分區(qū)劃線法課件

細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)1培養(yǎng)基常用玻璃器材的準(zhǔn)備培養(yǎng)基的成分和作用培養(yǎng)基的種類(lèi)培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基常用玻璃器材的準(zhǔn)備2細(xì)菌的接種與培養(yǎng)無(wú)菌技術(shù)細(xì)菌檢驗(yàn)的操作需在無(wú)菌室或超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。無(wú)菌室、超凈工作臺(tái)使用前后需進(jìn)行消毒。細(xì)菌檢驗(yàn)使用的物品使用前后需嚴(yán)格滅菌標(biāo)本的采集無(wú)菌試管、平皿的使用細(xì)菌的接種與培養(yǎng)無(wú)菌技術(shù)3細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)4細(xì)菌接種法平板劃線接種法：

★目的：使混合的細(xì)菌呈單個(gè)分散生長(zhǎng)，形成單個(gè)菌落，以便獲得純菌。

★方法：★分區(qū)劃線法：適用于含菌量較多的標(biāo)本★連續(xù)劃線法：適用于含菌量較少的標(biāo)本液體培養(yǎng)基接種法穿刺接種法:用于觀察細(xì)菌動(dòng)力斜面接種法傾注培養(yǎng)法:用于細(xì)菌計(jì)數(shù)細(xì)菌接種法平板劃線接種法：5分區(qū)劃線法：本次試驗(yàn)要求同學(xué)首先掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的平板劃線接種法。注意：在每次劃線前要燒灼接種環(huán)，以殺滅環(huán)上留剩的菌液。分區(qū)劃線法：本次試驗(yàn)要求同學(xué)首先掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的平板劃線接6圖2-3分區(qū)劃線法示意圖

三段分區(qū)法四段分區(qū)法圖2-3分區(qū)劃線法示意圖

三段分區(qū)法7

五段分區(qū)法孵育后情況

五段分區(qū)法孵育后情況8分區(qū)劃線法(3區(qū))第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)分區(qū)劃線法(3區(qū))第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第9連續(xù)劃線法連續(xù)劃線法10分區(qū)劃線法課件11細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：★培養(yǎng)溫度：37℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）★培養(yǎng)時(shí)間：18～24h細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：12斜面接種法及接種后菌落生長(zhǎng)示意圖

斜面接種法及接種后菌落生長(zhǎng)示意圖

13取菌的方法

取菌的方法

14接種后菌落生長(zhǎng)示意圖菌苔(lawn)接種后菌落生長(zhǎng)示意圖菌苔(lawn)15【實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察記錄】細(xì)菌生長(zhǎng)情況的觀察觀察瓊脂平板表面生長(zhǎng)的各種菌落，注意其大小、形狀、邊緣、表面結(jié)構(gòu)、透明度、顏色等性狀?！緦?shí)驗(yàn)結(jié)果觀察記錄】細(xì)菌生長(zhǎng)情況的觀察16細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落★定義：指單個(gè)細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，形成單一肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集團(tuán)。★菌落特征：大小、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤(rùn)度、黏度、溶血性★菌落類(lèi)型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落17菌落的三個(gè)類(lèi)型：

1.光滑型菌落（SmoothtypeColony）：又稱(chēng)S型2.粗糙型菌落（RoughtypeColony）：又稱(chēng)R型3.粘液型菌落（MucoidtypeColony）又稱(chēng)M型菌落的三個(gè)類(lèi)型：

1.光滑型菌落（SmoothtypeC18菌落（S型）cultureplate菌落（S型）cultureplate19菌落(R型)菌落(R型)20細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象混濁沉淀：多見(jiàn)于鏈狀排列的細(xì)菌菌膜：多見(jiàn)于厭氧菌細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象混濁21細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴(kuò)散生長(zhǎng)，穿刺線邊緣模糊。無(wú)鞭毛細(xì)菌：只沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線邊緣清晰。細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線22單菌落（clone)菌落（R型）菌苔(lawn)細(xì)菌的群體形態(tài)單菌落（clone)菌落（R型）菌苔(lawn)細(xì)菌的群體形23菌落菌落24菌落與菌苔菌落與菌苔25液體培養(yǎng)時(shí)的群體形態(tài)：液體培養(yǎng)時(shí)的群體形態(tài)：26細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象27細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有動(dòng)力現(xiàn)象無(wú)動(dòng)力現(xiàn)象細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有動(dòng)力無(wú)動(dòng)力28細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)29培養(yǎng)基常用玻璃器材的準(zhǔn)備培養(yǎng)基的成分和作用培養(yǎng)基的種類(lèi)培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基常用玻璃器材的準(zhǔn)備30細(xì)菌的接種與培養(yǎng)無(wú)菌技術(shù)細(xì)菌檢驗(yàn)的操作需在無(wú)菌室或超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。無(wú)菌室、超凈工作臺(tái)使用前后需進(jìn)行消毒。細(xì)菌檢驗(yàn)使用的物品使用前后需嚴(yán)格滅菌標(biāo)本的采集無(wú)菌試管、平皿的使用細(xì)菌的接種與培養(yǎng)無(wú)菌技術(shù)31細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)32細(xì)菌接種法平板劃線接種法：

★目的：使混合的細(xì)菌呈單個(gè)分散生長(zhǎng)，形成單個(gè)菌落，以便獲得純菌。

★方法：★分區(qū)劃線法：適用于含菌量較多的標(biāo)本★連續(xù)劃線法：適用于含菌量較少的標(biāo)本液體培養(yǎng)基接種法穿刺接種法:用于觀察細(xì)菌動(dòng)力斜面接種法傾注培養(yǎng)法:用于細(xì)菌計(jì)數(shù)細(xì)菌接種法平板劃線接種法：33分區(qū)劃線法：本次試驗(yàn)要求同學(xué)首先掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的平板劃線接種法。注意：在每次劃線前要燒灼接種環(huán)，以殺滅環(huán)上留剩的菌液。分區(qū)劃線法：本次試驗(yàn)要求同學(xué)首先掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的平板劃線接34圖2-3分區(qū)劃線法示意圖

三段分區(qū)法四段分區(qū)法圖2-3分區(qū)劃線法示意圖

三段分區(qū)法35

五段分區(qū)法孵育后情況

五段分區(qū)法孵育后情況36分區(qū)劃線法(3區(qū))第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)分區(qū)劃線法(3區(qū))第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第37連續(xù)劃線法連續(xù)劃線法38分區(qū)劃線法課件39細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：★培養(yǎng)溫度：37℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）★培養(yǎng)時(shí)間：18～24h細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：40斜面接種法及接種后菌落生長(zhǎng)示意圖

斜面接種法及接種后菌落生長(zhǎng)示意圖

41取菌的方法

取菌的方法

42接種后菌落生長(zhǎng)示意圖菌苔(lawn)接種后菌落生長(zhǎng)示意圖菌苔(lawn)43【實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察記錄】細(xì)菌生長(zhǎng)情況的觀察觀察瓊脂平板表面生長(zhǎng)的各種菌落，注意其大小、形狀、邊緣、表面結(jié)構(gòu)、透明度、顏色等性狀?！緦?shí)驗(yàn)結(jié)果觀察記錄】細(xì)菌生長(zhǎng)情況的觀察44細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落★定義：指單個(gè)細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，形成單一肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集團(tuán)。★菌落特征：大小、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤(rùn)度、黏度、溶血性★菌落類(lèi)型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落45菌落的三個(gè)類(lèi)型：

1.光滑型菌落（SmoothtypeColony）：又稱(chēng)S型2.粗糙型菌落（RoughtypeColony）：又稱(chēng)R型3.粘液型菌落（MucoidtypeColony）又稱(chēng)M型菌落的三個(gè)類(lèi)型：

1.光滑型菌落（SmoothtypeC46菌落（S型）cultureplate菌落（S型）cultureplate47菌落(R型)菌落(R型)48細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象混濁沉淀：多見(jiàn)于鏈狀排列的細(xì)菌菌膜：多見(jiàn)于厭氧菌細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象混濁49細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴(kuò)散生長(zhǎng)，穿刺線邊緣模糊。無(wú)鞭毛細(xì)菌：只沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線邊緣清晰。細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線50單菌落（clone)菌落（R型）菌苔(lawn)細(xì)菌的群體形態(tài)單菌落（c