醫(yī)療器械無菌和初始污染菌檢驗(yàn)

醫(yī)療器械無菌和初始污染菌檢驗(yàn)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局北京醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心1整理ppt

用于檢查要求無菌的醫(yī)療器械是否無菌的一種方法。若供試品符合無菌檢查法的規(guī)定，僅表明了供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。無菌試驗(yàn)的目的：將醫(yī)療器械或其浸提液接種于培養(yǎng)基內(nèi)，以檢驗(yàn)供試品是否有細(xì)菌和真菌污染。什么是無菌檢查法？

2整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)GB/T14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法2010年版《中國(guó)藥典》無菌檢查法3整理ppt醫(yī)療器械無菌試驗(yàn)檢查要點(diǎn)指南（2010版）

無菌檢驗(yàn)是無菌醫(yī)療器械產(chǎn)品生產(chǎn)控制過程中的一項(xiàng)重要內(nèi)容。其檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果判定及檢驗(yàn)人員業(yè)務(wù)能力等因素直接影響產(chǎn)品的質(zhì)量和安全。作為無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)，其無菌檢驗(yàn)工作應(yīng)由本企業(yè)獨(dú)立完成。并要求企業(yè)的檢驗(yàn)人員能當(dāng)場(chǎng)操作或口述無菌檢驗(yàn)的過程。4整理ppt

培養(yǎng)基:是人工配制的生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，即用人工的方法將多種物質(zhì)按各種微生物生長(zhǎng)繁殖的需要配成的一種混合營(yíng)養(yǎng)物。微生物:必須用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能觀察到的微小生物。微生物具有一定的形態(tài)與結(jié)構(gòu),并能在適宜的環(huán)境中迅速地生長(zhǎng)和繁殖,如細(xì)菌、病毒、真菌等。無菌：是指某一物體或某一環(huán)境中不含有活的微生物。凡能殺滅物體中所有活的微生物的作用稱為滅菌。5整理ppt

細(xì)菌：為單細(xì)胞微生物,其細(xì)胞分化不完善，無完整細(xì)胞核及核膜、核仁，直徑一般為1μm~

10μm。6整理ppt

真菌：為多細(xì)胞或單細(xì)胞微生物，其細(xì)胞分化完善，有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，故易在體外生長(zhǎng)繁殖，直徑一般為10μm~

100μm。7整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備

超凈工作臺(tái)8整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備恒溫培養(yǎng)箱（至少2臺(tái)）9整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備壓力蒸汽滅菌器10整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備電熱干燥箱11整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備集菌儀12整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備生物安全柜:（從試驗(yàn)安全性考慮，建議陽性對(duì)照試驗(yàn)使用生物安全柜）13整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備電子天平14整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備光學(xué)顯微鏡15整理ppt醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)所需設(shè)備過濾裝置（無油真空泵、濾杯、濾頭、濾瓶、微孔濾膜、夾子）

16整理ppt無菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行，其全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。隔離系統(tǒng)按相關(guān)的要求進(jìn)行驗(yàn)證，其內(nèi)部環(huán)境的潔凈度須符合無菌檢查的要求。

無菌檢查人員必須具備微生物專業(yè)知識(shí)，并經(jīng)過無菌技術(shù)的培訓(xùn)。還應(yīng)該具有高度的責(zé)任心和嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的工作作風(fēng)。環(huán)境及人員要求17整理ppt

無菌檢查法環(huán)境要求18整理ppt隔離系統(tǒng)無菌檢查法環(huán)境要求19整理ppt

無菌室在消毒處理完畢后，應(yīng)檢查空氣中的菌落數(shù)。

無菌檢查法環(huán)境要求TSA瓊脂平皿在30℃~35℃培養(yǎng)48h證明無菌取3只放無菌操作臺(tái)或超凈工作臺(tái)平均位置打開上蓋，暴露30min后蓋好3只培養(yǎng)皿上生長(zhǎng)的菌落數(shù)平均應(yīng)不超過1個(gè)無菌試驗(yàn)過程中也應(yīng)檢查空氣中的菌落數(shù)，方法要求同上20整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備

器具滅菌：與供試液接觸的所有器具應(yīng)采用可靠方法滅菌，置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)121℃30min，或置電熱干燥箱內(nèi)160℃2h。

培養(yǎng)基：可按藥典中的處方制備培養(yǎng)基，亦可使用按該處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。應(yīng)采用驗(yàn)證合格的滅菌程序滅菌。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2℃~

25℃，一般在3周內(nèi)使用。21整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備配制培養(yǎng)基所需器具:

22整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備常用器具與稀釋液:

23整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備培養(yǎng)基:

24整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基:在供試品接種前,培養(yǎng)基氧化層的高度不得超過培養(yǎng)基深度的1/5，否則,須經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失（不超過20分鐘）迅速冷卻,只限加熱一次，并應(yīng)防止被污染。其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層（粉紅色）不超過培養(yǎng)基深度的1/2。30℃~

35℃培養(yǎng)14天。

需氧菌生長(zhǎng)厭氧菌生長(zhǎng)25整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備培養(yǎng)基:

26整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備

改良馬丁培養(yǎng)基：23℃~

28℃培養(yǎng)14天27整理ppt無菌檢查法試驗(yàn)前準(zhǔn)備培養(yǎng)基:

28整理ppt無菌檢查用的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基等應(yīng)符合培養(yǎng)基的無菌性檢查及靈敏度檢查的要求。

無菌性檢查

每批培養(yǎng)基隨機(jī)不少于5支（瓶），培養(yǎng)14天，應(yīng)無菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)基的適用性檢查29整理ppt靈敏度檢查：

菌種

培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代（從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為第0代），并采用適宜的菌種保藏技術(shù)，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus

aureus)［CMCC（B）26

003］

銅綠假單胞菌

(Pseudomonas

aeruginosa)

［CMCC（B）10

104］

枯草芽孢桿菌

(Bacillus

subtilis

)

［CMCC（B）63

501］

生孢梭菌

(Clostridiumsporogenes)

[CMCC(B)

64

941]

白色念珠菌

(Candidaalbicans)

[CMCC(F)

98

001]

黑曲霉

(Aspergillus

niger

)

[CMCC(F)

98

003]培養(yǎng)基的適用性檢查30整理ppt培養(yǎng)基應(yīng)符合無菌性檢查及靈敏度檢查的要求。檢查可在供試品的無菌檢查前或與供試品的無菌檢查同時(shí)進(jìn)行。靈敏度檢查所用菌種（藥典2010版規(guī)定）金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉分別接種各菌種新鮮培養(yǎng)物至相應(yīng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，將培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成菌懸液（濃度小于100cfu/mL）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（12mL）9支：分別接種小于100cfu的金葡、銅綠、枯草、生孢各2支，另一支不接種做空白對(duì)照，培養(yǎng)3天改良馬丁培養(yǎng)基（9mL）

5支：分別接種小于100cfu的白念、黑曲霉各2支，另1支不接種做空白對(duì)照，培養(yǎng)5天逐日觀察結(jié)果：空白對(duì)照管應(yīng)無菌生長(zhǎng)，若加菌的培養(yǎng)基管均生長(zhǎng)良好，則靈敏度符合規(guī)定。31整理ppt無菌檢驗(yàn)有兩種方法：直接接種法、薄膜過濾法直接接種法:將供試品或其有代表性的各部分直接投放入培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)。薄膜過濾法:含抗菌、抑菌成分的供試品會(huì)抑制某些微生物的生長(zhǎng)繁殖,所以用常規(guī)方法檢查會(huì)出現(xiàn)假陰性的結(jié)果,但并不等于產(chǎn)品中沒有微生物甚至是致病性微生物。所以采用薄膜過濾法來去除供試品中可溶的抑菌性成分,把細(xì)菌等微生物截留在濾膜上,然后再經(jīng)過處理培養(yǎng)使所含微生物生長(zhǎng)繁殖,從而使微生物檢出。方法驗(yàn)證試驗(yàn)32整理ppt當(dāng)建立產(chǎn)品的無菌檢查法時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法的驗(yàn)證，以證明所采用的方法適合于該產(chǎn)品的無菌檢查。若產(chǎn)品的組分或原檢驗(yàn)條件發(fā)生改變時(shí)，檢查方法應(yīng)重新驗(yàn)證。

驗(yàn)證時(shí)，按“供試品的無菌檢查”的規(guī)定及下列要求進(jìn)行操作。對(duì)每一試驗(yàn)菌應(yīng)逐一進(jìn)行驗(yàn)證。方法驗(yàn)證試驗(yàn)33整理ppt菌種及菌液制備：除大腸埃希菌（Escherichiacoli）[CMCC(B)44102〕外，金黃色葡萄球菌

、

枯草芽孢桿菌

、

生孢梭菌、

白色念珠菌、黑曲霉同培養(yǎng)基靈敏度檢查。大腸埃希菌的菌液制備同金黃色葡萄球菌。方法驗(yàn)證試驗(yàn)與靈敏度檢驗(yàn)所有菌種區(qū)別：大腸埃希菌代替銅綠假單胞菌。方法驗(yàn)證試驗(yàn)34整理ppt取每種培養(yǎng)基規(guī)定接種的供試品總量按薄膜過濾法過濾，沖洗，在最后一次的沖洗液中加入小于100cfu的試驗(yàn)菌，過濾。取出濾膜接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或改良馬丁培養(yǎng)基中，或?qū)⑴囵B(yǎng)基加至濾筒內(nèi)。另取一裝有同體積培養(yǎng)基的容器，加入等量試驗(yàn)菌，作為對(duì)照。按規(guī)定溫度培養(yǎng)3天~

5天。各試驗(yàn)菌同法操作。方法驗(yàn)證試驗(yàn)：薄膜過濾法35整理ppt方法驗(yàn)證所用菌種（藥典2010版規(guī)定）金黃色葡萄球菌大腸埃希菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉分別接種各菌種新鮮培養(yǎng)物至相應(yīng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，將培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成菌懸液（濃度小于100cfu/mL）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基8支：分別接種小于100cfu的金葡、大腸、枯草、生孢各2支，其中1管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定的供試品接種量，另1管作為對(duì)照，培養(yǎng)3天。改良馬丁培養(yǎng)基4支：分別接種小于100cfu的白念、黑曲霉各2支，其中1管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定的供試品接種量，另1管作為對(duì)照，培養(yǎng)5天。方法驗(yàn)證試驗(yàn)：直接接種法36整理ppt

與對(duì)照管比較，如含供試品各容器中的試驗(yàn)菌均生長(zhǎng)良好，則說明供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下無抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不計(jì)，照此檢查法和檢查條件進(jìn)行供試品的無菌檢查。如含供試品的任一容器中微生物生長(zhǎng)微弱、緩慢或不生長(zhǎng)，則說明供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下有抑菌作用，可采用增加沖洗量，或增加培養(yǎng)基的用量，或使用中和劑或更換濾膜品種等方法，消除供試品的抑菌作用，并重新進(jìn)行方法驗(yàn)證。

方法驗(yàn)證試驗(yàn)也可與供試品的無菌檢查同時(shí)進(jìn)行。方法驗(yàn)證試驗(yàn)：結(jié)果判斷37整理ppt

供試品包裝須完好無損，尤其是只有一層包裝的樣品。進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室的樣品若有兩層（或兩層以上）包裝的，需將外包裝在傳遞窗（或緩沖間）拆除后，傳入實(shí)驗(yàn)室。

操作人員準(zhǔn)備：帶口罩、帽子、穿專用無菌服、鞋進(jìn)入無菌室。供試品的無菌檢查38整理ppt

供試品的無菌檢查

在100級(jí)超凈臺(tái)內(nèi)，酒精燈火焰周圍，以無菌操作法將規(guī)定量的供試品分別接種至含硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（不少于15ml/管）和改良馬丁培養(yǎng)基（不少于10ml/管）的容器中。正確的無菌操作，既不能引入外來菌污染培養(yǎng)物造成假陽性，也要注意接觸供試品的試驗(yàn)用具溫度不可過高以免將可能存在的菌燙死。39整理ppt陰性對(duì)照（目的是驗(yàn)證試驗(yàn)是否存在污染）：供試品無菌檢查時(shí)，應(yīng)取相應(yīng)溶劑和稀釋液同法操作，作為陰性對(duì)照。陰性對(duì)照不得有菌生長(zhǎng)。陽性對(duì)照（目的是驗(yàn)證試驗(yàn)可靠性，防止假陰性）：應(yīng)根據(jù)供試品特性選擇陽性對(duì)照菌；無抑菌作用供試品以金黃色葡萄球菌為陽性對(duì)照菌。陽性對(duì)照試驗(yàn)的菌液制備同方法驗(yàn)證試驗(yàn)，加菌量小于100cfu，供試品用量同供試品無菌檢查每份培養(yǎng)基接種的樣品量。陽性對(duì)照管培養(yǎng)48~72小時(shí)應(yīng)生長(zhǎng)良好。供試品的無菌檢查40整理ppt無菌檢查法-直接接種法供試品數(shù)量：同一批號(hào)3個(gè)~11個(gè)單位供試品優(yōu)先采用將供試品或其有代表性的各部分直接投放入培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)。如：棉簽、導(dǎo)尿包中的導(dǎo)尿管、注射器中的液體等41整理ppt無菌檢查法-薄膜過濾法

2010年版《中國(guó)藥典》規(guī)定:只要供試品性狀允許，應(yīng)采用薄膜過濾法。供試品無菌檢查所采用的檢查方法和檢驗(yàn)條件應(yīng)與驗(yàn)證的方法相同。在蠕動(dòng)泵的作用下，被測(cè)產(chǎn)品通過裝有帶空氣過濾器的針頭及無菌管路直接從樣品容器中進(jìn)入濾筒中，免去了通常膜轉(zhuǎn)移過程中易產(chǎn)生的污染。無菌檢查法中薄膜過濾法所用的濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45μm，直徑約為50mm。42整理ppt水溶液供試品取規(guī)定量的供試液，直接過濾，或混合至含適量稀釋液的無菌容器內(nèi)，混勻，立即過濾。供試液經(jīng)薄膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml，總沖洗量不得超過1000mL，以免濾膜上微生物受損傷。無菌檢查法-薄膜過濾法沖洗后分別將100mL硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基加入相應(yīng)的濾筒內(nèi)，培養(yǎng)。43整理ppt無菌檢查法培養(yǎng)及觀察上述含培養(yǎng)基的容器按規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天。培養(yǎng)期間應(yīng)逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)。如在加入供試品后或在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng)14天后，不能從外觀上判斷有無微生物生長(zhǎng)，可取該培養(yǎng)液適量轉(zhuǎn)種至同種新鮮培養(yǎng)基中，細(xì)菌培養(yǎng)2天、真菌培養(yǎng)3天，觀察接種的同種新鮮培養(yǎng)基是否再出現(xiàn)渾濁；或取培養(yǎng)液涂片，染色，鏡檢，判斷是否有菌。44整理ppt若供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無菌生長(zhǎng)，判供試品符合規(guī)定；若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長(zhǎng)，判供試品不符合規(guī)定，除非能充分證明試驗(yàn)結(jié)果無效，即生長(zhǎng)的微生物非供試品所含。

試驗(yàn)若經(jīng)確認(rèn)無效，應(yīng)重試。重試時(shí)，重新取同量供試品，依法檢查，若無菌生長(zhǎng)，判供試品符合規(guī)定；若有菌生長(zhǎng)，判供試品不符合規(guī)定。

陽性對(duì)照管應(yīng)生長(zhǎng)良好，陰性對(duì)照不得有菌生長(zhǎng)。否則，試驗(yàn)無效。無菌檢查法結(jié)果判斷45整理ppt

當(dāng)符合下列至少一個(gè)條件時(shí)，方可判試驗(yàn)結(jié)果無效：

（1）無菌檢查試驗(yàn)所用的設(shè)備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無菌檢查法的要求；

（2）回顧無菌試驗(yàn)過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素。

（3）供試品管中生長(zhǎng)的微生物經(jīng)鑒定后，確證是因無菌試驗(yàn)中所使用的物品和（或）無菌操作技術(shù)不當(dāng)引起的。無菌檢查法結(jié)果判斷46整理ppt

試驗(yàn)若經(jīng)確認(rèn)無效，應(yīng)重試。重試時(shí)，重新取同量供試品，依法檢查，若無菌生長(zhǎng)，判供試品符合規(guī)定；若有菌生長(zhǎng)，判供試品不符合規(guī)定。

無菌檢查法結(jié)果判斷47整理ppt醫(yī)療器械無菌試驗(yàn)檢查要點(diǎn)指南（2010版）

由于無菌檢驗(yàn)時(shí)間跨度較長(zhǎng)，因此過程的記錄應(yīng)能夠完整體現(xiàn)試驗(yàn)的全過程，對(duì)于在試驗(yàn)過程中出現(xiàn)的各種情況，均應(yīng)在記錄中客觀反映。

48整理ppt直接接種法試驗(yàn)結(jié)果

49整理ppt薄膜過濾法試驗(yàn)結(jié)果

50整理ppt無菌檢查法判定51整理ppt52整理ppt試驗(yàn)報(bào)告中宜給出下列信息：

供試品名稱；生產(chǎn)批號(hào)和（或）滅菌批號(hào)；供試液制備方法；接種方式；每日觀察結(jié)果（包括陰、陽性對(duì)照）；結(jié)果判定試驗(yàn)報(bào)告53整理pptGB15979-2002一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)初始污染菌的檢驗(yàn)初始污染菌：產(chǎn)品消毒、滅菌前的細(xì)菌總數(shù)，可判明檢品受細(xì)菌污染的程度以及生產(chǎn)單位所用的原料、工具設(shè)備、工藝流程、生產(chǎn)人員的衛(wèi)生狀況，是對(duì)檢品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)的綜合依據(jù)。54整理ppt部分一次性使用衛(wèi)生產(chǎn)品微生物學(xué)指標(biāo)要求產(chǎn)品種類微生物指標(biāo)初始污染菌cfu/g細(xì)菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL大腸菌群致病性化膿菌真菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL口罩普通級(jí)消毒級(jí)—≤10000≤200≤20不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出≤100不得檢出尿布等普通級(jí)消毒級(jí)—≤10000≤200≤20不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出≤100不得檢出注：致病性化膿菌指綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌與溶血性鏈球菌。55整理ppt初始污染菌的檢驗(yàn)準(zhǔn)備：平皿洗凈、烘干；牛皮紙包好滅菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制、滅菌。步驟：采樣，供試液制備，培養(yǎng)，菌落計(jì)數(shù)

在100級(jí)凈化條件下用無菌方法打開至少3個(gè)包裝；從每個(gè)包裝中取樣，準(zhǔn)確稱取10g±1g樣品；剪碎后加入200mL無菌生理鹽水中，充分混勻。液體產(chǎn)品用原液直接做樣液。56整理ppt初始污染菌的檢驗(yàn)取上清液共接種5個(gè)平皿，每個(gè)平皿中加入1mL供試液用冷卻至45℃左右的熔化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（15~20）mL，倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置35℃±2℃培養(yǎng)48h后，計(jì)算平板上的菌落數(shù)。稀釋度

5細(xì)菌菌落總數(shù)=5塊平板上的細(xì)菌菌落總數(shù)×（cfu/g或cfu/mL）如：取10g樣品入200mL生理鹽水中，則稀釋20倍當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)采用二位有效數(shù)字。57整理ppt初始污染菌的檢驗(yàn)計(jì)數(shù)方法：將平板置菌落計(jì)數(shù)器或從平板的背面直接以肉眼用標(biāo)記筆點(diǎn)計(jì)，以投射光襯以暗色背景，仔細(xì)觀察，計(jì)數(shù)。必要時(shí)可以借助于放大鏡、菌落計(jì)數(shù)器。菌落特征：⑴形態(tài)特征：常為白色、灰白色或灰色，亦有淡褐色、淡黃色。⑵邊緣整齊或不整齊，表面有光滑、粗糙，皺褶、突起或扁平。⑶大小差異很大。58整理ppt初始污染菌的檢驗(yàn)

如果樣品菌落總數(shù)超過本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，應(yīng)將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果平均值都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格；其中有任何一次結(jié)果平均值超過本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。59整理ppt醫(yī)療器械的無菌和初始污染菌檢驗(yàn)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)GB/T14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法2010年版《中國(guó)藥典》無菌檢查法GB15979-2002

一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T15980-1995一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)YY0033-2000無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范60整理ppt（1）培養(yǎng)基配制記錄（2）滅菌器、天平等儀器的使用記錄（3）培養(yǎng)基無菌性檢查、靈敏度檢查記錄（4）菌種購(gòu)買、傳代、使用記錄（5）方法學(xué)驗(yàn)證記錄（6）無菌試驗(yàn)記錄（7）滅菌物品制作（8）廢棄物處理記錄（9）潔凈間監(jiān)測(cè)記錄醫(yī)療器械無菌檢驗(yàn)應(yīng)有記錄61整理ppt一、適用范圍二、檢查內(nèi)容1.選擇的無菌檢驗(yàn)方法2.檢驗(yàn)人員資質(zhì)3.現(xiàn)場(chǎng)察看無菌實(shí)驗(yàn)室環(huán)境4.設(shè)備和器具5.管理制度、操作規(guī)程等相關(guān)技術(shù)文件

6.查閱試驗(yàn)記錄三、其它應(yīng)注意的問題醫(yī)療器械無菌試驗(yàn)檢查要點(diǎn)指南（2010版）（1）培養(yǎng)基制備（2）供試品的無菌檢查（3）培養(yǎng)及觀察（4）結(jié)果判斷（1）樣品記錄（2）滅菌物品制作記錄（3）原始試驗(yàn)記錄（4）廢棄物處理記錄62整理ppt醫(yī)療器械無菌試驗(yàn)檢查要點(diǎn)指南（2010版）其它應(yīng)注意的問題還包括：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)確保樣品具有代表性：試驗(yàn)樣品應(yīng)從常規(guī)產(chǎn)品中能夠代表加工過程和條件的批中選擇。選擇樣品是隨機(jī)的。試驗(yàn)樣品的選擇和處理技術(shù)應(yīng)明確，以免對(duì)樣品上所含的微生物的數(shù)量和種類造成污染和改變。試驗(yàn)樣品可以選擇制造過程中的不合格產(chǎn)品，它們應(yīng)該代表這個(gè)生產(chǎn)批的加工程序和條件。用于試驗(yàn)的不合格產(chǎn)品應(yīng)不會(huì)影響無菌測(cè)試的有效性。63整理ppt醫(yī)療器械無菌試驗(yàn)檢查要