色譜柱的制備

色譜柱的制備

指導老師：甘黎明學生：趙玉勇蘭州石化職業(yè)技術(shù)學院石油化學工程系工業(yè)分析與檢驗實驗目的

了解色譜柱的制備過程。練習用真空泵抽法裝填色譜柱。

實驗原理

1.的分離是在色譜柱中進行的，制備一根分離性能好的色譜柱，是完成色譜分析的鍵。2.一根填充柱的步驟：1.選擇固定相（選擇固定液、載體、確定配比）;2.涂漬固定液3.裝填柱子4.老化柱子。

儀器和試劑

儀器;90色譜儀、真空泵、分液漏斗、圓底燒瓶、量筒、燒杯、不銹鋼柱2mx￠4mm、玻璃棉、紗布等。試劑：鄰苯二甲酸二壬酯、6201紅色硅藻土(60~80目)、丙酮。

操作步驟

制備一根2mx￠4mm不銹鋼螺旋柱

固定液：鄰苯二甲酸二壬酯；載體：6201紅色硅藻土(60~80目)；配比：5%。

清洗和干燥色譜柱管

用20%左右的氫氧化鈉溫熱溶液反復抽洗柱管3~4次，用自來水抽洗，再用10%鹽酸抽洗至中性。試漏烘干。將柱子一端堵住，另一端通入氣體，用肥皂水檢漏。若無漏氣，再將柱管用蒸餾水清洗至無氯離子，抽去水后放入烘箱中120°烘干。

載體預處理

稱取100g60~80目的6201紅色硅藻土擔體于400ml燒杯中，加入6mol/L的鹽酸溶液，浸泡20~30min，然后用水洗至中性，抽濾后轉(zhuǎn)移入蒸發(fā)皿中，在105°c烘箱內(nèi)烘干至4~6h。取出冷卻后，用60~80目標準分子篩出去過粗或過細的篩分，并保存在干燥器中備用。

（若為已經(jīng)預處理過的市售載體，則不必酸洗，只要烘干即可）。

確定固定液、擔體及溶劑量

①．先計算出柱管的容積在過量20%~40%即為載體的量（Ms）;

柱管容積：Vc=лd2L/4=3.14×0.42×200/4=25.6(ml);

實際用量:Vs=25.6×(1+0.4)=35.84mL=36mL。

用量筒量取粒度合格的擔體36mL，并稱出擔體的質(zhì)量（ms）。

②．由擔體的量根據(jù)配比確定固定液的質(zhì)量（mL）。

配比即固定液與固定相之比，配比為5%，即：

Ml=Ms×（5/100）

在分析天平上用100mL燒杯稱出mlg固定液。

溶劑用量:一般以體積計，為載體體積的0.8~1.2倍即可。

涂漬固定液

活化擔體-配制溶液-涂漬-除溶劑-干燥

裝填柱子

在柱子的一端塞上一小段玻璃棉，用一塊紗布包扎后，通過三通活塞開關(guān)和緩沖瓶接真空泵減壓抽氣，柱管另一端接一小漏斗，向漏斗中連續(xù)加固定相，并用小木棒輕輕敲打柱管，邊抽邊敲，不要使固定相斷流。當固定相不在進入時，取下漏斗，在此端塞入一小段玻璃棉，做好進氣端和出氣端的標記。

老化

將柱子的進口段接到色譜儀的汽化室（原來接漏斗的一端），另一端連接一段細管線后放空，通氮氣，緩慢升溫至110