毛細(xì)管電泳原理及策略

毛細(xì)管電泳分離原理及分析策略

貝克曼高效毛細(xì)管電泳儀毛細(xì)管電泳是帶電粒子在電場(chǎng)力的驅(qū)動(dòng)下，在毛細(xì)管中按其淌度或和分配系數(shù)不同進(jìn)行高效、快速分離的電泳新技術(shù)，也稱為高效毛細(xì)管電泳(CapillaryElectrophoresis,CE)。

毛細(xì)管電泳的原理

1裝置

毛細(xì)管數(shù)據(jù)處理電極檢測(cè)器電極試樣緩沖液高壓電源

（可高至30KV）

2電泳和電滲

電泳是指在電場(chǎng)作用下，溶液中的帶電粒子作定向移動(dòng)的現(xiàn)象。電滲是指在電場(chǎng)作用下，毛細(xì)管或固相多孔物質(zhì)內(nèi)液體沿固體表面移動(dòng)的現(xiàn)象。

2電泳和電滲

電泳行為與特性使用淌度描述

即單位場(chǎng)強(qiáng)(E)下離子的平均電泳速度υ

μep=υ/E實(shí)驗(yàn)中，只發(fā)生電泳時(shí)有效淌度μef=υef﹒

(L/V)=(

l/tm)﹒(L/V)

毛細(xì)管有效長(zhǎng)度遷移時(shí)間毛細(xì)管總長(zhǎng)度電壓

2電泳和電滲

電滲與固液界面的雙電層有著密切的關(guān)系在毛細(xì)管壁雙電層的擴(kuò)散層中的陽(yáng)離子，相對(duì)于毛細(xì)管壁的負(fù)電荷表面，形成一個(gè)圓筒形的陽(yáng)離子鞘，在電場(chǎng)作用下，溶劑化了的陽(yáng)離子，沿滑動(dòng)面與緊密層作相對(duì)運(yùn)動(dòng)，攜帶著溶劑一起向陰極遷移，便形成了電滲流（electroosmoticflow,EOF）。固液兩相間的總電勢(shì)-熱力學(xué)電勢(shì)-φ0Zeta電勢(shì)-ζ

2電泳和電滲

電滲流的流型特點(diǎn)電滲流HPLC塞流層流

2電泳和電滲

電滲流的表示電滲流的大小可用淌度(μeo)或電滲流系數(shù)表示

μeo=υeo/E=l/(teo﹒E)電滲流速度毛細(xì)管有效長(zhǎng)度

電滲流流出時(shí)間

電場(chǎng)強(qiáng)度第22章毛細(xì)細(xì)管電泳22－1毛毛細(xì)管電泳泳的原理2電泳和電滲滲電滲流的意意義電泳過程中中，伴隨著著電滲現(xiàn)象象電滲流的速速度比電泳泳速度快5－7倍利用電滲流流可將正、、負(fù)離子或或中性分子子一起向同同一方向，，產(chǎn)生差速速遷移，在在一次電泳泳操作中同同時(shí)完成正正、負(fù)離子子的分離分分析電滲流是毛毛細(xì)管電泳泳分離的重重要參數(shù)控制電滲流流的大小和和方向，可可提高毛細(xì)細(xì)管電泳分分離的效率率、重現(xiàn)性性、分離度度。分情況而論論2電泳和電滲滲改變電滲流流的方法改變外加徑徑向電場(chǎng)改變緩沖液液成分和濃濃度Zeta電勢(shì)改變緩沖液液pH加入添加劑劑改變溫度粘度鹽-離子強(qiáng)度表面活性劑劑μeo正比于Zeta電勢(shì)和介質(zhì)質(zhì)的介電常數(shù)反比于介質(zhì)的黏度度Zeta電勢(shì)正比于于雙電層厚度度和界面有效電電荷密度反比于介質(zhì)質(zhì)的介電常數(shù)表觀電泳淌淌度μapμap=υap/Eυap為離子的表表觀遷移速速度υap=υef+υeoμap=μef+μeo2電泳和電滲滲3分離離效率和分分離度分離效率柱效可以用用理論塔板板數(shù)n表示n=(μep+μeo)Vl/(2DL)毛細(xì)管電泳泳分離的柱柱效方程理論塔板高高H=L/nn=5.54(χ/W?)2實(shí)驗(yàn)上可按按上式求出出理論塔板板數(shù)χ為電泳圖上上從起點(diǎn)至電泳峰最大值之間的距離離W?為電泳峰的的半高峰寬3分離離效率和分分離度分離度電泳中兩峰峰的分離度度（Rs），也稱為分辨辨率，它表表示了淌度度相近的組組分分開的能力力，可表達(dá)達(dá)為Rs=（n1/2/4）×（Δυ/υ平）Δυ相鄰兩區(qū)帶帶的遷移速速度差υ平為兩者的平平均速度Δυ/υ平表示分離選選擇性n為柱效分離度計(jì)算算式Rs=2(tm2-tm1)/(W1+W2)tm1、tm2分別為兩個(gè)個(gè)組份的遷遷移時(shí)間W為峰底的寬度度3分離離效率和分分離度4區(qū)帶帶寬度及其其展寬因素素區(qū)帶寬度展寬因素焦耳熱進(jìn)樣電泳擴(kuò)散毛細(xì)管壁對(duì)對(duì)組分的吸吸附焦耳熱細(xì)內(nèi)徑（<100μμm），粗外徑的毛毛細(xì)管柱溫度輪廓----黏度輪廓----速度輪廓4區(qū)帶帶寬度及其其展寬因素素進(jìn)樣試樣導(dǎo)入毛毛細(xì)管柱時(shí)時(shí)，總有一一定的試樣樣區(qū)帶長(zhǎng)度度。細(xì)內(nèi)徑的毛毛細(xì)管柱時(shí)時(shí)，進(jìn)樣操操作的要求求更為嚴(yán)格格。一般進(jìn)樣區(qū)區(qū)帶控制在在柱長(zhǎng)的1%電泳擴(kuò)散試樣區(qū)帶中中的緩沖溶溶液濃度或或電阻率與與毛細(xì)管其其它地方的的濃度或電電阻率不相相等時(shí)，因因兩個(gè)區(qū)域域電場(chǎng)強(qiáng)度度的差異，，而引起區(qū)區(qū)帶電分散散。μs---μb峰前展或拖拖尾？4區(qū)帶帶寬度及其其展寬因素素毛細(xì)管壁對(duì)對(duì)組分的吸吸附電泳峰拖尾尾或變形，，甚至消失失。抑制吸附作作用常用的的方法有：：●使用極端端pH條件●加入中性性鹽或兩性性離子化合合物●對(duì)毛細(xì)管管內(nèi)壁進(jìn)行行涂層處理理需要注意：：方法也會(huì)會(huì)抑制或改改變電滲流流4區(qū)帶帶寬度及其其展寬因素素CE分離原理-與模式有關(guān)關(guān)毛細(xì)管區(qū)帶帶電泳（CZE）毛細(xì)管膠束束電動(dòng)色譜譜（MECC/MCKC）毛細(xì)管凝膠膠電泳（CGE）毛細(xì)管等電電聚焦（cIEF）親和毛細(xì)管管電泳（ACE）毛細(xì)管電色色譜（CEC）第一章毛毛細(xì)管區(qū)帶帶電泳樣品在電解液中泳動(dòng),根據(jù)物質(zhì)的荷/質(zhì)質(zhì)比差異來進(jìn)行分離，比值愈大大,跑得愈愈快進(jìn)樣方式壓力進(jìn)樣電動(dòng)進(jìn)樣濃縮進(jìn)樣毛細(xì)管種類類非涂層毛細(xì)細(xì)管（裸管管）內(nèi)壁涂層毛毛細(xì)管（涂涂層管）非涂層毛細(xì)細(xì)管-電滲流的概概念-H+高pH低pH電滲流的特特點(diǎn)EOF-+純電泳狀態(tài)態(tài)-+EOF電泳+電滲流0tm(min)電滲流的作作用電滲流的活活塞流特點(diǎn)點(diǎn)HydrodynamicflowParabolicResistancetoflowatsurfaceMorediffusion/broaderdetectionzoneEOFgivesplugflowMinimizesbandbroadeningNarrowsdetectionzoneHydrodynamicflowParabolicResistancetoflowatsurfaceMorediffusion/broaderdetectionzoneEOFgivesplugflowMinimizesbandbroadeningNarrowsdetectionzone電滲流的活活塞流特點(diǎn)點(diǎn)電滲流是CE中最大的驅(qū)驅(qū)動(dòng)力來源源之一電滲流的正正面及負(fù)面面作用正面作用增加分離速速度使得正、負(fù)負(fù)電荷物質(zhì)質(zhì)同時(shí)分離離負(fù)面作用減少分離時(shí)時(shí)間和分離離有效距離離電滲流的波波動(dòng)極大的的影響了遷遷移時(shí)間的的重復(fù)性影響電滲流流的因素pH值pH越高，電滲滲流越大離子強(qiáng)度離子強(qiáng)度越越高，電滲滲流越小緩沖溶液添添加劑離子型表面面活性劑、、有機(jī)溶劑劑、環(huán)糊精精電滲流隨pH的變化情況況控制電滲流流的三個(gè)重重要手段采用涂層毛毛細(xì)管，消消除電滲流流的影響改變pH，從而調(diào)整整電滲流的的大小。pH<3時(shí)電滲流很很低；當(dāng)pH>10以后，電滲滲流基本不不增加添加劑：有有機(jī)溶劑可可以降低電電滲流的大大小，從而而增加分離離的有效距距離；表面面活性劑可可以徹底改改變電滲流流的方向和和大小，主主要是在陰陰離子分析析時(shí)使用緩沖溶液的的影響和選選擇在CE中應(yīng)該根據(jù)據(jù)以下性質(zhì)質(zhì)來選擇緩緩沖溶液：：在所選的pH范圍內(nèi)有較較強(qiáng)緩沖能能力；在檢測(cè)波長(zhǎng)長(zhǎng)處有低的的紫外吸收收；小的淌度（（即大體積積、低電荷荷離子）以以降低所產(chǎn)產(chǎn)生的電流流。那些被稱為為生物“優(yōu)優(yōu)良緩沖液液”的，如如Tris,borate,CAPS等特別有用用，因?yàn)檫@這些緩沖溶溶液中的離離子一般較較大，能夠夠在較高濃濃度下使用用而不會(huì)產(chǎn)產(chǎn)生大的電電流，但一一個(gè)潛在的的缺點(diǎn)是這這些大的緩緩沖離子有有強(qiáng)的紫外外吸收。常用的CE緩沖體系磷酸鈉體系系寬寬緩沖范圍圍硼酸鈉體系系高高pH范圍Tris-HCl體系低低pH范圍醋酸-醋酸銨體系系CE/MS常用體系CZE分離條件的的選擇毛細(xì)管類型型--涂層還是非非涂層？毛細(xì)管長(zhǎng)度度--長(zhǎng)毛細(xì)管還還是短毛細(xì)細(xì)管？緩沖液體系系--種類和pH值添加劑類型型--甲醇|環(huán)糊精|乙腈檢測(cè)器選擇擇--紫外|二極管陣列列|激光誘導(dǎo)熒熒光緩沖溶液的的選擇可先用磷酸酸緩沖體系系為搜尋基基礎(chǔ)，初步步確定（最最佳）pH范圍后，再再進(jìn)一步細(xì)細(xì)選出更好好pH和緩沖試劑劑。磷酸鹽鹽是毛細(xì)管管電泳中最最常用的緩緩沖體系之之一，它的的紫外吸收收低，pH緩沖范圍比比較寬（pH=1.5～13），但電導(dǎo)導(dǎo)也比較大大。緩沖溶液及及pH值的選擇研究經(jīng)驗(yàn)表表明：對(duì)于于蛋白質(zhì)、、肽和氨基基酸等兩性性樣品，采采用酸性（（pH2）或堿性（（pH＞9）分分離離條條件件，，比比較較容容易易得得到到好好的的分分離離結(jié)結(jié)果果；；糖糖類類樣樣品品通通常常在在pH=9～11之間間能能獲獲得得最最佳佳分分離離；；羧羧酸酸或或其其他他樣樣品品多多在在pH=5～9之間間選選擇擇分分離離條條件件。緩沖沖溶溶液液及及pH值的的選選擇擇pH的選選擇擇也也和和所所用用的的毛毛細(xì)細(xì)管管種種類類有有關(guān)關(guān)，，許許多多涂涂層層毛毛細(xì)細(xì)管管只只能能在在一一定定的的pH范圍圍內(nèi)內(nèi)工工作作，，例例如如聚聚丙丙烯烯酰酰胺胺涂涂層層毛毛細(xì)細(xì)管管，，在在3＜pH＜8的范范圍圍以以外外工工作作，，其其涂涂層層容容易易水水解解失失效效。。緩沖沖溶溶液液及及pH值的的選選擇擇在相相同同的的pH下，，不不同同緩緩沖沖體體系系的的分分離離效效果果不不盡盡相相同同，，有有的的可可能能相相差差甚甚遠(yuǎn)遠(yuǎn)。。一一般般的的經(jīng)經(jīng)驗(yàn)驗(yàn)是是，，能能與與樣樣品品發(fā)發(fā)生生相相互互作作用用的的試試劑劑，，有有可可能能就就是是最最好好的的試試劑劑。。一一個(gè)個(gè)典典型型的的例例子子是是，，在在分分離離糖糖類類和和DNA等分分子子時(shí)時(shí)優(yōu)優(yōu)先先使使用用硼硼酸酸鹽鹽緩緩沖沖體體系系，，因因?yàn)闉榕鹋鹚崴岣苣芘c與糖糖羥羥基基形形成成配配位位鍵鍵，，從從而而增增加加糖糖的的負(fù)負(fù)電電荷荷和和分分離離度度。。硼硼酸酸緩緩沖沖試試劑劑也也適適用用于于其其他他含含鄰鄰位位羥羥基基或或多多羥羥基基化化合合物物的的分分離離。。緩沖沖溶溶液液及及pH值的的選選擇擇緩沖沖試試劑劑及及pH調(diào)節(jié)節(jié)劑劑的的濃濃度度也也需需要要優(yōu)優(yōu)化化。。緩緩沖沖試試劑劑的的濃濃度度一一般般控控制制在在10～200mmol/L之間間。。電電導(dǎo)導(dǎo)率率高高的的緩緩沖沖試試劑劑如如磷磷酸酸鹽鹽和和硼硼砂砂等等，，其其濃濃度度多多控控制制在在20mmol/L附近近，，而而電電導(dǎo)導(dǎo)小小的的試試劑劑如如硼硼酸酸及及HEPES等，，其其濃濃度度可可在在100mmol/L以上上。。有有時(shí)時(shí)為為了了抑抑制制蛋蛋白白質(zhì)質(zhì)吸吸附附等等特特殊殊目目的的，，可可采采用用很很高高（（＞＞0.5mol/L）的的試試劑劑濃濃度度，，此此時(shí)時(shí)要要注注意意減減少少分分離離電電壓壓，，分分析析速速度度自自然然也也將將隨隨之之降降低低。。添加加劑劑的的選選擇擇目的的：：改善善分分離離抑制制分分析析物物在在毛毛細(xì)細(xì)管管上上的的吸吸附附添加加劑劑的的選選擇擇甲醇醇|乙腈腈（（5-50%）降低電滲滲流，增增加分離離有效距距離，從從而改善善分離效效果增加非極極性物質(zhì)質(zhì)的水溶溶性環(huán)糊精|SDS等表面活活性劑增加分離離選擇性性，提高高分析效效果降低電滲滲流，增增加分離離有效距距離，從從而改善善分離效效果非極性高高分子聚聚合物掩蔽毛細(xì)細(xì)管內(nèi)壁壁電荷，，抑制分分子吸附附降低電滲滲流形成一定定的分子子篩，提提高分子子大小選選擇性第二章毛毛細(xì)管管膠束電電動(dòng)色譜譜電解質(zhì)中加入表面活性劑(surfactant，例如SDS)，使之形成膠束（Micelle），樣品根據(jù)其疏水性(Hydrophobicity)強(qiáng)弱的差異，在膠束與電電解質(zhì)的的分配系數(shù)有所不同同來進(jìn)行分離，樣品疏水性愈愈強(qiáng)，則進(jìn)入膠束的機(jī)會(huì)愈大。通常物質(zhì)進(jìn)入膠束后，，泳動(dòng)的速度會(huì)變慢，因此疏水水性愈強(qiáng)強(qiáng)的物質(zhì)則愈慢出來來。毛細(xì)管膠膠束電動(dòng)動(dòng)色譜原原理SDS-+EOFMicellarElectrokineticChromatography(MEKC)七種青霉霉素的分分離CZE:20mMPi-Borate,pH8.5(B)MEKC:0.1MSDSin(A)soln.膠束電動(dòng)動(dòng)色譜的的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)增加對(duì)弱弱極性物物質(zhì)分離離的分離離度在中藥分分析、天天然產(chǎn)物物分析、、農(nóng)藥分分析中經(jīng)經(jīng)常使用用缺點(diǎn)穩(wěn)定性不不佳，達(dá)達(dá)到好的的重復(fù)性性比較困困難第三章毛毛細(xì)管管凝膠電電泳毛細(xì)管內(nèi)內(nèi)先填充充凝膠(例如polyacrylamide或cellulose)，此時(shí)凝膠會(huì)會(huì)在毛細(xì)管管內(nèi)形成成分子篩，樣品依分子子量的大小在毛毛細(xì)管內(nèi)內(nèi)移動(dòng)速度不同同而進(jìn)行分離。主要用于于核酸片片斷及蛋蛋白分子子量分析析毛細(xì)管凝凝膠電泳泳CE雙鏈及單單鏈核酸酸分析45-寡寡核苷酸酸質(zhì)控1.02.03.0123456789101112131415161718192023242526272829303031323334IS2110.015.0RelativeFluorescenceIntensitydsDNA片段

(72bp-12Kbp)CE-SDS蛋白分子子量分析析第四章毛毛細(xì)管管等電聚聚焦第五章親親和毛毛細(xì)管電電泳-分離條件件基于CZE當(dāng)在CZE樣品或緩緩沖液中中引入抗抗原或抗抗體時(shí)，，便可以以用于研研究和分分析抗體體或抗原原，也可可以利用用這種方方法對(duì)電電泳峰進(jìn)進(jìn)行特異異性定性性。顯然然除抗原原與抗體體的選擇擇需要應(yīng)應(yīng)用生化化知識(shí)外外，其他他方面的的選擇與與CZE等相同。。用于研究究分子間相相互作用用測(cè)定，，分子構(gòu)構(gòu)型變化化特定物質(zhì)質(zhì)檢測(cè)活性物質(zhì)質(zhì)篩選ACE測(cè)定分子子間結(jié)合合常數(shù)與與解離速速率JAK2與SH2-B之間的相相互作用用研究CE藥物篩選選ACE用于相互互作用篩篩選適體Aptamer類似于抗抗體，但但可以體體外合成成，結(jié)合合常數(shù)比比抗體更更高，有有廣泛的的藥物篩篩選和臨臨床診斷斷應(yīng)用潛潛力目前已有有以下的的一些蛋蛋白的aptamer是采用CE方法篩選選得到的的IgEHIVtype1reversetranscriptaseThrombinAnti-thrombinIIITaqDNApolymeraseACE用于相互互作用篩篩選傳統(tǒng)篩選選方法如如親和色色譜或者者CEC篩選一個(gè)個(gè)Aptamer需要4-6周而CE只需要幾幾天就可可以了，，大大提提高了篩篩選速度度--MicroScaleBioseparations2006第六章檢檢測(cè)器器選擇小分子檢檢測(cè)大分子檢檢測(cè)CE檢測(cè)器種種類及性性能小分子檢檢測(cè)有紫外吸吸收首先選擇擇二極管管陣列檢檢測(cè)器或或紫外檢檢測(cè)器無紫外吸吸收可以衍生生化的，，可以采采用自外外衍生的的方法再再用紫外外檢測(cè)器器檢測(cè)，，如氨基基酸、還還原性糖糖等不可以衍衍生化的的，可采采用間接接紫外法法用紫外外檢測(cè)器器檢測(cè)，，也可以以嘗試電電化學(xué)檢檢測(cè)器有熒光或或需要高高靈敏度度檢測(cè)的的可采用用LIF檢測(cè)器需要測(cè)定定結(jié)構(gòu)或或者難以以用光學(xué)學(xué)檢測(cè)器器檢測(cè)的的，可以以考慮質(zhì)質(zhì)譜檢測(cè)測(cè)大分子檢檢測(cè)蛋白、核核酸可以首先先選擇紫紫外檢測(cè)測(cè)器如果需要要高靈敏敏度檢測(cè)測(cè)可以采采用柱前前或者柱柱上衍生生的方法法標(biāo)記熒熒光，然然后用LIF檢測(cè)如果需要要特異性性檢測(cè)，，可使用用特異性性熒光探探針，標(biāo)標(biāo)記后再再LIF檢測(cè)需要測(cè)定定分子量量或氨基基酸序列列，可采采用質(zhì)譜譜檢測(cè)多糖含量較高高的多糖糖可以采采用末端端吸收法法以紫外外檢測(cè)器器檢測(cè)含量較低低的還原原性多糖糖可用衍衍生試劑劑標(biāo)記后后以LIF、UV的方式檢檢測(cè)第七章分分離條條件選擇擇流程分離條件件的選擇擇是毛細(xì)細(xì)管電泳泳中最重重要但也也是最難難之處。。不同的的專業(yè)研研究工作作者可能能會(huì)有各各自不同同的選擇擇策略和和流程，，我們提提出如下下九步選選擇流程程，僅供供參考：：第一步，，盡可能能多地了了解分離離樣品的的類型、、來源、、組成及及其性質(zhì)質(zhì)；第二步，，根據(jù)樣樣品的可可能性質(zhì)質(zhì)和來源源，選擇擇分離模模式，若若無樣品品信息可可先選CZE；條件選擇擇流程第三步，，根據(jù)樣樣品性質(zhì)質(zhì)確定檢檢測(cè)方法法，一般般先選直直接紫外外吸收；；第四步，，確定樣樣品處理理方式，，包括衍衍生方案案以及離離心過濾濾除蛋白白等；第五步，，根據(jù)樣樣品解離離常數(shù)計(jì)計(jì)算最佳佳pH，或利用用75μmID毛細(xì)管和和磷酸緩緩沖體系系確定pH范圍;條件選擇擇流程第六步，，根據(jù)所所需pH構(gòu)建緩沖沖體系，，包括進(jìn)進(jìn)一步優(yōu)優(yōu)化pH、緩沖試試劑濃度度等；第七步，，優(yōu)化其其他操作作參數(shù)，，如毛細(xì)細(xì)管尺寸寸、分離離電壓和和溫度等等；第八步，，確定是是否需要要使用添添加劑和和使用非非水溶劑劑；第九步，，確定是是否需要要換用其其他分離離模式。。條件選擇擇流程在毛細(xì)管管電泳條條件選擇擇中，還還應(yīng)充分分注意下下列操作作事項(xiàng)：：①最好對(duì)對(duì)樣品和和緩沖液液進(jìn)行過過濾或離離心處理理。②毛細(xì)管管的洗滌滌或平衡衡，與緩緩沖體系系、pH以及柱子子有關(guān)。。磷酸根根與石英英和玻璃璃之間存存在慢相相互作用用，需要要延長(zhǎng)平平衡或沖沖洗時(shí)間間，處理理的時(shí)間間應(yīng)由分分離重現(xiàn)現(xiàn)性決定定。條件選擇擇流程③欲降低緩緩沖液的的電導(dǎo)，，應(yīng)盡量量使用所所謂的““生物緩緩沖試劑劑”；欲欲降低檢檢測(cè)背景景，則應(yīng)應(yīng)盡量使使用無機(jī)機(jī)緩沖試試劑。④欲保持持分離重重現(xiàn)，要要盡量采采用相同同的條件件，包括括毛細(xì)管管、緩沖沖液、溫溫度、電電壓、洗洗滌等。。第八章各各類物物質(zhì)的分分離要點(diǎn)點(diǎn)陰離子及及有機(jī)酸酸此類物質(zhì)質(zhì)沒有紫紫外吸收收，要采采用間接接檢測(cè)法法間接紫外外法一般般以鉻酸酸鈉等物物質(zhì)作為為背景吸吸收物CTAB通常用作作電滲流流反向劑劑，以加加速出峰峰，提高高峰的尖尖銳度要使用反反向極性性分離各類物質(zhì)質(zhì)的分離離要點(diǎn)陽(yáng)離子及及金屬離離子的分分離此類物質(zhì)質(zhì)沒有紫紫外吸收收，要采采用間接接檢測(cè)法法間接紫外外法一般般以氨基基吡啶等等物質(zhì)作作為背景景吸收物物與陰離子子不同的的是陽(yáng)離離子的分分析不需需要在緩緩沖溶液液中添加加電滲流流反向試試劑也不需要要使用反反向極性性分離各類物質(zhì)質(zhì)的分離離要點(diǎn)易電離有有極性的的化合物物一般采用用長(zhǎng)60cm的毛細(xì)管管分離的最最佳pH在分析物物pKa+/-1左右通常不需需要添加加劑各類物質(zhì)質(zhì)的分離離要點(diǎn)弱極性物物質(zhì)和水水溶性差差的物質(zhì)質(zhì)（一些些中藥成成分、農(nóng)農(nóng)藥等））要注