《特殊雜質(zhì)的檢查》教學(xué)課件

四、特殊雜質(zhì)的檢查

〔一〕對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查?！捕雏}酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查。四、特殊雜質(zhì)的檢查

〔一〕對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查。1〔一〕對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查對(duì)乙酰氨基酚的合成：以對(duì)硝基氯苯為原料，水解后制得對(duì)硝基酚，經(jīng)復(fù)原生成對(duì)氨基酚，再經(jīng)乙?；笾频谩Ｒ苑訛樵?，經(jīng)亞硝化及復(fù)原反響制得?！惨弧硨?duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查對(duì)乙酰氨基酚的合成：2乙醇溶液的澄清度與顏色對(duì)以下氨基酚的生產(chǎn)工藝中使用鐵粉作為還原劑，致使乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對(duì)氨基酚的有色氧化產(chǎn)物，在乙醇中顯橙紅色或棕色。檢查方法〔目視比色法P40〕取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清，無色；如遇1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號(hào)或橙紅色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。

《特殊雜質(zhì)的檢查》教學(xué)課件3目視比色法所用比色液系：由比色用重鉻酸鉀液、比色用氯化鈷液和比色用硫酸銅液按一定比配成五種不同色調(diào)的貯備液，再加不同量的水制成10個(gè)色號(hào)〔詳見P40〕有關(guān)物質(zhì)這些有機(jī)雜質(zhì)主要包括中間體，副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。例如：對(duì)氨基酚，對(duì)氯乙酰苯胺，O-乙?；鶎?duì)乙酰氨基酚，偶氮苯，氧化偶氮苯，苯醌和醌亞胺等。藥典對(duì)本品“有關(guān)物質(zhì)〞項(xiàng)下檢查，以對(duì)氯苯乙酰胺為對(duì)照品。

目視比色法所用比色液系：4

檢查方法取本品的細(xì)粉，乙醚溶解后至澄清，取上清液作為供試品溶液；另取含對(duì)氯苯乙酰胺的乙醇溶液適量，用乙醚稀釋成每1ml中含50μg的溶液作為對(duì)照溶液。在同一硅膠GF254薄層板上點(diǎn)樣，展開后，置紫外燈〔254nm〕下檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更大，更深。

5對(duì)氨基酚本品在合成過程中，由于乙酰化不完全或貯藏不當(dāng)發(fā)生水解，均可引入對(duì)氨基酚。其毒性較大并使本品產(chǎn)生色澤。利用對(duì)氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍(lán)色配位化合物，而對(duì)乙酰氨基酚無此反響的特點(diǎn)，與對(duì)照品比較，進(jìn)展限量檢查。Na2[Fe(NO)(CN)5]+H2ONa2[Fe(CN)5H2O]+NONa2[Fe(CN)5H2O]+H2NOHNa2Fe(CN)5H2NOH+H2O藍(lán)色對(duì)氨基酚本品在合成過程中，由于乙酰化不完全或貯藏不當(dāng)6

檢查方法本品1.0g，加甲醇溶液〔12〕20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml，搖勻放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50μg用同一方法制成的對(duì)照品比較，不得更深〔0.005%〕對(duì)氨基酚對(duì)照溶液不穩(wěn)定，應(yīng)臨用前新鮮配制。

7〔二〕鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查。

普魯卡因分子構(gòu)造中有酯鍵，易發(fā)生水解反響。其注射液制備過程中受滅菌溫度、時(shí)間、溶液PH值、貯藏時(shí)間以及光線和金屬離子等因素影響，可發(fā)生水解反響生成對(duì)氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。其中對(duì)氨基苯甲酸隨貯藏時(shí)間的延長或高溫加熱，可進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化為苯胺，而苯胺又可被氧化為有色物，使注射液變黃。已變黃注射液不僅療效下降，而且毒性增加。故藥典中規(guī)定檢查水劑產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸，其限度不得超過1.2%?！捕雏}酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查。

8CO2[O]H2NCOOHH2NOO檢查方法精細(xì)量取本品加乙醇稀釋使成每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液,作為供試品溶液;另取對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品,加乙醇制成每1ml中含30μg的溶液,作為對(duì)照品溶液去上述兩種溶液各10μl,在硅膠H薄層板上點(diǎn)樣,用展開劑展開后用對(duì)二甲氨基苯甲醛(2%對(duì)二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml,加冰醋酸5ml制成)噴霧顯色.供試品溶液如顯與對(duì)照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn),其顏色與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較,不得更深.

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采用硅膠H-CMC薄層色譜法檢查時(shí),對(duì)氨基苯甲酸的最低檢出量為0.01μg.檢查久貯變色的產(chǎn)品發(fā)現(xiàn)除主斑點(diǎn)鹽酸普魯卡因和分解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸外,還有一個(gè)雜質(zhì)斑點(diǎn),經(jīng)和構(gòu)造物質(zhì)對(duì)照,確證為苯胺,最低檢出量為0.01μg

10五.含量測定亞硝酸鈉滴定法原理:芳伯氨基藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反響,生成重氮鹽,用永停法指示反響終點(diǎn)H+Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHAr-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O

五.含量測定亞硝酸鈉滴定法11測定的主要條件重氮化反響的速度受多種因素的影響,亞硝酸鈉滴定液及反響生成的重氮鹽也不夠穩(wěn)定,。(1)加適量溴化鉀加快反響速度:在鹽酸存在下,重氮化反響歷程為:NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2ONO+Cl-Ar-NH2Ar-NH-NOAr-N=N-OHAr-N2+Cl-慢快快測定的主要條件12注意：第一步反響的快慢與含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游離程度有密切關(guān)系：芳伯氨基的堿性較弱在一定強(qiáng)度酸性溶液中成鹽比例較小游離的芳伯氨基多重氮化反應(yīng)速度就快；反之亦反。KBr使重氮化反響加速的原理HCl+KBrKCl+HBrHNO2+HBrNOBr+H2O〔1〕假設(shè)供試液中僅含HCl,那么：HNO2+HClNOCl+H2O〔2〕〔1〕式的平衡常數(shù)比〔2〕式約大300倍，生成NOBr量大的多從而加速了重氮化反響的進(jìn)展。

注意：13〔2〕加過量鹽酸加速反響因胺類藥物的鹽酸鹽較其硫酸鹽的溶解度大，反響速度也較快，所以多采用鹽酸。故量鹽酸有利于：1.重氮化反響速度加快；2.重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；3.防止生成偶氮氨基化合物，而影響測定結(jié)果。Ar-N2+Cl-+H2N-ArAr-N=N-NH-Ar+HCl假設(shè)酸度過大:可阻礙芳伯氨基的游離，影響重氮化反響速度;還可使亞硝酸分解。所以參加鹽酸量一般按芳胺類藥物與酸的摩爾比約為1：2.5~6?！?〕加過量鹽酸加速反響14〔3〕溫度〔10-30℃〕條件下滴定：通常溫度高重氮化反響速度快；但溫度太高，可使亞硝酸逸失，并可使重氮鹽分解：Ar-N+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl一般溫度每升高10℃，重氮化反響速度加快2.5倍，但重氮鹽的分解速度相應(yīng)加速2倍；所以滴定一般在低溫下進(jìn)展。由于低溫時(shí)反響太慢，經(jīng)試驗(yàn)可在室溫下進(jìn)展。 〔3〕溫度〔10-30℃〕條件下滴定：通常溫度高重氮化反響速15〔4〕滴定管尖端插入液面下滴定：重氮化反響是分子反響，反響速度較慢，故滴定不宜過快。為了防止滴定過程中亞硝酸的揮發(fā)和分解滴定時(shí)將滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次將大局部亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下參加，使其盡快反響。然后將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定。尤其在近終點(diǎn)時(shí)，因尚未反響的芳伯氨基藥物濃度極稀，須在最后一滴參加后，攪拌1min~5min，再確定重點(diǎn)是否真正到達(dá)。〔4〕滴定管尖端插入液面下滴定：16終點(diǎn)指示方法：有電位法，永停滴定法，外指示劑法和內(nèi)指示劑法等?！?〕永停滴定法：中國藥典規(guī)定用永停法指示亞硝酸鈉滴定法。裝置如P150圖7-3

1.Ve2.Ve3.Ve在永停滴定法中，根據(jù)滴定劑和被側(cè)物電位是否可逆可分為幾種情況〔橫軸為V，縱軸為I〕終點(diǎn)指示方法：有電位法，永停滴定法，外指示劑法和內(nèi)指示劑法等17永停滴定法:(又稱雙電流法或雙安培滴定法)原理：見課本P149電極：兩個(gè)鉑電極優(yōu)點(diǎn)：裝置簡單，準(zhǔn)確和簡便意義：是藥典上進(jìn)展重氮化滴定和用KarlFischer法進(jìn)展水分測定的法定方法。

BACK《特殊雜質(zhì)的檢查》教學(xué)課件181.滴定劑屬可逆電對(duì)，如I2/I〔I2+2e2I?〕;被測物屬不可逆電對(duì)，如用含I2的KI溶液滴定Na2S2O3溶液：只能發(fā)生：2S2O32-S4O62-+2e不能發(fā)生：S4O62-+2e2S2O32-2.滴定劑屬不可逆電對(duì)，被測物屬可逆電對(duì)。〔用Na2S2O3滴定含I2的KI溶液〕3.滴定劑和被測物屬可逆電對(duì)，如用Ce4+滴定Fe2+?！睠e4+/Ce2+與Fe2+/Fe3+均屬可逆電對(duì)〕1.滴定劑屬可逆電對(duì)，如I2/I〔I2+2e2I?〕19本實(shí)驗(yàn)中滴定劑與酸反響后是可逆滴定劑〔NaNO2與酸反響后生成NO2-,NO2-/NO3-是可逆電對(duì)〕，而被測物中芳伯氨基藥物和其他離子為不可逆電對(duì)。本實(shí)驗(yàn)中滴定劑與酸反響后是可逆滴定20〔2〕外指示劑法：常用碘化鉀-淀粉糊劑或指示液，滴定到達(dá)終點(diǎn)時(shí)，稍過量的亞硝酸鈉在酸性溶液中氧化碘化鉀，析出碘遇淀粉即顯藍(lán)色。2NaNO3+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O以碘化鉀-淀粉作外指示劑的方法，適用于多種藥物及其制劑的亞硝酸鈉滴定法。應(yīng)用外指示劑法時(shí)，應(yīng)注意其靈敏度與反響的體積有關(guān)。為防止偏差，可是測定時(shí)溶液體積與標(biāo)化時(shí)亞硝酸鈉滴定液的體積一致或測定與標(biāo)化均進(jìn)展空白校正。

〔2〕外指示劑法：常用碘化鉀-淀粉糊劑或指示液，滴定到達(dá)終點(diǎn)21謝謝！謝謝！22四、特殊雜質(zhì)的檢查

〔一〕對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查。〔二〕鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查。四、特殊雜質(zhì)的檢查

〔一〕對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查。23〔一〕對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查對(duì)乙酰氨基酚的合成：以對(duì)硝基氯苯為原料，水解后制得對(duì)硝基酚，經(jīng)復(fù)原生成對(duì)氨基酚，再經(jīng)乙酰化后制得。以酚為原料，經(jīng)亞硝化及復(fù)原反響制得。〔一〕對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查對(duì)乙酰氨基酚的合成：24乙醇溶液的澄清度與顏色對(duì)以下氨基酚的生產(chǎn)工藝中使用鐵粉作為還原劑，致使乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對(duì)氨基酚的有色氧化產(chǎn)物，在乙醇中顯橙紅色或棕色。檢查方法〔目視比色法P40〕取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清，無色；如遇1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號(hào)或橙紅色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。

《特殊雜質(zhì)的檢查》教學(xué)課件25目視比色法所用比色液系：由比色用重鉻酸鉀液、比色用氯化鈷液和比色用硫酸銅液按一定比配成五種不同色調(diào)的貯備液，再加不同量的水制成10個(gè)色號(hào)〔詳見P40〕有關(guān)物質(zhì)這些有機(jī)雜質(zhì)主要包括中間體，副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。例如：對(duì)氨基酚，對(duì)氯乙酰苯胺，O-乙?；鶎?duì)乙酰氨基酚，偶氮苯，氧化偶氮苯，苯醌和醌亞胺等。藥典對(duì)本品“有關(guān)物質(zhì)〞項(xiàng)下檢查，以對(duì)氯苯乙酰胺為對(duì)照品。

目視比色法所用比色液系：26

檢查方法取本品的細(xì)粉，乙醚溶解后至澄清，取上清液作為供試品溶液；另取含對(duì)氯苯乙酰胺的乙醇溶液適量，用乙醚稀釋成每1ml中含50μg的溶液作為對(duì)照溶液。在同一硅膠GF254薄層板上點(diǎn)樣，展開后，置紫外燈〔254nm〕下檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更大，更深。

27對(duì)氨基酚本品在合成過程中，由于乙?；煌耆蛸A藏不當(dāng)發(fā)生水解，均可引入對(duì)氨基酚。其毒性較大并使本品產(chǎn)生色澤。利用對(duì)氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍(lán)色配位化合物，而對(duì)乙酰氨基酚無此反響的特點(diǎn)，與對(duì)照品比較，進(jìn)展限量檢查。Na2[Fe(NO)(CN)5]+H2ONa2[Fe(CN)5H2O]+NONa2[Fe(CN)5H2O]+H2NOHNa2Fe(CN)5H2NOH+H2O藍(lán)色對(duì)氨基酚本品在合成過程中，由于乙?；煌耆蛸A藏不當(dāng)28

檢查方法本品1.0g，加甲醇溶液〔12〕20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml，搖勻放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50μg用同一方法制成的對(duì)照品比較，不得更深〔0.005%〕對(duì)氨基酚對(duì)照溶液不穩(wěn)定，應(yīng)臨用前新鮮配制。

29〔二〕鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查。

普魯卡因分子構(gòu)造中有酯鍵，易發(fā)生水解反響。其注射液制備過程中受滅菌溫度、時(shí)間、溶液PH值、貯藏時(shí)間以及光線和金屬離子等因素影響，可發(fā)生水解反響生成對(duì)氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。其中對(duì)氨基苯甲酸隨貯藏時(shí)間的延長或高溫加熱，可進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化為苯胺，而苯胺又可被氧化為有色物，使注射液變黃。已變黃注射液不僅療效下降，而且毒性增加。故藥典中規(guī)定檢查水劑產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸，其限度不得超過1.2%。〔二〕鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查。

30CO2[O]H2NCOOHH2NOO檢查方法精細(xì)量取本品加乙醇稀釋使成每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液,作為供試品溶液;另取對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品,加乙醇制成每1ml中含30μg的溶液,作為對(duì)照品溶液去上述兩種溶液各10μl,在硅膠H薄層板上點(diǎn)樣,用展開劑展開后用對(duì)二甲氨基苯甲醛(2%對(duì)二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml,加冰醋酸5ml制成)噴霧顯色.供試品溶液如顯與對(duì)照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn),其顏色與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較,不得更深.

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采用硅膠H-CMC薄層色譜法檢查時(shí),對(duì)氨基苯甲酸的最低檢出量為0.01μg.檢查久貯變色的產(chǎn)品發(fā)現(xiàn)除主斑點(diǎn)鹽酸普魯卡因和分解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸外,還有一個(gè)雜質(zhì)斑點(diǎn),經(jīng)和構(gòu)造物質(zhì)對(duì)照,確證為苯胺,最低檢出量為0.01μg

32五.含量測定亞硝酸鈉滴定法原理:芳伯氨基藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反響,生成重氮鹽,用永停法指示反響終點(diǎn)H+Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHAr-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O

五.含量測定亞硝酸鈉滴定法33測定的主要條件重氮化反響的速度受多種因素的影響,亞硝酸鈉滴定液及反響生成的重氮鹽也不夠穩(wěn)定,。(1)加適量溴化鉀加快反響速度:在鹽酸存在下,重氮化反響歷程為:NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2ONO+Cl-Ar-NH2Ar-NH-NOAr-N=N-OHAr-N2+Cl-慢快快測定的主要條件34注意：第一步反響的快慢與含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游離程度有密切關(guān)系：芳伯氨基的堿性較弱在一定強(qiáng)度酸性溶液中成鹽比例較小游離的芳伯氨基多重氮化反應(yīng)速度就快；反之亦反。KBr使重氮化反響加速的原理HCl+KBrKCl+HBrHNO2+HBrNOBr+H2O〔1〕假設(shè)供試液中僅含HCl,那么：HNO2+HClNOCl+H2O〔2〕〔1〕式的平衡常數(shù)比〔2〕式約大300倍，生成NOBr量大的多從而加速了重氮化反響的進(jìn)展。

注意：35〔2〕加過量鹽酸加速反響因胺類藥物的鹽酸鹽較其硫酸鹽的溶解度大，反響速度也較快，所以多采用鹽酸。故量鹽酸有利于：1.重氮化反響速度加快；2.重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；3.防止生成偶氮氨基化合物，而影響測定結(jié)果。Ar-N2+Cl-+H2N-ArAr-N=N-NH-Ar+HCl假設(shè)酸度過大:可阻礙芳伯氨基的游離，影響重氮化反響速度;還可使亞硝酸分解。所以參加鹽酸量一般按芳胺類藥物與酸的摩爾比約為1：2.5~6?！?〕加過量鹽酸加速反響36〔3〕溫度〔10-30℃〕條件下滴定：通常溫度高重氮化反響速度快；但溫度太高，可使亞硝酸逸失，并可使重氮鹽分解：Ar-N+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl一般溫度每升高10℃，重氮化反響速度加快2.5倍，但重氮鹽的分解速度相應(yīng)加速2倍；所以滴定一般在低溫下進(jìn)展。由于低溫時(shí)反響太慢，經(jīng)試驗(yàn)可在室溫下進(jìn)展。 〔3〕溫度〔10-30℃〕條件下滴定：通常溫度高重氮化反響速37〔4〕滴定管尖端插入液面下滴定：重氮化反響是分子反響，反響速度較慢，故滴定不宜過快。為了防止滴定過程中亞硝酸的揮發(fā)和分解滴定時(shí)將滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次將大局部亞硝酸鈉滴定液在攪拌條件下參加，使其盡快反響。然后將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定。尤其在近終點(diǎn)時(shí)，因尚未反響的芳伯氨基藥物濃度極稀，須在最后一滴參加后，攪拌1min~5min，再確定重點(diǎn)是否真正到達(dá)?！?〕滴定管尖端插入液面下滴定：38終點(diǎn)指示方法：有電位法，永停滴定法，外指示劑法和內(nèi)指示劑法等。〔1〕永停滴定法：中國藥典規(guī)定用永停法指示亞硝酸鈉滴定法。裝置如P150圖7-3

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