。⑷調(diào)節(jié)酸堿堿度各種食用菌菌需要的pH值不同同，配制培培養(yǎng)料時，，應(yīng)選用NaOH、、石灰、鹽鹽酸或過磷磷酸鈣等物物質(zhì)調(diào)節(jié)pH值。霉霉菌比食用用菌喜歡更更低的pH值，生產(chǎn)產(chǎn)上有時為為了控制這這類雜菌的的發(fā)生，往往往將pH值適當調(diào)調(diào)高0.5~1。2、培養(yǎng)基基（料）配配制原則3、原料選選擇的注意意事項（幾幾點說明））⑴木屑：樹種：除松樹、杉杉樹、柏樹樹、樟樹、、蕓香屬、、按屬等樹樹種之外，，絕大多數(shù)數(shù)闊葉樹和和木屑都可可以利用。。（因其中中含有酚、、酯、精油油等殺菌物物質(zhì)）粗細：不宜過細，，以免培養(yǎng)養(yǎng)基過濕或或通氣不良良。3、原料選選擇的注意意事項（幾幾點說明））⑴木屑：選擇：根據(jù)食用菌菌分解能力力選擇，分分解能力較較強的食用用菌采用硬硬質(zhì)闊葉樹樹木屑，反反之采用軟軟質(zhì)樹種木木屑。如：金針菇菇分解能力力較弱，以以含單寧較較少木屑為為宜，木屑屑越陳越好好；茯苓菌分解解能力較強強，可采用用顆粒粗的的松木屑或或松木釘。。⑵米糠、麩麩皮作用作用：補充充氮源和維維生素。稻草、麥秸秸、木屑、、棉籽殼等等纖維素原原料，含氮氮量低。如如：木屑含含氮量0.03%以以下。麩皮：含氮量比米米糠多，但但維生素不不如米糠。。米糠：含氮量比麩麩皮少。用量：一般般10%~20%，過多易引引起污染。。3、原料選選擇的注意意事項（幾幾點說明））⑶加糖的作作用①初期補充充碳源，用用量1%~5%。②誘導(dǎo)胞外外酶的產(chǎn)生生。纖維素原料料，食用菌菌利用緩慢慢。加入少少量白糖作作為食用菌菌初期補充充碳源，促促進菌絲快快速生長，，同時誘導(dǎo)導(dǎo)纖維素酶酶的產(chǎn)生，，更好地利利用纖維素素。3、原料選選擇的注意意事項（幾幾點說明））⑷Ca2＋作用①提供食食用菌鈣離離子：原料料中加石膏膏、CaCO3或過磷酸鈣鈣、骨粉提提供食用菌菌鈣離子；；②鈣不斷斷中和食用用菌產(chǎn)生的的有機酸；；③鈣還能能中和單寧寧；④減少過過量K、Mg對菌絲絲中毒，促促進菌絲生生長。3、原料選選擇的注意意事項（幾幾點說明））(三)原原種和栽培培種的生產(chǎn)產(chǎn)技術(shù)4、原種、、栽培種的的制作方法法按配方稱取取原料→拌拌料→裝瓶瓶（袋）→→打洞（孔孔徑1cm深至瓶底底）→滅菌菌（1.5kg／／cm2，1.5~2h））→冷卻→→接種（接接入黃豆大大小一塊））→培養(yǎng)（（25℃℃~27℃）→→菌絲長滿滿瓶（袋））→培養(yǎng)7d~8d→擴擴大成栽培培種。(三)原原種和栽培培種的生產(chǎn)產(chǎn)技術(shù)5、雜菌檢檢查（菌種種檢查）接種后的原原種，一般般在3d~5d左右菌絲絲恢復(fù)生長長，應(yīng)每天天全面檢查查雜菌情況況，如有污污染及時剔剔除。（正常為白白色，若混混有其它色色澤，應(yīng)及及時處理））；如發(fā)現(xiàn)現(xiàn)接種塊無無新菌絲萌萌發(fā)，則認認為是死菌菌，應(yīng)及時時補種。正常：菌絲絲白色雜菌：黃、、紅、綠、、黑死菌：補種種二、菌種保保藏菌種是食用用菌栽培成成敗的關(guān)鍵鍵。分離篩篩選一株優(yōu)優(yōu)良的菌種種是一項艱艱苦的任務(wù)務(wù)，而長期期保持優(yōu)良良菌種的性性能，也是是一項極為為重要的工工作。食用用菌與其他他微生物一樣，都是是有遺傳性性和變異性性。遺傳性：保證了優(yōu)優(yōu)良菌種的的性能相對對穩(wěn)定，能能傳給下一一代，為菌菌種保藏提提供了良好好的條件。。變異性：使高產(chǎn)優(yōu)優(yōu)質(zhì)的菌種種，逐漸衰衰退，給菌菌種保藏帶帶來了困難難。菌種保藏的的目的：①保持菌種種的優(yōu)良性性狀；②降低衰退退速度。③確保菌種種純潔，長長期在生產(chǎn)產(chǎn)上應(yīng)用。。（不衰退、、不死亡、、不污染雜雜菌）二、菌種保保藏原理：降低菌種代謝活動。降低代謝活動方法：（創(chuàng)造各種條件）低溫干燥缺氧等在這些條件下，食用菌可處于“休眠”狀態(tài)或處于微弱的代謝活動。

常用的保存方法有以下幾種。

二、菌種保保藏（一）斜面面低溫保藏藏法這是一種較較好的簡易易保藏法，，目前應(yīng)用用最多。方法：將培養(yǎng)好的的斜面菌種種，放入4℃冰箱內(nèi)內(nèi)保藏。保存期：3~6月適用范圍：：多數(shù)食用菌菌注：不適于于草菇。由由于草菇對對低溫的耐耐受力較差差，其菌絲絲在5℃下下易死亡，，所以保藏藏草菇菌種種的溫度需需提高至10~12℃或在草草菇斜面菌菌種上加3~4ml10%甘油防凍凍。二、菌種保保藏（二）石蠟蠟封藏法（（隔絕空氣氣法）方法：用注射器注注入滅菌的的石蠟。注注入量以高高出斜面尖尖端1cm為宜，然然后塞上棉棉塞或無菌菌橡皮塞，，用蠟封好好，保藏在在冰箱或低低溫干燥處處。（菌絲體與與空氣隔絕絕，降低其其代謝活動動，防止培培養(yǎng)基干燥燥）保存期：6年適用范圍：：可用于保藏藏所有不宜宜用冷凍或或干燥保藏藏的真菌。。石蠟培養(yǎng)基菌絲體二、菌種保保藏（三）擔子子孢子保藏藏法（干燥燥）食用菌的孢孢子，可用用濾紙條、、河砂、氯氯化硅膠作作吸附劑，，干燥后進進行保存。。1、濾紙片片保藏法將食用菌的的孢子吸附附在無菌的的濾紙條上上，干燥后后進行保存存，一般可可保存3~5年。方法：濾紙片（剪剪成4×0.8cm小條→滅滅菌）→收收集孢子（（讓孢子彈彈射到濾紙紙條上）→→將有孢子子的濾紙條條放入試管管中（含硅硅膠）→封封口→冰箱箱中保存（三）擔子子孢子保藏藏法（干燥燥）1、濾紙片片保藏法2、砂土管管保藏法砂土（2∶∶1）→裝裝管→滅菌菌→接入孢孢子→干燥燥→保存。。（四）冷凍凍、真空、、干燥保藏藏法這種方法是是利用低溫溫、干燥、、缺氧等條條件保存菌菌種，一般般可保存10年左右右。二、菌種保保藏三、制種、、保藏中易易碰到的問問題及處理理方法1、母種污污染處理⑴細菌污染染底部取菌：：可根據(jù)細菌菌只發(fā)生在在培養(yǎng)基表面面，而真菌菌菌絲能穿透透到培養(yǎng)基基內(nèi)部的特特點，用無無菌操作法法敲破試管管取出培養(yǎng)養(yǎng)基，在培培養(yǎng)基的底底部挑取一一小塊帶有有菌絲的培培養(yǎng)基，移移植到另一一試管中培培養(yǎng)，可得得到純正的的母種。二、菌種保保藏三、制種、、保藏中易易碰到的問問題及處理理方法1、母種污污染處理⑴細菌污染染底部取菌覆蓋培養(yǎng)：：將熔化培養(yǎng)養(yǎng)基冷卻到到40℃，，倒在已污污染細菌的的斜面上，，使之形成成厚約20cm的的覆蓋層，，當食用菌菌菌絲透過過培養(yǎng)基形形成新的菌菌落時，即即可挑取轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)管純化。。三、制種、、保藏中易易碰到的問問題及處理理方法1、母種污污染處理⑴細菌污染染⑵真菌污染染若污染的是是青霉、黃黃霉、木霉霉等真菌，，只要母種種菌絲與這這些雜菌沒沒有相聯(lián)或或尚有一部部分菌絲沒沒有相聯(lián)，，并且這些些雜菌的菌菌絲還沒有有產(chǎn)生孢子子時，可以以用無菌方方法仔細挑挑取沒有相相聯(lián)的一部部分菌絲，，移植到另另外的試管管中繼續(xù)培培育，就能能得到純正正的母種。。三、制種、、保藏中易易碰到的問問題及處理理方法1、母種污污染處理2、原種、、栽培種被被雜菌污染染的原因有有哪些？怎怎樣鑒別？？根據(jù)雜菌開開始發(fā)生的的部位，大大致有以下下幾種污染染原因：⑴若雜菌同同時在培養(yǎng)養(yǎng)基的上、中、下下部位發(fā)生，，主要是由由于培養(yǎng)基滅菌菌不徹底造成的。⑵若雜菌開開始發(fā)生在在接種塊上，這很可可能是母種種或原種已已經(jīng)感染了了雜菌；或或者是由于于接種工具不不嚴格（消毒），，把雜菌帶帶入。2、原種、、栽培種被被雜菌污染染的原因有有哪些？怎怎樣鑒別？？⑶若雜菌先先在培養(yǎng)基表面面發(fā)生，這是是由于接種種過程中無菌操作不不嚴而引起的。。⑷若雜菌是是在接種后若干干天才發(fā)生的，而而且是發(fā)生生在瓶口往往下掛的，，這說明雜雜菌是從棉棉花塞侵入入培養(yǎng)基的的。引起的的原因是培養(yǎng)室濕度度過大、棉棉塞受潮，，造成霉菌菌滋生所致致。三、制種、、保藏中易易碰到的問問題及處理理方法3、為什么么母種不能能多次轉(zhuǎn)管管移植？母種轉(zhuǎn)管次次數(shù)多了會會削弱菌絲絲的生活力力，降低出出菇率，甚甚至造成菌菌絲不孕而而不能形成成子實體。。因此母種種培育可以以一次多培培育幾支試試管，不要要反復(fù)多次次分離轉(zhuǎn)管管，以確保保菌絲旺盛盛的生活力力。（發(fā)生變異異）4、優(yōu)良菌菌種的標準準是什么？？各種食用菌菌菌種，既既有特定的的質(zhì)量標準準，也有共共同的質(zhì)量量標準。這這些共同的的質(zhì)量標準準主要是純、壯兩條。⑴純：除銀耳菌種種，其余各各種栽培食食用菌均是是一種菌絲絲體的純培培養(yǎng)物，不不得混入雜雜菌或純培培養(yǎng)物以外外的其它菌菌種。例如：香菇菇7925菌種，只只能是7925菌株株菌絲體的的純培養(yǎng)。。4、優(yōu)良菌菌種的標準準是什么？？第一、不得得混入毛霉霉、根霉、、曲霉、木木霉等任何何霉菌或細細菌、病毒毒；（雜菌）第二、也不不得混入平平菇、金針針菇等其它它食用菌的的菌絲體；；（其它食用用菌）第三、也不不得混入香香菇7925菌株以以外的任何何一種香菇菇菌株。（其它菌株株）⑵壯：菌種長相正正常、長勢勢旺、再生生能力強。。1、食用菌菌生產(chǎn)中常常用的設(shè)備備和用具有有哪些？（1）接種種設(shè)備：如如接種箱、、超凈工作作臺、接種種室等；（2））滅滅菌菌設(shè)設(shè)備備：：如如高高壓壓蒸蒸汽汽滅滅菌菌鍋鍋、、常常壓壓滅滅菌菌鍋鍋等等；；（3））培培養(yǎng)養(yǎng)設(shè)設(shè)備備：：如如培培養(yǎng)養(yǎng)室室、、生生化化培培養(yǎng)養(yǎng)箱箱；；（4））培培養(yǎng)養(yǎng)菌菌種種容容器器：：如如試試管管、、菌菌種種瓶瓶、、菌菌種種袋袋；；（5））接接種種工工具具：：如如接接種種針針、、環(huán)環(huán)、、刀刀、、鉤鉤、、鏟鏟、、鋤鋤、、槍槍等等；；（6））消消毒毒藥藥品品：：如如70%酒酒精精、、0.1%升升汞汞、、0.1%KMnO4、、5%石石炭炭酸酸、、2%來來蘇蘇爾爾、、新新潔潔爾爾滅滅、、甲甲醛醛（（福福爾爾馬馬林林））等等。。一、、簡簡答答題題2、、寫寫出出PDA培培養(yǎng)養(yǎng)基基的的配配方方和和配配制制方方法法。PDA培培養(yǎng)養(yǎng)基基的的配配方方：：馬鈴鈴薯薯200g，，葡葡萄萄糖糖20g，，瓊瓊脂脂20g，，水水1000mL，，pH6.5配制制方方法法：：馬鈴鈴薯薯去去皮皮→→切切成成片片→→稱稱取取200g加加水水1000mL→→煮煮沸沸20~30mim→→雙雙層層紗紗布布過過濾濾→→取取濾濾液液并并補補足足1000mL加加瓊瓊脂脂→→溶溶化化+其其它它營營養(yǎng)養(yǎng)物物質(zhì)質(zhì)→→調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)pH→→分分裝裝試試管管→→滅滅菌菌→→制制成成斜斜面面→→檢檢查查滅滅菌菌效效果果。。一、、簡簡答答題題組織織分分離離接種種→→母母種種（（一一級級））接種種→→→→原原種種（（二二級級））接種種→→→→栽栽培培種種（（三三級級））種菇菇孢子子分分離離經(jīng)過過這這樣樣三三級級培培養(yǎng)養(yǎng)，，食食用用菌菌菌菌絲絲數(shù)數(shù)量量大大大大增增加加。。一一般般1支支試試管管菌菌種種可可繁繁殖殖4~6瓶瓶原原種種，，每每瓶瓶原原種種又又可可擴擴大大繁繁殖殖60~100瓶瓶栽栽培培種種。。培養(yǎng)養(yǎng)培養(yǎng)養(yǎng)3、、寫寫出出食食用用菌菌的的制制種種程程序序⑴70%酒酒精精：：一般般用用于于手手、、種種菇菇表表面面消消毒毒；；⑵0.1%升升汞汞：：常用用于于玻玻璃璃器器皿皿、、非非金金屬屬器器械械及及種種菇菇表表面面消消毒毒；；⑶0.1%KMnO4：一般般用于于用具具、、器器皿皿消消毒毒；；⑷5%石石炭炭酸酸：：噴灑灑墻墻壁壁、、地地面面及及擦擦洗洗桌桌面面等等，，也也可可用用來來蘇蘇爾爾代代替替；；⑸2%來來蘇蘇爾爾、、新新潔潔爾爾滅滅：：用法法同同上上；；⑹甲甲醛醛（（福福爾爾馬馬林林））：：用于于菇菇房房和和接接種種箱箱等等空空氣氣消消毒毒；；方法法：：關(guān)關(guān)閉閉門門窗窗消消毒毒，，自自行行氣氣化化；；用量量：：10ml甲甲醛醛＋＋5gKMnO4／／立立方方米米。。4、、寫寫出出食食用用菌菌栽栽培培中中5種種常常用用的的消消毒毒藥藥品品一、、簡簡答答題題5、、優(yōu)優(yōu)良良菌菌種種的的標標準準是是什什么么？？各種種食食用用菌菌菌菌種種，，既既有有特特定定的的質(zhì)質(zhì)量量標標準準，，也也有有共共同同的的質(zhì)質(zhì)量量標標準準。。這這些些共共同同的的質(zhì)質(zhì)量量標標準準主主要要是是純純、、壯壯兩兩條條。。⑴純純：：除除銀銀耳耳菌菌種種，，其其余余各各種種栽栽培培食食用用菌菌均均是是一一種種菌菌絲絲體體的的純純培培養(yǎng)養(yǎng)物物，，不不得得混混入入雜雜菌菌或或純純培培養(yǎng)養(yǎng)物物以以外外的的其其它它菌菌種種。。例如如：：香香菇菇7925菌菌種種，，只只能能是是7925菌菌株株菌菌絲絲體體的的純純培培養(yǎng)養(yǎng)。。一、、簡簡答答題題5、、優(yōu)優(yōu)良良菌菌種種的的標標準準是是什什么么？？第一一、、不不得得混混入入毛毛霉霉、、根根霉霉、、曲曲霉霉、、木木霉霉等等任任何何霉霉菌菌或或細細菌菌、、病病毒毒；；（雜雜菌菌））第二二、、也也不不得得混混入入平平菇菇、、金金針針菇菇等等其其它它食食用用菌菌的的菌菌絲絲體體；；（其其它它食食用用菌菌））第三三、、也也不不得得混混入入香香菇菇7925菌菌株株以以外外的的任任何何一一種種香香菇菇菌菌株株。。（其其它它菌菌株株））⑵壯壯：：菌種種長長相相正正常常、、長長勢勢旺旺、、再再生生能能力力強強。。1、、人人工工培培育育的的食食用用菌菌菌菌種種有有（（1））、、（（2））和和（（3））之之分分。。（1））母母種種，，（（2））原原種種，，（（3））栽栽培培種種2、、母母種種分分離離常常用用的的方方法法有有：：（（4））、、（（5））和和（（6））三三種種。（4））、、（（5））、、（（6））孢孢子子分分離離，，組組織織分分離離，，基基質(zhì)質(zhì)分分離離3、、食食用用菌菌菌菌種種保保藏藏中中用用來來降降低低代代謝謝活活動動的的三三個個環(huán)環(huán)境境條條件件分分別別是是：：低低溫溫、、（（7））、、（（8））等等。。食食用用菌菌優(yōu)優(yōu)良良菌菌種種的的標標準準主主要要是是純純和和（（9））兩兩條條。。（7））、、（（8））干干燥燥，，缺缺氧氧，，（（9））壯壯。。二、、填填空空題題4、、菌菌種種袋袋內(nèi)內(nèi)出出現(xiàn)現(xiàn)了了綠綠色色、、黑黑色色、、黃黃色色、、紅紅色色等等顏顏色色，，原原因因是是（（10）），，若若此此現(xiàn)現(xiàn)象象同同時時發(fā)發(fā)生生在在菌菌種種袋袋的的上上、、中中、、下下部部位位，，其其原原因因可可能能是是（（11））。。防防止止此此現(xiàn)現(xiàn)象象發(fā)發(fā)生生通通常?？煽捎糜茫ǎ?2））、、（（13））等等處處理理。。（10）雜雜菌污污染，，（11））培養(yǎng)養(yǎng)料滅滅菌不不徹底底，（（12）、、（13）15%的石石灰水水，0.3%多多菌靈靈二、填空題題9、靜夜四四無鄰，，荒居舊舊業(yè)貧。。。12月-2212月-22Tuesday,December20,202210、雨中黃黃葉樹，，燈下白白頭人。。。05:32:2805:32:2805:3212/20/20225:32:28AM11、以我獨獨沈久，，愧君相相見頻。。。12月-2205:32:2805:32Dec-2220-Dec-2212、故人江海海別，幾度度隔山川。。。05:32:2805:32:2805:32Tuesday,December20,202213、乍見翻翻疑夢，，相悲各各問年。。。12月-2212月-2205:32:2805:32:28December20,20