畜禽繁殖與改良人工授精

關(guān)于畜禽繁殖與改良人工授精2012/11/211第一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第一節(jié)人工授精概述

一、自然交配種公畜與發(fā)情母畜直接交配的配種方式。1.自由交配：公母畜混群飼養(yǎng)，公畜任意和發(fā)情母畜交配。原始交配方式，容易引起近親繁殖。

2.分群交配：在配種季節(jié)，把一頭或數(shù)頭經(jīng)選擇的公畜放入一定數(shù)量的母畜群中進(jìn)行交配。性別比例為1︰10～20（一夫多妻）。

3.圍欄交配：與分群交配相似，配種時(shí)，在圍欄內(nèi)放入一頭母畜與特定的公畜交配。性別比例為1︰1。

4.人工輔助交配：公母畜平時(shí)隔離，到配種季節(jié)，選擇特定的公母畜，人為控制交配，交配完成后即行隔離開(kāi)來(lái)。第二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日二、人工授精

人工授精是指用特定的器械采集公畜的精液，通過(guò)檢查、稀釋、保存等適當(dāng)處理后，再用器械把精液輸入到發(fā)情母畜的生殖道內(nèi)，以代替公母畜自然交配而繁殖后代的一種繁殖技術(shù)。

1780年，意大利生理學(xué)家Spallanzani將公犬的精子注入母犬生殖道，獲得了3只小犬，這是人類(lèi)第一次進(jìn)行的人工授精嘗試。1899年，前蘇聯(lián)科學(xué)家開(kāi)始研究家畜的人工授精技術(shù)，Ivanoff起初的研究對(duì)象是馬，但首次成功的卻是牛和綿羊的人工授精。第三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日我國(guó)家畜的人工授精技術(shù)研究始于1935年的句容種馬場(chǎng)，到1951年以后，隨著我國(guó)畜牧業(yè)的迅速發(fā)展，人工授精技術(shù)得到推廣，主要在東北推廣馬的人工授精。奶牛的人工受精始于20世紀(jì)50年代中期，到70年代已經(jīng)普及了冷凍精液人工授精技術(shù)。目前，我國(guó)各省、市、自治區(qū)都建有冷凍精液站，城郊和大型乳牛場(chǎng)采用凍精配種的奶牛幾乎為100%。其它家畜凍精人工授精工作也在一定的范圍內(nèi)得到應(yīng)用。第四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日三、人工授精的意義1.有效改變家畜的配種過(guò)程，提高優(yōu)良種公畜的配種效能和種用價(jià)值，充分發(fā)揮公畜繁殖潛力。

畜種自然交配人工授精豬30～60頭/年200～400頭/年牛20～40頭/年6000～12000頭/年羊30～50只/年7000～10000只/年馬30～50匹/年200～400匹/年第五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.加速家畜品種改良，促進(jìn)育種工作進(jìn)程。人工授精大大提高了公畜的配種效能，就能選擇最優(yōu)秀的公畜用于配種，從而成為迅速增殖良種家畜的有效方法和改良畜種進(jìn)行育種工作的有力手段。

3.減少了種公畜的飼養(yǎng)頭數(shù)，降低飼養(yǎng)管理費(fèi)用。

第六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

4.配種時(shí)公母畜互不接觸，可防止某些生殖疾病的傳播。由于人工授精所用精液a.必須經(jīng)過(guò)檢查，以保證質(zhì)量，b.必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，只有健康的公母畜才能用作人工授精，c.通過(guò)發(fā)情鑒定可以掌握適宜的配種時(shí)機(jī)，d.能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)某些生殖疾病，因此可減少和防止因本交引起的傳染性疾病，如布氏桿菌病、毛滴蟲(chóng)病、胎兒弧菌病、傳染性流產(chǎn)、馬媾疫等。第七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

5.克服公母畜體格懸殊不易交配的困難，有利于提高母畜受胎率?？梢钥朔蚬⒛感篌w格相差太大或因生殖道異常造成交配困難引起的不孕，從而有利于提高母畜的受胎率。第九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日6.克服時(shí)間和地域的限制，并可開(kāi)展國(guó)際間的交流與貿(mào)易。優(yōu)良公畜的精液可以長(zhǎng)期冷凍保存，而且便于運(yùn)輸，因此可以在任何時(shí)間(即使在公畜死后)、任何地點(diǎn)選用某頭公畜的精液輸精。對(duì)一些有特殊遺傳特性或即將絕跡的品種或個(gè)體的精液可以冷凍保存，建立精液基因庫(kù)，對(duì)家畜的遺傳、育種及動(dòng)物多樣性的保存均具有重大的科學(xué)價(jià)值。第十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日7.有利于精液的長(zhǎng)期保存與利用8.為開(kāi)展生殖生物技術(shù)科學(xué)研究提供了有效手段項(xiàng)目自然配種人工授精飼養(yǎng)公牛數(shù)需依母牛數(shù)決定少或無(wú)需飼養(yǎng)遺傳選擇性較低較高可配種時(shí)間較長(zhǎng)較短同期配種較不易容易疾病控制較不易容易所需技術(shù)無(wú)需需配合相關(guān)技術(shù)小知識(shí)第十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日四、人工授精技術(shù)的基本環(huán)節(jié)人工授精技術(shù)的基本技術(shù)環(huán)節(jié)包括采精、精液品質(zhì)檢查、精液的稀釋、精液的分裝、精液的保存（液態(tài)保存、冷凍保存）、精液的運(yùn)輸、冷凍精液的解凍與檢查、輸精等。第十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第二節(jié)采精

采精就是精液的采集。采精是人工授精的第一個(gè)環(huán)節(jié)，必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程，以保證公畜正常、充分的性行為表現(xiàn)，采集到量多、質(zhì)優(yōu)、無(wú)污染的精液。第十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日一、采精前的準(zhǔn)備

（一）場(chǎng)地采精應(yīng)有專(zhuān)用場(chǎng)地，以便公畜建立穩(wěn)固的條件反射；要求寬敞、平坦、安靜、清潔，避免陽(yáng)光直射，并有采精架保定公畜；在配種站最好建立采精室，并與精液處理室相連，以方便正常工作，同時(shí)也可以控制溫度、濕度光照等條件，便于消毒，保證精液質(zhì)量。室內(nèi)采精場(chǎng)面積一般為10×10m2。第十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（二）臺(tái)畜臺(tái)畜的選擇必須滿(mǎn)足種公畜的要求，可利用活臺(tái)畜或者假臺(tái)畜。采精時(shí)用發(fā)情良好的母畜做臺(tái)畜效果最好，經(jīng)過(guò)訓(xùn)練的母畜皆可作為臺(tái)畜。第十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

對(duì)于活臺(tái)畜，指使用與公畜同種的母畜、閹畜或另一頭種公畜作臺(tái)畜?；钆_(tái)畜應(yīng)健康、體壯、大小適中、性情溫順、四肢有力。采精前，將臺(tái)畜保定在采精架內(nèi)，臺(tái)畜的尾根部、外陰部、肛門(mén)應(yīng)清洗干凈，采精時(shí)將尾巴纏綁在一側(cè)?；钆_(tái)畜第十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

假臺(tái)畜即采精臺(tái)，模仿母畜體型大小，選用金屬材料或木料做成的具有一定支撐力的支架。假臺(tái)畜要求大小適宜，堅(jiān)實(shí)牢固，表面柔軟干凈，用畜皮、人造革等偽裝。牛采精架的構(gòu)造采精用假臺(tái)畜第十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

◆在假臺(tái)畜的后軀涂抹發(fā)情母畜的陰道粘液或尿液。其目的是刺激公畜性欲并引誘其爬跨假臺(tái)畜，經(jīng)過(guò)幾次采精后即可調(diào)教成功。

◆以發(fā)情母畜誘導(dǎo)，在公畜達(dá)到性高潮時(shí)誘導(dǎo)爬跨假臺(tái)畜。在假臺(tái)畜旁邊牽一發(fā)情母畜，誘使其爬跨數(shù)次，但不使其交配，當(dāng)公畜性欲達(dá)到高峰時(shí)迅速牽走母畜，令其爬跨假臺(tái)畜。公畜調(diào)教的基本方法第十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日公畜調(diào)教的基本方法第十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日公畜調(diào)教的基本方法

◆觀(guān)看調(diào)教好的公畜爬跨假臺(tái)畜。將需要調(diào)教的公畜拴系在假臺(tái)畜附近，讓其觀(guān)看另一頭已經(jīng)調(diào)教好的公畜爬跨假臺(tái)畜采精，然后再誘導(dǎo)其爬跨假臺(tái)畜。第二十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日公畜調(diào)教的注意事項(xiàng)第二十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日公畜調(diào)教的注意事項(xiàng)1.調(diào)教過(guò)程中要反復(fù)進(jìn)行訓(xùn)練，耐心誘導(dǎo)，切勿強(qiáng)迫、恐嚇、抽打等，以防止性抑制而造成調(diào)教困難。2.調(diào)教時(shí)應(yīng)注意公畜外生殖器的清潔衛(wèi)生。3.調(diào)教時(shí)間最好選擇在早上，早上公畜精力充沛，性欲旺盛。4.調(diào)教時(shí)間、地點(diǎn)要固定，每次調(diào)教時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。第二十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（三）性準(zhǔn)備

公畜在采精前，空爬跨幾次臺(tái)畜，可以提高精子數(shù)量及精子活率，這個(gè)空爬跨過(guò)程叫性準(zhǔn)備(也叫性刺激)。常采用以下方法來(lái)做好性準(zhǔn)備：1.改換臺(tái)畜

2.變換臺(tái)畜位置

3.觀(guān)摩其他家畜爬跨——示范作用

4.自身空爬（有的公畜有自淫現(xiàn)象，就不能性刺激，特別值得注意的是寵物狗）第二十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第二十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（四）藥液的準(zhǔn)備

1.配制稀釋液（后講）。2.配制潤(rùn)滑劑（在凡士林中加入1/3的液體石蠟，高壓滅菌后涼冷，每周滅菌一次，并潤(rùn)滑內(nèi)胎）。3.配制70%～75%的酒精。4.配制小蘇打液。取小蘇打粉2g加溫開(kāi)水100ml，消毒公畜包皮，母畜后軀及洗滌器械、桌面等。5.煤酚皂液（來(lái)蘇兒）。取2ml加溫開(kāi)水100ml，消毒母畜的外陰部。第二十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（五）器械的消毒

1.將清洗好的集精杯、貯精瓶、紗布、毛巾、潤(rùn)滑劑等放入高壓滅菌器內(nèi)，以120℃1kg左右的壓力持續(xù)15～20分鐘，也可用一般的鋼筋鍋蒸汽消毒30分鐘。

2.溫度計(jì)、玻璃棒、長(zhǎng)柄鉗子，用75%的酒精棉球消毒，晾干后，用滅菌稀釋液沖洗2遍。

3.輸精管等玻璃容器在清洗后，可放在鼓風(fēng)干燥箱中加溫（160℃～180℃）之間，維持20分鐘。第二十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日吸管輸精針第二十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日二、采精方法

一種理想的采精方法，應(yīng)具備以下四個(gè)條件或者遵循以下四個(gè)基本原則：①可全部收集公畜一次射出的精液②不影響精液品質(zhì)③公畜生殖器官和性機(jī)能不會(huì)受到損傷或影響④器械用具簡(jiǎn)單，使用方便目前在生產(chǎn)中常用的采精方法有：假陰道法、手握法、按摩法和電刺激法，其中以假陰道法最為理想。第二十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第二十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日(一)假陰道法

假陰道法是用模擬母畜陰道環(huán)境制成的人工陰道，誘導(dǎo)公畜在其中射精而獲取精液的方法。1.假陰道的結(jié)構(gòu)和具備條件假陰道是一筒狀結(jié)構(gòu)，主要由外殼、內(nèi)胎、集精杯及其附件組成。外殼為筒狀，可用硬質(zhì)塑料或鍍鋅鐵皮制成；內(nèi)胎為彈性強(qiáng)、薄而柔軟無(wú)毒的橡膠筒，裝在外殼內(nèi)，構(gòu)成假陰道內(nèi)壁。第三十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日附件包括：1.集精杯由暗色玻璃或膠質(zhì)制成，裝在假陰道的一端。2.膠圈固定內(nèi)胎，保定集精杯。充氣用的3.活塞和4.雙連球。連接集精瓶(豬)或集精管(牛)的5.膠漏斗。為防止精液污染而敷設(shè)在假陰道入口處的6.泡沫塑料墊，用于固定龜頭(豬)用的7.螺旋橡膠圈等。第三十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日假陰道第三十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

假陰道在使用時(shí)先安裝內(nèi)胎，然后消毒、沖洗、注水、涂滑潤(rùn)劑、調(diào)節(jié)溫度和壓力等步驟，使假陰道達(dá)到與母畜陰道環(huán)境相似的條件。(1)適當(dāng)溫度注入相當(dāng)假陰道容積2/3的溫水，采精時(shí)保持38～40℃。集精杯應(yīng)保持34～35℃。

(2)適當(dāng)壓力借助注入水和空氣來(lái)調(diào)節(jié)假陰道的壓力。以假陰道內(nèi)胎入口處形成Y

形為宜。

第三十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日壓力過(guò)大壓力適宜第三十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

(3)適當(dāng)潤(rùn)滑度用消毒過(guò)的潤(rùn)滑劑對(duì)假陰道內(nèi)表面潤(rùn)滑，涂抹部位是假陰道全長(zhǎng)的1/2～1/3。

(4)無(wú)菌凡是接觸精液的部分如內(nèi)胎、集精杯及橡膠漏斗均須嚴(yán)格消毒。(5)無(wú)破損漏洞外殼、內(nèi)胎、集精杯不得漏水或漏氣。第三十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第三十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

采精前，將假陰道入口處用消毒過(guò)的紗布2～4層蓋住，防止污染。最好將裝好的假陰道放在40～42℃的恒溫箱內(nèi)，以免采精前溫度下降。在安裝假陰道時(shí)，不同動(dòng)物對(duì)上述條件的要求不同。

牛：38℃，其次是壓力和潤(rùn)滑度。

羊：38℃，其次是壓力和潤(rùn)滑度。

豬：主要是壓力，其次是潤(rùn)滑度。馬：主要是壓力，其次是潤(rùn)滑度。標(biāo)準(zhǔn)壓力，用指頭粗的玻棒從假陰道中不掉下來(lái)。第三十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.采精操作比較安全而簡(jiǎn)單的方法是將假陰道安放在能夠調(diào)節(jié)假陰道角度的假臺(tái)畜后軀內(nèi)，任由公畜爬跨并在假陰道內(nèi)射精。A.安裝假陰道B.引導(dǎo)公畜至臺(tái)畜后面，誘導(dǎo)公畜爬跨C.及時(shí)將陰莖導(dǎo)入假陰道D.向下傾斜假陰道的集精杯端，收集精液E.當(dāng)陰莖回縮自動(dòng)脫出時(shí)，將假陰道直立、放氣、放水F.精液送化驗(yàn)室進(jìn)行檢查第三十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

公牛采精：

采精員站在臺(tái)畜的右后側(cè)，右手握住假陰道，集精杯一端向上。當(dāng)公畜爬跨時(shí)，使假陰道與公畜陰莖伸出方向成直線(xiàn)，迅速將陰莖導(dǎo)入假陰道內(nèi)，公畜的后軀向前沖即射精，隨后將假陰道集精杯一端向下傾斜，以便使精液完全流入集精杯內(nèi)。第三十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

當(dāng)公畜爬下時(shí)，采精人員應(yīng)持假陰道隨陰莖后移，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，放出空氣，待陰莖自行軟縮脫出后，迅速取下假陰道，立即送往精液處理室檢查，取下集精杯，蓋上集精杯蓋。

第四十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第四十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

(二)手握法

手握法適宜于采集豬、犬、狐貍等的精液，具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、能采集富含精子部分的精液等優(yōu)點(diǎn)，但其缺點(diǎn)是精液容易污染和受低溫打擊的影響。手握法采精是模仿母豬子宮頸對(duì)公豬螺旋狀陰莖龜頭約束力而引起射精的生理刺激，以手握其陰莖龜頭呈節(jié)奏性松緊給予壓力進(jìn)行刺激而采精。當(dāng)公豬爬跨臺(tái)畜陰莖伸出后，采精員握在空拳中，使其陰莖抽動(dòng)片刻后，手指握緊螺旋狀龜頭，然后順勢(shì)牽出整個(gè)陰莖，就可采精。

第四十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第四十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

采精員蹲在假臺(tái)畜一側(cè)，戴上滅菌手套，待公豬爬跨臺(tái)畜后，用0.1%高錳酸鉀溶液將公豬包皮附近洗凈消毒，并用生理鹽水沖洗，然后將手捏成空拳，于公豬陰莖伸出同時(shí)，導(dǎo)入空拳內(nèi)，一松一緊有節(jié)奏性地施加壓力，以不使陰莖滑脫為標(biāo)準(zhǔn)，待陰莖充分勃起時(shí)即可引起公豬射精。另一只手持保溫的集精瓶(帶有過(guò)濾紗布)收集濃精部分的精液。公豬射精停止，可按上述法再次施加壓力，即可第2或第3次射精，待射精全部結(jié)束時(shí)再松開(kāi)陰莖。第四十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第四十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日分段采精：棄掉含副性腺分泌物多、精子較少、精液清亮白色的第一段和精液較稀、清亮、精子少的第三段，只收集精液濃、精子多、呈乳白色的第二段精液。第四十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

(三)按摩法

按摩法適用于無(wú)爬跨能力的公牛和禽類(lèi)。對(duì)于牛，先將直腸宿糞排除，再將手伸入直腸約25cm處，按摩精囊腺和輸精管壺腹，使精液流出，同時(shí)由助手按摩陰莖S狀彎曲部使陰莖伸出，便于收集精液。雞采精時(shí)由助手兩手分握公雞兩腿，以自然寬度分開(kāi)，尾部朝向術(shù)者，泄殖腔周?chē)裘竞?，采精員右手拇指與食指在泄殖腔下部?jī)蓚?cè)抖動(dòng)觸摸腹部柔軟處，然后迅速輕輕用力向上抵壓泄殖腔，使交配器翻出；固定在泄殖腔兩上側(cè)的左手拇指和食指微微擠壓，精液即可順利排出。第四十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日三、采精頻率

采精頻率是指每周對(duì)公畜的采精次數(shù)。1g睪丸組織每周大約生產(chǎn)5000萬(wàn)精子。

牛：成年公牛一般每周采精2次，每次連續(xù)采精2遍。也可每周采精3次，隔日采精。牛每次射精約為100～150億。羊：附睪貯存量大而射精量少，由于配種季節(jié)短，每天可采精多次而不影響精液品質(zhì)。每次射精約為20～30億。

豬：射精量大，能很快使附睪內(nèi)貯存精子徹底排空，成年公豬采精最好隔日1次。每次射精約為300～500億。

馬：射精量大，很快使附睪內(nèi)貯存精子徹底排空，采精最好隔日1次。每次射精約為100～150億。第四十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

精液品質(zhì)檢查的目的在于確定精液品質(zhì)的優(yōu)劣，以此作為精液稀釋、保存的依據(jù)。同時(shí)，也反映種公畜飼養(yǎng)管理水平和生殖器官的機(jī)能狀態(tài)，以及精液在稀釋、保存、冷凍和運(yùn)輸過(guò)程中的品質(zhì)變化及處理效果。采得精液后，要迅速置于37℃條件下進(jìn)行檢查。

第三節(jié)精液品質(zhì)檢查第四十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

在檢查精液過(guò)程中應(yīng)注意：首先標(biāo)記清被檢精液的來(lái)源，檢查取樣具有代表性；檢查過(guò)程中不能使精液受到任何不良因素影響而遭受危害；檢查操作時(shí)力求動(dòng)作迅速，評(píng)定結(jié)果準(zhǔn)確?，F(xiàn)行評(píng)定精液品質(zhì)的方法主要有外觀(guān)檢查法、顯微鏡檢查法、生物化學(xué)法等。無(wú)論哪一種檢查法，都必須以受精力高低為依據(jù)。第五十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日一、精液外觀(guān)和精液量1.云霧狀牛、羊、鹿、犬和狐的精液因精子密度大而混濁不透明。肉眼觀(guān)察剛采得的新鮮精液時(shí)，可看到如翻騰滾滾的霧狀，這是精子密度大而運(yùn)動(dòng)又非?；钴S的表現(xiàn)。精液混濁度越大，云霧狀越顯著，精子密度和活率也就越高。云霧狀顯著者可用“+++”表示；比較顯著用“++表示；不顯著用“+”表示；如果沒(méi)有云霧狀則用“-”表示。馬、豬的精子少，混濁度也較低，云霧狀不顯著。

2.氣味公畜的精液略帶腥味。如有異常氣味，可能是混有尿液、膿液、塵土、糞渣或其他異物的表現(xiàn)，應(yīng)廢棄。色澤與氣味檢查可以結(jié)合進(jìn)行，使鑒定結(jié)果更為準(zhǔn)確。

第五十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日新鮮收集的羊、牛、馬、豬（從左到右）的射出精液

3.色澤正常精液的顏色為乳白色和灰白色，且精子密度越高，乳白程度越濃，其透明度也就越低。正常牛、羊、鹿、犬和狐的精液均呈乳白色或灰白色，但有時(shí)呈乳黃色（多見(jiàn)于牛)；豬、馬、兔均為淡乳白色或淺灰白色。第五十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

4.射精量

公畜一次采精射出精液的容量。射精量因動(dòng)物種類(lèi)、品種及個(gè)體的不同而不同。同一個(gè)體也會(huì)因年齡、營(yíng)養(yǎng)、性準(zhǔn)備、采精方法、采精頻率而有所變化。第五十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日畜種馬驢牛羊豬犬兔鹿狐平均射精量（ml）7050412505131正常范圍（ml）30～10020～802～100.5～2150～5002～150.2～22～50.5～3不同品種動(dòng)物射精量第五十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日二、精子活率

精子活率：就是指精液中呈直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)占總精子數(shù)的百分比。直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)的精子是指精子近似直線(xiàn)地從一點(diǎn)移動(dòng)或前進(jìn)到另一點(diǎn)，也稱(chēng)為有效精子。精子的運(yùn)動(dòng)方式有擺動(dòng)、旋轉(zhuǎn)、曲線(xiàn)前進(jìn)和直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)幾種。其中只有直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子才具有正常的生存和受精能力，與精子的受精力密切相關(guān)。第五十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日精子活率的測(cè)定是評(píng)定精液品質(zhì)優(yōu)劣的一個(gè)重要指標(biāo)。一般在采精后、精液處理前后、輸精前都應(yīng)進(jìn)行檢查。第五十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

精子活率的檢查通常是在200～400倍顯微鏡下進(jìn)行。由于精子受溫度的影響較大，檢查時(shí)應(yīng)在37℃左右進(jìn)行，最好用帶有電熱裝置的顯微鏡。

第五十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

精子活率一般采用十級(jí)評(píng)分法來(lái)表示。即按精子直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)占視野中精子的估計(jì)百分比來(lái)表示。若精子100%呈直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)，則評(píng)為1.0，90%即為0.9，依此類(lèi)推。一般新鮮精液活率為0.7～0.9左右。其中奶牛的精液比水牛高，驢的比馬的高，豬的濃精和牛相似。為了保證有較高的受胎率，用于輸精的精子活率應(yīng)達(dá)到一定等級(jí)，液態(tài)保存的精液應(yīng)在0.5～0.6以上，冷凍保存的精液在0.3以上。第五十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日牛精子活力檢查的程序載玻片預(yù)溫精液稀釋取樣檢查鏡檢活力估測(cè)活力記錄將恒溫加熱板放在載物臺(tái)上，打開(kāi)電源并調(diào)整控制溫度至37℃，然后放置載玻片

將生理鹽水與精液等溫后，按1:10稀釋取10ul放在預(yù)溫后載玻片中間，蓋上蓋玻片用100倍和400倍觀(guān)察判斷視野中前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子占的百分率

按10級(jí)制評(píng)分和記錄第五十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日三、精子密度

精子密度：也稱(chēng)精子濃度，指精液的單位容積(通常是1ml)內(nèi)所含有的精子數(shù)目。目前測(cè)定精子密度的主要方法有目測(cè)法、血細(xì)胞計(jì)數(shù)法和光電比色法等。

1.目測(cè)法在顯微鏡下根據(jù)精子分布的稠密和稀疏程度，將精子大致分為“密”、“中”、“稀”三個(gè)等級(jí)。第六十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

密：表示在整個(gè)視野里精子密度很大，彼此之間空隙很小，很難看到單個(gè)精子運(yùn)動(dòng)情況，每毫升精液中含有精子數(shù)為10億以上。中：表示精子間空隙明顯，彼此間距離約一個(gè)精子的長(zhǎng)度，每毫升精液含精子數(shù)大約2～10億。

?。罕硎揪臃稚⒃谝曇爸?，精子之間空隙超過(guò)一個(gè)精子的長(zhǎng)度，每毫升含2億個(gè)以下。

第六十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

畜種精子密度密中稀牛10～20億/ml8～10億/ml8億/ml以下羊25億/ml以上20～25億/ml20億/ml以下豬、馬2億/ml以上1～2億/ml1億/ml以下第六十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.血細(xì)胞計(jì)數(shù)法：用血色素吸管吸取被測(cè)精液作100或200倍稀釋?zhuān)♂屢河?%NaCl溶液。然后取一滴滴于計(jì)數(shù)板上的蓋玻片邊緣，使精液滲入到計(jì)數(shù)室內(nèi)。在400～600倍顯微鏡下統(tǒng)計(jì)出計(jì)數(shù)室的四角及中央共5個(gè)中方格內(nèi)的80個(gè)小方格內(nèi)的精子數(shù)（X），代入下列公式即為每毫升被測(cè)原精液所含的精子數(shù)

X×5×10×稀釋倍數(shù)×1000＝精子數(shù)/mL簡(jiǎn)化計(jì)算：5個(gè)大方格的精子數(shù)×5萬(wàn)×稀釋倍數(shù)為減少誤差，須進(jìn)行兩次計(jì)數(shù)，且誤差小于10%。第六十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第六十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第六十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

3.光電比色計(jì)測(cè)定法目前較準(zhǔn)確用來(lái)測(cè)定精子密度的一種簡(jiǎn)便方法，適用于牛、羊的精液和除去精液膠樣物的各種動(dòng)物精液。其原理是精液中精子越多、其透光性越低。使用光電比色計(jì)通過(guò)反射光和透射光檢驗(yàn)，能準(zhǔn)確測(cè)定精液中精子的密度。檢測(cè)前需先繪制成查數(shù)表。第六十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

3.光電比色計(jì)測(cè)定法操作方法：將原精液稀釋成不同比例，并以血細(xì)胞計(jì)數(shù)器測(cè)定各種稀釋比例的精子密度，制成標(biāo)準(zhǔn)管，再用光電比色計(jì)測(cè)定已知精子密度的各種標(biāo)準(zhǔn)透光度求出相差1%透光率的級(jí)差精子數(shù)，根據(jù)其不同透光度與其對(duì)應(yīng)的精子數(shù)，制成精子查數(shù)表，也可繪成曲線(xiàn)圖。測(cè)定精液樣品時(shí)，只要將原精液按一定比例稀釋?zhuān)鶕?jù)其透光度查對(duì)精子查數(shù)表，即可得出精液樣品的精子密度。第六十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日四、精子形態(tài)精子形態(tài)是否正常與母畜的受胎率密切相關(guān)。精子形態(tài)檢查有畸形率和頂體異常率檢查兩個(gè)方面。

1.精子畸形率：畸形精子是形態(tài)和結(jié)構(gòu)不正常的精子的統(tǒng)稱(chēng)。精子畸形率是精液中畸形精子數(shù)占總精子數(shù)的百分率。根據(jù)精子的畸形部位，可分為4類(lèi)。

第六十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

第1類(lèi)：頭部畸形，如頭部巨大、瘦小、細(xì)長(zhǎng)、圓形、輪廓不清、皺縮、缺損、雙頭等；

第2類(lèi)：頸部畸形，如頸部膨大、纖細(xì)、屈折、不全、帶有原生質(zhì)滴、不鮮明、雙頸等；

第3類(lèi)：中段畸形，如中段膨大、纖細(xì)、不全、帶有原生質(zhì)滴、雙體等；第4類(lèi)：主段畸形，如主段彎曲、屈折、回旋、短小、長(zhǎng)大、缺陷、帶有原生質(zhì)滴、雙尾等，以中段和主段畸形為多。第六十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

第七十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

在正常精液中，一般以精子尾部畸形比較多見(jiàn)，頭部和頸部畸形較少。動(dòng)物精液中畸形精子率一般不會(huì)超過(guò)20%。牛不超過(guò)18%，水牛不超過(guò)15%，羊不超過(guò)14%，豬不超過(guò)18%，馬不超過(guò)12%，狗和狐不超過(guò)20%。如果超過(guò)20%，則影響受精力，表示精子品質(zhì)不良，不宜用作輸精。第七十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日1.將1滴精液滴在玻璃片上2.用另一玻片拉向液滴，使玻璃片邊緣附著精液3.將玻片推向另一端第七十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

●精子生成過(guò)程受阻●副性腺及尿道分泌物的病理變化●精液處理不當(dāng)，精子遭受外界不良影響的刺激?；尉拥臋z查，可在計(jì)數(shù)死活精子數(shù)的同時(shí)進(jìn)行，也可將精液制成抹片直接在顯微鏡下觀(guān)察，或用普通染色液（美藍(lán)）或紅藍(lán)墨水染色，水洗干燥后鏡檢。檢查的精子數(shù)不得少于200個(gè)，計(jì)算畸形百分比，即畸形率?；尉映霈F(xiàn)的主要原因?yàn)槭裁?？第七十三?yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.精子頂體異常率

精子頂體異常率是指精液中頂體異常的精子數(shù)占精子總數(shù)的百分率。頂體中含有多種酶類(lèi)，在受精過(guò)程中具有重要作用，因此只有呈直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)并具有完整頂體的精子才具有正常的受精能力。第七十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.精子頂體異常率在正常情況下，牛精子頂體異常率為5.9%，豬為2.3%。如頂體異常率顯著增加，例如牛超過(guò)14%以上，豬超過(guò)4.3%以上，就會(huì)直接影響受精力。頂體異常主要有膨脹、缺損、部分脫落、全部脫落等數(shù)種。頂體異常出現(xiàn)的原因可能與精子生成過(guò)程和副性腺分泌物異常有關(guān)，但更重要的可能是由于射出體外后精子受低溫打擊，特別是冷凍方法不當(dāng)而造成。第七十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

頂體異常率的常規(guī)檢查方法是：先同畸形精子檢查一樣制成抹片，待自然干燥后再在固定液中固定片刻，水洗后用姬姆薩緩沖液染色1.5～2.0h，再水洗干燥后，用樹(shù)脂封裝，置于1000倍以上顯微鏡或相差顯微鏡下觀(guān)察200個(gè)以上的精子，計(jì)算異常率。凡是含有卵黃、甘油成分稀釋液的精液抹片，必須先要在含有甲醛的檸檬酸鹽液中固定，然后在37℃下干燥后，才能染色和鏡檢。第七十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第七十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日五、精子存活時(shí)間和存活指數(shù)精子存活時(shí)間是指精子在體外一定保存條件下的總生存時(shí)間。存活指數(shù)是指精子存活時(shí)間及精子活率變化的一項(xiàng)綜合指標(biāo)，反映精子活率下降速度。檢查時(shí)，將稀釋后的精液置于一定的溫度下(0～5℃或者37℃)，間隔一定時(shí)間檢查活率，直至無(wú)活動(dòng)精子或只有個(gè)別精子呈擺動(dòng)活動(dòng)為止。精子存活時(shí)間越長(zhǎng)，指數(shù)越大，說(shuō)明精子生活力越強(qiáng)，品質(zhì)越好。第七十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日精子存活時(shí)間（h）：檢查間隔時(shí)間的總和－最末兩次檢查間隔時(shí)間的一半

精子存活指數(shù)＝每前后相鄰兩次檢查精子活率的平均數(shù)與間隔時(shí)間乘積的總和。第七十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日六、精子代謝能力精子能量代謝的強(qiáng)弱在一定程度上反應(yīng)了精子的生理特征及其受精潛能。在正常情況下，精子代謝主要利用生活環(huán)境中的外源性物質(zhì)，其中以糖類(lèi)為主，精子可通過(guò)糖酵解或呼吸作用而獲得能量?？梢?jiàn)，精子代謝能力越強(qiáng)，消耗的糖和氧氣越多，表現(xiàn)活動(dòng)力越強(qiáng)。第八十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日六、精子代謝能力1.精子耗氧量測(cè)定指以1億個(gè)精子在37℃的條件下每小時(shí)內(nèi)所消耗的氧氣的微升數(shù)。將已知精子密度的一定數(shù)量的精液置于37℃的溫箱中孵育1h，用瓦氏呼吸器測(cè)定其耗氧量，則可計(jì)算出精子耗氧率。

2.精液果糖分解測(cè)定精液中果糖分解能力與精子活率有密切的關(guān)系。果糖測(cè)定是以1億精子在37℃和嫌氧條件下每小時(shí)消耗果糖的毫克數(shù)。第八十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

3.美藍(lán)褪色試驗(yàn)美藍(lán)是一種氧化還原劑，氧化后呈藍(lán)色，而還原后呈無(wú)色。精子在美藍(lán)溶液中，呼吸時(shí)氧化脫氫，美藍(lán)獲得氫離子后便由藍(lán)色還原為無(wú)色。因此，根據(jù)美藍(lán)溶液褪色時(shí)間的快慢，便可估測(cè)精子的活率和密度的高低。第八十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

七、精液的細(xì)菌學(xué)檢查精液中病原微生物及菌落數(shù)量已列入評(píng)定精液品質(zhì)檢查的重要指標(biāo)，并作為海關(guān)進(jìn)出口精液的重要檢驗(yàn)項(xiàng)目。精液中如果含有大量細(xì)菌微生物的存在，不僅會(huì)影響精子壽命和降低受精能力，而且還將導(dǎo)致有關(guān)疾病的傳播。精液中如果含有病原微生物，每毫升精液中細(xì)菌菌落數(shù)超過(guò)1000個(gè)，則視為不合格。第八十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日計(jì)算機(jī)輔助精子分析（computerassistantsemenassay,CASA)第八十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第八十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日一、精液稀釋的目的

精液稀釋是在精液中加入一定量按特定配方配制的、適宜于精子存活并保持受精能力的稀釋液。1.延長(zhǎng)精子的存活時(shí)間。通過(guò)降低精液能量消耗，補(bǔ)充適量營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)物質(zhì)，抑制精液中有害微生物活動(dòng)，可延長(zhǎng)精子的壽命。

2.擴(kuò)大精液容量，提高配種率。即提高一次射精量可配母畜頭數(shù)。

3.便于精液長(zhǎng)期保存和運(yùn)輸。第四節(jié)精液的稀釋第八十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日二、稀釋液的主要成份及作用

稀釋液：加入精液中的等滲溶液。（一）主要成份1.奶類(lèi)：牛奶、羊奶、奶粉，最好是各種鮮奶，其目的是為精子提供能量。鮮奶用前在92～95℃的條件下，經(jīng)10min的熱處理，除去其中的乳烴素，然后過(guò)濾，除去泡沫。

2.卵黃：含有卵磷酯，用1周以?xún)?nèi)的新鮮雞蛋，涼開(kāi)水洗凈外殼，用75%的酒精消毒一次，晾干，打開(kāi)后用注射器吸取卵黃。

第八十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日3.甘油（丙三醇）：三個(gè)“－OH”親水性強(qiáng)，具有抗凍作用。4.Tris（三羥基甲基氨基甲烷，三基）：非電解胺化物。作用：①調(diào)節(jié)pH值；②保護(hù)精子具有受精能力和不被凍傷等。5.糖類(lèi)（果糖、葡萄糖等）：①抗凍；②提供能量；③降低電解質(zhì)濃度。

6.其它：丙二醇、生理鹽水、酶類(lèi)、非電解質(zhì)、激素、維生素等。

第八十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第八十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（二）稀釋液中各成份

1.稀釋劑：擴(kuò)大精液容量，要求必須是等滲溶液，例如奶類(lèi)、糖類(lèi)、生理鹽水等。2.營(yíng)養(yǎng)劑：為精子提供營(yíng)養(yǎng)和能量等，補(bǔ)充精子在代謝過(guò)程中的能量消耗。精子代謝只是單純的分解作用，不能通過(guò)同化作用將外界物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樽陨沓煞?。糖?lèi)（葡萄糖、果糖、乳糖等）、奶類(lèi)、卵黃等。3.保護(hù)劑：保護(hù)精子的作用，以免受到各種不良外界環(huán)境的危害。第九十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

①降低精液中（精清）的電解質(zhì)濃度（糖類(lèi)、磷酸鹽、酒石酸鹽等）精清中電解質(zhì)濃度很高，生理上具有激發(fā)精子活動(dòng)，有利于精子和卵子結(jié)合受精。但同時(shí)也能促進(jìn)精子早衰，破壞精子脂蛋白膜，使精子失去電荷聚集能力，不利于精液保存。一般常用的非電解質(zhì)、弱電解質(zhì)有各種糖類(lèi)、氨基乙酸、甘氨酸等。

各種成分的具體作用：第九十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

②緩沖物質(zhì)的作用：緩沖劑（檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉等）緩沖物質(zhì)是用以保持精液適當(dāng)?shù)膒H值。常用的緩沖劑有檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉、磷酸二氫鉀以及三羥甲基氨基甲烷(Tris)等。第九十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

③防止冷休克（低溫打擊）的作用當(dāng)精子從體溫降到20℃時(shí)對(duì)其活力影響不大，當(dāng)精液從20℃下降至10℃，則有較大影響，會(huì)使精子遭受冷打擊而喪失活率。卵黃和奶類(lèi)等含有卵磷脂，防止冷休克的發(fā)生。

當(dāng)從10℃降到0℃（急劇降溫10～20分鐘），就會(huì)造成精子的不可逆性死亡，即冷休克。這是因?yàn)榫雍械目s醛磷脂融點(diǎn)高，在低溫下容易凝結(jié)，而不能被精子利用，造成精子不可逆的冷休克。第九十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

④抗凍作用：具有抗冷凍危害的作用。精液在冷凍過(guò)程中，精子內(nèi)外環(huán)境的水分，必須經(jīng)歷液態(tài)和固態(tài)的過(guò)程，這種物態(tài)的轉(zhuǎn)化對(duì)精子具有極大的危害。而抗凍物質(zhì)有助于減輕或消除這種危害。一般常用于抗凍的保護(hù)物多采用甘油、糖類(lèi)、二甲基亞砜（DMSO），TRIS等。

⑤抗菌作用。在采精過(guò)程中即便在嚴(yán)格的操作下，也難免要受到某些細(xì)菌等有害微生物的污染，而精液和稀釋液又都是病原微物良好的培養(yǎng)基。常用的抗生素有青霉素、鏈霉素、氨苯磺胺素、林肯霉素、多粘菌素等。第九十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日4.其它類(lèi)物質(zhì)

①酶類(lèi)：乳酸脫氫酶，細(xì)胞色素氧化酶，琥珀酸脫氫酶，β-葡萄糖苷酸酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶，過(guò)氧化氫酶，粘蛋白酶等。

②激素：催產(chǎn)素，PGE2，PGF2α,T等。

③維生素：VC,VB2,B12,VE等。酶類(lèi)、激素類(lèi)、維生素類(lèi)等，有助于調(diào)節(jié)和改善精子外在環(huán)境的理化特性，以及母畜生殖道的生理機(jī)能，以利于提高受精機(jī)會(huì)，促進(jìn)合子發(fā)育。④常溫保存時(shí)通入CO2可延長(zhǎng)保存時(shí)間。⑤在顆粒精液中加入染料用作標(biāo)志等。第九十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日三、稀釋液配制的注意事項(xiàng)

1.消毒：配制好的稀釋液，瓶口用硫酸紙包好，外用布蓋上，扎緊，置高壓鍋中，0.8kg、105℃的壓力維持30min；糖類(lèi)稀釋液只能用0.5kg的壓力，或用水煮沸30min即可。2.用于配制稀釋液以及封裝保存精液的一切用品，都必須消毒，使用前再用稀釋液沖洗2～3次。3.稀釋液應(yīng)新鮮、無(wú)菌，現(xiàn)用現(xiàn)配。第九十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日4.在稀釋液中加入卵黃、奶類(lèi)及抗菌素等藥物應(yīng)在稀釋液降溫到35℃以下時(shí)再加入。

5.稀釋液加入卵黃和抗菌素前應(yīng)過(guò)濾。0.02～0.2μm濾膜。6.成本低，配制方便，精子存活率高，受胎率高。第九十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日四、精液的稀釋

（一）稀釋液的種類(lèi)根據(jù)性質(zhì)和用途可分為4類(lèi)。1.現(xiàn)用稀釋液：適用于采精后立即授精，以單純擴(kuò)大精液容量，增加輸精母畜頭數(shù)為目的。此類(lèi)型稀釋液以簡(jiǎn)單的等滲的糖類(lèi)和奶類(lèi)為主體。

2.常溫保存稀釋液：適用于精液在常溫下作短期保存，具有以糖類(lèi)和弱酸鹽為主體的pH偏低的特點(diǎn)。

3.低溫保存稀釋液：適用于精液低溫保存，具有含卵黃或奶液為主體的抗冷休克特點(diǎn)。第九十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

4.冷凍保存稀釋液：適用于精液超低溫冷凍保存，具有甘油、二甲亞砜等抗凍物質(zhì)為主體特點(diǎn)，此類(lèi)稀釋液比較復(fù)雜，有僅一種稀釋液組成，也有由多種稀釋液組成。第九十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（二）精液稀釋的方法

1.先將稀釋精液所用的器具加溫到30～35℃，并用等溫稀釋液沖洗2～3次（防止溫度和滲透壓的損害）。2.新采集的精液及時(shí)稀釋?zhuān)覝氐陀?0℃時(shí)，要用精液無(wú)菌保溫箱。精液放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)則會(huì)降低精子活率，一般在0.5h內(nèi)進(jìn)行稀釋。

第一百頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日3.稀釋液與精液的溫度必須一致，可用消毒溫度計(jì)測(cè)量。采精時(shí)集精杯加保溫措施，稀釋液預(yù)先加溫到30℃左右，置于精液保溫箱中。

4.在稀釋精液時(shí)，將稀釋液沿杯壁緩緩加入精液中，一般將稀釋液與精液置于預(yù)定溫度的保溫瓶中作等倍稀釋處理。然后輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)精液瓶或用滅菌棒攪動(dòng)，使之混勻。第一百零一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

5.如果進(jìn)行低倍稀釋?zhuān)?～5倍）可一次完成，若高倍稀釋時(shí)則須分兩步進(jìn)行，即先低倍稀釋?zhuān)乐咕铀幍沫h(huán)境突然改變，對(duì)精子造成打擊。間隔1.5～2h后，精液降至保存（平衡）溫度時(shí)，進(jìn)行二次稀釋。6.精液稀釋后，先靜置片刻，再做活率檢查，如果活率沒(méi)有變化，則分裝保存。如果活率下降，則說(shuō)明稀釋或操作不當(dāng)，不宜使用，并檢查原因。第一百零二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（二）稀釋倍數(shù)精液的稀釋?xiě)?yīng)保證每輸精劑量所含直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)不低于輸精標(biāo)準(zhǔn)要求。精液稀釋倍數(shù)應(yīng)根據(jù)以下依據(jù)決定：

1.稀釋液種類(lèi)：糖類(lèi)稀釋液→低倍稀釋?zhuān)填?lèi)稀釋液→高倍稀釋。

2.保存時(shí)間：時(shí)間長(zhǎng)→高倍稀釋?zhuān)瑫r(shí)間短→低倍稀釋。

3.精液保存方法：冷凍保存稀釋倍數(shù)應(yīng)低一些，而液態(tài)保存稀釋倍數(shù)可高些。

4.畜種：羊、牛、鹿精子密度大，稀釋的倍數(shù)應(yīng)大一點(diǎn)，而豬、馬密度小，則不宜作高倍稀釋。第一百零三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日（三）每次輸精保持受精力所需的最低有效精子數(shù)畜種牛山羊豬馬稀釋倍數(shù)10～402～42～42～3輸精量（mL）0.2～10.5～130～4015～30有效精子數(shù)2000～5000萬(wàn)5000萬(wàn)2億2.5～5億牛：射精量8ml，活率0.7，密度12億個(gè)/ml，每毫升精液中有效精子數(shù)12×0.7=8.4億個(gè)，若每毫升稀釋后的精液中含有3000萬(wàn)個(gè)有效精子，則每毫升可稀釋倍數(shù)8.4億÷0.3億=28倍?？上♂?zhuān)?ml×28=224ml，可供224頭母牛輸精。第一百零四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日一、保存目的

1.延長(zhǎng)精子存活時(shí)間，保持其受精能力；2.擴(kuò)大種公畜（優(yōu)良）精液利用率；3.方便運(yùn)輸，擴(kuò)大精液的利用范圍。二、保存方法

（一）常溫保存法

常溫保存是指在15～25℃之間的溫度范圍內(nèi)保存精液的方法。

1.原理：利用稀釋液的弱酸性（pH6.2～6.4）環(huán)境抑制精子活動(dòng)，以減少其能量消耗，使精子保持在可逆性的靜止?fàn)顟B(tài)而不失去受精能力。即當(dāng)精液pH值降低到一定的酸度時(shí)，精子運(yùn)動(dòng)及代謝受到可逆性抑制，但當(dāng)pH值恢復(fù)到精液正常的pH值時(shí)，精子可以復(fù)蘇，從而對(duì)精液進(jìn)行保存的方法。第五節(jié)精液的保存第一百零五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.調(diào)整pH的方法：為了使稀釋液的pH達(dá)到所需范圍，可以選用下面三種方法中的一種：（1）向稀釋液中輸入CO2，如伊里尼變溫稀釋液(IVT)。（2）利用精子在保存過(guò)程中自己產(chǎn)生的CO2，自行調(diào)節(jié)pH，如康奈爾大學(xué)稀釋液(CUE)。（3）在稀釋液中配有酸類(lèi)物質(zhì)和充以氮?dú)?，如已酸稀釋液及一些植物汁液（椰汁稀釋液，CME）。第一百零六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日牛冷凍精液稀釋液配方

●海帶多糖0.025～

0.2％、葡萄糖2～

2.5％、檸檬酸鈉0.9～

1.5％、蒸餾水65～

75％、白蛋白17～

18％、甘油7～

10％、青霉素8.5～

10萬(wàn)IU

●果糖0.5～1.5％、檸檬酸鈉1～2％、TRIS1.5～3％、青霉素G鈉5～15萬(wàn)IU、甘油5～8％、低密度脂蛋白5～10%、去離子水92～95％

第一百零七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

3.稀釋液配制：牛的檸檬酸鉀鈉稀釋液（100ml）。配方：檸檬酸鉀0.11g磺胺粉0.3g檸檬酸鈉0.6g卵黃10ml磷酸氫二鈉0.15g青鏈霉素各10萬(wàn)葡萄糖0.97g蒸餾水加到100ml

配制方法：將檸檬酸鉀、檸檬酸鈉、磷酸氫二鈉、葡萄糖和磺胺粉溶于蒸餾水，加熱煮開(kāi)，并冷卻后加入卵黃和抗菌素，通入CO220～30min，控制pH在6.2～6.4。第一百零八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（二）低溫保存法

低溫保存就是將稀釋過(guò)的精液置于0～5℃的低溫條件下保存。通常放在冰箱內(nèi)或裝有冰塊的廣口保溫瓶中冷藏。1.原理：在低溫（0～5℃）保存過(guò)程中，精子處于休眠狀態(tài)，代謝降到最低水平，并且在采精以及精液稀釋等操作過(guò)程中混入的細(xì)菌微生物的繁殖與危害也受到抑制，故精子能夠保存的時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)。在輸精的時(shí)候，將溫度回升至37℃左右，精子又能逐漸恢復(fù)正常的代謝，并保持其正常的受精能力。然而，精子對(duì)冷刺激，特別是溫度急劇下降至10℃以下時(shí)，會(huì)使精子發(fā)生不可逆的冷休克現(xiàn)象。因此，在稀釋液中須添加卵黃、奶類(lèi)等抗休克物質(zhì)，以提高精子的抗冷能力。第一百零九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.稀釋液（1）牛精液低溫保存稀釋液在0～5℃條件下，有效保存期可達(dá)7d之久。牛的檸檬酸鈉--卵黃稀釋液?；A(chǔ)液：取二水檸檬酸鈉2.9g，加水定溶于100ml。稀釋液：基礎(chǔ)液75ml，卵黃25ml，青鏈霉素各1000IU/ml。（2）豬精液低溫保存稀釋液豬的濃份精液或離心后的精液，可在5～10℃條件下保存3d，且具有受精能力。在0～5℃下也可保存。豬：取新鮮牛、羊奶100ml，煮沸10min，去掉浮沫，冷卻過(guò)濾加入青鏈霉素1000單位/ml。第一百一十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（3）馬和綿羊精液低溫保存稀釋液由于精液本身的特性以及季節(jié)配種的影響，馬和綿羊精液的低溫保存效果不如其它家畜的效果好。因此，在生產(chǎn)中的應(yīng)用并不普遍。

3.精液保存方法（1）冰箱保存法：冷源是冰箱。將稀釋好的精液裝入貯精瓶封裝后，用12層紗布或3～4層毛巾包裹，外用塑料薄膜用皮筋扎緊，先在室溫下降溫1h，再用8～15℃涼水冷卻1h，然后放入2～5℃的冰箱中逐漸冷卻（2h以上），嚴(yán)格控制溫度，并保持恒定。（2）冰塊保存法。（3）農(nóng)村可用水井或窖進(jìn)行保存。第一百一十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

4.注意事項(xiàng)

(1)稀釋液必須含有卵黃或奶類(lèi)；卵黃用量一般在10～30%，牛奶適量。

(2)緩慢降溫牛、羊、驢：20℃—0～5℃，約1～2h，0.2℃/min豬：30℃～15℃→1～2h；15～10℃→6h；10℃～0℃→2～3d。第一百一十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（三）超低溫（冷凍）保存

精液冷凍保存，是利用干冰(－79℃)、液氮(－196℃)或其它制冷設(shè)備作為冷源，將精液經(jīng)過(guò)特殊處理后，保存在低溫下，以達(dá)到長(zhǎng)期保存精液的目的。1.原理精子具有受溫度變化直接影響其本身活動(dòng)力和代謝能力的生物學(xué)特性。精子保存在超低溫狀態(tài)下，其代謝活動(dòng)完全受到抑制，生命以相對(duì)靜止?fàn)顟B(tài)保持下來(lái)，一旦升溫又能復(fù)蘇而不失去受精能力。精子之所以能夠復(fù)蘇的關(guān)鍵在于精液在冷凍過(guò)程中，在冷凍劑的保護(hù)下，防止了精子水分冰晶化對(duì)精子的破壞，而盡可能形成玻璃化。第一百一十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

冰晶化是水在降溫過(guò)程中的一定溫度條件下，水分子重新按照幾何圖形排列形成冰晶的過(guò)程。冰晶改變了精子膜的溶質(zhì)濃度和滲透壓，造成精子脫水，發(fā)生不可逆的化學(xué)毒害而死亡。冰晶化只有當(dāng)溫度在0～－60℃溫度范圍內(nèi)緩慢降溫時(shí)形成，降溫越慢冰晶越大，－15～－25℃形成冰晶最多。在冷凍精液過(guò)程中，只有避開(kāi)0～－60℃有害溫區(qū)，才有利于精子長(zhǎng)期保存。第一百一十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日玻璃化的冰凍狀態(tài)是水在超低溫下，水分子仍然保持原來(lái)自然的一種無(wú)次序的排列狀態(tài)，形成玻璃樣的堅(jiān)硬而均勻的冰結(jié)。在此狀態(tài)下，精子不會(huì)發(fā)生細(xì)胞脫水，結(jié)構(gòu)維持正常，解凍后可以復(fù)蘇。第一百一十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.冷源

干冰：（-79℃），液N：（-196℃），液O：（-183℃），液H：（-253℃），液He：（-269℃）。第一百一十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日3.劑型目前廣泛應(yīng)用的劑型為細(xì)管型，在冷凍精液早期也曾使用過(guò)顆粒型和安瓿型。

（1）細(xì)管型以長(zhǎng)125～133mm、容量為0.25或0.5ml的各種顏色的聚氯乙烯復(fù)合塑料細(xì)管，通過(guò)吸引裝置將平衡后的精液進(jìn)行分裝、封口，置液氮蒸氣上冷卻，再浸入到液氮中保存。細(xì)管型精液具有許多優(yōu)點(diǎn)，適于快速冷凍，精液細(xì)管內(nèi)徑小，每次凍制細(xì)管多，精液受溫均勻，冷凍效果好，精液不必暴露就可直接輸入母畜子宮內(nèi)因而不受污染，劑量標(biāo)準(zhǔn)化，標(biāo)記明顯，精液不易混淆，容積小，便于大量保存，精液消耗少，輸精母畜受胎率高。適用于機(jī)械化生產(chǎn)。第一百一十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日細(xì)管型凍精設(shè)備第一百一十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日細(xì)管型凍精設(shè)備第一百一十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（2）顆粒型將0.1ml精液滴凍在經(jīng)液氮冷卻的聚乙烯氟板或金屬板上，制成顆粒。其優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)便、易于制作，成本低，體積小，便于大量貯存。但缺點(diǎn)也較多，如劑量不標(biāo)準(zhǔn)，精液暴露在外容易受到污染，不易標(biāo)記，易混淆，大多需解凍液解凍等，故許多國(guó)家已不用這種方法。（3）安瓿[bù]

型采用硅酸鹽硬質(zhì)玻璃制成的安瓿，盛裝精液劑量多為0.5～1ml。優(yōu)點(diǎn)是劑量標(biāo)準(zhǔn)，不受污染，標(biāo)記明顯。缺點(diǎn)是生產(chǎn)工藝復(fù)雜，成本比較高；易破碎，體積和占用的空間比較大；解凍后需要轉(zhuǎn)移到輸精器內(nèi)方可使用。第一百二十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

4.精液冷凍保存的稀釋液根據(jù)配制要求和稀釋的需要，可將冷凍保存稀釋液分別制成三種溶液。A.基礎(chǔ)液：將糖類(lèi)、鹽類(lèi)，成批量的制成溶液，并密封保存。奶類(lèi)經(jīng)熱處理。B.I液：根據(jù)每次采精所需的冷凍稀釋液的量，在基礎(chǔ)液中加入一定量的卵黃和抗生素等配制成，用作第一次稀釋?；A(chǔ)液+卵黃+抗生素。C.II液：取需要量的I液，按照比例加入經(jīng)滅菌的甘油，配制成含有甘油的II液，用作精液的第二次稀釋。Ⅰ液+甘油。牛精液冷凍保存稀釋液主要有3種：卵黃－檸檬酸鈉－甘油液、卵黃－糖類(lèi)－甘油、奶類(lèi)－甘油液。第一百二十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日例：牛細(xì)管用冷凍稀釋液基礎(chǔ)液：2.9%的檸檬酸鈉液。Ⅰ液：取基礎(chǔ)液80mL，卵黃20mL，青霉素10萬(wàn)單位。Ⅱ液：含7%甘油的Ⅰ液。牛顆粒用冷凍稀釋液基礎(chǔ)液：蔗糖（乳）12g，蒸餾水加至100mL。Ⅰ液：基礎(chǔ)液80mL+卵黃20mL+青霉素10萬(wàn)單位。Ⅱ液：含7%甘油的Ⅰ液。第一百二十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日稀釋液成分與配比◆冷凍保存稀釋液的成分

※低溫保存劑(卵黃、奶類(lèi))防凍保護(hù)劑(甘油)※維持滲透壓物質(zhì)(糖類(lèi)、檸檬酸鈉等)※抗菌素及其他添加劑◆牛精液冷凍保存稀釋液●乳糖-卵黃-甘油(乳卵甘液)●蔗糖-卵黃-甘油(蔗卵甘液)●葡萄糖-卵黃-甘油(葡卵甘液)●葡萄糖-檸檬酸鈉-卵黃-甘油液(葡檸卵甘液)第一百二十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：牛冷凍精液細(xì)管型容量為0.25ml,含直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子不低于1000萬(wàn)個(gè)；顆粒型精液容量為0.1ml，含直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)不低于1200萬(wàn)個(gè)。解凍后精子活力不低于0.3。0.25ml細(xì)管型冷凍精液稀釋倍數(shù)應(yīng)該為：X=直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)/ml×預(yù)測(cè)精子活力(≥0.3)×0.25ml/1000萬(wàn)

精液冷凍前的稀釋倍數(shù)第一百二十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

5.冷凍精液的制作技術(shù)

（1）精液的稀釋采用的冷凍精液劑型不同，所采用的稀釋液的配方、稀釋倍數(shù)和次數(shù)也不盡相同，一般多采用一次或二次稀釋法。A一次稀釋法：常用于顆粒精液，將含有甘油抗凍劑的稀釋液按稀釋比例一次同溫稀釋精液。B二次稀釋法：常用于細(xì)管精液的冷凍，也適用于安瓿冷凍。將采出的精液在等溫條件下，先用不含甘油的I液稀釋至最終倍數(shù)的一半。稀釋后的精液經(jīng)1～1.5h緩慢降溫至4～5℃。再用含有甘油的II液在等溫條件下做等量的第二次稀釋。第一百二十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

（2）精液平衡精液經(jīng)含有甘油的稀釋液（II液）稀釋后，緩慢降溫至4～5℃并放置一段時(shí)間，以增強(qiáng)精子的抗凍性，起到抗凍保護(hù)作用，這個(gè)處理過(guò)程稱(chēng)做平衡。平衡時(shí)間通常為2～4h為宜。第一百二十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日（3）精液的冷凍

A顆粒冷凍法：在裝有液氮的廣口保溫容器上置一個(gè)銅紗網(wǎng)(或鋁飯盒)，距液氮面1～3cm，預(yù)冷數(shù)分鐘，使其溫度維持在－80～－120℃，也可用聚四氟乙烯板（氟板）代替銅紗網(wǎng)，先在液氮中浸泡數(shù)分鐘后，置于距液氮面2cm處，然后將經(jīng)平衡的精液定量均勻而整齊的滴于其上，每粒0.1ml，停留2～4min后，當(dāng)精液顏色變白時(shí)，將顆粒置于液氮中。取出1～2粒解凍，活率達(dá)到0.3以上者貯存于液氮灌中。第一百二十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日冷凍精液顆粒制作精液顆粒第一百二十八頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

B細(xì)管精液冷凍法：將細(xì)管放在距離液氮面上2～3cm的銅紗網(wǎng)上，停留5min左右，等精液凍結(jié)后，移入液氮中貯存。細(xì)管冷凍的自動(dòng)化操作是使用控制液氮噴量的自動(dòng)記溫速凍器，5～－60℃每分鐘降4℃，－60℃后盡快降到－196℃。第一百二十九頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日（4）精液的解凍

細(xì)管型、安瓿型凍精：直接將其投入到38～40℃的溫水中，待凍精融化一半時(shí)，立即取出備用。

顆粒型凍精：①干解凍：將凍精顆粒直接放入38℃～40℃的小試管中解凍，待溶化到1/2時(shí)取出在常溫下完全解凍；②濕解凍：在預(yù)熱的試管中加入解凍液（VB12等），待融化到1/2左右取出，在常溫下完全解凍。第一百三十頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日第一百三十一頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

6.精液冷凍保存的注意事項(xiàng)：（1）冷凍精液的包裝上須明確標(biāo)明公畜品種、編號(hào)、生產(chǎn)日期、精子活率及數(shù)量，將冷凍精液分類(lèi)裝入液氮罐提筒內(nèi)，浸入液氮貯存。（2）冷凍精液的保存原則是精液細(xì)管不能脫離液氮，因而必須定期向液氮灌內(nèi)添加液氮，當(dāng)液氮消耗掉1/2時(shí)應(yīng)補(bǔ)充。

冬季1次/月，夏季2～3次/月。第一百三十二頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日（3）取細(xì)管精液時(shí)，動(dòng)作要快，不可將精液提筒超出液氮灌頸部下沿，精液脫離液氮的時(shí)間不得超過(guò)10秒鐘。（4）保存中不同品種和不同個(gè)體的精液不能混雜。

（5）液氮灌要輕拿輕放，安放牢固，避免強(qiáng)烈震動(dòng)。第一百三十三頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

輸精就是將一定量的合格精液輸入到發(fā)情母畜生殖道內(nèi)的一定部位，從而使其達(dá)到妊娠的操作技術(shù)，是人工授精的最后一個(gè)環(huán)節(jié)。一、輸精前的準(zhǔn)備1.輸精器械的準(zhǔn)備輸精器械在使用前必須經(jīng)過(guò)徹底的洗滌和消毒，最后用稀釋液沖洗。

第六節(jié)輸精第一百三十四頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

2.母畜的準(zhǔn)備接受輸精的母畜要進(jìn)行保定，并對(duì)母畜的外陰及其附近皮膚用肥皂水擦洗干凈，并用消毒液進(jìn)行消毒，然后用溫水或生理鹽水沖洗擦干。第一百三十五頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日

3.精液的準(zhǔn)備液態(tài)保存的精液活率不低于0.6，冷凍保存的精液解凍后精子活率不低于0.3。4.輸精人員準(zhǔn)備輸精員的指甲必須剪短磨光，洗滌干凈，用75%的酒精消毒，同時(shí)手臂也應(yīng)消毒并涂以稀釋液或生理鹽水作潤(rùn)滑劑。在條件允許的情況下，輸精員最好戴手套進(jìn)行操作。第一百三十六頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日二、輸精的基本要求

輸精的技術(shù)要求包括輸精量、輸精時(shí)間、輸精次數(shù)以及輸精部位的確定。在進(jìn)行人工授精時(shí)，動(dòng)物的種類(lèi)不同，對(duì)輸精的要求也就有所不同。一般情況下，各種動(dòng)物都適宜在排卵前的4～8h進(jìn)行輸精。在生產(chǎn)中，常用發(fā)情鑒定來(lái)判定適宜的輸精時(shí)間。第一百三十七頁(yè)，共一百五十六頁(yè)，2022年，8月28日品種排卵時(shí)間理論輸精時(shí)間實(shí)際輸精時(shí)間輸精量輸精部位牛發(fā)情結(jié)束后10h左右排卵前7～8h早上發(fā)情，下午輸精，并進(jìn)行二次輸精（第二天早上）1～1.5mL，有效精子數(shù)不少于1千萬(wàn)個(gè)子宮頸深部豬發(fā)情開(kāi)始后24～36h排卵前6h壓背站立不動(dòng)時(shí)，第二天再補(bǔ)輸一次30～40mL，凍