檢驗(yàn)科生物安全手冊(cè)11-消毒和滅菌處理程序

消毒、滅菌和廢棄物的處理過(guò)程消毒、滅菌和廢棄物的處理過(guò)程1111－PAGE8定義關(guān)于消毒和滅菌有許多不同的術(shù)語(yǔ)，下面是生物安全中較常用的：抗菌劑（antimicrobial）能夠殺死微生物或抑制它們生長(zhǎng)和繁殖的制劑。防腐劑（antiseptic） 能夠抑制微生物生長(zhǎng)和繁殖但不足將其殺滅的物質(zhì)。防腐常應(yīng)用于體表。生物殺滅劑（biocide） 所有能夠殺死生物體的制劑的統(tǒng)稱(chēng)?；瘜W(xué)殺菌劑（chemicalgermcide）用于殺死微生物的化學(xué)品或化學(xué)混合物。清除污染去除和／或殺死微生物的任何過(guò)程。該詞也用于去除或中和有（decontamination）危害的化學(xué)品和放射性物質(zhì)。消毒劑（disinfectant）用于殺死微生物的化學(xué)品或化學(xué)混合物，但不一定殺死其孢子。消毒劑常用于非生命物體或其表面。消毒（disinfection） 殺死微生物的物理或化學(xué)手段，但不一定殺死其孢子。滅菌劑（microbicide） 能夠殺死微生物的化學(xué)品或化學(xué)混合物。該詞常?？梢源吧餁鐒?、“化學(xué)殺菌劑”或“抗菌劑”。殺孢子劑（sporocide） 用于殺死微生物和孢子的化學(xué)品或化學(xué)混合物滅菌（sterilization） 殺死和／或去除所有微生物及其孢子的過(guò)程。實(shí)驗(yàn)室材料的清潔清潔是指去除污垢、有機(jī)物和污漬。清潔方法包括刷、吸、干擦、洗滌或用浸泡肥皂水或清潔劑的濕布拖擦。塵土、污物以及有機(jī)物是微生物的棲身之所，并可能影響除污染劑（抗菌劑、化學(xué)殺菌劑以及消毒劑）的作用。必須通過(guò)預(yù)清潔才能實(shí)現(xiàn)洗滌和滅菌的目的。許多殺菌劑只對(duì)經(jīng)過(guò)預(yù)清潔的物品才具有殺菌活性。預(yù)清潔時(shí)必須小心，以避免暴露于感染性物質(zhì)中。的化學(xué)殺菌劑進(jìn)行預(yù)清潔和消毒。消除局部環(huán)境的污染可以聯(lián)合使用液體和氣體消毒劑來(lái)清除實(shí)驗(yàn)室空間、用具和設(shè)備的污染。清除表面污0.1％而當(dāng)處理高危環(huán)境時(shí)，建議使用高難度（5g/L）的溶液。在清除環(huán)境污染時(shí)，含有3％過(guò)氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。（如門(mén)窗等21℃且70％的條件下進(jìn)行。8能允許人員進(jìn)入。在通風(fēng)之前需要進(jìn)入房間時(shí)，必須帶適當(dāng)?shù)姆蓝久婢?。可以采用氣態(tài)的碳酸氫銨來(lái)中和甲醛。采用過(guò)氧化氫溶液對(duì)小空間進(jìn)行氣霧熏蒸同樣有效，但需要專(zhuān)門(mén)的蒸汽發(fā)生設(shè)備。清除生物安全柜的污染III設(shè)備。應(yīng)當(dāng)將適量的多聚甲醛（空氣中的終濃度達(dá)到0.8％）放在電熱板上的長(zhǎng)柄平鍋中（在生物安全柜外進(jìn)行控制。然后將含有比多聚甲醛多10％的碳酸氫銨臵于另一個(gè)長(zhǎng)柄（在生物安全柜外進(jìn)行控制70％，在使用強(qiáng)力膠帶（如管道膠帶）臵一個(gè)開(kāi)口的盛有熱水的容器。如果前部沒(méi)有封密板，則可以用大塊塑料布粘帖覆蓋在前部開(kāi)口和排氣口以保證氣體不會(huì)泄漏進(jìn)入房間。同時(shí)供電線穿過(guò)前封密板的穿透孔時(shí)須用管道膠帶密封。將放有多聚甲醛平鍋的加熱板插上插頭接通電源。在多聚甲醛完全蒸發(fā)時(shí)拔掉插頭以6230分鐘。使用前應(yīng)擦掉生物安全柜表面上的殘?jiān)?。洗?清除手部污染處理生物危害性材料時(shí)，只要可能均應(yīng)戴合適的手套。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室人員仍然需要經(jīng)常地、徹底地洗手。處理完生物危害性材料和動(dòng)物后以及離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前必須洗手。10。應(yīng)使用肘控的水龍頭洗手。如沒(méi)有安裝，應(yīng)使用紙巾或毛巾來(lái)關(guān)上水龍頭，以防止再度污染干凈的手。如果沒(méi)有以上推薦的洗手方法或洗手不方便，應(yīng)該用酒精擦手來(lái)清除雙手的輕度污染。消毒和滅菌方法物理和化學(xué)的去污染方法包含三個(gè)方面：加熱、液體去污劑、水蒸氣和空氣。加熱加熱的應(yīng)用,濕熱和干熱被推薦為殺菌最有效的方法.在一般環(huán)境下，高壓滅菌器1600C-1700C，2-4非有機(jī)體的物質(zhì)（如玻璃）是可行的凈化方法,但是甚至在有機(jī)體或非有機(jī)體的淺層也實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)對(duì)熱的固體和液體有害物的處理相當(dāng)熟悉，并要注意如果濫用設(shè)備那在高壓下水蒸氣將會(huì)噴射出來(lái)，因此只能在允許范圍內(nèi)使用。在高壓蒸汽下被處理過(guò)的液體是非常熱的，如果要從滅菌器中取出必須等處理后過(guò)段時(shí)間再取出；如果立即取出，會(huì)引起容器內(nèi)的液體產(chǎn)生暴沸，并飛濺到處理容器的人員身上。液體去污劑在通常情況下,足夠濃度的液體去污劑常用于表面去污染，而液體廢物的去污劑最終的處理是進(jìn)入污水管道系統(tǒng)。液體去污劑的去污效果不佳，常常是因?yàn)橛行┮蛩兀ㄈ鐟?yīng)用場(chǎng)所的溫度、接觸時(shí)間、pH、當(dāng)時(shí)情況、播散狀況、穿透能力、有機(jī)物的反應(yīng)）因此甚至在很有利的情況下，當(dāng)最終要求必須無(wú)菌時(shí)，液體去污劑也不是完全可信賴(lài)的去污方法。有許多可用的液體去污劑在商商品名上有很大的變化。在通常情況下,這些去污劑但是去污劑的作用越大，它的危害性可能也越大（如腐蝕性）。對(duì)于所有傳染性的情況沒(méi)有一種（去污劑）是具有同等作用和效力的。使用普通原料的消毒劑處理中必須特別小心。從原料到制成可用的溶液對(duì)工作人員的安排必須考慮到有潛在的危險(xiǎn)，要進(jìn)行安全培訓(xùn)以及合適的個(gè)人防護(hù)設(shè)備保證毒性不接觸眼睛，皮膚和呼吸部位。蒸氣和氣體蒸汽和氣體的種類(lèi)決定了去污劑的性質(zhì)，其中最常用的是甲醛和乙烯氧化物。當(dāng)在一個(gè)密閉的系統(tǒng)中，在一定的溫度、濕度控制下，它們能發(fā)揮很好的去污作用。蒸汽和氣體去污劑最初被用于生物安全柜和與之相關(guān)的空氣處理系統(tǒng)和空氣過(guò)濾系統(tǒng)、和光學(xué)（設(shè)備）和門(mén)、建筑物和與之相關(guān)的空氣處理系統(tǒng)等。為了避免甲醛和乙烯氧化物蒸汽的吸入，（貯存）這些化學(xué)品的容器的材料應(yīng)盡可能地限制這些蒸汽（的溢出）和應(yīng)放臵在適當(dāng)通風(fēng)的化學(xué)品貯存區(qū)。當(dāng)準(zhǔn)備進(jìn)行稀釋和（這些化學(xué)品）時(shí)應(yīng)穿戴呼吸防護(hù)裝臵。乙烯氧化物已歸入（對(duì)人體具有）潛在危害的誘變劑；甲醛也（對(duì)人體）具有毒性和超敏性反應(yīng)。乙烯氧化物的用途非常有限，通常用于外科和臨床領(lǐng)域。高壓滅菌器程序濕熱引起蛋白質(zhì)的變性比干熱所需要的溫度低且時(shí)間短。最主要的物理去污控制作用之一是在一個(gè)密閉的小室（空間）里高壓滅菌器產(chǎn)生濕熱和高壓。大多數(shù)情況，下列組合可以確保高壓滅菌器的滅菌效果。a.134℃、3分鐘b.126℃、10分鐘c.121℃、15分鐘d.115℃、25分鐘應(yīng)使用生物指示劑驗(yàn)證高壓滅菌操作是否達(dá)到效果。當(dāng)操作高壓滅菌器時(shí)必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備（簡(jiǎn)稱(chēng)PPE）如橡膠圍裙和抗熱防水的手套。高壓滅菌器里物品的放臵應(yīng)保證蒸汽能穿透至需消毒的所有部分，所以物品間不能靠得太緊或互相阻塞，否則不能保證滅菌效果，而且當(dāng)從滅菌器中移出物品時(shí)由于受壓嚴(yán)重可能引起（人身）傷害的危險(xiǎn)。含有如酚類(lèi)和氯仿等化學(xué)品的消毒物品不允許放入高壓滅菌器內(nèi)滅菌?；瘜W(xué)去污劑的特征（特性）具有去污特性的最主要的化學(xué)品有粉劑、晶體或濃縮液體。這些化學(xué)品可以加水作態(tài)的化學(xué)去污劑可以作為空氣去污劑，另一些在溫度升高時(shí)變成氣體的（化學(xué)品）能作為水表面或空氣去污劑?；瘜W(xué)去污劑在滅活微生物時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生一種或多種副作用，如：蛋白凝固和變性、溶血、酶的粘合或酶實(shí)質(zhì)被酶底物氧化、或毀壞而滅活?；瘜W(xué)去污劑的作用可能會(huì)因下列因素而改變：主要成分的濃度、接觸時(shí)間、pH、溫度、濕度和外界有機(jī)物的存在。這些因素對(duì)化學(xué)去污劑如何成功去污的處理依賴(lài)于化學(xué)去污劑對(duì)靶微生物的最小滅活和分析系統(tǒng)敏感度限定范圍的殺菌顯示效果。去污劑使用無(wú)效的主要原因是對(duì)微生物的最初接觸后作用無(wú)效。液體去污劑對(duì)某一成分去污時(shí)，如果這一成分表面有一些微小的氣泡，因氣泡下的區(qū)域是干燥的，其中的微生物就不能被殺滅。如果在這一成分上有油脂斑點(diǎn)，鐵銹或污垢樣，那么去污劑將不能接觸到這些保護(hù)層下的微生物。將這一成分浸入去污劑進(jìn)行凈化是有效果的。去污劑應(yīng)對(duì)物體整體表面主要成分去污。一些常用去污劑的性質(zhì)乙醇乙醇的水溶液最有效的使用濃度約為50%和＞90%則無(wú)效。乙醇在殺菌作用的同時(shí)對(duì)蛋白質(zhì)有緩慢輕微的變性作用。然而，乙醇對(duì)含脂類(lèi)病毒是有去污劑的接觸時(shí)間為十分鐘是必須的。因?yàn)檫@個(gè)原因，血液耐受病原體標(biāo)準(zhǔn)（文件）不認(rèn)為乙醇對(duì)表面具有有效的去污作用。一般來(lái)說(shuō)異丙醇對(duì)植物細(xì)菌更有效；乙醇對(duì)病毒性成分的殺傷更有效。甲醛甲醛作為市售去污劑通常是濃度為375%時(shí)是有效的液體去污劑。甲醛在冷藏溫度下的大量失活，其刺激性的氣味和味道，使甲醛溶液在實(shí)驗(yàn)室使用難于進(jìn)行。從甲醛溶液中產(chǎn)生的苯酚效。四銨化合物或四銨（物）試驗(yàn)和應(yīng)用了四十多年后，至今對(duì)于四銨物作為去污劑的功效還有很多的爭(zhēng)論。這些陽(yáng)離子去污劑是很強(qiáng)的表面作用劑和對(duì)含脂病毒較有效。四銨物將黏附蛋白質(zhì)以使溶液稀釋并在蛋白質(zhì)存在時(shí)迅速釋放效力。四銨物趨向成叢微生物時(shí)能被諸如肥皂類(lèi)的陰離子去污劑抑制。它們的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)毒，無(wú)嗅，穩(wěn)定，無(wú)色，對(duì)金屬無(wú)腐蝕，和價(jià)格不貴。氯鹵素對(duì)許多微生物有廣泛的去污作用，包括細(xì)菌孢子。氯和蛋白質(zhì)結(jié)合能快速降低溶液中現(xiàn)存的蛋白質(zhì)濃度。自由的有效氯是作用的因素。它是一個(gè)強(qiáng)氧化劑且對(duì)金屬有腐蝕性。氯溶液必須被經(jīng)常更新（現(xiàn)配現(xiàn)用）。氯去污劑中次氯酸鈉是常用的基本物質(zhì)。碘酒碘酒和氯的性質(zhì)是相同的。用于實(shí)驗(yàn)室的最常用的去污劑組合之一是碘結(jié)合物，與WescodyneWescodyne稀釋范圍是1.5克/升水－4.5克/升水（即有效碘為25～75ppm）。在這個(gè)范圍內(nèi)的少量自由有效碘能被存在著的無(wú)關(guān)75ppm有效碘的（化合物）對(duì)表面和水的清潔處理是有效的，但是假Wescodyne,危急的。碘結(jié)合物的濃度越高則實(shí)際作用越低，正如結(jié)合了分子后碘就被束縛了一樣。用于洗手和殺孢子劑時(shí)，被推薦稀釋成Wescodyne1～10于50%乙醇中（一種相當(dāng)好的自身去污劑）。有效碘為1,600ppm，在這個(gè)濃度下所有微生物中與之相關(guān)的部分會(huì)快速滅活。可選擇的化學(xué)消毒劑沒(méi)有一個(gè)單一的化學(xué)消毒劑或方法對(duì)所有的情況都是有效和實(shí)用的。在選擇化學(xué)消毒劑和消毒程序之前必須考慮消毒的目的和（消毒劑）間的互相影響因素及最終要達(dá)到的目的。消毒程序的選擇將從以下問(wèn)題的答案中得到信息：?靶有機(jī)體是什么？? 用什么消毒劑，什么形式能滅活靶有機(jī)體？? 要求滅活到什么程度？? 將靶有機(jī)體懸浮在什么溶劑中？（如：?jiǎn)我换蚧旌弦?，固體多孔滲水的表面，和/空氣介質(zhì)）？? 什么是有機(jī)體預(yù)期的最高濃度？? 作為液體，蒸汽，或氣體的消毒劑接觸有機(jī)體時(shí)發(fā)生作用的持續(xù)時(shí)間？? 要考慮物質(zhì)的兼容性受什么限制？? 間來(lái)進(jìn)行可用工作濃度即刻制備的消毒劑的穩(wěn)定性？實(shí)驗(yàn)室的去污劑的最初目標(biāo)是在研究狀態(tài)下的有機(jī)體。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備或培養(yǎng)通常有超過(guò)在自同樣,接觸時(shí)間的主要部分要求達(dá)到滅活的水平也許要消耗大量抵抗部分中的小部分相對(duì)滅活的部分?，F(xiàn)在的技術(shù)狀態(tài)幾乎不能提供信息來(lái)預(yù)測(cè)對(duì)更多抵抗細(xì)胞可能的毒性。然而，這些一般是針對(duì)所有潛在的致病因素和必須通常在選擇消毒劑和消毒過(guò)程時(shí)被考慮的問(wèn)題。（對(duì)去污劑）抵抗力最強(qiáng)。選擇消毒劑基于它對(duì)生物體在低抵抗范圍內(nèi)的效力。因此，如果為了實(shí)驗(yàn)室常規(guī)去污而選擇對(duì)孢子形式有效的消毒劑，它能假定在實(shí)驗(yàn)室操作中產(chǎn)生其他的生物體，甚至在高濃度時(shí)也能被滅活。對(duì)幾種化學(xué)消毒劑的相關(guān)特性和潛在應(yīng)用大多數(shù)是被用于生物實(shí)驗(yàn)室的概述是在以下幾頁(yè)的表格中。實(shí)際使用濃度和接觸時(shí)間也許與產(chǎn)品制造商說(shuō)明書(shū)上推薦的有相當(dāng)大的不同。它被假定微生物將被有機(jī)溶劑提供一個(gè)高度的潛在保護(hù)。它不被假定一個(gè)消過(guò)毒的情況將來(lái)源于說(shuō)明書(shū)上顯示的使用濃度和接觸時(shí)間。必須強(qiáng)調(diào)的是這些數(shù)據(jù)僅僅是在人工實(shí)驗(yàn)的情況下的效力顯示。最終將有個(gè)體調(diào)查者的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定一同樣顯然是為了作為一種維持消毒劑“藥庫(kù)”選擇的折衷需要。消毒、滅菌和廢棄物的處理過(guò)程滅活重要特性滅活重要特性a–可利用的鹵素 四銨化合物.Cpds0.1-2.0%＋四銨化合物.Cpds0.1-2.0%＋＋＋＋＋＋＋＋酚Cpds1.0-5.0%＋＋b＋＋＋＋＋＋氯Cpds500ppma＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋碘伏25-1600ppma＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋乙醇70-85%＋＋b＋＋＋＋異丙醇70-85%＋＋b＋＋＋＋甲醛0.2-8.0%＋＋＋＋＋＋＋＋＋戊二醛2%＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋b–依賴(lài)病毒變異的結(jié)果c–從光和空氣中的防護(hù)d–通常相配，但考慮在聯(lián)結(jié)物質(zhì)上從殘余物和效應(yīng)的干擾如載片的膠粘劑。e–在制造商的文獻(xiàn)中認(rèn)為被皮膚或口腔或兩者都請(qǐng)注意在消毒劑的功效試驗(yàn)中接觸時(shí)間為10分鐘是一般常用的。11－9消毒、滅菌和廢棄物的處理過(guò)程消毒、滅菌和廢棄物的處理過(guò)程廢棄物處理廢棄物是指將要丟棄的所有物品。實(shí)驗(yàn)用一次性個(gè)人防護(hù)用品和實(shí)驗(yàn)器材、棄臵的菌（毒）考慮的主要問(wèn)題有：1．是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進(jìn)行了有效的清除污染或焚燒？設(shè)施的地方進(jìn)行處理？觸到丟棄物的人員造成任何潛在的生物學(xué)或其他方面的危害？清除污染器中（如根據(jù)內(nèi)容物是否需要進(jìn)行高壓滅菌和/或焚燒而采用不同顏色標(biāo)記的可高壓滅菌的塑料袋。也可采用其他可以除去和/或殺滅微生物的替代方法。污染性材料和廢棄物的處理和丟棄程序相關(guān)規(guī)定。廢棄物可以分成以下幾類(lèi)：1．可重復(fù)或再使用，或按普通“家庭”廢棄物丟棄的非污染（非感染性）廢棄物。消毒、滅菌和廢棄物的處理過(guò)程消毒、滅菌和廢棄物的處理過(guò)程污染（感染性）銳皮下注射用針頭、手術(shù)刀、刀子及破碎玻璃；這些廢棄物應(yīng)收集在帶蓋的不易刺破的容器內(nèi)，并按感染性物質(zhì)處理。通過(guò)高壓滅菌和清洗來(lái)清除污染后重復(fù)或再使用的污染材料。高壓滅菌后丟棄的污染材料。直