維生素C不同的測定方法及各種方法優(yōu)缺點比較

維生素C不同的測定方法及各種方法優(yōu)缺點比較CC6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學發(fā)光法、電化學分析法及色譜法等,各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果.VC或抗壞血酸和測定"為檢索詞對1994～2002年中國期刊網(wǎng)全文數(shù)據(jù)庫(CNKI)ABC45.06％,65.69％,18.6312.75％;45.06％,60.92％,19.54％,10.34％.結(jié)論目前國內(nèi)維生素CHPLC一．熒光法1．原理樣品中還原型抗壞血酸經(jīng)活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸后，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline）,其熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。OPDA0.022g/ml。適用范圍本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定注意事項C。清液過濾。故活性炭用量應適當與準確，所以，應用天平稱量。我們的實驗結(jié)果證明，用2g二、2，6-二氯靛酚滴定法（還原型VC）1、原理：二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅2，6-二氯靛酚的量與樣品中C2、注意事項⑴所有試劑的配制最好都用重蒸餾水；⑵滴定時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為觀察顏色變化的參考；2%C；（Fe2+，要用8%的醋酸代2%使用醋酸可以避免這種情況的發(fā)生；⑸整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化；⑹在處理各種樣品時，如遇有泡沫產(chǎn)生，可加入數(shù)滴辛醇消除；⑺測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。32,6—DCIP2,62,6—DCIP2,6—DICP2,6—DCIP立即被還原成無色，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時，則滴下微量過剩的2,6—DCIP2,6—DCIP標準溶液的消耗量(ml)，2,6—DCIP2,6—DCIP2,6—DCIP壞樣品中還原型抗壞血酸后，再用2,6—DCIP滴定樣品中其他還原物質(zhì)。然后2,6—DCIP2,6—DCIP—DCIP2,6—DCIPpH1—3范圍內(nèi)，進行快速滴定，可以消除或減少其他還原物質(zhì)的作用，2,6—DCIPDCIPPCMB)而得到消除。三、2，4-二硝基苯肼法1．原理抗壞血酸含量成正比，進行比色測定。2．適用范圍本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定。VcV然后與2，4—二硝基苯肼作用，生成紅色的脎，將脎溶于硫酸后進行比色。最近國標中該法強調(diào)空白，每個樣品及標準系列均需作對應空白，這樣消除色澤、Vc四碘量法1、維生素C的原理CCCC即為滴定終點。2、注意事項看到紅棕色出現(xiàn)時要放慢滴定的速度。30sL-C)測定試劑盒（酶學方法1.應用于食品，飲料及生物制品檢測比色方法此方法用于檢測水果和蔬菜（如馬鈴薯，水果和蔬菜產(chǎn)品（如西紅柿醬、泡菜、果醬、果汁葡萄酒，還有動物飼料，醫(yī)藥品（如維生素配制、陣痛藥、退燒藥）和生物樣品L-C)，分析物L-抗壞血酸不定量的分布于動物和植物中。人類不能自身生產(chǎn)L-抗壞血酸，因此必須由外源(vitaminC)提供。一般情況下來源于水果和蔬菜中，出于技術原抗壞血酸的檢測非常適用于從原始水果和蔬菜中加工食品的質(zhì)量評定。L用于動物飼料添加劑中。原理L-抗壞血酸(x-H2)+MTT+PMS—>dehydroascorbate(x)+MTT-formazan+L-抗壞血酸+?O2 AAO——>dehydroascorbate+H2OX特異性在給定的條件下，此方法特別針對于L-抗壞血酸。合成的D-阿拉伯抗壞血酸/阿拉伯糖型抗壞血酸能作為抗氧化劑，也能反應，但反應速度較慢。靈敏度0.0051.600ml，0.1mg/lL-抗壞血酸濃度。0.0150.3mg/l1.600ml.。線性測定的線性范圍為0.5ugL-（0.3mgL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為1.600ml）到20ugL-抗壞血酸（0.2gL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為0.100ml）精密度0.005-0.010準的相對偏差（變異系數(shù)）1-3%L-血酸的水溶液穩(wěn)定性較差，尤其是重金屬離子或氧存在時。干擾及錯誤來源糧食的成分不經(jīng)常干擾實驗。高濃度的酒精和D-ft梨酸醇能降低反應速度，大量的亞硫酸鹽必須通過添加甲醛來去除。醋酸抑制酶AAO。金屬和亞硫酸鹽離子可以導致L-抗壞血酸的自發(fā)分解。試劑盒包括內(nèi)容磷酸鹽/檸檬酸緩沖液———— pH值大約3.5；MTTAAO（坑壞血酸-氧化酶）—— 每板約17UAAOPMS六．磷鉬藍分光光度法測定維生素CCCC，準確度和重復性均達到令人滿意的程度。適用范圍本標準適用于果品、蔬菜及其加工制品中還原型抗壞血酸的測定(不含二價鐵、二價錫、一價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽),不適用于深色樣品。測定原理染料2,6－二氯靛酚的顏色反應表現(xiàn)兩種特性,一是取決于其氧化還原狀態(tài),氧化態(tài)為深藍色,還原態(tài)變?yōu)闊o色;二是受其介質(zhì)的酸度影響,在堿性溶液中呈深藍色,在酸性介質(zhì)中呈淺紅色。用藍色的堿性染料標準溶液,對含維生素C的酸性浸出液進行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當?shù)竭_滴定終點時,多余的染料在酸性介質(zhì)中則表現(xiàn)為淺紅色,由染料用量計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。七.二甲苯－二氯靛酚比色法12用定量的2,6－二氯靛酚染料與試樣中的維生素C進行氧化還原反應,多余的染料在酸性環(huán)境中呈紅色,用二甲苯萃取后比色,在一定范圍內(nèi),吸光度與染料濃度呈線性相關,收剩余染料濃度用差減法計算維生素C含量。八.近紅外漫反射光譜分析法(NIRDRSA)1965快等優(yōu)點，逐漸受到分析界的重視。此法已廣泛應用于石油、紡織、農(nóng)業(yè)、食品、藥物分析等領域[1，2]。在藥物分析中，NIRDRSA量分析等工作。維生素C是一種不穩(wěn)定的二烯醇化合物，其藥典[3]含量測定方法為碘量C方法簡便，結(jié)果可靠。C-H，O-H，N-H的特征振動信息。由于近紅外光譜的譜帶較寬，譜圖重疊嚴重，不能用特征峰等簡單方法分析，需要運用計算機技術與化學計量學方法。本實驗應用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用定標集建立預測模型，然后將預測集作為未知樣本，根據(jù)預測模型進行預測。對所選擇的譜區(qū)范圍，采用對反射吸光度的MSC(散射校正)預處理，對個樣品進行交叉驗證，即選擇一個樣品，從校正集中除去該樣品對應的光譜和1，循環(huán)迭代樣品數(shù)和主成分數(shù)，計算預測殘22.029，2，PLS九電位滴定法PtE池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/I-+k(常數(shù))原理(具體來說:)突變；引起電位的突變，因此由測量工作電池電動勢的變化就能確定終點。計算式：(與碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%優(yōu)點：解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時無法指示終點的問題用線性電位滴定法分析抗壞血酸,抗壞血酸回收率為99.80％～101.5準偏差為0.61％;分析維生素C片中的抗壞血酸,相當標示量為98.90％～100.50.48％,說明線性電位滴定法分析維生素C抗壞血酸含量是可行的.十.分光光度法1. 原理：CpH>5,脫氫抗4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎脎在500nm波長有最大吸收VCVC原理：庫侖滴定法屬于恒電流庫侖分析。（中的標準濃液）與待測物質(zhì)定量作用，借助指示劑或電位法確定滴定終點。Q即： m=MQ/zF=MIt/zF3..化學反應：陰極反應：2H+2e-=H2陽極反應：2I-=I2+2e-終點指示：多種方法(1)化學指示劑－－I2(2)電位法(3)雙鉑極電流指示法計算式：Wvc=MvcQ/zFmF---（96487C）Z--100％優(yōu)點：無需標準化的試劑溶液，免去了大量的標準物質(zhì)的準備工作（配制，標定）只需要一個高質(zhì)量的供電器，計時器，小鉑絲電極，且易于實現(xiàn)自動化控制若電流維持一個定值，可大大縮短了電解時間電量容易控制及準確測量；方法靈敏度，準確度較高Cu＋,Br2,Cl2缺點(難點)：要求電解過程沒有副反應和漏電現(xiàn)象，即使電解電極上只進行生成滴定劑的反應，且電流的效率是100％注：電流效率＝i÷i＝i÷（ii＋i）因為：實際電解過程中存在影響電流效率的因素，如，雜質(zhì)，溶劑，電極自身在電極上的反應等）十二紫外快速測定法原理C2，6—C243nmC十三光電比濁法的原理原理在酸性介質(zhì)中,抗壞鐵酸與亞硒酸(H2SeO3)能定量地進行氧化還原反應.1mol2mol穩(wěn)定的懸濁液.當抗鐵酸的濃度在0-4mg/25-50ml的范圍內(nèi),該溶液生成的濁度與抗壞鐵酸的含量成正比.將試液置分光光度計上測其濁度可以定量地測定抗壞鐵酸.十四熒光分析法的原理原理用酸洗活性炭將抗壞鐵酸氧化為順式脫氫抗壞鐵酸,然后與鄰苯二胺縮合成一種熒光性化合物.樣品中其它熒光雜質(zhì)的干擾可以通過向氧化后的樣品中加入硼酸,使脫氫抗壞鐵酸形成硼酸脫氫抗壞鐵酸的絡合物,它不與鄰二苯胺生成熒光化合物.這樣可以測定其它熒光雜質(zhì)的空白熒光強度而加以校正十五原子吸收間接測定法原理VcVcCu2+定Cu+SCNCuSCNC化改善。十六．金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法５ｍＬ比色管中，依次加入０．１－２．０ｍＬ濃度為９５．６４μｇ／ｍＬ的↓［４］溶液，０．０２－０．５０ｍＬ０．００１－２．０ｍＬ濃度為０．３８ｍｇ／ｍＬ５２０ｎｍ處測定吸十七L-CL-CVCpH=10.0溶液中，VCL-VＣ度在1.0×10-