四環(huán)類抗生素課件

第一節(jié)概述1第一節(jié)概述1一、簡(jiǎn)介定義：

一類具有并四苯結(jié)構(gòu)的廣譜抗生素。由放線菌產(chǎn)生的一類抗生素（金霉素、土霉素、四環(huán)素、地美環(huán)素、美他環(huán)素等）基本骨架為并四苯。2一、簡(jiǎn)介定義：一類具有并四苯結(jié)構(gòu)的廣譜抗生素。2

碳核：

氫化并四苯（四環(huán)）

基本結(jié)構(gòu)：

H45176101112可變部分3H45176101112可變部分31四環(huán)素：C22H24N2O8；R=R2=H,R1=CH32土霉素：C22H24N2O9；R=H,R1=CH3,R2=OH3金霉素：C22H23ClN2O8;R=Cl,R1=CH3,R2=H4去甲基金霉素：C21H21N2O8;R=Cl,R1=H,R2=H41四環(huán)素：C22H24N2O8；R=R2天然四環(huán)素類結(jié)構(gòu)：

四環(huán)素

465465四環(huán)素的命名6-甲基-4-（二甲氨基）-3，6，10，12，12a-五羥基-1，11-二氧代-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氫-2-并四苯甲酰胺625a4534a6a7891010a1112a111a126四環(huán)素的命名6-甲基-4-（二甲氨基）-3，6，10，12，

土霉素：(5α-OH-四環(huán)素）

金霉素：（7-Cl-四環(huán)素）H65644H7H65644H7C6-OH：是不穩(wěn)定性的主要原因，并且不是必須基團(tuán)，利用土霉素去掉C6-OH，即多西環(huán)素,穩(wěn)定性增加，因此目前是四環(huán)素類藥物中的首選藥。半合成四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)改造(Doxycycline)(Minocycline)多西環(huán)素的6位碳上無(wú)羥基，可避免發(fā)生酸性消除反應(yīng)和堿性條件反應(yīng)；并且由于5位碳上存在羥基，可以與4位的二甲氨基間形成氫鍵，使4位在酸性條件下的差向異構(gòu)化反應(yīng)難以發(fā)生。故多西環(huán)素對(duì)酸、堿都比較穩(wěn)定。8C6-OH：是不穩(wěn)定性的主要原因，并且不是必須基團(tuán)，利用土霉四環(huán)素類構(gòu)效關(guān)系結(jié)構(gòu)中的四環(huán)是活性必須，A環(huán)中1-4位的取代基是抗菌活性基本藥效團(tuán)，改變其結(jié)構(gòu)活性消失，僅可在酰胺基上的氫進(jìn)行前藥修飾。ABCD625a4534a6a7891010a1112a111a129四環(huán)素類構(gòu)效關(guān)系結(jié)構(gòu)中的四環(huán)是活性必須，A環(huán)中構(gòu)效關(guān)系C11、C1位的雙酮系統(tǒng)結(jié)構(gòu)對(duì)抗菌活性至關(guān)重要。5、6、7、8、9位的取代基為非活性必須基團(tuán)，對(duì)其改造可改變其抗菌活性、化學(xué)穩(wěn)定性和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。ABCD625a4534a6a7891010a1112a111a1210構(gòu)效關(guān)系C11、C1位的雙酮系統(tǒng)結(jié)構(gòu)對(duì)抗菌活性二、發(fā)現(xiàn)1948年由金色鏈絲菌的培養(yǎng)液中分離出金霉素1950年從皸裂鏈絲菌培養(yǎng)液中分離出土霉素金霉素土霉素11二、發(fā)現(xiàn)1948年由金色鏈絲菌的培養(yǎng)液中分離出金霉素金霉素1953年發(fā)現(xiàn)將金霉素Chlotetracycline脫去氯原子，可得到四環(huán)素隨后發(fā)現(xiàn)用在不含氯的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的鏈霉菌菌株發(fā)酵可生產(chǎn)四環(huán)素Tetracycline60年代~70年代，研究開(kāi)發(fā)了半合成四環(huán)類：甲烯土霉素、強(qiáng)力霉素和二甲胺四環(huán)素等。金霉素四環(huán)素121953年發(fā)現(xiàn)將金霉素Chlotetracycline脫去1、抗菌譜四環(huán)類早期主要用于治療對(duì)耐青霉素菌引起的感染有相當(dāng)?shù)寞熜?。本類抗生素，?duì)各種G+細(xì)菌、除銅綠色假單胞菌以外的G?細(xì)菌、螺旋體、支原體、立克次氏體和衣原體都有很好的抗菌活性。目前絕大多數(shù)大腸桿菌和痢疾桿菌，半數(shù)以上金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、鏈球菌等均呈現(xiàn)抗藥性，因而主要用于支原體、立克次氏體和衣原體感染癥。三、四環(huán)素類藥理131、抗菌譜三、四環(huán)素類藥理13藥物的抗菌活性為：米諾環(huán)素＞多西環(huán)素＞美他環(huán)素＞地美環(huán)素＞四環(huán)素＞土霉素。主要優(yōu)點(diǎn)是：抗菌譜廣、吸收好、副作用小、價(jià)格低廉、不引起過(guò)敏反應(yīng)。但又可能引起嚴(yán)重的胃腸道反應(yīng)和嘔吐等。14藥物的抗菌活性為：米諾環(huán)素＞多西環(huán)素＞美他環(huán)素＞地美環(huán)素＞四

2、作用機(jī)理：四環(huán)素類抗生素(Tetracyclines)這類抗生素可與敏感菌的70S核蛋白體中的30S亞基結(jié)合，從而抑制其蛋白質(zhì)合成。

152、作用機(jī)理：四環(huán)素類抗生素(Tetracyclin影響抗菌作用的主要因素：①藥物透過(guò)革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁或陰性菌細(xì)胞膜（即第一道穿透屏障）的難易；②對(duì)酶（第二道屏障）的穩(wěn)定性；③對(duì)抗菌作用靶位（PBPS）的親和性。細(xì)菌的耐藥方式：細(xì)胞壁外膜滲透性的改變。使抗生素失活：如鈍化酶使抗生素作用靶點(diǎn)改變：如PBPs結(jié)構(gòu)改變，使藥物對(duì)其不敏感。細(xì)菌產(chǎn)生藥泵細(xì)菌產(chǎn)生核蛋白體保護(hù)蛋白四環(huán)素類藥物的耐藥性16四環(huán)素類藥物的耐藥性163、副作用四環(huán)素類抗生素的急性毒性很低，但副作用較多，有胃腸道障礙、誘發(fā)機(jī)會(huì)感染和維生素缺乏、肝障礙、粒狀白細(xì)胞減少等。另外，對(duì)胎兒有致畸作用，對(duì)幼兒可致骨發(fā)育障礙和齒色素沉積，故孕婦和嬰幼兒禁用。含Ca、Mg、Al、Fe的食物降低其口服吸收率。1717第二節(jié)四環(huán)類抗生素理化性質(zhì)一、物理性質(zhì)。1.發(fā)色團(tuán)：酮基和烯醇基共軛雙鍵系統(tǒng)，決定顏色和紫外特征吸收：265nm~350nm。黃色結(jié)晶粉末、味苦。2.功能團(tuán)：二甲胺基（pKa=9.5）,酚羥基（pKa=7.5），三羰基甲烷系統(tǒng)（pKa=3.3）18第二節(jié)四環(huán)類抗生素理化性質(zhì)一、物理性質(zhì)。183.溶解度：pH<4，pH＞8時(shí)，可得高濃度水溶液，過(guò)剩的酸能防止水解。pH=4.5~7.2時(shí)難溶于水。四環(huán)素的pI=5.4。193.溶解度：pH<4，pH＞8時(shí)，可得高濃度水溶液，過(guò)剩結(jié)晶黃色結(jié)晶物質(zhì)。從水中可得到含有6分子結(jié)晶水的四環(huán)素，從含有機(jī)水溶劑中可以得到3分子結(jié)晶水的四環(huán)素。20結(jié)晶黃色結(jié)晶物質(zhì)。20保存特性：低溫、密閉、防潮、避光保存。4.穩(wěn)定性：固體干品相當(dāng)穩(wěn)定，可存放5年以上，效價(jià)無(wú)明顯下跌。溶液，均不穩(wěn)定。對(duì)氧化劑包括空氣中的O2都不穩(wěn)定，堿性時(shí)特別易氧化，顏色變深。在干燥條件下固體比較穩(wěn)定，遇日光變色。21保存特性：低溫、密閉、防潮、避光保存。4.穩(wěn)定性：固體干品相722722二.化學(xué)性質(zhì)1、脫水化合物：pH＜2A、脫水四環(huán)素B、脫水四環(huán)類抗生素活性很低，色澤較深，在酸堿性溶液中都穩(wěn)定。C、去甲基金霉素因不含叔羥基，僅含仲羥基，在酸溶液中穩(wěn)定，脫水需要強(qiáng)烈條件下進(jìn)行。可用于測(cè)定四環(huán)素和金霉素。23二.化學(xué)性質(zhì)1、脫水化合物：pH＜22、差向化合物：（pH=2~6）A、4位不對(duì)稱碳原子發(fā)生差向異構(gòu)化。B、差向異構(gòu)化后，生物活性大大降低。pH＜2或pH＞9時(shí)差向化速度很小。C、陰離子存在，特別是高價(jià)有機(jī)酸，差向化速度增加很快。高價(jià)無(wú)機(jī)酸（硫酸除外），也會(huì)使差向化速度增大。（估計(jì)是價(jià)數(shù)越高，空間排斥影響越大。因此差向化越快）。D、差向化后在酸堿中都很穩(wěn)定，比旋度負(fù)值較大，水中溶解度也較大，但水溶液在紫外光中吸收度較低。242、差向化合物：（pH=2~6）24酸性條件兩個(gè)反應(yīng)可同時(shí)發(fā)生最終生成脫水差向異構(gòu)化產(chǎn)物25酸性條件兩個(gè)反應(yīng)可同時(shí)發(fā)生最終生成脫水差向異構(gòu)化產(chǎn)物25土霉素由于5位羥基與4位二甲氨基之間形成氫鍵，4位差向異構(gòu)化反應(yīng)難以發(fā)生。金霉素由于7位氯原子的空間排斥作用，4位差向異構(gòu)化反應(yīng)更易發(fā)生。土霉素金霉素26土霉素由于5位羥基與4位二甲氨基之間形成氫鍵，4位差向異構(gòu)化事件：“梅花K”流毒社會(huì)藥監(jiān)部門(mén)立即對(duì)梅花K黃柏膠囊進(jìn)行了檢驗(yàn)。株洲市藥檢所在對(duì)該市各藥店所銷售的梅花K黃柏膠囊進(jìn)行檢驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)藥里有10％到20％含量的四環(huán)素，這是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有的成分。27事件：“梅花K”流毒社會(huì)藥監(jiān)部門(mén)立即對(duì)梅花K黃柏膠囊進(jìn)行了案例黃柏的主要有效成分是什么？代理方為什么要求廠家添加四環(huán)素？減肥茶添加芬氟拉明28案例黃柏的主要有效成分是什么？28

3.堿性下降解反應(yīng)：pH＞8時(shí)。轉(zhuǎn)化成無(wú)活性異構(gòu)化合物：6位羥基形成富電子基團(tuán)（氧負(fù)離子）與11位羰基發(fā)生親核反應(yīng)，C環(huán)打開(kāi)生成內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的異四環(huán)素293.堿性下降解反應(yīng)：pH＞8時(shí)。轉(zhuǎn)化成無(wú)活性異構(gòu)化合物土霉素異土霉素土霉酸30土霉素異土霉素土霉酸304、形成螯合物：（1）與很多高價(jià)金屬離子（ⅡA，ⅢB）形成螯合物。螯合物的位置是二酮系統(tǒng)。螯合物的穩(wěn)定性次序?yàn)椋篎e3+>Al3+>Ca2+>Co2+>Mn2+>Mg2+

，其中以Ca―Mg復(fù)鹽溶解度較低。–鈣或鎂離子形成不溶性的鈣鹽或鎂鹽–鐵離子形成紅色絡(luò)合物–鋁離子形成黃色絡(luò)合物314、形成螯合物：31四環(huán)素與鈣離子的絡(luò)合物黃色絡(luò)合物：沉積在骨骼和牙齒上小兒和孕婦：應(yīng)慎用或禁用

–小兒牙齒變黃色

–孕婦產(chǎn)兒可發(fā)生牙齒變色、骨骼生長(zhǎng)抑制32四環(huán)素與鈣離子的絡(luò)合物黃色絡(luò)合物：沉積在骨骼和牙齒上32（2）Ca―Mg復(fù)鹽在醇（低級(jí)醇）中的溶解度。隨著CaCl2濃度的增加而增加，而其鹽酸鹽則隨CaCl2濃度的增加而減少。這是由堿制備鹽酸鹽的最佳方法.

2酮系統(tǒng)為酸性基團(tuán)，沉淀應(yīng)在pH8.5～9.0中進(jìn)行。這是提取的重要依據(jù)之一；（3）四環(huán)素能與尿素形成等當(dāng)量復(fù)合物。屬四環(huán)素的特異性反應(yīng)。33（2）Ca―Mg復(fù)鹽在醇（低級(jí)醇）中的溶解度。隨著CaCl5、熒光反應(yīng)：四環(huán)素類抗生素在紫外光下都能產(chǎn)生熒光。這個(gè)性質(zhì)可用于紙上層析和薄層層析中的斑點(diǎn)顯色;6、氧化降解：接觸氧化劑，會(huì)被氧化成低碳鏈化合物。久貯顏色更深。345、熒光反應(yīng)：34第三節(jié)四環(huán)類抗生素發(fā)酵技術(shù)35第三節(jié)四環(huán)類抗生素發(fā)酵技術(shù)35一、生產(chǎn)菌種1、金色鏈霉菌2、育種36一、生產(chǎn)菌種1、金色鏈霉菌363737二、種子制備及其控制要點(diǎn)38二、種子制備及其控制要點(diǎn)381、孢子制備斜面培養(yǎng)基：麩皮5％，硫酸鎂0.03％，磷酸氫鉀0.02％，磷酸氫氨0.05％，瓊脂2％。金色鏈霉菌在保存和繁殖過(guò)程中容易發(fā)生變異。391、孢子制備斜面培養(yǎng)基：麩皮5％，硫酸鎂0.03％，磷酸氫鉀成分種子發(fā)酵玉米淀粉4.06.5玉米粉―――――――2.0花生餅粉2.02.6蛋白胨0.50.5氯化鎂0.0250.03硫酸銨0.30.6錄化鈉0.20.35碳酸鈣0.40.5玉米漿―――――――1.0酵母粉0.60.3磷酸二氫鉀0.00250.008油0.30.25淀粉酶0.00250.0340成分種子發(fā)酵玉米淀粉4.06.5玉米粉―――――――2.0花2、種子制備培養(yǎng)基：淀粉、蛋白胨、花生餅粉。30-32℃培養(yǎng)24-27h。通氣和攪拌對(duì)種子生長(zhǎng)有很大的影響。412、種子制備培養(yǎng)基：淀粉、蛋白胨、花生餅粉。30-32℃培養(yǎng)三、影響發(fā)酵的因素及工藝控制要點(diǎn)1、培養(yǎng)基C源：淀粉、可溶性淀粉、葡萄糖、糖蜜及其油脂。也可用玉米淀粉。N源：花生餅粉、黃豆餅粉、棉籽餅粉、硫酸銨、尿素等。抑氯劑。無(wú)機(jī)鹽：磷酸鹽最重要。鐵離子的影響：消泡劑培養(yǎng)基的滅菌質(zhì)量。42三、影響發(fā)酵的因素及工藝控制要點(diǎn)1、培養(yǎng)基422、培養(yǎng)條件的影響1、溫度：32℃2、pH：菌體生長(zhǎng)6.0-6.8，四環(huán)素合成最適5.8-6.0。3、溶氧的影響。4、二氧化碳的影響。2-8mL/100mL,適合四環(huán)素的合成。432、培養(yǎng)條件的影響1、溫度：32℃43第三節(jié)、四環(huán)類抗生素提取精制一、原理：結(jié)合結(jié)構(gòu)式進(jìn)行分析.二、過(guò)程：44第三節(jié)、四環(huán)類抗生素提取精制一、原理：結(jié)合結(jié)構(gòu)式進(jìn)行分析.4方法：1、沉淀法：利用在等電點(diǎn)溶解度最低的特點(diǎn)進(jìn)行沉淀；利用形成Ca--Mg復(fù)鹽沉淀。2、溶媒萃取法：在堿性下與一些長(zhǎng)鏈季胺堿形成復(fù)鹽，難溶于水，而易溶于溶媒中，即所謂帶溶劑提取法。如：氯代烷基三甲胺RN(CH3)3Cl，R=8~22個(gè)C原子；另一類帶溶劑是吡啶鹽具下列結(jié)構(gòu)，R=8~18個(gè)C原子。溶媒有丁醇、戊醇、甲基異丁酮、BA、醋酸戊酯等。3、離子交換法：基于在酸性下呈一價(jià)陽(yáng)離子，可用磺酸基樹(shù)脂提取。在堿性下洗脫（NH3.H2O）。（酸性下洗脫困難）4、精制：四環(huán)素利用其能與尿素形成特異性反應(yīng)的復(fù)鹽得以精制。其余品種可利用重結(jié)晶或重萃取而得以精制。45方法：454646三、四環(huán)素提取方法及過(guò)程：酸化及預(yù)處理原理若先加ZnSO4，則與草酸反應(yīng)，當(dāng)加入黃血鹽，草酸鋅需先解離后才能與黃血鹽反應(yīng),這樣就要較長(zhǎng)時(shí)間。亞鐵氰化鋅鉀有吸附作用，可吸附發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)（白色膠狀物）和微細(xì)顆粒。47三、四環(huán)素提取方法及過(guò)程：酸化及預(yù)處理原理47思考題1、四環(huán)類抗生素的抗菌譜。2、四環(huán)類抗生素的抗菌作用機(jī)理。3、四環(huán)類抗生素的化學(xué)性質(zhì)。48思考題1、四環(huán)類抗生素的抗菌譜。48第一節(jié)概述49第一節(jié)概述1一、簡(jiǎn)介定義：

一類具有并四苯結(jié)構(gòu)的廣譜抗生素。由放線菌產(chǎn)生的一類抗生素（金霉素、土霉素、四環(huán)素、地美環(huán)素、美他環(huán)素等）基本骨架為并四苯。50一、簡(jiǎn)介定義：一類具有并四苯結(jié)構(gòu)的廣譜抗生素。2

碳核：

氫化并四苯（四環(huán)）

基本結(jié)構(gòu)：

H45176101112可變部分51H45176101112可變部分31四環(huán)素：C22H24N2O8；R=R2=H,R1=CH32土霉素：C22H24N2O9；R=H,R1=CH3,R2=OH3金霉素：C22H23ClN2O8;R=Cl,R1=CH3,R2=H4去甲基金霉素：C21H21N2O8;R=Cl,R1=H,R2=H521四環(huán)素：C22H24N2O8；R=R2天然四環(huán)素類結(jié)構(gòu)：

四環(huán)素

4653465四環(huán)素的命名6-甲基-4-（二甲氨基）-3，6，10，12，12a-五羥基-1，11-二氧代-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氫-2-并四苯甲酰胺625a4534a6a7891010a1112a111a1254四環(huán)素的命名6-甲基-4-（二甲氨基）-3，6，10，12，

土霉素：(5α-OH-四環(huán)素）

金霉素：（7-Cl-四環(huán)素）H65644H55H65644H7C6-OH：是不穩(wěn)定性的主要原因，并且不是必須基團(tuán)，利用土霉素去掉C6-OH，即多西環(huán)素,穩(wěn)定性增加，因此目前是四環(huán)素類藥物中的首選藥。半合成四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)改造(Doxycycline)(Minocycline)多西環(huán)素的6位碳上無(wú)羥基，可避免發(fā)生酸性消除反應(yīng)和堿性條件反應(yīng)；并且由于5位碳上存在羥基，可以與4位的二甲氨基間形成氫鍵，使4位在酸性條件下的差向異構(gòu)化反應(yīng)難以發(fā)生。故多西環(huán)素對(duì)酸、堿都比較穩(wěn)定。56C6-OH：是不穩(wěn)定性的主要原因，并且不是必須基團(tuán)，利用土霉四環(huán)素類構(gòu)效關(guān)系結(jié)構(gòu)中的四環(huán)是活性必須，A環(huán)中1-4位的取代基是抗菌活性基本藥效團(tuán)，改變其結(jié)構(gòu)活性消失，僅可在酰胺基上的氫進(jìn)行前藥修飾。ABCD625a4534a6a7891010a1112a111a1257四環(huán)素類構(gòu)效關(guān)系結(jié)構(gòu)中的四環(huán)是活性必須，A環(huán)中構(gòu)效關(guān)系C11、C1位的雙酮系統(tǒng)結(jié)構(gòu)對(duì)抗菌活性至關(guān)重要。5、6、7、8、9位的取代基為非活性必須基團(tuán)，對(duì)其改造可改變其抗菌活性、化學(xué)穩(wěn)定性和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。ABCD625a4534a6a7891010a1112a111a1258構(gòu)效關(guān)系C11、C1位的雙酮系統(tǒng)結(jié)構(gòu)對(duì)抗菌活性二、發(fā)現(xiàn)1948年由金色鏈絲菌的培養(yǎng)液中分離出金霉素1950年從皸裂鏈絲菌培養(yǎng)液中分離出土霉素金霉素土霉素59二、發(fā)現(xiàn)1948年由金色鏈絲菌的培養(yǎng)液中分離出金霉素金霉素1953年發(fā)現(xiàn)將金霉素Chlotetracycline脫去氯原子，可得到四環(huán)素隨后發(fā)現(xiàn)用在不含氯的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的鏈霉菌菌株發(fā)酵可生產(chǎn)四環(huán)素Tetracycline60年代~70年代，研究開(kāi)發(fā)了半合成四環(huán)類：甲烯土霉素、強(qiáng)力霉素和二甲胺四環(huán)素等。金霉素四環(huán)素601953年發(fā)現(xiàn)將金霉素Chlotetracycline脫去1、抗菌譜四環(huán)類早期主要用于治療對(duì)耐青霉素菌引起的感染有相當(dāng)?shù)寞熜?。本類抗生素，?duì)各種G+細(xì)菌、除銅綠色假單胞菌以外的G?細(xì)菌、螺旋體、支原體、立克次氏體和衣原體都有很好的抗菌活性。目前絕大多數(shù)大腸桿菌和痢疾桿菌，半數(shù)以上金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、鏈球菌等均呈現(xiàn)抗藥性，因而主要用于支原體、立克次氏體和衣原體感染癥。三、四環(huán)素類藥理611、抗菌譜三、四環(huán)素類藥理13藥物的抗菌活性為：米諾環(huán)素＞多西環(huán)素＞美他環(huán)素＞地美環(huán)素＞四環(huán)素＞土霉素。主要優(yōu)點(diǎn)是：抗菌譜廣、吸收好、副作用小、價(jià)格低廉、不引起過(guò)敏反應(yīng)。但又可能引起嚴(yán)重的胃腸道反應(yīng)和嘔吐等。62藥物的抗菌活性為：米諾環(huán)素＞多西環(huán)素＞美他環(huán)素＞地美環(huán)素＞四

2、作用機(jī)理：四環(huán)素類抗生素(Tetracyclines)這類抗生素可與敏感菌的70S核蛋白體中的30S亞基結(jié)合，從而抑制其蛋白質(zhì)合成。

632、作用機(jī)理：四環(huán)素類抗生素(Tetracyclin影響抗菌作用的主要因素：①藥物透過(guò)革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁或陰性菌細(xì)胞膜（即第一道穿透屏障）的難易；②對(duì)酶（第二道屏障）的穩(wěn)定性；③對(duì)抗菌作用靶位（PBPS）的親和性。細(xì)菌的耐藥方式：細(xì)胞壁外膜滲透性的改變。使抗生素失活：如鈍化酶使抗生素作用靶點(diǎn)改變：如PBPs結(jié)構(gòu)改變，使藥物對(duì)其不敏感。細(xì)菌產(chǎn)生藥泵細(xì)菌產(chǎn)生核蛋白體保護(hù)蛋白四環(huán)素類藥物的耐藥性64四環(huán)素類藥物的耐藥性163、副作用四環(huán)素類抗生素的急性毒性很低，但副作用較多，有胃腸道障礙、誘發(fā)機(jī)會(huì)感染和維生素缺乏、肝障礙、粒狀白細(xì)胞減少等。另外，對(duì)胎兒有致畸作用，對(duì)幼兒可致骨發(fā)育障礙和齒色素沉積，故孕婦和嬰幼兒禁用。含Ca、Mg、Al、Fe的食物降低其口服吸收率。6517第二節(jié)四環(huán)類抗生素理化性質(zhì)一、物理性質(zhì)。1.發(fā)色團(tuán)：酮基和烯醇基共軛雙鍵系統(tǒng)，決定顏色和紫外特征吸收：265nm~350nm。黃色結(jié)晶粉末、味苦。2.功能團(tuán)：二甲胺基（pKa=9.5）,酚羥基（pKa=7.5），三羰基甲烷系統(tǒng)（pKa=3.3）66第二節(jié)四環(huán)類抗生素理化性質(zhì)一、物理性質(zhì)。183.溶解度：pH<4，pH＞8時(shí)，可得高濃度水溶液，過(guò)剩的酸能防止水解。pH=4.5~7.2時(shí)難溶于水。四環(huán)素的pI=5.4。673.溶解度：pH<4，pH＞8時(shí)，可得高濃度水溶液，過(guò)剩結(jié)晶黃色結(jié)晶物質(zhì)。從水中可得到含有6分子結(jié)晶水的四環(huán)素，從含有機(jī)水溶劑中可以得到3分子結(jié)晶水的四環(huán)素。68結(jié)晶黃色結(jié)晶物質(zhì)。20保存特性：低溫、密閉、防潮、避光保存。4.穩(wěn)定性：固體干品相當(dāng)穩(wěn)定，可存放5年以上，效價(jià)無(wú)明顯下跌。溶液，均不穩(wěn)定。對(duì)氧化劑包括空氣中的O2都不穩(wěn)定，堿性時(shí)特別易氧化，顏色變深。在干燥條件下固體比較穩(wěn)定，遇日光變色。69保存特性：低溫、密閉、防潮、避光保存。4.穩(wěn)定性：固體干品相770722二.化學(xué)性質(zhì)1、脫水化合物：pH＜2A、脫水四環(huán)素B、脫水四環(huán)類抗生素活性很低，色澤較深，在酸堿性溶液中都穩(wěn)定。C、去甲基金霉素因不含叔羥基，僅含仲羥基，在酸溶液中穩(wěn)定，脫水需要強(qiáng)烈條件下進(jìn)行?？捎糜跍y(cè)定四環(huán)素和金霉素。71二.化學(xué)性質(zhì)1、脫水化合物：pH＜22、差向化合物：（pH=2~6）A、4位不對(duì)稱碳原子發(fā)生差向異構(gòu)化。B、差向異構(gòu)化后，生物活性大大降低。pH＜2或pH＞9時(shí)差向化速度很小。C、陰離子存在，特別是高價(jià)有機(jī)酸，差向化速度增加很快。高價(jià)無(wú)機(jī)酸（硫酸除外），也會(huì)使差向化速度增大。（估計(jì)是價(jià)數(shù)越高，空間排斥影響越大。因此差向化越快）。D、差向化后在酸堿中都很穩(wěn)定，比旋度負(fù)值較大，水中溶解度也較大，但水溶液在紫外光中吸收度較低。722、差向化合物：（pH=2~6）24酸性條件兩個(gè)反應(yīng)可同時(shí)發(fā)生最終生成脫水差向異構(gòu)化產(chǎn)物73酸性條件兩個(gè)反應(yīng)可同時(shí)發(fā)生最終生成脫水差向異構(gòu)化產(chǎn)物25土霉素由于5位羥基與4位二甲氨基之間形成氫鍵，4位差向異構(gòu)化反應(yīng)難以發(fā)生。金霉素由于7位氯原子的空間排斥作用，4位差向異構(gòu)化反應(yīng)更易發(fā)生。土霉素金霉素74土霉素由于5位羥基與4位二甲氨基之間形成氫鍵，4位差向異構(gòu)化事件：“梅花K”流毒社會(huì)藥監(jiān)部門(mén)立即對(duì)梅花K黃柏膠囊進(jìn)行了檢驗(yàn)。株洲市藥檢所在對(duì)該市各藥店所銷售的梅花K黃柏膠囊進(jìn)行檢驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)藥里有10％到20％含量的四環(huán)素，這是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有的成分。75事件：“梅花K”流毒社會(huì)藥監(jiān)部門(mén)立即對(duì)梅花K黃柏膠囊進(jìn)行了案例黃柏的主要有效成分是什么？代理方為什么要求廠家添加四環(huán)素？減肥茶添加芬氟拉明76案例黃柏的主要有效成分是什么？28

3.堿性下降解反應(yīng)：pH＞8時(shí)。轉(zhuǎn)化成無(wú)活性異構(gòu)化合物：6位羥基形成富電子基團(tuán)（氧負(fù)離子）與11位羰基發(fā)生親核反應(yīng)，C環(huán)打開(kāi)生成內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的異四環(huán)素773.堿性下降解反應(yīng)：pH＞8時(shí)。轉(zhuǎn)化成無(wú)活性異構(gòu)化合物土霉素異土霉素土霉酸78土霉素異土霉素土霉酸304、形成螯合物：（1）與很多高價(jià)金屬離子（ⅡA，ⅢB）形成螯合物。螯合物的位置是二酮系統(tǒng)。螯合物的穩(wěn)定性次序?yàn)椋篎e3+>Al3+>Ca2+>Co2+>Mn2+>Mg2+

，其中以Ca―Mg復(fù)鹽溶解度較低。–鈣或鎂離子形成不溶性的鈣鹽或鎂鹽–鐵離子形成紅色絡(luò)合物–鋁離子形成黃色絡(luò)合物794、形成螯合物：31四環(huán)素與鈣離子的絡(luò)合物黃色絡(luò)合物：沉積在骨骼和牙齒上小兒和孕婦：應(yīng)慎用或禁用

–小兒牙齒變黃色

–孕婦產(chǎn)兒可發(fā)生牙齒變色、骨骼生長(zhǎng)抑制80四環(huán)素與鈣離子的絡(luò)合物黃色絡(luò)合物：沉積在骨骼和牙齒上32（2）Ca―Mg復(fù)鹽在醇（低級(jí)醇）中的溶解度。隨著CaCl2濃度的增加而增加，而其鹽酸鹽則隨CaCl2濃度的增加而減少。這是由堿制備鹽酸鹽的最佳方法.

2酮系統(tǒng)為酸性基團(tuán)，沉淀應(yīng)在pH8.5～9.0中進(jìn)行。這是提取的重要依據(jù)之一；（3）四環(huán)素能與尿素形成等當(dāng)量復(fù)合物。屬四環(huán)素的特異性反應(yīng)。81（2）Ca―Mg復(fù)鹽在醇（低級(jí)醇）中的溶解度。隨著CaCl5、熒光反應(yīng)：四環(huán)素類抗生素在紫外光下都能產(chǎn)生熒光。這個(gè)性質(zhì)可用于紙上層析和薄層層析中的斑點(diǎn)顯色;6、氧化降解：接觸氧化劑，會(huì)被氧化成低碳鏈化合物。久貯顏色更深。825、熒光反應(yīng)：34第三節(jié)四環(huán)類抗生素發(fā)酵技術(shù)83第三節(jié)四環(huán)類抗生素發(fā)酵技術(shù)35一、生產(chǎn)菌種1、金色鏈霉菌2、育種84一、生產(chǎn)菌種1、金色鏈霉菌368537二、種子制備及其控制要點(diǎn)86二、種子制備及其控制要點(diǎn)381、孢子制備斜面培養(yǎng)基：麩皮5％，硫酸鎂0.03％，磷酸氫鉀0.02％，磷酸氫氨0.05％，瓊脂2％。金色鏈霉菌在保存和繁殖過(guò)程中容易發(fā)生變異。871、孢子制備斜面培養(yǎng)基：麩