微生物標(biāo)本的采集

微生物檢測(cè)樣本的規(guī)范化采集北川中醫(yī)院感染管理科陳曉艷抗生素時(shí)代感染仍是

人類健康的主要“殺手”高死亡率原因新現(xiàn)傳染?。航?0年，已有近30種新的病原生物，其中包括Ebola-typevirus、HIV和各種新型肝炎病毒等引起的各種疾病。SARS、禽流感再現(xiàn)傳染病：以往已被認(rèn)為得到很好控制的傳染病，如結(jié)核、登革熱等的流行和傳播又重新抬頭。低免疫人群急劇上升：艾滋病、移植醫(yī)學(xué)國(guó)際間交通的快速便捷使得當(dāng)今疾病傳播無國(guó)界的概念。氣候變暖，人口快速增長(zhǎng)，都市化進(jìn)程加快，伴隨人口密度和人口流動(dòng)增加，清潔水源不足和衛(wèi)生設(shè)施的不完善，以及生態(tài)破壞造成人與媒介生物接觸機(jī)會(huì)增多（動(dòng)物微生物向人類的襲擊）等。人類還沒有足夠的能力戰(zhàn)勝病原。病原生物的抗藥性產(chǎn)生的速度已超過新型抗生素發(fā)明的速度（細(xì)菌耐藥性的快速發(fā)展)。耐藥菌株出現(xiàn)和擴(kuò)散的主要因素1.耐藥基因發(fā)生突變使耐藥譜增大；2.細(xì)菌間遺傳物質(zhì)交換，將耐藥基因轉(zhuǎn)移到新宿主；（質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性遠(yuǎn)比染色體介導(dǎo)的耐藥性普遍）3.醫(yī)院及社區(qū)抗生素的廣泛應(yīng)用，為耐藥菌產(chǎn)生和長(zhǎng)期存在于體內(nèi)、或更為廣泛地?cái)U(kuò)散，以及引起疾病提供了重要的選擇壓力；

前兩個(gè)為細(xì)菌本身生物學(xué)特性的因素，是耐藥性產(chǎn)生的客觀依據(jù)，后一個(gè)是人為因素，是抗生素耐藥性迅速播散的主要推動(dòng)力。4.其他：與感染控制措施不當(dāng)，各種先進(jìn)的侵襲性診治手段的廣泛應(yīng)用，以及免疫容忍性宿主增多等因素有關(guān)。如果說抗菌藥物的出現(xiàn)是人類第一次征服病菌，細(xì)菌耐藥性則是對(duì)人類智慧的又一次嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生是微生物的一種天然抗生現(xiàn)象。解決細(xì)菌耐藥問題，不能單純依靠開發(fā)抗生素，因?yàn)樵S多細(xì)菌耐藥性是在和抗生素接觸過程中產(chǎn)生的。合理使用抗菌藥物對(duì)細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生和發(fā)展具有重要影響。合理使用抗菌藥物可以降低耐藥菌增長(zhǎng)率，有效控制耐藥菌感染、減少耐藥菌交叉感染、降低院內(nèi)感染發(fā)病率和病死率以及延長(zhǎng)抗生素的使用壽命.衛(wèi)生部關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)抗菌藥物臨床應(yīng)用管理的通知〔2008〕48號(hào)通知

(一）對(duì)細(xì)菌耐藥率超過30%的抗菌藥物，應(yīng)將預(yù)警信息及時(shí)通報(bào)有關(guān)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和醫(yī)務(wù)人員。（二）對(duì)細(xì)菌耐藥率超過40%的抗菌藥物，應(yīng)該慎重經(jīng)驗(yàn)用藥。（三）對(duì)細(xì)菌耐藥率超過50%的抗菌藥物，應(yīng)該參照藥敏試驗(yàn)結(jié)果用藥。（四）對(duì)細(xì)菌耐藥率超過75%的抗菌藥物，應(yīng)該暫停該類抗菌藥物的臨床應(yīng)用，根據(jù)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果再?zèng)Q定是否恢復(fù)臨床應(yīng)用。提高感染樣本送檢率加強(qiáng)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)

關(guān)注細(xì)菌性疾病的病原學(xué)診斷，已成為臨床工作者，臨床微生物與微生態(tài)工作者，藥學(xué)家和從事感染控制的工作者共同關(guān)注的熱門焦點(diǎn)。臨床醫(yī)生要合理用好兩種數(shù)據(jù)1.本地區(qū)、本單位病原流行病學(xué)資料，指導(dǎo)經(jīng)驗(yàn)用藥。（微生物室、感染管理科、臨床科室）2.藥敏試驗(yàn)報(bào)告，糾正經(jīng)驗(yàn)用藥。重視病原學(xué)檢查,盡可能在應(yīng)用抗菌藥物之前留取標(biāo)本送檢.以提高病原學(xué)診斷率,為選藥和調(diào)整藥物提供依據(jù).成功治療感染癥因素?成功分離病源菌

–標(biāo)本收集、運(yùn)送、保存

–標(biāo)本處理方法

–檢驗(yàn)醫(yī)師專業(yè)知識(shí)?醫(yī)師判讀病源菌培養(yǎng)結(jié)果?選擇適當(dāng)治療方法☆I(lǐng)SO15189的技術(shù)要素部分將實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)全過程質(zhì)量保證分為三部分,即分析前質(zhì)量保證;分析中質(zhì)量保證;分析后質(zhì)量保證。☆衛(wèi)生部頒發(fā)的[衛(wèi)醫(yī)發(fā)（2006）73號(hào)]《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》第十五條：醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)有分析前質(zhì)量保證措施、制定患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本儲(chǔ)存、標(biāo)本運(yùn)送、標(biāo)本接收等標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，并由醫(yī)療機(jī)構(gòu)組織實(shí)施。研究表明，分析前和分析后是當(dāng)代檢驗(yàn)誤差的主要來源。★有報(bào)道，有93%的實(shí)驗(yàn)室誤差來自分析前，分析前階段的質(zhì)量控制是整個(gè)檢驗(yàn)質(zhì)量控制中一個(gè)容易被忽視卻非常重要的環(huán)節(jié)?！锼谦@得準(zhǔn)確實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要保證。標(biāo)本采集的規(guī)范化是微生物檢驗(yàn)分析前質(zhì)量控制的重要內(nèi)容之一。標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性正確采集、處理與運(yùn)送細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接關(guān)系到致病菌培養(yǎng)的正確性與陽性率的高低，是臨床細(xì)菌檢驗(yàn)成功的關(guān)鍵。標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)?shù)臉?biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)，因此標(biāo)本采集與處理的規(guī)范化是準(zhǔn)確、及時(shí)地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎(chǔ)。好的微生物檢驗(yàn)標(biāo)本可提升實(shí)驗(yàn)室工作效率及病患照顧質(zhì)量，降低醫(yī)療成本。國(guó)內(nèi)微生物標(biāo)本的采集目前存在的問題：

標(biāo)本送檢率低從全國(guó)來看，抗感染治療前，送檢相關(guān)標(biāo)本可能只占應(yīng)送標(biāo)本的一半左右，與抗菌藥物應(yīng)用率之高形成鮮明的反差。一些醫(yī)師在經(jīng)驗(yàn)性治療受挫后方送標(biāo)本，此時(shí)已失去陽性培養(yǎng)的機(jī)會(huì)。標(biāo)本有缺陷正確收集各種臨床標(biāo)本，關(guān)注特檢標(biāo)本采樣與送檢的方法和條件，是完成病原學(xué)診斷的先決條件。

※

微生物實(shí)驗(yàn)室與臨床的交流溝通不夠

※醫(yī)護(hù)人員對(duì)于微生物標(biāo)本的采集要求和注意事項(xiàng)不甚了解

※制定SOP：采集時(shí)機(jī)采集部位采集頻率（采幾次）樣本量采樣部位的消毒處理標(biāo)本保存與運(yùn)送等一、標(biāo)本采集和處理的原則

標(biāo)本收集部位

非無菌部位無菌部位眼血液耳脊髓液呼吸道胸膜液腸胃道腹膜液泌尿道關(guān)節(jié)液皮膚毛發(fā)標(biāo)本收集原則?可能致病源–收集到越多越好–保持其活性?可能污染菌–非無菌部位?避免污染:消毒?減少增生:低溫保存及使用輸送培養(yǎng)基–無菌部位?避免污染:確實(shí)消毒發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查最好是病程早期、急性期或癥狀典型時(shí)，而且必須在使用抗生素或其他抗菌藥物之前采集標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，采集的標(biāo)本應(yīng)無外源性污染，減少或避免機(jī)體正常菌群及其它雜菌污染采集的標(biāo)本均應(yīng)盛于無菌容器內(nèi)要收集足夠量的標(biāo)本標(biāo)本采集后應(yīng)立即送至細(xì)菌室標(biāo)本采集與處理原則一些對(duì)環(huán)境敏感的細(xì)菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應(yīng)保溫并立即送檢厭氧性標(biāo)本應(yīng)放在專門的運(yùn)送瓶或試管內(nèi)運(yùn)送，也可直接用抽取標(biāo)本的注射器運(yùn)送，針頭應(yīng)插一橡皮塞以隔絕空氣

病人標(biāo)本中可能含有大量致病菌，不管標(biāo)本運(yùn)送距離遠(yuǎn)近，都必須注意安全防護(hù)

標(biāo)本切勿污染容器口和外壁，容器必須包裝好，防止送檢過程中翻倒或碰破流出實(shí)驗(yàn)室有責(zé)任拒絕接受未按正確方法采集和轉(zhuǎn)運(yùn)的標(biāo)本標(biāo)本的處理二、血液培養(yǎng)標(biāo)本的采集血液培養(yǎng)提升分離率及判別是否污染?準(zhǔn)備無菌的采血部位及培養(yǎng)瓶口–靜脈或動(dòng)脈穿刺–不換針頭–不可由血管導(dǎo)管注射帽抽取?采集足量的血液–5至10毫升/瓶，先打入黃色瓶蓋厭氧瓶–如果血量不足，則以需氧瓶為優(yōu)先?至少收集2套血液培養(yǎng)瓶(需氧及厭氧)–采集時(shí)機(jī):用藥前，間隔30分鐘或發(fā)燒、發(fā)冷后采集血液影響血液培養(yǎng)菌采樣因素?血液采樣人員訓(xùn)練?采集部位?穿刺部位的準(zhǔn)備工作?血液采樣設(shè)備?采樣數(shù)量與時(shí)機(jī)（一）血培養(yǎng)檢測(cè)采血指征：

臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者，1．發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）

2．寒戰(zhàn)

3．白細(xì)胞增多（>10×109/L，特別有“核左移”未成熟的或帶狀的白細(xì)胞增多

4．粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞<1×109/L）

5．血小板減少

6．皮膚粘膜出血

7．昏迷

8．多器官衰竭，血壓降低，CRP升高及呼吸快，或同時(shí)具備上述幾種體征而臨床可疑菌血癥應(yīng)采血培養(yǎng)。新生兒菌血癥，應(yīng)該增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。對(duì)入院危重感染患者未進(jìn)行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應(yīng)及時(shí)采集血培養(yǎng)。血培養(yǎng)對(duì)于疑似病例，我們都進(jìn)行血培養(yǎng)了嗎？CR-BSI疑似病人?帶有血管內(nèi)留置導(dǎo)管的病人–CVC–外周靜脈–外周動(dòng)脈?出現(xiàn)不能用其他原因解釋的毒性征象–發(fā)熱：突然發(fā)熱，熱型改變，>38℃–寒戰(zhàn)–血壓下降2008年上海市院內(nèi)感染質(zhì)控中心督查方案?項(xiàng)目：年度重點(diǎn)-加強(qiáng)醫(yī)院感染病原診斷和耐藥性監(jiān)測(cè)?內(nèi)容：正確掌握血培養(yǎng)指征-住院病人出現(xiàn)發(fā)熱>38℃，考慮感染所致，并伴有以下一種情況，應(yīng)抽血培養(yǎng)：(1)對(duì)于留置深靜脈導(dǎo)管超過48小時(shí)的患者(2)醫(yī)院內(nèi)肺炎患者?分值：4分?評(píng)估方法：到ICU或病區(qū)，查找發(fā)熱伴深靜脈留置導(dǎo)管超過48小時(shí)和醫(yī)院內(nèi)肺炎，各2例。如果缺少病例，可以從出院病例中查找?扣分標(biāo)準(zhǔn)：符合條件者，沒有做血培養(yǎng)，每例扣1分（二）血培養(yǎng)檢測(cè)消毒程序：1.皮膚消毒程序：（為防止皮膚寄生菌污染）

（1）用75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上。

（2）然后用棉簽（1%～2%碘酊作用30秒或10%碘伏60秒）消毒皮膚。

（3）最后用75%酒精脫碘。對(duì)碘過敏的患者，只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。

嚴(yán)格執(zhí)行以上三步消毒后，可行靜脈穿刺采血。

2.培養(yǎng)瓶消毒程序：

（1）用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60秒。

（2）用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。

血培養(yǎng)（三）血培養(yǎng)檢測(cè)采集和運(yùn)送：

1.采血量嬰幼兒和兒童，一般靜脈采血1～5ml，當(dāng)細(xì)菌濃度足夠高時(shí)，血液少于1ml也足以檢測(cè)菌血癥。成人血培養(yǎng)的采血量是8～10ml，20～30ml最合適，血液和肉湯的比一般為1︰5至1︰10。血培養(yǎng)2.血培養(yǎng)的份數(shù)和采血時(shí)間：

一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單次血培養(yǎng)。

血培養(yǎng)應(yīng)盡量在使用抗菌藥之前進(jìn)行，在24h內(nèi)采集23份血培養(yǎng)，每次血培養(yǎng)同時(shí)采集23瓶。

對(duì)間歇性菌血癥，用于培養(yǎng)的血液應(yīng)在估計(jì)寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.51h采集，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1h進(jìn)行。血培養(yǎng)CLSI指南?研究結(jié)果–一套血培養(yǎng)的陽性率為65％–二套血培養(yǎng)的陽性率為80％–三套血培養(yǎng)的陽性率為96％?CLSI建議方針–對(duì)于每位需要血培養(yǎng)的患者需采取2至3套血培養(yǎng)。–對(duì)成年患者，不允許只采單套血培養(yǎng)，因結(jié)果解釋困難–采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，不需要重復(fù)采樣，因?yàn)橹委熀?至5天內(nèi)血液中的感染細(xì)菌不會(huì)馬上消失2008年上海市院內(nèi)感染質(zhì)控中心督查方案?項(xiàng)目：年度重點(diǎn)-加強(qiáng)醫(yī)院感染病原診斷和耐藥性監(jiān)測(cè)?內(nèi)容：血培養(yǎng)標(biāo)本采集方法－懷疑有血流感染時(shí)，應(yīng)在不同部位采血，至少2次。?分值：4分?評(píng)估方法：到微生物室統(tǒng)計(jì)連續(xù)50例血培養(yǎng)數(shù)據(jù)?扣分標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)天2次采血培養(yǎng)人數(shù)占總體血培養(yǎng)人數(shù)的比例：61～

80％，扣1分；41～

60％，扣2分；21～

40％，扣3分；<20％，扣4分相似規(guī)模醫(yī)院的血培養(yǎng)數(shù)?國(guó)內(nèi)多數(shù)三甲綜合醫(yī)院2～10瓶/天?復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院20～50瓶/天?香港瑪麗醫(yī)院200瓶/天?臺(tái)灣大學(xué)醫(yī)院300瓶/天?我院約10～

20瓶/天血液培養(yǎng)采檢建議

急性高燒，懷疑原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎的患者–10分鐘內(nèi)，由不同的部位抽取2套的檢體懷疑菌血癥或真菌菌血癥，血培養(yǎng)結(jié)果持續(xù)陰性，應(yīng)改變血培養(yǎng)方法，以獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物。?非急性高燒疾病–24小時(shí)內(nèi)，由不同的部位抽取2-3套的檢體（間隔不小于3小時(shí)）?不明熱，如隱性膿腫，傷寒熱和波浪熱：–由不同的部位抽取2-3套的檢體，每套間隔≧1小時(shí)，當(dāng)培養(yǎng)24至48小時(shí)后，若為陰性培養(yǎng)，估計(jì)體溫升高之前（通常在下午）立即采集2份以上血培養(yǎng)。沙門菌感染患者：根據(jù)病程可在不同時(shí)間采集標(biāo)本。傷寒患者在病程第１-２周采取靜脈血液，病程第１-３周采集骨髓標(biāo)本。?針對(duì)小兒病患，應(yīng)立即采血血培養(yǎng)

特別注意：感染性心內(nèi)膜炎抽取血培養(yǎng)的時(shí)機(jī)?必須在根據(jù)經(jīng)驗(yàn)使用抗生素前30分鐘之內(nèi)抽取血培養(yǎng)?(1)在30min-1h之內(nèi)連續(xù)抽取數(shù)套血培養(yǎng);(2)皮膚消毒尤為重要，因?yàn)槠渲饕牟≡鸀槠つw定植菌如凝固酶陰性的葡萄球菌。必須取自外周靜脈而非留置的靜脈裝置,否則會(huì)判有很高的污染風(fēng)險(xiǎn)從而導(dǎo)致錯(cuò)誤的心內(nèi)膜炎結(jié)論；抽取血培養(yǎng)的數(shù)量?最佳的血培養(yǎng)數(shù)量不確定，但只抽單瓶血培養(yǎng)是不夠的?多套血培養(yǎng)可以幫助區(qū)別血培養(yǎng)假陽性（如皮膚污染等）?建議：起始采集3套血培養(yǎng)，如24小時(shí)內(nèi)仍報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)，全部培養(yǎng)為5套。入院前兩周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者，連續(xù)三天，每天采集2份。選用可中和或吸附抗菌藥物的培養(yǎng)基。兒童血培養(yǎng)?不同于成人血培養(yǎng)，由于厭氧菌感染極少發(fā)生在兒童病患，因此建議只采用需氧瓶；厭氧培養(yǎng)只考慮針對(duì)特殊的高危險(xiǎn)群體?皮膚消毒參照成人的方法，除新生兒外?兒童的采血量為不超過總血容量的1％3.標(biāo)本運(yùn)送采血后應(yīng)立即送到臨床微生物實(shí)驗(yàn)室，如不能立即送檢，短期內(nèi)置于室溫不影響細(xì)菌檢出，可室溫保存或置35C37C孵箱中，切勿冷藏。自動(dòng)化連續(xù)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)雖有允許延遲上機(jī)監(jiān)測(cè)微生物生長(zhǎng)的原理，還是應(yīng)該盡量減少延遲上機(jī)時(shí)間。血培養(yǎng)（四）特別提醒1.血培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止皮膚寄生菌或環(huán)境引起的污染。感染性心內(nèi)膜炎，特別是心臟瓣膜修復(fù)術(shù)的感染，可能由皮膚寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒桿菌屬）。因此，采集過程中血培養(yǎng)的污染一定要減小至最低程度。2.通常采血部位為肘靜脈。避免通過靜脈置管直接采集血樣。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)，以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜，切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。3.標(biāo)本采集量少，兒童少于1ml，成人少于3ml，血培養(yǎng)份數(shù)不夠，可明顯降低血培養(yǎng)的陽性率。4.采血時(shí)機(jī)不合適，未抓住菌血癥時(shí)期，或在剛使用抗生素不久，均降低了血培養(yǎng)的陽性率。采血最好在：體溫升高前半小時(shí)，使用抗生素前，或停用抗生素24h。血培養(yǎng)5.血培養(yǎng)瓶存放于冰箱，取出后立即采血進(jìn)行培養(yǎng)或血液標(biāo)本采集后放置于冰箱，過低的溫度抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。6.血液標(biāo)本采集后，放于機(jī)外時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)菌生長(zhǎng)過度已達(dá)衰老期，會(huì)降低陽性率。7.標(biāo)本消毒時(shí)消毒酒精未完全揮發(fā)，會(huì)降低陽性率。8.所用培養(yǎng)瓶必須仔細(xì)檢查有無變色或混濁。同時(shí)作需氧菌和厭氧菌培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)先將標(biāo)本注入?yún)捬跗恐校缓笤僮⑷胄柩跗?，不需要另換針頭。9.對(duì)兩次不同部位血培養(yǎng)生長(zhǎng)同一種微生物，不同類無菌部位標(biāo)本培養(yǎng)中生長(zhǎng)同一種微生物或微生物快速生長(zhǎng)（48h內(nèi)）的情況下，應(yīng)考慮是真正的感染。10.培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送至細(xì)菌室。如有特殊情況不能送檢的，應(yīng)將培養(yǎng)瓶置于室溫，切勿放入冰箱。血培養(yǎng)血培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告程序

當(dāng)培養(yǎng)48h后，對(duì)陰性血培養(yǎng)結(jié)果在最短的時(shí)間內(nèi)發(fā)出初步報(bào)告。血培養(yǎng)陽性，立即進(jìn)行革蘭染色。染色結(jié)果口頭報(bào)告給患者的主治醫(yī)生，可指導(dǎo)醫(yī)生為患者經(jīng)驗(yàn)選擇抗生素治療。雖然美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CLIS）推薦的抗生素敏感試驗(yàn)沒有血培養(yǎng)直接敏感試驗(yàn)法，但根據(jù)革蘭染色初步分析鑒定，可以靈活地選擇抗生素進(jìn)行直接抗生素藥敏試驗(yàn)，供臨床參考使用。危重病人的三級(jí)報(bào)告一級(jí)：報(bào)告培養(yǎng)陽性和涂片報(bào)告。二級(jí)：報(bào)告初步藥敏和確切涂片報(bào)告三級(jí)：正式鑒定和藥敏報(bào)告三、下呼吸道標(biāo)本的采集（一）采集指征凡是發(fā)熱、咳嗽和咳痰，痰呈膿性、粘稠或血性，并伴有胸痛、氣急，肺部聞及濕羅音，外周白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例明顯增高，X線檢查提示肺部有炎性浸潤(rùn)或胸腔積液，甚至出現(xiàn)感染性休克和呼吸衰竭等患者，應(yīng)采集痰液或下呼吸道標(biāo)本。對(duì)可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集檢驗(yàn)標(biāo)本時(shí)必須注意生物安全防護(hù)。下呼吸道標(biāo)本的采集（二）采集方法1.自然咳痰以晨痰為佳。用清水反復(fù)漱口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入無菌、清潔、干燥、不滲漏、不吸水的廣口帶蓋的容器中，盡快送檢。否則有的細(xì)菌（如肺炎球菌、流感嗜血桿菌）在外界可能死亡。不能及時(shí)送檢的標(biāo)本，室溫保存≤2h。痰量極少者可用霧化吸入加溫至45℃的100g/LNaCl水溶液，使痰液易于排出。要求采到肺深部的痰液，不要唾液。2.小兒取痰法用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部和氣管分泌物，粘在棉拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。3.支氣管鏡采集法用纖維支氣管鏡可直接在病灶部位采集高濃度的感染病原菌，但必須注意在操作中盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。下呼吸道標(biāo)本的采集4.胃內(nèi)采痰法無自覺癥狀的肺結(jié)核病人尤其嬰幼兒不會(huì)咳嗽，有時(shí)將痰誤咽入胃內(nèi)，可采集胃內(nèi)容物做結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)，其陽性率比咳痰高10%左右。該方法于清晨空腹時(shí)，將胃管插入胃內(nèi)，用注射器抽取胃液。5.吸痰管取痰法對(duì)咳嗽乏力或昏迷病人，用吸痰管經(jīng)鼻腔或口抵達(dá)氣管腔內(nèi)吸引痰液。雙側(cè)肺部感染伴人工氣道如氣管切開或氣管插管患者，可用吸痰管經(jīng)人工氣道插至葉支氣管水平吸引痰液。6.重癥、難治、或伴免疫抑制、或疑似厭氧菌引起的肺部感染可采用環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引（TTA）、經(jīng)胸壁穿刺肺吸引（LA）、經(jīng)纖維支氣管鏡或人工氣道作防污染雙套管毛刷（PS）或防污染支氣管肺泡灌洗（PBAL）采集無口咽部菌群污染的痰液，進(jìn)行精確的感染病原學(xué)診斷。下呼吸道標(biāo)本的采集（三）痰標(biāo)本的質(zhì)量評(píng)估正常人體的下呼吸道是無菌的。痰液是臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室最常見的標(biāo)本，但通常不是檢驗(yàn)下呼吸道病原菌感染的最好標(biāo)本。1.肉眼觀察★觀察痰液的顏色、黏度、有無血絲和是否呈膿性，如有顆粒存在，應(yīng)注意可能與放線菌屬及奴卡菌屬感染有關(guān)?！锊糠痔禈?biāo)本通過肉眼觀察其外觀如粘液和膿性成分，可大致了解受檢標(biāo)本的質(zhì)量。★痰涂片細(xì)胞學(xué)檢查判斷標(biāo)本受污染程度則是一種較為可靠的方法。下呼吸道標(biāo)本的采集2.顯微鏡檢查

痰培養(yǎng)前需做標(biāo)本質(zhì)量評(píng)估，即涂片進(jìn)行細(xì)胞學(xué)篩選和細(xì)菌學(xué)顯微鏡檢查。明確唾液對(duì)標(biāo)本的污染程度和有無必要做細(xì)菌培養(yǎng)。并可初步判定是否有病原菌存在，病原菌的數(shù)量及其類別，有助于初步報(bào)告、選擇培養(yǎng)基（如真菌）和對(duì)培養(yǎng)結(jié)果的綜合分析。一般認(rèn)為，來自下呼吸道的合格痰標(biāo)本應(yīng)是含膿細(xì)胞和支氣管柱狀上皮細(xì)胞較多，而受唾液污染嚴(yán)重的不合格標(biāo)本則扁平鱗狀上皮細(xì)胞較多。中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)制訂的標(biāo)準(zhǔn)：痰直接涂片檢查每低倍視野鱗狀上皮細(xì)胞＜10個(gè)、白細(xì)胞＞25個(gè)，或鱗狀上皮細(xì)胞：白細(xì)胞＜1︰2.5，可做污染相對(duì)較少的“合格”標(biāo)本接種培養(yǎng)。否則，便是不合格的唾液或唾液嚴(yán)重污染的標(biāo)本，應(yīng)棄去并重新留痰送檢。下呼吸道標(biāo)本的采集（三）特別提醒1.痰標(biāo)本不能及時(shí)送檢者，可暫存4℃冰箱。室溫下耽擱數(shù)h，定植于口咽部的非致病菌過度生長(zhǎng)而肺炎鏈球菌、葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率則明顯降低。2.在臨床上咳痰仍是診斷肺部感染最常用的標(biāo)本，但咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。痰液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)，必須區(qū)分是病原菌還是來自上呼吸道的正常菌群。經(jīng)過洗滌處理的痰液或自氣管鏡采集及氣管穿刺所獲標(biāo)本，結(jié)果比較可靠。

3.由于口腔和咽部存在大量的革蘭陽性和革蘭陰性厭氧細(xì)菌，而且缺乏可靠的方法區(qū)分它們究竟是致病菌還是定植菌，因此不主張對(duì)咳痰標(biāo)本進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)。4.做結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24h痰液，嬰兒肺結(jié)核要用胃管取痰。（重復(fù)誘導(dǎo)咳痰結(jié)核分枝桿菌涂片檢測(cè)與培養(yǎng)的陽性率較接近）5.約有1/4～1/2肺部感染患者可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時(shí)做血培養(yǎng)。下呼吸道標(biāo)本的采集四、尿液標(biāo)本的采集

尿路感染是指尿道內(nèi)有大量微生物繁殖而引起的尿路炎癥。根據(jù)感染部位分為：

上尿路感染（腎盂腎炎）下尿路感染（膀胱炎、尿道炎）男性可出現(xiàn)前列腺炎。（一）尿液標(biāo)本采集指征1.有典型的尿路感染癥狀；2.有肉眼膿尿或血尿；3.尿常規(guī)檢查白細(xì)胞或亞硝酸鹽陽性；4.有不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；5.留置導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱；6.膀胱排空功能受損；7.泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前；8.有尿路感染癥狀者，前次培養(yǎng)結(jié)果陰性或抗菌治療48h后仍持續(xù)發(fā)熱。9.抗生素停藥后，感染癥狀再次出現(xiàn)。尿液標(biāo)本的采集（二）尿液標(biāo)本的采集方法

標(biāo)本采集應(yīng)在使用抗生素之前，避免消毒劑污染標(biāo)本。1．清潔中段尿留取清晨清潔中段尿標(biāo)本，先用肥皂水清洗會(huì)陰部，再用清水沖洗尿道口周圍；將前段尿排去，留取中段尿10ml左右于無菌容器內(nèi)，立即加蓋送檢，2h內(nèi)接種。該方法簡(jiǎn)單、易行，是最常用的尿標(biāo)本收集方法，但是容易受到會(huì)陰部細(xì)菌污染。2．恥骨上膀胱穿刺使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸取尿液，是評(píng)估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集。尿液標(biāo)本的采集采集方法3．直接導(dǎo)尿按常規(guī)方法對(duì)會(huì)陰局部進(jìn)行消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液，可減少尿液標(biāo)本污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能下尿道細(xì)菌進(jìn)入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。4．小兒收集包無自控能力的小兒可用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會(huì)陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。如果檢驗(yàn)結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時(shí)可使用膀胱上穿刺或?qū)蚍羧?biāo)本進(jìn)行復(fù)檢。5．留置導(dǎo)尿管收集尿液用導(dǎo)尿管導(dǎo)取10~15ml尿液置滅菌容器內(nèi)送檢。長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換新導(dǎo)尿管后留取尿標(biāo)本。留置導(dǎo)尿患者應(yīng)消毒導(dǎo)尿管外部及尿管口，采取無菌操作方法，用注射器通過導(dǎo)尿管吸取尿液。注意防止混入消毒劑，不能從尿液收集袋中采集尿液。尿液標(biāo)本的采集尿液標(biāo)本的采集（三）采集容器1.容器材料為不與尿液成分發(fā)生反應(yīng)的惰性材料；2.潔凈、無菌、加蓋、封閉、防滲漏；3.不含防腐劑和抑菌劑；4.廣口、具有較寬的底部、容積應(yīng)＞50ml、盒蓋易于開啟。（四）采集時(shí)間和標(biāo)本運(yùn)送

1.通常采集清晨第1次尿液送檢，確保尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上。應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用前采集尿液。懷疑沙門菌感染時(shí)應(yīng)在發(fā)病2周左右采集尿液培養(yǎng)，懷疑鉤端螺旋體感染時(shí)在感染后2周采集尿液培養(yǎng)。2.標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢、及時(shí)接種，室溫下保存時(shí)間不得超過2h（夏季保存時(shí)間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存），冷藏保存標(biāo)本必須在6h內(nèi)進(jìn)行接種，但冷藏保存的標(biāo)本不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng)。尿液標(biāo)本的采集（五）特別提醒1.由于自然排尿收集的標(biāo)本很難避免會(huì)陰部及下尿道細(xì)菌污染，所以需要定量接種、合理評(píng)價(jià)才能判斷培養(yǎng)的細(xì)菌是否與尿路感染有關(guān)。尿標(biāo)本菌落計(jì)數(shù)中革蘭陰性桿菌數(shù)>105CFU/ml或革蘭陽性球菌數(shù)>104CFU/ml時(shí)有臨床診斷意義。（不是絕對(duì)的，受多因素影響，綜合判斷）2.尿液標(biāo)本的采集和培養(yǎng)中的問題是污染雜菌，故應(yīng)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作。3.尿標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，以免污染，尿液中不得加防腐劑和消毒劑。尿液標(biāo)本的采集下列因素可使尿液中細(xì)菌數(shù)量減少，判斷結(jié)果時(shí)應(yīng)注意

①使用抗生素治療，細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制；②尿液稀釋，尿比重＜1.003，營(yíng)養(yǎng)成分減少，細(xì)菌生長(zhǎng)遲緩；③尿PH＜5.0或＞8.5，細(xì)菌生長(zhǎng)受阻；④尿頻時(shí)，膀胱內(nèi)細(xì)菌停留時(shí)間短，菌落數(shù)減少；⑤尿道口消毒液混入標(biāo)本中，影響細(xì)菌繁殖，菌落數(shù)減少；⑥不同種類的細(xì)菌生長(zhǎng)速度不同、營(yíng)養(yǎng)要求不同，菌落計(jì)數(shù)有所不同。五、糞便標(biāo)本的采集

（一）采集時(shí)間腹瀉患者應(yīng)在急性期，并盡可能在使用抗生素之前采集新鮮糞便；傷寒患者在發(fā)病2周以后。（二）采集方法1．自然排便采集法自然排便后，挑取有膿血或黏液部位的糞便2-3g，液狀糞便取絮狀物盛于無菌的容器內(nèi)或置于保存液或增菌液中送檢。2．直腸拭子采集法對(duì)不易獲得糞便或排便困難的患者及嬰幼兒，可采用直腸拭子法采集標(biāo)本，其方法是將拭子前端用甘油濕潤(rùn)。然后插入肛門約4～5cm（幼兒約2～3cm）處，輕輕在直腸內(nèi)旋轉(zhuǎn)，擦取直腸表面粘液后取出，盛入無菌試管或保存液中送檢。糞便標(biāo)本的采集（三）采集容器糞便標(biāo)本直接收集于有合適蓋子的塑料容器或一干凈蠟制紙板中，按要求送到實(shí)驗(yàn)室。旋蓋玻璃或塑料容器適合于液狀糞便。如果標(biāo)本需運(yùn)送或采便后2h內(nèi)未培養(yǎng)，標(biāo)本應(yīng)放在Cary-blair運(yùn)送培養(yǎng)基中并于冰箱保存。標(biāo)本應(yīng)選取有黏液、血的部分，標(biāo)本量為0.5～2g糞便標(biāo)本。糞便標(biāo)本的采集實(shí)驗(yàn)室檢查

腸道細(xì)菌大多為革蘭陰性桿菌，且因糞便標(biāo)本中有各種正常菌群，形態(tài)上區(qū)分困難，因此一般不作直接涂片檢查。只有當(dāng)臨床懷疑腸道菌群失調(diào)或檢查霍亂弧菌、結(jié)核分枝桿菌、疑似葡萄球菌或難辯芽孢梭菌引起的偽膜性腸炎以及真菌性腹瀉時(shí)，才作直接涂片檢查。疑似葡萄球菌引起的抗菌素相關(guān)性腸炎，可取水樣便或腸黏膜樣物涂片，革蘭染色后鏡檢，見革蘭陰性桿菌明顯減少，革蘭陽性球菌大量散在或成堆（葡萄狀）排列，可提示腸道菌群失調(diào)。糞便標(biāo)本的采集特別提醒在腹瀉發(fā)病的正確時(shí)間收集標(biāo)本，病人應(yīng)盡量在急性期（3d）內(nèi)和用藥前采集標(biāo)本，以提高檢出率。大便標(biāo)本中含有很多雜菌，糞便標(biāo)本的采集須注意防止外界臟物污染。為提高陽性檢出率，要采集新鮮標(biāo)本，立即送檢。六、生殖道標(biāo)本的采集

（一）標(biāo)本采集生殖器官標(biāo)本包括子宮頸、陰道、前列腺；男性及女性外生殖器的分泌物及經(jīng)血等。應(yīng)根據(jù)感染的部位和可能的病原體決定用于病原學(xué)診斷的標(biāo)本種類、采集部位和采集方法等。陰道、子宮頸及前列腺等分泌物應(yīng)由醫(yī)師采集，收集于無菌試管內(nèi)送檢。生殖道標(biāo)本?制作直接涂片?病源菌對(duì)溫度敏感直接接種于恢復(fù)至室溫的適當(dāng)培養(yǎng)基

置于運(yùn)送培養(yǎng)基中?使用特殊采檢棒，迅速送至實(shí)驗(yàn)室竹（木）簽棉拭子因棉花含有的脂肪酸及竹或木簽含有樹脂和甲醛等對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)有抑制作用而不適于細(xì)菌學(xué)標(biāo)本的采集，建議使用塑料桿的藻酸鹽或滌綸拭子。生殖道標(biāo)本的采集（二）送檢指征

1.全身癥狀

發(fā)熱、乏力、食欲不振2.皮膚黏膜損害

3.男性泌尿系統(tǒng)表現(xiàn)尿急、尿頻、尿痛尿道分泌物增多會(huì)陰部疼痛及陰囊疼痛性功能障礙泌尿生殖器畸形和缺損生殖道標(biāo)本的采集送檢指征4.女性泌尿系統(tǒng)表現(xiàn)

分泌物增多及性狀異常尿道口搔癢及膿性分泌物流暢下腹疼痛月經(jīng)失調(diào)陰道出血外陰搔癢外陰或陰道疼痛性功能障礙生殖道標(biāo)本的采集（三）特別提醒

1.生殖器是開放性器官，標(biāo)本采集過程中應(yīng)嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)程以減少雜菌污染。

2.由于陰道正常菌群的存在而使細(xì)菌的分離鑒定受到干擾，所以在采集女性生殖道標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意盡量減少或避免正常菌群的污染。

3.疑有宮腔感染，如遇產(chǎn)婦需行剖宮產(chǎn)，待胎兒娩出后取宮腔分泌物，并同時(shí)取嬰兒耳拭子一同送檢。

4.沙眼衣原體和病毒均在宿主細(xì)胞內(nèi)繁殖，取材時(shí)拭子應(yīng)在病變部位（移行上皮處稍內(nèi)）停留十幾秒鐘，并采集盡可能多的上皮細(xì)胞。生殖道標(biāo)本的采集特別提醒

5.生殖道感染厭氧菌也較多見，疑有厭氧菌感染時(shí)，標(biāo)本采集和運(yùn)送應(yīng)避免與氧氣接觸，最佳方法是床邊采樣，直接接種至厭氧裝置內(nèi)。

6.淋病奈瑟菌檢查時(shí)，取材的深度一定要夠，因?yàn)榱芮蚓冒l(fā)于柱狀上皮細(xì)胞而不是復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞。不論男女尿道及子宮頸均需用拭子插入尿道及子宮頸3cm深轉(zhuǎn)動(dòng)并停留10~30s取樣送檢。

7.淋病奈瑟菌抵抗力低，對(duì)外環(huán)境變化頗為敏感，對(duì)寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，為了保證培養(yǎng)有足夠的成功率，取材后要盡快送檢，立即接種，標(biāo)本離體時(shí)間越短越好。生殖道標(biāo)本的采集七、化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集組織或器官的化膿性感染，其病原菌的來源可分為兩類：①內(nèi)源性：感染源是炎癥局部周圍器官中的正常菌群，由于損傷等因素進(jìn)入無菌狀態(tài)的組織內(nèi)，發(fā)生感染。②外源性：感染源是存在于人體外部自然界的微生物，由于外傷和直接接觸通過人體表面進(jìn)入人體，造成感染?！撘旱募?xì)菌學(xué)檢查對(duì)于確定感染的種類（結(jié)核性或非結(jié)核性等）、提供藥物敏感結(jié)果和指導(dǎo)臨床治療有重要的意義。（一）標(biāo)本采集1．開放性感染和已潰破的化膿灶標(biāo)本采集前先用滅菌生理鹽水拭去表面滲出物，盡可能用抽吸或?qū)⑹米由钊雮?，緊貼傷口前沿取樣，從膿腫底部或膿腫壁取樣，效果最好。慢性感染，污染嚴(yán)重，很難分離到致病菌，可取感染部位下的組織，研磨成組織勻漿接種于適宜的培養(yǎng)基。2．封閉性膿腫局部消毒后用針及注射器抽吸膿腫壁，將所有物質(zhì)置于無菌試管內(nèi)送檢，疑為厭氧菌感染時(shí)立即作床邊接種或置于厭氧轉(zhuǎn)運(yùn)裝置送檢（針頭插一橡皮塞隔絕空氣）。但取樣時(shí)，可能會(huì)帶入與感染過程無關(guān)的定植細(xì)菌。化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集標(biāo)本采集3．大面積創(chuàng)傷感染：可取感染組織塊或沾有膿汁的內(nèi)層敷料送檢。4．細(xì)菌對(duì)干燥敏感或只能采集少量標(biāo)本時(shí)，用棉拭子采集標(biāo)本后立即放入液體培養(yǎng)基內(nèi)，或采標(biāo)本前先將棉拭子沾少許肉湯以保持標(biāo)本濕度。對(duì)于不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4℃保存，培養(yǎng)淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外。注：盡可能在用藥前采集標(biāo)本，如患者在采集標(biāo)本前已用藥，請(qǐng)?jiān)跈z驗(yàn)申請(qǐng)單上注明，檢驗(yàn)人員可在培養(yǎng)基內(nèi)加入相應(yīng)拮抗物，以利于提高陽性檢出率。采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑。化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集

有的創(chuàng)傷均可有細(xì)菌污染，但不一定發(fā)生感染，因此對(duì)分離到的細(xì)菌要根據(jù)創(chuàng)傷的情況、菌量和種數(shù)，收集標(biāo)本的處理過程、機(jī)體免疫力及抗生素的使用情況等多種因素來分析判斷?；摵蛣?chuàng)傷標(biāo)本的采集八、穿刺液標(biāo)本的采集

穿刺液主要包括:

腦脊液膽汁胸水腹水心包液關(guān)節(jié)液鞘膜液在正常人體中，上述體液均是無菌的。有感染的情況下檢出的細(xì)菌，在排除污染后應(yīng)視為病原菌，及時(shí)給予正確的治療，使病人早日恢復(fù)健康。（一）腦脊液1.采集時(shí)間：懷疑為腦膜炎的病人，應(yīng)立即采集腦脊液，最好在使用抗菌藥物以前采集標(biāo)本。2.采集方法：用腰穿方法采集腦脊液3～5ml，一般放入3個(gè)無菌試管，每個(gè)試管內(nèi)1～2ml。如用于檢測(cè)細(xì)菌或病毒，腦脊液量應(yīng)不少于1ml；如果用于檢測(cè)真菌或抗酸桿菌，腦脊液量應(yīng)大于或等于2ml。穿刺液標(biāo)本的采集腦脊髓液標(biāo)本

?直接觀察–革蘭氏染色–抗酸菌染色-墨汁染色?無菌采集技術(shù)–避免檢體污染及病患被感染?病毒培養(yǎng)標(biāo)本置于4℃保存?分枝桿菌培養(yǎng)標(biāo)本需要2mL以上，置于4℃保存?細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本置于35℃保存（二）膽汁及其它穿刺液（胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液及鞘膜液等）

1.檢測(cè)時(shí)間懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后1~2天采集。

2.采集方法首先用2%碘酊消毒皮膚。用針穿刺法抽取標(biāo)本或外科手術(shù)方法采集標(biāo)本，然后放入無菌試管或小瓶?jī)?nèi)，立即送到實(shí)驗(yàn)室。盡可能采集更多的液體，至少1ml。穿刺液標(biāo)本的采集(三)特別提醒1．如果用于檢測(cè)細(xì)菌，收集腦脊液后，在常溫下15min內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保存，否則會(huì)使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。常溫下可保存24h。2．如果用于檢測(cè)病毒，腦脊液標(biāo)本應(yīng)放置冰塊，在4℃15min內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。用于檢測(cè)病毒的腦脊液，在4℃可保存72h。3．作腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，建議同時(shí)作血培養(yǎng)。4．采集腦脊液的試管不需要加入防腐劑。穿刺液標(biāo)本的采集特別提醒5．進(jìn)行腰穿過程中，嚴(yán)格無菌操作，避免污染。6．由于厭氧菌在這些感染中占有重大比例，故除了有一般細(xì)菌培養(yǎng)的無菌試管外，還應(yīng)有做厭氧菌培養(yǎng)的傳輸系統(tǒng)。深部膿液穿刺物作普通細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，同時(shí)作厭氧菌培養(yǎng)。7．防止穿刺液的凝固，應(yīng)在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液。8．有淋病性關(guān)節(jié)炎患者之關(guān)節(jié)液，采集后應(yīng)立即送檢。穿刺液標(biāo)本的采集九、

眼、耳、鼻、咽拭子標(biāo)本的采集

正常眼部、中耳及鼻竇內(nèi)是無菌的，而咽峽部有口腔的常在菌叢。耳、鼻、咽部的細(xì)菌感染病原菌多源于口腔，口腔中既有需氧菌也有厭氧菌，所以，其周圍組織器官的感染不僅考慮是需氧菌，也須檢查厭氧菌。（一）標(biāo)本采集

1.眼結(jié)膜：分別用（無菌鹽水預(yù)濕）拭子繞每一個(gè)結(jié)膜取；采集完即接種培養(yǎng)基；將拭子涂片在兩個(gè)玻片上染色。角膜刮擦：滴兩滴局部麻醉液；用無菌鏟刮擦膿腫或潰瘍，將刮擦物直接接種于培養(yǎng)基；將剩余材料涂于兩個(gè)干凈的玻片上染色。液體或抽吸物：備眼，用針頭抽吸液體。先用無菌生理鹽水沖洗眼部，然后用棉拭子拭干，再用無菌棉拭子采集分泌物。眼、耳、鼻、咽拭子標(biāo)本的采集2.耳

內(nèi)耳：對(duì)復(fù)雜的、反復(fù)的或慢性頑固的中耳炎做鼓膜穿刺術(shù)，接觸耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液體；對(duì)破裂的鼓室，借助耳科診視器，用軟桿拭子收集液體；外耳：用濕拭子將耳道的任何碎屑或痂皮拭去；在外耳道用力旋轉(zhuǎn)拭子取樣。3．鼻或鼻咽分泌物直接用拭子涂抹病灶部位，切勿接觸周圍粘膜或皮膚，標(biāo)本立即送檢。4．咽分泌物先用清水漱口，用壓舌板將舌向下向外壓，將咽拭子在咽后壁或懸雍垂后側(cè)涂抹數(shù)次，插入運(yùn)送培養(yǎng)基。切勿接觸口腔和舌粘膜。

眼、耳、鼻、咽拭子標(biāo)本的采集（二）標(biāo)本運(yùn)送和保存標(biāo)本采集時(shí)，無菌手續(xù)以稍蘸肉湯的拭子采集病變明顯處的膿液和分泌物。采取后拭子應(yīng)置于運(yùn)送培養(yǎng)基或培養(yǎng)拭子運(yùn)送，以防干燥。立即送檢，如不能及時(shí)送檢，應(yīng)置于４℃冰箱保存，超過48h不可使用。眼、耳、鼻、咽拭子標(biāo)本的采集十、導(dǎo)管等標(biāo)本的采集

血管內(nèi)留置管道是現(xiàn)代醫(yī)護(hù)工作，尤其是ICU一個(gè)不可缺少的部分。目前使用的有外周靜脈導(dǎo)管和單腔、多腔的中心靜脈導(dǎo)管、隧道式的中心靜脈導(dǎo)管、漂浮式肺動(dòng)脈導(dǎo)管、經(jīng)外周靜脈置入中心靜脈的導(dǎo)管、外周動(dòng)脈導(dǎo)管等。這些可留置的通道為醫(yī)療工作的液體、血液制品、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、藥物的輸入、血流動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè)、采血及急救通道的維持提供了可靠途徑；但同時(shí)也帶來了各種并發(fā)癥，如導(dǎo)管相關(guān)的局部感染與菌血癥、血栓形成、血栓性脈管炎、膿性血栓脈管炎等。血管導(dǎo)管培養(yǎng)

?血管導(dǎo)管（intravascularcathetertips）及腹膜透析導(dǎo)管（peritonealdialysiscatheters）培養(yǎng)是偵測(cè)血流感染源方法之一

?標(biāo)準(zhǔn)方法：經(jīng)由導(dǎo)管抽取20ml血液，進(jìn)行血液培養(yǎng)；導(dǎo)管周圍的皮膚乙醇消毒，然后以無菌剪刀取下約5cm長(zhǎng)度，置于無菌容器中送檢（防干燥，不能作床旁接種者，可將導(dǎo)管置含有少量生理鹽水的無菌試管內(nèi)送檢。也可將剪下的導(dǎo)管體內(nèi)段置肉湯增菌液或用于血培養(yǎng)液內(nèi)，但不能區(qū)分導(dǎo)管感染菌與少量的定植菌）再由靜脈端抽血進(jìn)行另外一套血液培養(yǎng)。標(biāo)本處理：實(shí)驗(yàn)室將體內(nèi)段導(dǎo)管立即置血平皿上作滾動(dòng)涂布接種，將血平板置35℃培養(yǎng)8～24h，觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng)，如細(xì)菌菌落數(shù)≥15CFU/Tip即為陽性，則認(rèn)為血流感染是可能與導(dǎo)管有關(guān)導(dǎo)管等標(biāo)本的采集血管導(dǎo)管培養(yǎng)導(dǎo)管于培養(yǎng)基上滾動(dòng)數(shù)次后進(jìn)行培養(yǎng)，如