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文檔簡介
學必求其心得,業(yè)必貴于專精【講――高效整合】專題16生物技術實踐考向1微生物的培養(yǎng)與利用1.講高考(1)考綱導讀微生物培養(yǎng)、選擇及利用。(2)命題展望預計2017年高考命題會結合相關實例觀察微生物的培養(yǎng)及利用。(3)真題重現(xiàn)1.(2016年江蘇卷,25)(多項選擇)漆酶屬于木質降解酶類,在環(huán)境修復、農業(yè)生產等領域有著廣泛用途.以下列圖是分別、純化和保存漆酶菌株的過程,相關表達正確的選項是( )A.生活污水中含有大量微生物,是分別產漆酶菌株的首選樣品B.優(yōu)選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,經(jīng)過菌落學必求其心得,業(yè)必貴于專精特點挑出產漆酶的菌落C.在涂布平板上長出的菌落,在經(jīng)過劃線進一步純化D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在常溫下長期保存菌株【答案】BC2.(2016年新課標Ⅰ卷,39)空氣中的微生物在重力等作用下,能夠必然程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以認識教室內不同樣高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟以下:①配置培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作無菌平板;③設置空白比較組和若干實驗組,進行相關操作;④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù).回答以下問題:(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮本源于_________________。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分X平常是_________________。2)步驟③中,實驗組的操作是_________________。3)若在某次檢查中,某一實驗組平板上菌落平均學必求其心得,業(yè)必貴于專精數(shù)為36個/平板,而空白比較組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落,這種結果說明在此次檢查中出現(xiàn)了_________________現(xiàn)象.若將30(即36-6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法_______________(填“正確”或“不正確”)?!敬鸢浮浚?)牛肉膏、蛋白胨瓊脂2)將各實驗組平板分別放置在教室不同樣高度的地址上,開蓋裸露一段時間(3)污染不正確【剖析】(1)依照配制培養(yǎng)基的成分可知:該培養(yǎng)基中微生物所需的氮本源于牛肉膏、蛋白胨。由于該實驗是“用平板收集教室空氣中的微生物",所使用的培養(yǎng)基應為固體培養(yǎng)基,配制時,需加入凝固劑,據(jù)此推知:該培養(yǎng)基中的成分X平常是瓊脂.2.講基礎1.培養(yǎng)基1)看法:人們依照微生物對營養(yǎng)物質的不同樣需求,配制出供其生長生殖的營養(yǎng)基質。2)營養(yǎng)組成:一般都含有水、碳源、氮源和無機學必求其心得,業(yè)必貴于專精鹽。其他,還需要滿足微生物生長對pH、氧氣以及特別營養(yǎng)物質的要求。3)種類:依照物理性質可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基.2.無菌技術1)含義:指在培養(yǎng)微生物的操作中,所有防范雜菌污染的方法。2)要點:防范外來雜菌的入侵。(3)不同樣對象的無菌操作方法3.大腸桿菌的純化培養(yǎng)1)制備固體培養(yǎng)基:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。2)純化大腸桿菌①平板劃線法:是經(jīng)過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將齊聚的菌種漸漸稀釋分別到培養(yǎng)基的表面。②稀釋涂布平板法:是將菌液進行一系列的梯度稀釋,爾后將不同樣稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基學必求其心得,業(yè)必貴于專精的表面,進行培養(yǎng)。4.菌種的保存方法①關于頻頻使用的菌種,能夠采用臨時珍藏的方法。②關于需要長遠保存的菌種,能夠采用甘油管藏的方法。5.土壤中分解尿素的細菌的分別與計數(shù)1)分別原理:土壤中的細菌之因此能分解尿素,是由于它們能合成脲酶,這種物質在把尿素分解成無機物的過程中起到催化作用。2)統(tǒng)計菌落數(shù)目:統(tǒng)計樣品中的活菌一般用稀釋涂布平板法。(3)實驗流程:土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察→細菌的計數(shù)。6.分解纖維素的微生物的分別(1)纖維素酶①組成:纖維素酶是一種復合酶,一般認為它最少包括三種組分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。②作用2)纖維素分解菌的優(yōu)選①原理學必求其心得,業(yè)必貴于專精②優(yōu)選方法:剛果紅染色法,即經(jīng)過可否產生透明圈來優(yōu)選纖維素分解菌。③培養(yǎng)基:以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。④實驗流程土壤取樣(富含纖維素的環(huán)境)→選擇培養(yǎng)(用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng),以增加纖維素分解菌的濃度)→梯度稀釋(制備系列稀釋液)→涂布平(板將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上)→優(yōu)選產生透明圈的菌落。3.講典例【例1】微生物的實驗室培養(yǎng)要進行嚴格的滅菌和消毒,以下理解不正確的選項是()A.滅菌是指殺滅環(huán)境中的所有微生物的細胞、芽孢和孢子B.任何消毒方法一般都不能夠消滅微生物的孢子和芽孢C.灼燒法滅菌主要對象時金屬用具,也能夠是玻璃用具.常用滅菌方法有灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法和紫外線滅菌法學必求其心得,業(yè)必貴于專精【答案】D【一鼓作氣】如圖是微生物平板劃線表示圖,劃線的序次為1、2、3、4、5,以下操作方法正確的選項是(
)A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌B.劃線操作須在火焰進步行C.在5地域中才能夠獲得所需菌落D.在1、2、3、4、5地域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌【答案】D【剖析】進行平板劃線操作從前,用將接種環(huán)在酒精燈火焰進步行灼燒滅菌,A錯誤;平板劃線操作應在火焰旁進行,不能夠在火焰進步行,B錯誤;由題圖可知,5地域是最后一個地域,有可能在5地域獲得所需要的菌落,在4地域也有可能獲得所需要的菌落,C錯誤;在1、2、3、地域中劃線前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌,保證每次劃線的菌種來自上一地域的尾端,5地域劃線前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌目的是防范雜菌污染,1地域劃線后進行灼燒滅菌是防范污染環(huán)境及操作者,D正確.【例2】在鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中,經(jīng)常加入學必求其心得,業(yè)必貴于專精水溶性的羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)。以下表達錯誤的是( )A.羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)主要為細菌供應氮源B.剛果紅染液能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物C.剛果紅可在倒平板時加入,加入前需要將剛果紅溶液滅菌D.纖維素酶最少包括三種組分,即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶【答案】A【一鼓作氣】以下相關生物技術實踐的相關知識敘述中,錯誤的選項是( )A.利用剛果紅培養(yǎng)基上可否形成透明圈來優(yōu)選纖維素分解菌B.制作腐乳所用的毛霉是一種耐高鹽的微生物C.在微生物的分別和培養(yǎng)實驗中,對劃線后或涂布好的平板應倒置培養(yǎng).采用稀釋涂布平板法時,每個稀釋度涂布三個平板且總合涂布一個無菌水平板【答案】B學必求其心得,業(yè)必貴于專精4.講方法1.培養(yǎng)基的配制原則(1)目的要明確:配制時應依照微生物的種類、培養(yǎng)目的等確定配制的培養(yǎng)基種類.(2)營養(yǎng)要協(xié)調:注意各種營養(yǎng)物質的濃度和比率。(3)pH要合適:細菌為6。5~7。5,放線菌為7.5~8。5,真菌為5.0~6.0,培養(yǎng)不同樣微生物所需pH不同樣。2.微生物對主要營養(yǎng)物質的需求特點不同樣種類的微生物代謝特點不同樣,因此對培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的需求也不同樣.1)自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質是無機鹽,碳源可來自傲氣中的CO2,氮源可由含氮無機鹽供應。2)異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質主若是有機物,即碳源必定由含碳有機物供應,氮源也主若是由有機物供應,部分異養(yǎng)型微生物也能夠利用無機氮源。3.消毒和滅菌的辨析項結果常用應用范圍條件目方法較為平易僅殺死物體表面煮沸或內部的部分對消毒平常用品消的物理或人體有害的微生法毒化學方法物巴氏不耐高溫的學必求其心得,業(yè)必貴于專精消毒液體法化學用酒精擦拭藥劑雙手,用氯氣消毒消毒水源法灼燒滅菌接種工具法殺死物體內外所干熱玻璃器皿、金滅滅菌強烈的理屬工具菌有的微生物,包法化因素括芽孢和孢子高壓蒸汽培養(yǎng)基及容滅菌器的滅菌法4.選擇培養(yǎng)基的制作方法1)在培養(yǎng)基所有營養(yǎng)成分具備的前提下,加入物質:依照某些微生物對某些物質的抗性,在培養(yǎng)基中加入某些物質,以控制不需要的微生物,促進所需要的微生物生長,如培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽時可控制多種細菌的生長,但不影響金黃色葡萄球菌的生長,從而可將該菌分別出來;而在培養(yǎng)基中加入青霉素時可控制細菌、放線菌的生長,從而分別獲得酵母菌和霉菌.學必求其心得,業(yè)必貴于專精(2)經(jīng)過改變培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分達到分別微生物的目的:培養(yǎng)基中缺少氮源時,可分別自生固氮微生物,非自生固氮微生物因缺少氮源而無法生計;培養(yǎng)基中若缺少有機碳源則異養(yǎng)微生物無法生計,而自養(yǎng)微生物可利用空氣中的CO2制造有機物生計。3)利用培養(yǎng)基的特定化學成分分別特定微生物:如當石油是唯一碳源時,可控制不能夠利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生計,從而分別出能除掉石油污染的微生物.(4)經(jīng)過某些特別環(huán)境分別微生物:如在高鹽環(huán)境中可分別耐鹽菌,其他菌在鹽濃度高時易失水而不能夠生計;在高溫環(huán)境中可分別獲得耐高溫的微生物,其他微生物在高溫環(huán)境中因酶失活而無法生計。5.稀釋涂布平板法計數(shù)微生物的注意問題用稀釋涂布平板法計數(shù)微生物時,要求選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù)。解題時易出現(xiàn)以下誤解:(1)只獲得1個菌落數(shù)在30~300的平板是錯誤的.錯誤的原因是不吻合實驗的重還原則,易碰到偶發(fā)因素的影響。2)獲得3個或3個以上菌落數(shù)在30~300的平板,也不用然正確,這可能有兩種情況:①不同樣平板間差異較大,如獲得3個平板,菌落數(shù)分別為230、34、240,誠然菌落數(shù)均在“30300"~之間,這也是不正確的,由于“34”與“230”“240”差異太大,學必求其心得,業(yè)必貴于專精應重新實驗找出原因。②不同樣平板之間差異不大,是吻合要求的,用其平均值作為估計的最后結果。可見,其實不是只要獲得3個“菌落數(shù)在30~300的平板”即可,而應該是涂布的同一稀釋度的平板均吻合“菌落數(shù)在30~300的平板”且無較大差異,說明實驗操作合格,才能依照計算公式進行計算??枷?生物技術在食品加工及其他方面的應用1.講高考1)考綱導讀植物組織中有效成分的提取、果酒和果醋的制作.2)命題展望預計2017年高考命題會以給定資料綜合觀察果酒和果醋的制作及植物有效成分的提取等知識。(3)真題重現(xiàn)1.(2016年江蘇卷,7)以下關于中學“腐乳的制作"實驗,表達正確的選項是()A.加鹽主若是為了調治水分,利于毛霉生長B.加料酒主若是為了滅菌,防范腐乳變質C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌.實驗室制作的腐乳不宜直接食用【答案】D【剖析】加鹽主若是為了控制微生物生長,防范豆腐腐敗變質,A錯誤;加料酒主要為了使腐乳擁有獨到的學必求其心得,業(yè)必貴于專精香味,B錯誤;發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉,C錯誤;實驗室制作的腐乳可能滅菌不完整,不宜直接食用,D正確.2.(2016年新課標Ⅱ卷,39)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的,回答以下為題:1)酵母菌的呼吸代謝路子以下列圖。圖中過程①和是蘋果醋生產的第一階段,在酵母菌細胞的______________中進行,其產物乙醇與_________________試劑反應表現(xiàn)灰綠色,這一反應可用于乙醇的檢驗;過程③在酵母菌細胞的________________中進行,與無氧條件對照,在有氧條件下,酵母菌的增值速度________________。(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產生的乙醇轉變?yōu)榇姿岬倪^程,依照醋酸桿菌的呼吸作用類型,該過程需要在______________條件下才能完成.3)在生產過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同樣,第一階段的溫度__________(填“低于"或“高于”)第二階段。4)醋酸桿菌屬于_________核生物,其細胞結構中(填“含有"或“不含有")線粒體.【答案】(1)細胞質基質重鉻酸甲線粒體快學必求其心得,業(yè)必貴于專精(2)有氧(3)低于(4)原不含有2)醋酸桿菌是一種好氧菌,在氧氣充分的條件下才能進行旺盛的生命活動,因此將第一階段產生的乙醇轉變?yōu)榇姿岬倪^程,需要在有氧條件下才能完成。(3)第一階段即果酒的制作,所控制的溫度范圍是18~25℃,第二階段即果醋的制作所控制的溫度范圍是30~35℃,因此第一階段的溫度低于第二階段的。4)醋酸桿菌屬于原核生物,其細胞結構中不含線粒體等復雜的細胞器。2.講基礎1.制作原理與發(fā)酵條件果酒制作果醋制作菌酵母菌醋酸菌種菌種附著在葡萄皮上的變酸酒表面的菌膜來野生型酵母菌源學必求其心得,業(yè)必貴于專精有氧條件下,酵母菌氧氣、糖源充分時:經(jīng)過有氧呼吸大量C6H12O6+2O2錯誤!發(fā)生殖:C6H12O6+6O22CH3COOH+2CO2酵錯誤!6CO2+6H2O;無+2H2O;過氧條件下,酵母菌通缺少糖源、氧氣充分程過無氧呼吸產生酒時:精:C6H12O6錯誤!C2H5OH+O2錯誤!2C2H5OH+2CO2CH3COOH+H2O溫一般酒精發(fā)酵18~25℃,生殖最適為最適為30~35℃度20℃左右氣先期:需氧,后期:體無氧需要充分的氧氣時10~12天7~8天間2.制作流程學必求其心得,業(yè)必貴于專精3.制作時的注意事項(1)資料的選擇與辦理:選擇新鮮的葡萄,榨汁前先將葡萄沖洗,并除掉枝梗,以防葡萄汁流失及污染。沖洗以洗去灰塵為目的,且不要太干凈,以防洗去野生型酵母菌。2)防范發(fā)酵液被污染的方法①榨汁機要沖洗干凈并晾干.②發(fā)酵瓶要洗凈并用體積分數(shù)為70%的酒精消毒,或用洗潔精沖洗.③裝入葡萄汁后要封閉充氣口.4.腐乳的制作(1)制作原理毛霉等微生物產生蛋白酶、脂肪酶,分解有機物。①蛋白質→氨基酸+小分子的肽。②脂肪→甘油+脂肪酸。2)制作流程讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。3)影響條件①溫度:控制在15~18℃.②資料的用量:控制鹽的用量,酒精含量控制在12%左右。③配制鹵湯:鹵湯的成分及作用。5.泡菜的制作學必求其心得,業(yè)必貴于專精(1)菌種附著在蔬菜上的乳酸菌。(2)制作原理:在無氧條件下,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。反應式:C6H12O6→2C3H6O3。(3)制作流程(4)測定亞硝酸鹽的含量①檢測原理-a。NO2+對氨基苯磺酸→反應物;反應物+N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽→玫瑰紅色染料.b。亞硝酸鹽溶液的濃度高,顏色深些;溶液濃度低,顏色淺些。②檢測步驟:配制溶液→制備標準顯色液→制備樣品辦理液→比色.6.植物有效成分的提取1)提取玫瑰精油實驗①方法:水蒸氣蒸餾法。②實驗流程:鮮玫瑰花加清水,水蒸氣蒸餾→油水混合物→加入NaC1分別油層→加入無水Na2SO4除水→過濾玫瑰油(2)提取橘皮精油的實驗學必求其心得,業(yè)必貴于專精①方法:一般采用壓迫法。②實驗流程:石灰水浸泡→漂洗→壓迫→過濾→靜置→再次過濾→橘皮油(3)胡蘿卜素的提?、俸}卜生性質:不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機溶劑。②提取方法及流程a。方法:萃取法,石油醚最合適作萃取劑。b.實驗流程:胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素。c。判斷方法:紙層析法。3.講典例【例1】如圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程表示圖,以下說法錯誤的選項是()A.制作泡菜宜采用新鮮的蔬菜或其他原料,原因是它們所含亞硝酸鹽的含量低B.發(fā)酵不同樣時期亞硝酸鹽的含量會發(fā)生變化C.發(fā)酵過程中應及時測定亞硝酸鹽的含量,及時檢測以掌握取食泡菜的最正確機會D.測定亞硝酸鹽含量的方法是紙層析法學必求其心得,業(yè)必貴于專精【答案】D【一鼓作氣】以下相關腐乳制作的表達中,正確的是()①毛霉產生的蛋白酶只能將豆腐中的蛋白質分解為氨基酸②用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形③豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲④決定腐乳特殊口味的是鹵湯⑤加鹽能夠析出豆腐的水分,使豆腐塊變硬⑥鹵湯中酒的含最應控制在30%左右,酒精含量過低,不足以控制微生物A.①②③④
B.②③④⑤C.③④⑤⑥【答案】B
D.①④⑤⑥【剖析】制作腐乳時,毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸,產生的脂肪酶能將脂肪分解成甘油和脂肪酸,①錯誤;用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形;因此需要加鹽析出豆腐中的水分,②⑤正確;豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲,嚴格地說是直立菌絲,豆腐中還有爬行菌絲,③正確;鹵湯直接關系到腐乳的色、香、味,④正確;鹵湯中含酒量應該控制在12%左右,⑥錯誤,應選B。【例2】以下與果酒和果醋制作相關的說法,不正確的是()學必求其心得,業(yè)必貴于專精A.醋酸菌在氧氣充分時才能進行旺盛的生命活動,發(fā)酵裝置需保持通氣狀態(tài)B.在果酒中加人醋酸菌進行醋酸發(fā)酵,發(fā)酵溫度應控制在18~25℃C.制作果酒和果醋時都需用70%的酒精對發(fā)酵瓶消毒并注意無菌操作.在變酸的果酒的表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量生殖形成的【答案】B【一鼓作氣】制取橘皮精油的過程中,需先后進行兩次過濾,則橘皮精油為()A.經(jīng)過第一次過濾后的濾液B.經(jīng)過第一次、第二次過濾后的濾液C.經(jīng)過第二次過濾后的濾液.經(jīng)過第一次過濾后靜置后辦理的上清液和第二次過濾后的濾液【答案】D【剖析】制取橘皮精油的過程中,為了提高出油率,第一將橘皮去水干燥,爾后用石灰水浸泡,經(jīng)漂洗、壓迫獲得壓迫液后,用一般布袋過濾除掉固體物和殘渣學必求其心得,業(yè)必貴于專精(第一次過濾),對濾液進行離心進一步除掉較小的殘留固體物,再用分液漏斗或吸管將上層的橘皮油分別出來,爾后在5℃~10℃下靜置5~7天,使果蠟等雜質積淀,用吸管吸出上層澄清橘皮油,其他部分經(jīng)過濾紙過濾(第二次過濾),濾液與吸出的上層橘皮油合并后成為最后的橘皮精油.故橘皮精油是經(jīng)過第一次過濾后靜置辦理的上清液和第二次過濾后的濾液,D正確。4.講方法1.果酒和果醋的制作成功的要點點項目說明資料的選選擇新鮮的葡萄,榨汁前先將葡萄進行沖洗,擇與辦理除掉枝梗,以防葡萄汁流失及污染①榨汁機和發(fā)酵瓶等都需沖洗干凈,且發(fā)酵防范發(fā)酵瓶要進行消毒;液被污染②沖洗葡萄時要先沖洗后除枝梗;③發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管而不用直管①葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時,要留約1/3的空間,目的是先讓酵母菌進行有氧呼吸,迅速生殖,耗盡O2后再進行酒精發(fā)酵,防范發(fā)酵過程中發(fā)酵條件產生的CO2造成發(fā)酵液的溢出;的控制②嚴格控制溫度:18~25℃利于酵母菌的繁殖和酒精發(fā)酵;30~35℃利于醋酸菌的生殖和果醋的發(fā)酵;③充氣:酒精發(fā)酵為無氧發(fā)酵,需封
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