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文檔簡(jiǎn)介
1
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件2醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)前言一個(gè)、兩個(gè)中心
主題動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件3一個(gè)中心標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件4標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)兩個(gè)主題動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件6動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)管理(生產(chǎn))營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)疾病預(yù)防根本選種,育種關(guān)鍵質(zhì)量控制遺傳控制微生物,寄生蟲(chóng)控制環(huán)境控制營(yíng)養(yǎng)控制動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件7實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)技術(shù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件8動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
通過(guò)生物學(xué)手段,研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的反應(yīng)、表現(xiàn)、發(fā)生、發(fā)展規(guī)律以及有關(guān)的技術(shù)問(wèn)題,并將結(jié)果推論到人的過(guò)程。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件9動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù):
研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的各種條件、方法、技術(shù),以保證取得科學(xué)的、完整的、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件10動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的要求..1、科學(xué)性2、經(jīng)濟(jì)性3、倫理性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件11科學(xué)性要求
標(biāo)準(zhǔn)化的動(dòng)物
標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)條件
標(biāo)準(zhǔn)化的操作規(guī)程動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件12經(jīng)濟(jì)性要求
動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)方法的選擇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件13倫理性要求動(dòng)物福利3R原則動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件14
第一講實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備內(nèi)容:1、實(shí)驗(yàn)條件的準(zhǔn)備2、實(shí)驗(yàn)技術(shù)的準(zhǔn)備3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件15第一節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)條件的準(zhǔn)備一.
動(dòng)物飼養(yǎng)條件的準(zhǔn)備動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要一個(gè)觀察動(dòng)物反應(yīng)的飼養(yǎng)場(chǎng)所,既動(dòng)物觀察室。不同等級(jí)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),需要不同環(huán)境條件的動(dòng)物觀察室。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件16(一)普通動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察室環(huán)境設(shè)施條件要求
環(huán)境特點(diǎn):1、開(kāi)放系統(tǒng)2、環(huán)境和微生物控等級(jí)較低3、不能完全控制傳染因子。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件17(二)清潔動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察室環(huán)境設(shè)施條件要求環(huán)境特點(diǎn):
1、屏障或半屏障系統(tǒng)
2、所有實(shí)驗(yàn)用品經(jīng)滅菌處理
3、實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)出要嚴(yán)格按屏障系統(tǒng)操作規(guī)程操作必需設(shè)備:超凈工作臺(tái)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件18
(三)SPF級(jí)以上動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察室環(huán)境設(shè)施條件要求環(huán)境特點(diǎn):
1、屏障系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)。2、所有實(shí)驗(yàn)用品經(jīng)嚴(yán)格滅菌處理。
3、實(shí)驗(yàn)人員要嚴(yán)格按隔離系統(tǒng)操作規(guī)程操作。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件19清潔級(jí)和SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)設(shè)施1、屏障系統(tǒng)飼養(yǎng)室2、空氣層流架和IVC系統(tǒng)3、有過(guò)濾帽的飼養(yǎng)盒動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件20二、實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)操作室動(dòng)物手術(shù)室細(xì)胞培養(yǎng)室其他特殊觀察室……動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件21三、實(shí)驗(yàn)藥品、試劑的準(zhǔn)備動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件22四、實(shí)驗(yàn)器械的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)器械準(zhǔn)備得充分、適當(dāng),有助于實(shí)驗(yàn)的順利完成。不同類型、部位的實(shí)驗(yàn)使用的實(shí)驗(yàn)器械種類、數(shù)量不盡一致。實(shí)驗(yàn)器械包括完成實(shí)驗(yàn)所需要的檢測(cè)儀器、實(shí)驗(yàn)時(shí)動(dòng)物的固定器械、動(dòng)物外科手術(shù)器械.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件23
(一)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的、要求、內(nèi)容不同而不同。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)檢查是否準(zhǔn)備就緒。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件24(二)
常用動(dòng)物外科手術(shù)器械(三)手術(shù)器械的消毒
1、煮沸滅菌法、
2、高壓蒸氣滅菌法
3、化學(xué)藥品滅菌法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件25(四)敷料、手術(shù)巾、手術(shù)衣、帽、口罩的消毒動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件26
五.
手術(shù)人員的準(zhǔn)備為了保證無(wú)菌手術(shù)的進(jìn)行,手術(shù)人員應(yīng)作一系列的無(wú)菌的準(zhǔn)備。不管做什么等級(jí)動(dòng)物的手術(shù),都應(yīng)該遵循無(wú)菌手術(shù)的基本原則。(一)手術(shù)所需人數(shù)(二)
更衣(三)
手、臂的清潔和消毒動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件27第二節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)的準(zhǔn)備一.
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)理論知識(shí)的準(zhǔn)備(一)了解實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、家畜家禽及部分野生動(dòng)物。特別是要熟悉動(dòng)物的生物學(xué)特性,解剖生理結(jié)構(gòu),這對(duì)開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究是十分有益的。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件28(二)掌握動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)和基本技能
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是一項(xiàng)系統(tǒng)的工作,涉及各種實(shí)驗(yàn)技術(shù)、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)手段、以及相關(guān)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件29二、實(shí)驗(yàn)技能的準(zhǔn)備全程預(yù)試驗(yàn):演習(xí)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程局部預(yù)試驗(yàn):訓(xùn)練技術(shù)難點(diǎn)預(yù)試驗(yàn)..動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件30
第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇是醫(yī)學(xué)研究中首要考慮的問(wèn)題。選擇恰當(dāng)與否關(guān)系到課題的質(zhì)量,經(jīng)費(fèi)開(kāi)支,研究途徑及方法的簡(jiǎn)繁,甚至影響到課題的成敗及研究結(jié)果的正確性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件31一.
選擇原則(一)相似性原則在醫(yī)學(xué)研究中選用那些生物學(xué)特性和解剖生理特點(diǎn)與人類相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物更具有實(shí)際意義。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件321、結(jié)構(gòu)和功能的相似性在可能的情況下,盡量選用那些生物學(xué)特性和解剖生理特點(diǎn)與人類相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。一般說(shuō)來(lái),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物愈高等,進(jìn)化程度愈高,其機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜,反應(yīng)就愈接近人類。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件332、年齡狀態(tài)的相似性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命與人具有很大的差異,但都可以找到與人的生長(zhǎng)發(fā)育階段相對(duì)應(yīng)的時(shí)期。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件343、群體分布的相似性人類群體屬于自然分布群體類型。在以群體為研究對(duì)象的課題中,要考慮選擇與人類群體基因型及表現(xiàn)型分布類型相似的動(dòng)物。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件35生態(tài)或健康狀況的相似性在動(dòng)物的遺傳、環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)控制相同的情況下,其微生物控制和健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響就非常重要。
一般無(wú)菌動(dòng)物是飼養(yǎng)在超常生態(tài)環(huán)境條件的動(dòng)物,用于一些特殊的研究。
SPF動(dòng)物和清潔動(dòng)物是飼養(yǎng)在健康生態(tài)環(huán)境條件下的動(dòng)物,用于多數(shù)科學(xué)研究。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件365.疾病特點(diǎn)的相似性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病能局部或全部地反映與人類類似的疾病過(guò)程和特點(diǎn),可用于研究相關(guān)的人類疾病。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件37操作實(shí)感的相似性體型大的動(dòng)物用于外科手術(shù)或教學(xué)示教中比體型小的動(dòng)物在操作實(shí)感更接近人類。小香豬動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件38(二)特殊性原則
1、動(dòng)物解剖、生理的特殊性
不同種系的動(dòng)物的解剖生理特征既有共性又存在差異,充分利用這些共性和差異,并符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?,是保證實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件392、對(duì)刺激反應(yīng)的特殊性不同種系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)相同因素的刺激反應(yīng)既有共同性的一面,也存在一些特殊反應(yīng),同樣的刺激對(duì)一些動(dòng)物敏感,但對(duì)另外一些動(dòng)物可能不敏感。因此在實(shí)驗(yàn)研究中選用那些有特殊反應(yīng)、對(duì)實(shí)驗(yàn)研究敏感的動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,也是保證實(shí)驗(yàn)成功的重要因素。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件40(三)標(biāo)準(zhǔn)化原則標(biāo)準(zhǔn)化原則是指動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中選擇與課題研究的目的、內(nèi)容、水平相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。只有選用經(jīng)微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)、遺傳學(xué)、環(huán)境及營(yíng)養(yǎng)控制的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,才能排除生物因素、遺傳因素、環(huán)境及營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件41(四)規(guī)格化原則規(guī)格化原則是指選擇與實(shí)驗(yàn)要求一致的動(dòng)物規(guī)格。動(dòng)物的規(guī)格是指對(duì)動(dòng)物在年齡、體重、性別、生理及健康狀況等量和質(zhì)的規(guī)定。同種動(dòng)物不同的規(guī)格對(duì)外界刺激的反應(yīng)存在差異。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件421、不同的動(dòng)物年齡,有不同的生物學(xué)特性,對(duì)實(shí)驗(yàn)刺激的反應(yīng)也隨著年齡的不同而有明顯變化。2.
標(biāo)準(zhǔn)化的健康實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重與年齡一般呈正相關(guān),選擇動(dòng)物時(shí),可按體重選擇。年齡體重動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件433.
同種動(dòng)物不同性別對(duì)外界刺激的反應(yīng)不一致。因此,一般而言,實(shí)驗(yàn)若對(duì)動(dòng)物性別無(wú)特殊要求,則宜選用雌雄各半。以避免由性別差異造成的差異。4、動(dòng)物不同的生理狀態(tài),機(jī)體對(duì)某些刺激的反應(yīng)有較大的差異。性別
生理和健康狀況
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件44(五)
經(jīng)濟(jì)性原則
經(jīng)濟(jì)原則是指在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下,盡量選用容易獲得、價(jià)格便宜和飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)的動(dòng)物。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件45二.
常用試驗(yàn)中動(dòng)物的選擇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件46毒理學(xué)研究中的選擇在試驗(yàn)品毒性試驗(yàn)研究中,選擇何種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取決于該動(dòng)物對(duì)試驗(yàn)品的反應(yīng),以及試驗(yàn)品在該動(dòng)物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄與人類的異同程度。因此,作動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí),選擇動(dòng)物應(yīng)當(dāng)注意以下幾個(gè)方面的問(wèn)題。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件471、不同種屬的動(dòng)物對(duì)試驗(yàn)品的毒性反應(yīng)有質(zhì)與量的區(qū)別。同一試驗(yàn)品對(duì)不同種屬動(dòng)物的毒性反應(yīng)是有差異的,甚至有本質(zhì)的不同。因此在毒理研究中,選擇動(dòng)物時(shí),應(yīng)至少選擇兩種動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)且種屬差異越大越好。一般應(yīng)選擇一種嚙齒類動(dòng)物和一種大動(dòng)物。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件482、通常情況下,動(dòng)物的進(jìn)化程度愈高,對(duì)試驗(yàn)品毒性反應(yīng)愈敏感。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件493、在選擇動(dòng)物規(guī)格方面,選擇未成年的動(dòng)物、雌雄各半較為合適(對(duì)年齡有特殊要求的除外)。生長(zhǎng)期動(dòng)物對(duì)毒性反應(yīng)比老年動(dòng)物敏感。動(dòng)物的性別不同對(duì)試驗(yàn)品的毒性反應(yīng)存在差異。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件50二.
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的購(gòu)入
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作中,動(dòng)物的購(gòu)入是一個(gè)重要的環(huán)節(jié)。在購(gòu)入動(dòng)物前,應(yīng)確定購(gòu)入動(dòng)物的種類、品系、規(guī)格、數(shù)量及動(dòng)物微生物控制等級(jí)等。購(gòu)入動(dòng)物時(shí)應(yīng)注意以下幾個(gè)方面的問(wèn)題。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件511、購(gòu)入或領(lǐng)取動(dòng)物前,應(yīng)檢查各項(xiàng)準(zhǔn)備工作是否就緒,如飼養(yǎng)動(dòng)物的器具、器材是否準(zhǔn)備好,飼養(yǎng)室的衛(wèi)生和消毒情況;此外,還應(yīng)檢查動(dòng)物的籠卡、實(shí)驗(yàn)記錄本、墊料、飼料、秤等實(shí)驗(yàn)必須品是否準(zhǔn)備好。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件52
2、購(gòu)入動(dòng)物時(shí),應(yīng)向供應(yīng)單位及時(shí)索取動(dòng)物的遺傳背景、微生物背景、質(zhì)量合格證、動(dòng)物的年齡、體重等資料。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件533、購(gòu)入動(dòng)物時(shí),無(wú)論運(yùn)輸距離的遠(yuǎn)近,都應(yīng)考慮運(yùn)輸環(huán)境的溫度、濕度、飲食以及途中污染和窒息死亡等問(wèn)題。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件544、購(gòu)入清潔級(jí)以上的動(dòng)物,應(yīng)采用帶有空氣過(guò)濾膜的無(wú)菌運(yùn)輸罐或帶過(guò)濾帽的籠盒運(yùn)輸,嚴(yán)格檢查其密封狀況。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件555、新購(gòu)進(jìn)的動(dòng)物不能直接進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)將動(dòng)物雌雄分開(kāi),并分籠在隔離區(qū)飼養(yǎng)一段時(shí)間,以便動(dòng)物得以恢復(fù)體能并適應(yīng)新的環(huán)境。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件566、無(wú)論購(gòu)入何種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,都應(yīng)同時(shí)購(gòu)入相應(yīng)數(shù)量的飼料和墊料。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件57三、動(dòng)物模型準(zhǔn)備動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件58(一)
概念
人類疾病動(dòng)物模型是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。
使用動(dòng)物模型是當(dāng)代生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)研究中一種便于認(rèn)識(shí)客觀事物的實(shí)驗(yàn)方法和手段。通過(guò)模型的研究可以有意識(shí)地改變那些在自然條件下不可能或不容易排除的因素,以觀察模型的反應(yīng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件59
(二)使用動(dòng)物模型的意義
1、避免在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來(lái)的
風(fēng)險(xiǎn)。如:外傷、中毒、腫瘤和輻射病等。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件602、應(yīng)用動(dòng)物模型可以隨時(shí)復(fù)制的特點(diǎn),得到平時(shí)臨床上不易見(jiàn)到的疾病。
如:放射病、毒氣中毒、烈性傳染病、戰(zhàn)傷等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件613、用動(dòng)物提供的模型可以克服人類某些疾病的潛伏期長(zhǎng),病程長(zhǎng)和發(fā)病率低的缺點(diǎn)。潛伏期長(zhǎng)的疾病:腫瘤、慢性氣管炎、動(dòng)脈粥樣硬化、遺傳病等。發(fā)病率低的疾?。好庖咝?、代謝性、內(nèi)分泌和血液病等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件624、
可以嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,排除各種干擾。
臨床上疾病較復(fù)雜,影響因素多,如:身患多種疾病、病人的年齡、性別、體重、遺傳、生活地區(qū)和規(guī)律,營(yíng)養(yǎng)狀況等各不相同。動(dòng)物復(fù)制的疾病模型,可以選擇相同品種、品系、性別、年齡、體重,以及相同的質(zhì)量控制和飼養(yǎng)條件等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件635、
樣品收集方便。
收集動(dòng)物疾病模型的樣品不受時(shí)間和條件的限制,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要隨時(shí)采集。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件64
(三)
動(dòng)物模型的分類1、
按產(chǎn)生的原因分類..(1)誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型
(ExperimentalAnimalModels)(2)自發(fā)性動(dòng)物模型(SpontaneousAnimalModels)(3)轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型(Transgenicanimal,geneknock-outanimal)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件65誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型:是指實(shí)驗(yàn)者使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物造成動(dòng)物組織、器官或全身一定的損害,出現(xiàn)某些類似人類疾病時(shí)的功能、代謝障礙或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件
..機(jī)械損傷、放射線損傷、氣壓、手術(shù)等
化學(xué)藥致癌、化學(xué)毒物中毒、強(qiáng)酸強(qiáng)堿燒傷、某種有機(jī)成分的增加或減少導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)性疾病等。細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)、生物毒素等。
物理因素
:化學(xué)因素:生物因素:復(fù)合因素:
多種因素誘導(dǎo).動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件67自發(fā)性動(dòng)物模型:是指在自然情況下所形成的疾病模型或者經(jīng)有意識(shí)的人工處置發(fā)生的疾病,并能穩(wěn)定遺傳給后代的疾病模型。包括人工培育的突變系和近交系的各種疾病模型。如:無(wú)胸腺裸鼠、高血壓大鼠、肥胖癥小鼠等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件68
需要指出:1、以上兩種動(dòng)物模型各有其優(yōu)缺點(diǎn)。其優(yōu)缺點(diǎn)只是相對(duì)的。2、很多疾病模型可用不同方式獲得。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件693、不同方法復(fù)制的動(dòng)物模型在發(fā)病機(jī)理和疾病內(nèi)在特征方面存在著各自的特點(diǎn)。4、大部分自發(fā)性動(dòng)物模型是通過(guò)人為定向培育而成的,與人類自然發(fā)生的疾病在很多方面有差異。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件70轉(zhuǎn)基因和基因敲除動(dòng)物模型:轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:是指用基因工程技術(shù)將外源目的基因通過(guò)生殖細(xì)胞或早期胚胎導(dǎo)入胚胎染色體基因組內(nèi),使之穩(wěn)定整合并能傳給后代的一類動(dòng)物?;蚯贸齽?dòng)物:是指用相應(yīng)的分子生物學(xué)技術(shù)將結(jié)構(gòu)已知但功能未知的基因去除,或用其他序列相近的基因?qū)⑵淙〈囊活悇?dòng)物。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件712、
按實(shí)驗(yàn)所用對(duì)象分類..(1)整體動(dòng)物模型(2)
離體器官,組織動(dòng)物模型(3)細(xì)胞株動(dòng)物模型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件72
(四)
動(dòng)物模型的設(shè)計(jì)原則
1、
相似形人類疾病動(dòng)物模型應(yīng)盡可能地相似于人類疾病。如:大鼠的自發(fā)性高血壓。
復(fù)制動(dòng)物模型時(shí),應(yīng)注意動(dòng)物的選擇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件732、
重復(fù)性理想的動(dòng)物模型應(yīng)該是可以重復(fù)的。保證動(dòng)物模型具有重復(fù)性的措施..
(1)選用標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(2)選用標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)施(3)保證復(fù)制因素的一致性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件743、
可靠性復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)可靠地反映人類疾病,疾病的主要癥狀和體征明顯,不能出現(xiàn)與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的疾病。
注意動(dòng)物的選擇和動(dòng)物的質(zhì)量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件754、
適用性和可控性
疾病模型應(yīng)盡量考慮在今后臨床上的應(yīng)用和便于控制其發(fā)展,以利于研究。如:雌激素終止大、小鼠早期妊娠的模型無(wú)實(shí)用性。動(dòng)物+制模因子=結(jié)果散發(fā)或死亡無(wú)法控制模型的發(fā)展方向和速度,無(wú)價(jià)值。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件765、
易行性和經(jīng)濟(jì)性復(fù)制動(dòng)物模型應(yīng)盡量做到方法簡(jiǎn)單、容易,合乎經(jīng)濟(jì)的原則。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件77(五
)影響動(dòng)物模型制作的因素動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件78
1、致模因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影響:致摸因素的劑量及在相關(guān)動(dòng)物上的反應(yīng)影響動(dòng)物模型的復(fù)制。
因此造模時(shí)應(yīng)注意..(1)致模因素的選擇(2)致模因素的劑量(3)致模因素與模型的相關(guān)信息動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件792、動(dòng)物因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影響(1)動(dòng)物種類的影響(2)
動(dòng)物品系的影響(3)年齡和體重的影響(4)性別因素的影響(5)生理狀態(tài)和健康因素影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件80動(dòng)物種類的影響:不同種的動(dòng)物存在許多不同的特點(diǎn),動(dòng)物種類選擇不當(dāng)將影響動(dòng)物模型的復(fù)制。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件81動(dòng)物品系的影響:同種不同品系的動(dòng)物對(duì)致模因素的反應(yīng)不一致。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件82年齡和體重的影響:動(dòng)物的壽命差異較大,解剖生理特征和反應(yīng)隨年齡而明顯變化,一般幼齡動(dòng)物比成年動(dòng)物敏感,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,選擇相應(yīng)年齡的動(dòng)物復(fù)制模型(健康動(dòng)物年齡與體重有相關(guān)性)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件83性別因素的影響:同種、同品系,不同性別的動(dòng)物,對(duì)某些反應(yīng)不一致。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件84生理狀態(tài)和健康因素影響:
動(dòng)物處在不同的生理狀態(tài)和不同的健康狀況對(duì)致模因素的反應(yīng)差異很大。如:肝功能衰竭動(dòng)物模型,不能選用患嚴(yán)重球蟲(chóng)病的家兔,因球蟲(chóng)病影響肝功能。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件85
3、實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影
響(1)實(shí)驗(yàn)季節(jié)不同季節(jié),動(dòng)物對(duì)某些反應(yīng)可能不一致,對(duì)跨季節(jié)的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)可能產(chǎn)生影響。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件86(2)晝夜不同的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體溫、血糖、基礎(chǔ)代謝的、內(nèi)分泌等隨晝夜的不同呈有節(jié)律的變化,在復(fù)制模型時(shí)要注意晝夜不同對(duì)模型的影響。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件87(3)麻醉深度的影響不同的麻醉藥、劑量對(duì)動(dòng)物麻醉效果有差異,這種差異會(huì)影響模型的復(fù)制。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件88(4)手術(shù)技巧的影響手術(shù)熟練,將減少對(duì)動(dòng)物的刺激,損傷和出血能提高模型的成功率。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件89(5)實(shí)驗(yàn)給藥的影響給藥途徑、劑量和熟練程度不同會(huì)對(duì)造模產(chǎn)生影響。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件90(6)對(duì)照組對(duì)造模的影響對(duì)照是檢測(cè)模型是否成功的重要手段。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件914、環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型的影響環(huán)境因素是影響造模及其實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素,居住條件、光照、噪聲、氨濃度、溫度、濕度、氣流速度等任何一項(xiàng)都不容忽視.營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型,特別是長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn),影響顯著,應(yīng)予以重視。造模過(guò)程中應(yīng)注意給水量充分和給予符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的飲水。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件92(六)動(dòng)物模型的制作1、制模前的準(zhǔn)備工作。2、制模動(dòng)物的選擇。3、制模材料的選擇。4、制模方法的確定。5、制模環(huán)境的確定。準(zhǔn)備就緒,開(kāi)始制模。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件93
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作就緒,接下來(lái)開(kāi)始作動(dòng)物實(shí)驗(yàn),下堂課講實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的基本技術(shù)和方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件94第三講動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的基本技術(shù)和方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件95
第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定抓取與固定是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù),其目的是使動(dòng)物保持在安靜的狀態(tài)下,順利地進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。不同種類的動(dòng)物的抓取與固定方法不盡一致。同種動(dòng)物不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)內(nèi)容,抓取與固定方法也可以不同。不同實(shí)驗(yàn)者的操作習(xí)慣上也存在差異。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件96一、小鼠(一)、抓取用右手拇指和食指的指腹抓住尾部中央提起或用兩手捧起。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件97(二)、固定1、徒手固定(1)將小鼠提起放在飼養(yǎng)盒蓋子上,輕輕向后拉住。(2)用左手拇指和食指抓住頸、背部中央皮膚。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件98(3)翻轉(zhuǎn)抓住頸背部的左手,右手拉住鼠尾再用左手的小指壓住尾根部,使整個(gè)小鼠呈一條直線。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件992、固定板(器)固定
(1)將小鼠麻醉后,用細(xì)繩捆住小鼠四肢。(2)準(zhǔn)備一個(gè)15-20cm,邊緣釘有5個(gè)釘子的方木板。(3)將四肢用細(xì)繩固定在木版兩側(cè)的釘子上,在上顎切齒處用細(xì)繩固定在木版前方的釘子上。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件100
固定板固定適用于大多數(shù)動(dòng)物手術(shù)。小鼠固定器適用于尾靜脈注射。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件101二、大鼠和地鼠(一)抓取
1、
周齡較小的大鼠和地鼠,可以像小鼠一樣抓住尾部提起。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1022、周齡較大的大鼠可張開(kāi)左手虎口,迅速將拇、食指插入大鼠的腋下,虎口向前,其余三指及掌心握住大鼠身體中段,并將其保持仰臥位,然后調(diào)整左手拇指的位置,緊抵在下頜骨上即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件103注意:操作者第一次抓取大鼠時(shí),最好戴防護(hù)手套;不能捉提尾尖,也不能長(zhǎng)時(shí)間將大鼠懸在空中。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件104(二)固定1、徒手固定:對(duì)體重較小的大鼠可用拇指、食指捏住大鼠耳部及頸部皮膚,余下三指緊捏住背部皮膚,置于掌心,調(diào)整好大鼠在手中的姿勢(shì)即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。如:灌胃、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射等實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1052、固定板固定:方法與小鼠固定板固定相同,只是需選擇更大一些的固定板。3、
固定器(盒)固定:方法與小鼠固定器(盒)固定相同,只是固定器較小鼠的大。同樣適用于大鼠尾靜脈注射。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件106三、豚鼠(一)抓取抓取幼齡豚鼠時(shí),用兩手捧起;成熟豚鼠可以用左手大把抓起。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件107
注意:
豚鼠性情溫和,一般不傷人,但膽小易驚,易造成自傷。抓取時(shí),不能太粗野,更不能抓腰腹部,在操作過(guò)程中,如果豚鼠掙扎,手不要越握越緊,否則會(huì)造成豚鼠呼吸困難,甚至死亡。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件108(二)固定1、徒手固定:用左手的食指和中指放在豚鼠頸背部?jī)蓚?cè),拇指和無(wú)名指放在肋部,分別用手指挾住左右前肢抓起,然后反轉(zhuǎn)左手,用右手的拇指和無(wú)名指挾住右后肢,用中指和無(wú)名指挾住左后肢,使鼠體成為一條直線。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1092、固定板(器)固定:與大、小鼠,豚鼠固定板固定基本一致。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件110四、實(shí)驗(yàn)兔(一)抓取抓住頸背部皮膚及兩耳提起,并用左手托住兔腹部或臀部,使其重量主要落在左手上。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件111
注意:
家兔溫順,一般不會(huì)咬人,但腳爪較銳利,要防止被抓傷。另外抓取時(shí)不能只提兔耳或四肢,也不能用單手只抓頸背部皮膚。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件112(二)固定1、徒手固定:用一只手抓住兔的頸背部皮膚,另一只手抓住兔的兩后肢,固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件113
也可以坐在椅子上用一手抓住兔頸背皮膚和兩耳,大腿挾住兔的后半身,用另一只手抓住兩前肢將兔固定。此固定方法適用于腹腔、肌肉注射,及經(jīng)口給藥。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1142、固定盒固定:此固定方法適用于頭、耳部位實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1153、固定板(臺(tái))固定:此固定方法可使兔俯臥、仰臥或側(cè)臥固定,適宜于兔頭、頸、軀干手術(shù)及其它實(shí)驗(yàn)操作。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件116五、實(shí)驗(yàn)犬(一)抓取對(duì)未經(jīng)馴服和調(diào)教的外購(gòu)犬抓取時(shí),可用特制的長(zhǎng)柄鐵鉗夾住犬的頸部,由另一人用布帶或粗繩縛其嘴,并將布帶、繩固定在狗耳后頸部,防止脫落。
注意:狗性情兇惡、咬人,特別是對(duì)陌生人有攻擊性。對(duì)剛購(gòu)入的狗要特別小心,避免被其咬傷。在縛嘴時(shí),動(dòng)作要迅速,捆綁松緊要適中。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件117(二)固定實(shí)驗(yàn)臺(tái)固定:用特制的長(zhǎng)柄鐵鉗夾住犬的頸部后,麻醉動(dòng)物。將麻醉的犬放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,再用粗棉帶(繩)固定四肢于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。并將犬舌拉出。此固定方法仰臥位適用于口腔、頸、胸、腹、四肢等部位的實(shí)驗(yàn),俯臥位適用于腦、背部位的實(shí)驗(yàn)。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件118動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件119
不管采用哪種抓取與固定方法,都應(yīng)遵守的基本原則是:1.保證實(shí)驗(yàn)人員的安全。2.防止動(dòng)物意外損傷,禁止采取粗暴的動(dòng)作。因此在抓取與固定動(dòng)物時(shí),應(yīng)了解動(dòng)物的生活習(xí)性,生理解剖結(jié)構(gòu),體重、體型,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容確定動(dòng)物的抓取與固定方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件120第二節(jié)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)與標(biāo)記動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí),當(dāng)使用的動(dòng)物數(shù)或?qū)嶒?yàn)分組數(shù)大于1時(shí),需要對(duì)動(dòng)物個(gè)體間或組間區(qū)別開(kāi)來(lái),就需進(jìn)行編號(hào)與標(biāo)記。因此編號(hào)與標(biāo)記的目的就是動(dòng)物個(gè)體與組別的識(shí)別。SD大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件121
標(biāo)記的方法很多,良好的標(biāo)記方法應(yīng)滿足:號(hào)碼清楚、持久、簡(jiǎn)便易認(rèn)和適用,不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,對(duì)動(dòng)物的刺激小,標(biāo)記物對(duì)動(dòng)物無(wú)毒性。編號(hào)方法無(wú)定法,原則是使實(shí)驗(yàn)者能夠識(shí)別動(dòng)物個(gè)體和組別?,F(xiàn)介紹幾種常用的標(biāo)記和編號(hào)方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件122染色法(一)染色法:是用化學(xué)試劑在動(dòng)物身體明顯部位如被毛、四肢等處進(jìn)行涂染,以涂染的部位或顏色來(lái)區(qū)別不同個(gè)體、組別,是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中最常用、最容易掌握的方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件123家兔針刺法(二)針刺法:用人工針刺的方法,在動(dòng)物無(wú)體毛或明顯部位,如耳、面鼻和四肢部位,拔去被毛,人工針刺號(hào)碼,刺后涂以酒精黑墨即可。此方法適用于兔及大、中型動(dòng)物。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件124(三)打耳孔法:用動(dòng)物編號(hào)的耳孔機(jī)直接在動(dòng)物耳朵上打孔或打成缺口編號(hào),也可用剪刀將耳緣成缺口,根據(jù)孔或缺口的位置、數(shù)量來(lái)標(biāo)記動(dòng)物個(gè)體的方法。常用于實(shí)驗(yàn)豬的標(biāo)記。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件125(四)標(biāo)簽號(hào)牌法:用塑料、金屬或木等材料制成號(hào)牌固定在動(dòng)物身體某一部位或飼養(yǎng)圈、籠上,以標(biāo)識(shí)動(dòng)物個(gè)體、組別的方法。如耳標(biāo)簽、戴項(xiàng)圈、戴腳圈等。常用于大動(dòng)物的標(biāo)記。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件126第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥途徑與方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法主要有:注射法和胃腸給藥法兩種,此外還有用于皮膚的涂布給藥法和用于呼吸道的吸入給藥法。
裸鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件127一.注射分為:皮內(nèi)注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、靜脈注射、腦膜下注射、腦內(nèi)注射、胸腔內(nèi)注射、腰椎內(nèi)注射、關(guān)節(jié)腔注射和心內(nèi)注射。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?dòng)物種類、藥物類型選擇給藥途徑和方法,若是臨床前藥物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),給藥方法應(yīng)與人的給藥途徑一致。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件128動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件129動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件130動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件131二.胃腸給藥法分為:自動(dòng)口服給藥灌胃給藥直腸給藥。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件132
表常用動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積*動(dòng)物種類體重(g)最大容積小鼠>301.025-300.820-240.5大鼠>3008.0250-3006.0200-2494.0-5.0100-1993.0豚鼠>3006.0.250-3004.0-5.0家兔>35002002500-35001502000-2400100貓>3000100-1502500-300050-80犬10,000-15,000200-500動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件133動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件134第四節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液和尿液的采集一.
動(dòng)物血液的采集方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液的采集方法有很多。(一)按采血部位不同可分為:眼部采血、耳部采血、心臟采血、大血管采血及尾部采血等。
小香豬動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件135(二)按采血使用的手段不同可分為:鼠尾刺血、剪尾采血、眼眶靜脈叢采血、心臟采血、斷頭采血、頸靜(動(dòng))脈采血、腹主動(dòng)(靜)脈采血、耳緣剪口采血、耳靜脈采血、后肢外側(cè)小隱靜脈、前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈采血、翼下采血等。采血時(shí),應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的種類,檢驗(yàn)項(xiàng)目、方法及需采血量確定采血的部位和方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件136動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件137動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件138動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件139動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件140表常用動(dòng)物的最大安全采血量動(dòng)物種類最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.10.3
大鼠12
豚鼠510
家兔1040
狗50300
猴1560動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件141
二、
尿液采集(一)、代謝籠采集代謝籠的特點(diǎn)是能將動(dòng)物排泄的大小便分開(kāi),達(dá)到采集尿液的目的。此法常用于大鼠、小鼠、豚鼠、兔等中小型動(dòng)物的尿液采集。(二)、導(dǎo)尿法采集在動(dòng)物的尿道或輸尿管內(nèi)插一根塑料導(dǎo)管采集尿液。此法適用于兔、犬、貓等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件142第五節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉就是用物理或化學(xué)的方法,使動(dòng)物全身或局部暫時(shí)痛覺(jué)消失或遲鈍,以利于實(shí)驗(yàn)操作。比格犬動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件143(一)全身麻醉:指麻醉藥通過(guò)呼吸道吸入,靜脈、肌肉或腹腔注射,使動(dòng)物產(chǎn)生短時(shí)間的意識(shí)喪失,痛覺(jué)消失,肌肉松弛和反射抑制等中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制現(xiàn)象。分為吸入麻醉和注射麻醉。1.吸入麻醉指揮發(fā)性麻醉劑經(jīng)動(dòng)物呼吸道吸入體內(nèi)從而產(chǎn)生麻醉效果的方法。常見(jiàn)的吸入麻醉劑有乙醚。一.麻醉類型及方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉分為全身麻醉和局部麻醉兩種類型。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件144(1)步驟與方法:
1)
準(zhǔn)備容器:小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:5000ml標(biāo)本瓶1個(gè),10ml試管或離心
管1個(gè).如鼠類中型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:適當(dāng)大小的玻璃箱1個(gè),試管或離心管1個(gè)如貓、兔大體形動(dòng)物:麻醉口罩.如犬
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1452)操作步驟:
放入揮發(fā)性麻醉劑----放入動(dòng)物---密閉4-6分鐘---麻醉---實(shí)驗(yàn)---小容器追加麻醉.
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件146(2)吸入麻醉的注意事項(xiàng):A、容器密封性。B、防止麻醉窒息和過(guò)量。C、適時(shí)追加麻醉。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1472.注射麻醉:通過(guò)注射的方法,將麻醉劑注入動(dòng)物的體內(nèi),使動(dòng)物進(jìn)入麻醉狀態(tài)的方法。常用的注射方法有靜脈注射、肌肉注射和腹腔注射等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1481)準(zhǔn)備器械:注射器(1)步驟與方法:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1492).注射麻醉方法:腹腔注射:固定動(dòng)物---頭下位---腹部后1/3
處靠外側(cè)。靜脈注射:固定動(dòng)物---血管---注射
肌肉注射:固定動(dòng)物---肌肉發(fā)達(dá)---注射動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件150(2).注射麻醉的注意事項(xiàng):
A、腹腔注射時(shí)使動(dòng)物的頭處于低位,使內(nèi)臟向上腹移動(dòng),可避免注射時(shí)傷及內(nèi)臟。
B、靜脈注射必須緩慢,過(guò)快會(huì)引起麻醉意外。
C、肌肉注射應(yīng)在肌肉較發(fā)達(dá)的部位注射,有利于麻醉劑的吸收。腹腔注射、肌肉注射和靜脈注射麻醉動(dòng)物各有優(yōu)缺點(diǎn),應(yīng)根據(jù)麻醉劑的特性,動(dòng)物解剖特點(diǎn)選擇方法簡(jiǎn)單,麻醉效果好的注射方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件151常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全身麻醉藥及用法和劑量藥物適用動(dòng)物給藥途徑給藥劑量(mg/kg)給藥體積(ml/kg)配制濃度(%)麻醉維持時(shí)間
戊巴比妥鈉大、小鼠腹腔453.8-7.51.2-0.62-4h,中途加1/5量,可延長(zhǎng)麻醉時(shí)間1h以上。靜脈30
1.2-0.6豚鼠腹腔40-502.0-2.52靜脈30
犬、貓、兔腹腔40-501.4-1.73靜脈301.03綿羊靜脈30
3山羊靜脈30
3豬靜脈15
3猴靜脈35
3
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件152速眠新ml/kg大、小鼠肌肉
0.3-0.8
1h-2h兔肌肉
0.2-0.3
雜種犬肌肉
0.1-0.15
純種犬肌肉
0.04-0.08
豬肌肉
0.1-0.15
羊肌肉
0.1-0.15
硫噴妥鈉小鼠腹腔50
115-30min靜脈25
1大鼠、地鼠腹腔405-101靜脈205-101豚鼠腹腔55
靜脈20
犬靜脈20-251.3-2.52貓靜脈281.3-2.52兔靜脈201.3-2.52豬〈45kg靜脈9-10
2豬〉45kg靜脈5
2猴靜脈25
腹腔60
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件153鹽酸氯胺酮大、小鼠肌肉、腹腔22-44
10-20min貓、犬、猴肌肉10-40
豬肌肉10-15
氨基甲酸乙脂(烏拉坦大、小鼠肌肉、腹腔13507.020-252-4h兔、貓、犬靜脈750-10003-425直腸15006.025乙醚各種動(dòng)物吸入
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件154第六節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外科操作技術(shù)兔動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件155一.術(shù)前準(zhǔn)備術(shù)前準(zhǔn)備是否充分、周到是手術(shù)是否能夠順利完成的關(guān)鍵。術(shù)前準(zhǔn)備工作很多,但主要包括手術(shù)動(dòng)物的準(zhǔn)備;手術(shù)器械的準(zhǔn)備、手術(shù)時(shí)所用藥品的準(zhǔn)備;手術(shù)室的準(zhǔn)備。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件156二.術(shù)中基本操作技術(shù)(一)
術(shù)部被毛的去除在實(shí)驗(yàn)外科操作技術(shù)中,對(duì)已麻醉、固定就緒的動(dòng)物首先要作的就是對(duì)術(shù)部被毛的去除,以免影響術(shù)部的消毒、手術(shù)操作和創(chuàng)口術(shù)后愈合。常用的被毛去除方法有剪毛法、剃毛法和脫毛法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件157
常用的脫毛劑配方:⑴配方1:硫化鈉8g溶于100ml水中。⑵配方2:硫化鈉∶肥皂粉∶淀粉的比例為
3∶1∶7,加水調(diào)成糊狀。⑶配方3:硫化鈉10g加生石灰15g溶于100ml
水中。⑷配方4:硫化鈉8g、淀粉7g、糖4g、甘油
5g、硼紗1g、水75g,共100g,調(diào)成糊狀。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件158一.
術(shù)后護(hù)理影響動(dòng)物手術(shù)成敗的因素很多,如動(dòng)物的選擇、動(dòng)物的健康狀況、麻醉、手術(shù)熟練程度、術(shù)后動(dòng)物的護(hù)理等,其中術(shù)后護(hù)理至關(guān)重要。動(dòng)物由于受到麻醉及手術(shù)的影響,使原來(lái)平衡的機(jī)體、機(jī)能狀態(tài)發(fā)生一系列的變化,機(jī)體的一些功能可能受到不同程度的影響。因此,為確保動(dòng)物手術(shù)達(dá)到預(yù)期的目的,應(yīng)對(duì)手術(shù)動(dòng)物施以良好的術(shù)后護(hù)理,并對(duì)術(shù)后動(dòng)物發(fā)生的各種情況作及時(shí)處理。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件159(一)
術(shù)后動(dòng)物的特點(diǎn)1.體溫下降:麻醉和手術(shù)都可使動(dòng)物體溫有不同程度的降低。麻醉時(shí)間越長(zhǎng),下降越明顯。2.疼痛:動(dòng)物蘇醒夠常見(jiàn)的問(wèn)題是疼痛。動(dòng)物因疼痛會(huì)出現(xiàn)行動(dòng)異常、嘶叫、飲食異常、心率加快、循環(huán)衰竭等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1603.
食欲下降或喪失:大部分手術(shù)后的動(dòng)物因疼痛而食欲下降,有的動(dòng)物因手術(shù)使采食功能喪失,如口腔內(nèi)手術(shù)。4.術(shù)部易感染:術(shù)后動(dòng)物飼養(yǎng)在環(huán)境衛(wèi)生惡劣的室內(nèi),極易引起術(shù)部感染。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件161
(二)術(shù)后動(dòng)物對(duì)環(huán)境的要求
術(shù)后動(dòng)物對(duì)的飼養(yǎng)環(huán)境溫暖、清潔、安靜、光線柔和。
1、環(huán)境溫暖:麻醉和手術(shù)的動(dòng)物體溫都有不同程度的下降,而低體溫休克是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后死亡的一個(gè)重要的原因,因此手術(shù)后動(dòng)物飼養(yǎng)室溫宜高些,以25℃-30℃為佳。輔以清潔、柔軟的鋪墊物,也是手術(shù)后動(dòng)物保溫的較好辦法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件162
2、環(huán)境衛(wèi)生:手術(shù)后動(dòng)物飼養(yǎng)室的環(huán)境衛(wèi)生應(yīng)達(dá)到或超過(guò)手術(shù)前動(dòng)物對(duì)環(huán)境衛(wèi)生的要求標(biāo)準(zhǔn)。環(huán)境衛(wèi)生差,易引起動(dòng)物手術(shù)部位的感染、化膿,甚至死亡。普通動(dòng)物環(huán)境要求無(wú)塵粒、無(wú)蚊蠅,對(duì)環(huán)境常消毒,經(jīng)常更換動(dòng)物的鋪墊物。動(dòng)物室的通風(fēng)設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)良好,室內(nèi)氨濃度不宜過(guò)高。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1633、線柔和、無(wú)噪音:手術(shù)后動(dòng)物室的光線宜暗淡些,切忌強(qiáng)光照明,若要觀察動(dòng)物可借助手電筒或局部光源。術(shù)后觀察動(dòng)物時(shí),動(dòng)作宜輕,嚴(yán)禁大聲喧嘩或出現(xiàn)尖銳的撞擊聲。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件164
(三)術(shù)后動(dòng)物的其它護(hù)理措施
術(shù)后未蘇醒的動(dòng)物:1保持呼吸道的暢通,2、鎮(zhèn)痛3、獨(dú)籠飼養(yǎng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件165第七節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法C57小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件166處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)遵循動(dòng)物安樂(lè)死的基本原則。
安樂(lè)死是從人道主義和動(dòng)物保護(hù)角度,在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的同時(shí),盡快使動(dòng)物無(wú)痛苦死去的方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件167
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死方法很多,常用的安樂(lè)死方法有:1.頸椎脫臼法2.空氣栓塞法3.急性放血法4.斷頭法藥物法等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)課件1681.頸椎脫臼法頸椎脫臼法常用于小鼠、大鼠,也用于沙鼠、豚鼠、兔。2.空氣栓塞法主要用于大動(dòng)物的處死3.急性放血法常用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、貓、犬等。四.斷頭法主要適用于小鼠、大鼠等小動(dòng)物。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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