完全版動物學整理 卷子版

名詞解釋：1、實驗動物（10年）：經(jīng)人工培育，對其攜帶的微生物及寄生蟲實行控制，遺傳背景明確或來源清楚，用于科學研究、教學、生物制品或藥品鑒定以及其它科學實驗的動物。2、實驗用動物：能夠用于科學實驗的所有動物，它包括實驗動物、家畜、家禽和野生動物。實驗動物來源于野生動物或家畜家禽，但又不同于野生動物和家畜家禽。3.實驗動物科學LaboratoryAnimalSciences是研究有關(guān)實驗動物和動物實驗的一門新興科學。簡言之，實驗動物科學是專門研究實驗動物的生物特性、飼養(yǎng)繁殖、遺傳育種、質(zhì)量控制、疾病防治和開發(fā)應用的科學。4.近交系至少經(jīng)過20代以上連續(xù)全同胞或親子交配，品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先的動物群。近交系數(shù)達98.6%以上。5.亞系（Substrain）：近交系內(nèi)各個分支動物群之間，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)或確信可能存在遺傳上的差異，則這些近交系的分支稱之為原近交系的亞系。6.支系（Subline）由于飼養(yǎng)的環(huán)境或人為的技術(shù)處理，可能影響動物群的某些特征，這個動物群體并未發(fā)現(xiàn)真正的或可能存在的遺傳上的差異，相對于原來的近交系或亞系，它稱之為支系。7.重組近交系RI由兩個無血緣關(guān)系的近交系雜交后，得到F2代，分組分別經(jīng)20代以上的兄妹交配而育成的近交系系列動物。8.同源突變近交系(Coisogenicinbredstrain)指兩個近交系，除了一個指明位點等位基因不同外，其它遺傳基因全部相同的品系。其更注重突變基因的研究。9.同源導入近交系（10級）(Congenicinbredstrain)通過雜交—互交或回交等方式將一個基因?qū)氲浇幌抵校纱诵纬傻囊粋€新的近交系與原來的近交系只是在一個很小的染色體片段上的基因不同，簡稱同源導入系或同類系。10.同源分離近交系(Segregatinginbredstrain)在培育近交系的同時，采取一定的交配方法，迫使個別基因位點上的基因處于雜合狀態(tài)。11.封閉群（Closedcolony）（10級）是以非近親交配方式進行繁殖生產(chǎn)的一個種群，在不從外部引入新的血緣條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上。每代近交系數(shù)F增加量少于1%，即:ΔF<1%12.雜交一代動物(10級)兩個不同近交系動物雜交所生的第一代動物，稱之為雜交一代動物（F1代）13.普通級動物(Conventionalanimals,CV)是在微生物學控制上要求最低的動物，要求不攜帶人獸共患病和動物烈性傳染病的病原。飼養(yǎng)于開放系統(tǒng)。14.清潔級動物(Cleananimals,CL)除普通動物應排除的病原外，不攜帶對動物危害大和對科學研究干擾大的病原。飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)或IVC系統(tǒng)中。15.SPF級動物（無特殊病原體動物Specificpathogenfreeanimals）：指動物體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在，但帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。除了普通動物和清潔級動物應排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科研實驗干擾大的病原。來源于無菌動物，飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)或IVC系統(tǒng)中。16.無菌動物(Germfreeanimals,GF)：用現(xiàn)有的檢測技術(shù)在動物體內(nèi)外的任何部位均檢不出任何活的微生物和寄生蟲的動物。無菌動物必須是生來就是無菌的。飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。17.悉生動物（Gnotobioticanimals,GN）指在無菌動物體內(nèi)植入一種或幾種已知微生物的動物。又稱已知菌動物或已知菌叢動物。飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。分為單菌（Monoxenie），雙菌(Dixenie)，三菌(Trixenie)，多菌(Polyxenie)動物。18.人類疾病動物模型10級醫(yī)學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關(guān)材料。19.自發(fā)性疾病動物模型10未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然狀況下所發(fā)生的疾病稱之為自發(fā)性疾病動物模型。20.誘發(fā)性疾病動物模型：以物理的、化學的或生物的致病因素造成動物組織、器官或全身一定的損害，出現(xiàn)類似人類疾病的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的改變稱之為誘發(fā)性疾病動物模型。21.免疫缺陷動物（10級）：由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物。22.轉(zhuǎn)基因動物：用實驗方法將外源基因穩(wěn)定地整合到動物細胞的基因組中，能穩(wěn)定地表達并遺傳給下一代的動物稱之為轉(zhuǎn)基因動物。23.轉(zhuǎn)基因動物模型：利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將人類疾病基因分離出來，再轉(zhuǎn)移到實驗動物，獲得相應疾病的動物模型24.超數(shù)排卵一種不正常的排卵，經(jīng)外源性激素處理的雌性動物，可改變性周期，以致超常數(shù)地排卵，甚至可以超常數(shù)幾十倍。25，品系（Strain）：是實驗動物分類學上專用名詞，采用一定的交配方式繁殖且祖先明確的動物群。三大特征：獨特的生物學特性，相似的外貌特性，穩(wěn)定的遺傳特性。問答題：詳述人員和物品進入屏障系統(tǒng)的移動路向及注意事項（07、08、09、10年試題，12分）★人員的移動路向：一更衣-----淋浴----二更衣-----風淋-----內(nèi)準備室（清潔走廊）-----飼養(yǎng)室或動物實驗室----亞清潔走廊（污染走廊）------一更衣-----外部。物品的移動路向：物品-----高壓滅菌（包裝的消毒物品可以經(jīng)傳遞窗、籠具泡有消毒液的渡槽）-----清潔準備室（內(nèi)準備間）-----清潔物品儲藏室------飼養(yǎng)室或動物實驗室-----廢物經(jīng)包裝處理-----亞清潔走廊-----外部。主要注意事項：隨手關(guān)門，污物包裝處理，消毒液擦洗，實驗完畢后開紫外燈，規(guī)范操作等。影響實驗動物的主要環(huán)境因素。溫度：國標：23±3℃；（1）實驗動物大多數(shù)屬于恒溫動物（2）臨界溫度：（4）溫度對實驗動物的影響：①對繁殖、育成的影響②影響代謝③影響健康與抗感染能力④激發(fā)應激反應⑤對實驗結(jié)果的影響。濕度：國標：Hr：40～70％(50±5％最好)；高溫（30～32℃）濕度Hr高，小鼠由卵蛋白引起的過敏休克死亡率明顯增高；仙臺病毒發(fā)病率增高；臭氣：氨濃度國標：<14mg/M3；NH3：41ppm可引起金魚40％死亡；NH3：25～250ppm可引起大鼠鼻炎、中耳炎、支氣管炎，支原體性肺炎；NH3：25ppm以下對人不產(chǎn)生危害。噪聲：國標：≦60dB（A）（1）對繁殖生長的影響(2)對實驗結(jié)果的影響：金屬鈣化可使血檢明顯變化DBA心跳、呼吸、血壓、明顯增加（3）聽源性痙攣；空氣溶膠：（1）粉塵dust對動物的影響：對皮膚、鼻粘膜、眼、消化、呼吸出現(xiàn)有害作用。（2）落下菌數(shù)：測試方法：5～10㎡范圍內(nèi)，距地面1m,培養(yǎng)皿Φ9cm，內(nèi)置8～10ml營養(yǎng)瓊脂或血瓊脂放置30分鐘，37℃48小時培養(yǎng)。國標：落下菌數(shù)：通環(huán)境：30個/皿；屏障環(huán)境：3個/皿；隔離環(huán)境：無檢出。氣流和風速：國標：①風速（m/s）0.1～0.2②換氣次數(shù)（次/h）普通環(huán)境8~10，屏障環(huán)境15，隔離環(huán)境20～50③壓力梯度：（Pa）屏障環(huán)境,10，隔離環(huán)境100～150；照明：①照度對視網(wǎng)膜可造成障礙；②對離乳率的影響③對繁殖的影響。國標：（1）照度（lx）①工作照度：150～300；②動物照度：15～20；（2）晝夜交替時間（h）12/12或10/14實驗動物設(shè)施分類。按微生物控制程度分類：開放系統(tǒng)：飼養(yǎng)室與外界相通，無空氣凈化裝置。通常為單走廊專用房舍，采用自然通風或設(shè)有排風裝置，有防蟲、防鼠設(shè)施，要求籠具和墊料消毒、使用無污染的飼料，人員進出有一定的防疫措施。這類設(shè)施僅適用于普通級動物。該系統(tǒng)通常分為三個區(qū)域：前區(qū)，包括檢疫室、辦公室、休息室等;控制區(qū)，包括動物飼育室、或動物實驗室、清潔走廊、清潔物品儲存室等;后勤處理室，包括污染走廊、洗刷消毒室、污物處理設(shè)施等。人員、動物和物品原則上按：前區(qū)--控制區(qū)--后勤處理區(qū)的走向運行。屏障系統(tǒng)：設(shè)有恒溫、恒濕、除菌換氣系統(tǒng)的相對封閉環(huán)境，空氣潔凈度達1000級，室內(nèi)保持正壓，有嚴格的微生物控制。主要是用于SPF級動物的飼育。有正壓屏障構(gòu)造、負壓屏障構(gòu)造（生物安全屏障系統(tǒng)）也有用層流架（正壓/負壓）或隔離器作SPF級屏障系統(tǒng)。屏障系統(tǒng)設(shè)施，要求與外界隔離，空氣經(jīng)三級過濾凈化后才進入屏障設(shè)施之內(nèi)，除生物安全屏障系統(tǒng)為負壓以外，通常應保持為正壓，且不低于20--50Pa;出風口設(shè)有防空氣倒流裝置。屏障系統(tǒng)設(shè)有清潔和污染走廊，進入系統(tǒng)的籠具、飼料、飲水、墊料、器械等一切物品都要經(jīng)過嚴格的消毒滅菌，人員進入要經(jīng)淋浴、更衣，使用專用的服裝，進入的動物要有專用包裝，也經(jīng)嚴格的消毒處理。系統(tǒng)內(nèi)的人員、物品和空氣等采用單向固定的流通路線，有呼吸系統(tǒng)疾病和皮膚病的人員不能進入系統(tǒng)內(nèi)。隔離系統(tǒng)：以隔離器為主及其它附屬裝置組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)，送入空氣潔凈度為100級。主要設(shè)備是隔離器，分有正壓和負壓隔離器。隔離器及其輔助裝置共同組成的隔離系統(tǒng)，用于飼養(yǎng)無菌動物和悉生動物。隔離器可置于開放系統(tǒng)內(nèi)運轉(zhuǎn)，則要嚴格控制系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的溫、濕度。操作時，工作人員只能通過隔離器上的橡膠手套來進行飼養(yǎng)或?qū)嶒?。物品是通過包裝消毒后，由滅菌渡艙或傳遞窗傳入;動物是經(jīng)由無菌剖腹產(chǎn)的方法進入;進入隔離器的空氣，應經(jīng)高效過濾，保證隔離器內(nèi)空氣潔凈度達100級，無菌并維持正壓狀態(tài)。根據(jù)實驗需要也可維持負壓狀態(tài)，但需要配置空氣排放裝置，保證空氣排放符合標準。雜交一代動物特點及應用概念：由二個不同近交雜交所生的第一代動物。特點及應用：1.遺傳和表型均質(zhì)性；2.雜交優(yōu)勢；3.遺傳組成的雜合性；4.個體間同基因型:BALB/cXCBA5；5.兩個親本互交，能表達所用品系性別如：C3HXIF1；NZBXNZWF1。命名習慣寫法:母系X父系F1。C57BL/6XDBA/2F1----->B6D2F1B6D2F1與D2B6F1區(qū)別:Y染色體、母性因素:細胞質(zhì)成分,子宮環(huán)境,母乳近交系的特征及應用★（09、10年試題）基因位點純合性遺傳組成同源性，表型一致性長期遺傳穩(wěn)定性遺傳特征的可分辨性遺傳組成的獨特性（個體性）敏感性近交衰退分布廣泛性背景資料和數(shù)據(jù)的完整性人類疾病動物模型的概念、意義、分類★09年試題）概念：醫(yī)學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關(guān)材料。意義：1.避免人體實驗造成的危害；2.可研究平時不易見到的疾??；3.可提供發(fā)病率低,潛伏期和病程長的疾病動物模型；4.克服復雜因素，增加方法學上的可比性；5.樣品收集方便，結(jié)果易于分析；6.有利于更全面地認識疾病的本質(zhì)。分類：1.按產(chǎn)生原因分：(1)誘發(fā)性動物模型(2)自發(fā)性動物模型(3)抗疾病動物模型(4)生物醫(yī)學動物模型；2.按模型種類分：(1)整體動物(2)離體器官和組織(3)細胞株(4)教學模型；3.按系統(tǒng)范圍分：(1)疾病的基本病理過程動物模型(2)各系統(tǒng)疾病動物模型。4.按中醫(yī)藥體系分：陰虛陽虛，氣虛血虛，脾虛腎虛，厥脫癥影響動物模型的因素★致模因素動物：種類，品系，年齡和體重，性別，生理狀況和健康因素.實驗技術(shù)：季節(jié)，晝夜變化，麻醉深度，手術(shù)技巧，實驗給藥，對照組；環(huán)境和營養(yǎng)。裸小鼠（免疫缺陷動物）特點★（07、08、09、10年試題，10分）概述先天性無胸腺，無毛；隱性突變基因在11號染色體上；一個基因兩種表現(xiàn)；已導入到不同的遺傳背景；體液免疫正常；細胞免疫功能低下，異體移植無排斥反應，用于腫瘤移植。生物遺傳特點：(1)無毛；(2)壽命短,死亡率高；(3)發(fā)育不良,新生鼠生長明顯遲緩；(4)繁殖能力差:♀nu/+×♂nu/nu；(5)有肝臟疾??；免疫學特征：(1)先天性胸腺缺失；(2)胸腺依存免疫功能(T細胞)喪失；(3)B細胞生理功能正常,T細胞依存性B細胞功能底下；(4)巨噬細胞活性比對照組(nu/+)高；(5)NK細胞在弱陽性細胞中可能有T前驅(qū)細胞。二十五、嚴重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)小鼠(1)C.B-17近交系小鼠。（2）隱性突變基因scid在16號染色體上.。（3）T,B細胞大大減少（10年考題，選擇題）.臨床表現(xiàn)為低球蛋白血癥,低淋巴細胞血癥.。（4）細胞和體液免疫功能均缺失,但巨噬細胞和NK細胞功能未受影響.。（5）有滲漏現(xiàn)象:主要與DNA修復,抗原刺激,年齡品系,飼養(yǎng)環(huán)境有關(guān).。（6）飼養(yǎng)繁殖:SPF環(huán)境,兩性均可生育,每胎產(chǎn)子弟3~5只。應用：（1）免疫細胞分化和功能研究。（2）異種免疫功能重建。（3）人類自身免疫性疾病及免疫缺陷性疾病。（4）病毒學。（5）腫瘤學。（6）人單克隆抗體生產(chǎn)。簡述影響人體腫瘤裸鼠移植成功的因素人體腫瘤細胞本身特征裸鼠免疫功能狀態(tài)裸鼠背景移植部位和途經(jīng)激素和宿主性別鼠齡裸鼠的健康狀況及潔凈狀況其它因素。簡述小鼠在生物醫(yī)學中的應用（10年試題，10分）★藥物研究：藥物篩選試驗。用于藥物對疾病療效篩選試驗。毒性試驗和安全評價。三致（致畸、致癌、致突變）試驗。生物藥品和制劑的效價測定。病原學研究：小鼠對多種病原體特別是病毒非常敏感，所以適用于這些疾病的發(fā)病機理、臨床癥狀及藥物療效評價。放射學研究：小鼠對放射線的反應與人的反應有可比性，可用來研究照射劑量、輻射效應等。但要注意其對放射性敏感性在冬季和初夏顯著升高，而在初春和夏季則降低。腫瘤學的研究：許多小鼠品系能自發(fā)產(chǎn)生腫瘤。如AKR小鼠白血病發(fā)生率可達90%，C3H小鼠乳腺癌發(fā)病率達90－97%。這些腫瘤的發(fā)生與人體發(fā)生腫瘤機制相近。無胸腺裸小鼠成為活的癌細胞試管。遺傳病和遺傳學研究：許多小鼠品系有自發(fā)性遺傳病。由于小鼠繁殖力強，傳代快，利于遺傳學的研究。免疫學研究：BALB/c小鼠免疫后的B淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合，可進行單克隆抗體的制備和研究。有些具有免疫功能缺陷的突變系小鼠利于腫瘤植入研究，也有利于免疫機制的研究。BALB/c裸鼠Ｔ細胞缺陷；CBA/N小鼠B細胞缺陷;Ｂeige小鼠ＮＫ（自然殺傷）細胞缺陷；SCID嚴重聯(lián)合免疫缺陷小鼠（B、T細胞均缺陷）。計劃生育研究：小鼠繁殖力強、妊娠期短、生長快，適合各種計劃生育研究和避孕藥物的開發(fā)。如日常用小鼠作抗著床、抗生育、抗早孕、抗排卵等實驗。老年病學研究：小鼠壽命短（1.5－3年），晚期老年病多，腫瘤發(fā)病率高，其發(fā)病機理與人類疾病類似。呼吸和消化系統(tǒng)疾病研究：小鼠在氫氧化氨氣霧的刺激下有咳嗽反應，可用此特性研究鎮(zhèn)咳藥物的效果。中毒性肝炎、肝硬化和胰腺炎均可在小鼠身上復制成功。內(nèi)分泌疾病研究。<補>不宜采用小鼠制作動物模型的實驗研究★研究體溫變化的試驗,因為小鼠體溫變化不穩(wěn)定；慢性支氣管炎的試驗,因為小鼠氣管及支氣管腺不發(fā)達；催吐試驗,因為小鼠無嘔吐反應；動脈粥樣硬化試驗,因為小鼠不形成動脈粥樣硬化。簡述大鼠在醫(yī)學研究中的應用（07、08、09年試題，8分）★藥物學研究：大鼠在藥理學研究方面的應用極為廣泛，幾乎所有藥物的藥理研究都使用大鼠。大鼠易誘發(fā)神經(jīng)病，則測試神經(jīng)病藥物效力；大鼠血壓和血管阻力對藥物反應敏感，則評價心血管藥效；大鼠踝關(guān)節(jié)對炎癥反應敏感，則常用以篩選抗關(guān)節(jié)炎藥物。行為學研究：大鼠體形大小合適，行為表現(xiàn)多樣，情緒反應敏感，對新環(huán)境易適應，具有探索性、易訓練、對懲罰和暗示有敏感性等特性，所以在行為學和行為異常的研究中用得很多腫瘤學研究：具有自發(fā)腫瘤的大鼠品系遠較小鼠少，但容易誘發(fā)各種大鼠腫瘤，是腫瘤研究最常用的實驗動物之一內(nèi)分泌學研究和內(nèi)分泌疾病研究：由于大鼠的垂體易摘除，便常用于研究腺體對全身生理生化功能的調(diào)節(jié)。大鼠有相應的自發(fā)或誘發(fā)的內(nèi)分泌失調(diào)的疾病模型，如糖尿病、甲狀腺疾病、尿崩癥、高血脂癥、應激性胃潰瘍等（5）傳染病研究：是研究支氣管肺炎、副傷寒的重要實驗動物。是流行性出血熱的自然宿主。故應定期進行血清學檢查。不宜作慢性支氣管炎模型及去痰平喘藥研究。營養(yǎng)、代謝性疾病研究：大鼠對營養(yǎng)物質(zhì)缺乏敏感，可發(fā)生典型缺乏癥狀，是營養(yǎng)學研究使用最多、最早的實驗動物。常用于維生素或蛋白質(zhì)缺乏及氨基酸和鈣、磷代謝的研究。（7）肝膽研究：無膽囊，但膽總管較大，方便收集膽汁，這特殊的特點正適合肝膽功能的研究。大鼠肝切除60-70%后，仍有再生能力，可用于肝外科實驗老年學及老年病研究：年老體衰時，心理和生理上的疾病很多心血管疾病研究：可用直接血壓描記法研究降壓藥；以灌流肢體血管或離體心臟研究心血管藥物；研究毒扁豆堿的升壓作用。已培育了幾種高血壓品系大鼠，如SHR/Oka大鼠，血壓常180-200mmHg，其生育力、壽命尚可。正常對照組WKY大鼠，血壓140-150mmHg環(huán)境污染與人類健康的研究：大鼠的肺比較脆弱，空氣污染、重金屬污染可使大鼠很快相應的疾病癥狀口腔醫(yī)學研究：用變異鏈球菌接種于大鼠口腔，然后喂給含蔗糖食物，大鼠牙齒上的琺瑯質(zhì)蛀損似人的齲齒，可用來研究齲齒的防治方法。放射醫(yī)學研究計劃生育研究中醫(yī)中藥研究簡述家兔在醫(yī)學生物學中的應用★免疫學研究：家兔的最大用處是生產(chǎn)抗體，制備高效價和特異性強的免疫血清。大多數(shù)免疫血清是采用家兔來制備的；2）發(fā)熱研究及熱原試驗：家兔的體溫變化靈敏，最易產(chǎn)生發(fā)熱反應，發(fā)熱反應典型、恒定。注射某些藥品和生物制品或異源蛋白也可引起發(fā)熱反應。眼科研究：大眼睛，眼球體積約5－6立方厘米，重約3－4克，便于進行手術(shù)操作和觀察?？蓮椭平悄ゑ：勰Ｐ停M行眼前房內(nèi)移植術(shù)等。膽固醇代謝和動脈粥樣硬化癥的研究：家兔是最早用于這方面研究的動物，容易制作動物模型。兔子對外源性膽固醇吸收率達75－90%，并且高脂血癥清除能力較低。而大鼠吸收率僅40%。兔子用高脂高膽固醇飼料飼喂二個月后，就出現(xiàn)了典型的高脂血癥、主動脈粥樣硬化斑塊、冠狀動脈粥樣病變。心血管和肺心病研究：家兔頸神經(jīng)血管和胸腔有特殊結(jié)構(gòu)，是所以很適合用于急性心血管實驗?？蓮椭菩难芎头涡牟〉母鞣N動物模型：心肌梗塞、缺血性瀕危心肌、心源性休克、缺血性心律紊亂、心律失常、冠心病、肺水腫等?？捎猛玫碾x體心臟等方法研究藥物對血管和心臟的作用。皮膚反應試驗：可用于化妝品、芥子氣、凍傷、燙傷等對皮膚局部反應的試驗。傳染病和微生物學研究：對許多病毒和致病菌非常敏感。如對過敏、免疫、狂犬病、天花、腦炎、梅毒等的研究生殖生理和避孕藥篩選及胚胎學的研究：誘發(fā)排卵后，排卵時間可固定，排卵數(shù)也可從卵巢表面上鮮紅色突起數(shù)加以計算，因此易于得到同期胚胎。遺傳性疾病和生理代謝失常的研究：兔子的軟骨發(fā)育不全、遺傳性骨質(zhì)疏松癥、遺傳性青光眼、脊柱裂、低淀粉酶血癥、維生素A缺乏癥、腦小癥等與人類的遺傳病相似?？谇豢茖W研究：兔可作為口腔黏膜病、牙周病及整形材料毒性試驗的對象。還可用于唇裂、腭裂等口腔畸形的研究。以小鼠為例，簡述顯微注射技術(shù)的過程（07、08年考試題目，10分）基本程序：1.目的基因的制備與純化；2.卵供體母鼠和假孕母鼠的準備；3.超排卵與取卵；4.基因顯微注射；5.受精卵移植；6.目的基因的表達整合鑒定和檢測

；7.建系同步獲得供體雌鼠和受體雌鼠。取4-6周齡的雌鼠、腹腔注射孕馬血清促性腺激素和人促絨毛膜性腺激素，與正常雄鼠交配，獲供體雌鼠。取6周齡或以上的雌鼠，與經(jīng)過結(jié)扎雄鼠交配，獲受體雌鼠。在注射人絨毛膜促性腺激素10-13h后采集受精卵。剖腹處置有陰道栓的雌鼠。剪下輸卵管和一小段子宮置于平衡液，在解剖鏡下找出輸卵管傘部，用帶針頭的注射器將受精卵沖出。用顯微注射法將純化的外源基因?qū)胧芫训男墼春藘?nèi)。將顯微注射后鑒定為存活的受精卵（或培養(yǎng)過的存活胚胎）移植到假孕母鼠的輸卵管（或子宮）內(nèi)，其一部分移植卵能繼續(xù)生長發(fā)育成個體。鑒定子代鼠中外源基因的整合和表達。轉(zhuǎn)基因動物品系的建立。用幼鼠組織或幼鼠尾巴用PCR或dotblot、southernblot等方法分析定。簡述超數(shù)排卵的方法及其影響因素★（07、08、09年考試題目，6分）超數(shù)排卵：是一種不正常的排卵，經(jīng)外源激素處理的雌性動物，可以改變性周期，以致超常數(shù)的排卵，甚至可以超常數(shù)十幾倍。常用激素：PMSGHCGFSHLH超排方法。第一天腹腔注射PMSG。第三或第四天腹腔注射HCG。(1)于第一日中午先向小鼠腹腔內(nèi)注入5一l0單位的PMSG；(2)過48小時(第三天中午)腹腔內(nèi)注入5—10單位的人hCG(注射后11—13小時后排卵)；(3)令雌雄動物一對一的合籠交配；動物半夜交尾，如未發(fā)生交配，兩周后可再重用，但成功率下降；(4)檢查陰栓(第四日晨)；檢查陰栓可判定是否受精；如已受精則出現(xiàn)陰栓。劑量:小鼠5~20IU兔30~60IU。影響因素:動物,激素生物活性,發(fā)情期,氣候季節(jié)。超數(shù)排卵的意義：采用超數(shù)排卵可大大增加每次的排卵數(shù)量；在科研上可以在短時間內(nèi)取得大量的卵和胚胎，可以滿足胚胎工程研究、遺傳工程研究和建立胚胎庫的需要；大大縮短了研究周期；在生產(chǎn)中，可以提高優(yōu)秀動物的繁殖數(shù)量，提高產(chǎn)量，增加經(jīng)濟效益。簡述影響動物營養(yǎng)需求的因素★（07、08年考試題目，10分）遺傳因素：不同品種、不同品系的動物其營養(yǎng)需求不同。因遺傳基因的表達程度不同而影響營養(yǎng)需求。近交系動物對蛋白質(zhì)的需求要比封閉群動物要高。如ODS大鼠因基因突變造成L－谷氨酸氧化酶的缺乏，而無法合成VC，飼料中必需添加VC。生理狀況：動物在不同的生理狀況過程中對營養(yǎng)需求會有所不同。如產(chǎn)后發(fā)情配種的小鼠，如帶仔多，營養(yǎng)供應不上，其受精卵會停留在輸卵管而不能在子宮著床，結(jié)果是懷孕期大大地延長。環(huán)境因素：就恒溫動物來說，若長期在低溫下，動物必須產(chǎn)生較多的熱能以維持體溫的恒定，飼料中就要增加能量原料。如長期在高溫環(huán)境下，則動物的采食量就會下降，為了保證動物的正常的生長，就把飼料的營養(yǎng)素濃度提高。微生物狀態(tài)：微生物在腸道中棲生，產(chǎn)生如水溶性VB、K及氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)。通常這些物質(zhì)很少被機體再吸收利用，除非有食糞便行為再攝取。食糞行為與動物的種類、飼料成分、飼養(yǎng)條件的不同而發(fā)生。因此設(shè)計實驗時就應考慮是否允許食糞行為的發(fā)生。研究條件：實驗操作如外科手術(shù)或于飼料中添加測試藥物時，會造成動物緊張或改變飼料的適口性，進而影響飼料的采食。在限制性采食的實驗中應調(diào)整飼料配方，增加部分養(yǎng)分的濃度，以補充因攝食減少而導致不足的部分。營養(yǎng)成分的相互作用：某些營養(yǎng)素攝取量增加時往往影響另外營養(yǎng)素的吸收和利用。如能量和蛋白。不同的礦物