檢驗方法培訓(xùn)課件(微生物)

冷飲事業(yè)部實驗室培訓(xùn)資料質(zhì)量管理部一、大腸菌群的檢驗1.目的：監(jiān)測食品被污染的程度。2.檢驗標(biāo)準(zhǔn)：GB/T4789.3-2003——2004.1.1一、大腸菌群的檢驗—儀器一、大腸菌群的檢驗—儀器一、大腸菌群的檢驗—儀器一、大腸菌群的檢驗—儀器一、大腸菌群的檢驗—試劑一、大腸菌群的檢驗—試劑一、大腸菌群的檢驗—試劑一、大腸菌群的檢驗—器皿一、大腸菌群的檢驗—器皿一、大腸菌群的檢驗—器皿一、大腸菌群的檢驗—操作步驟準(zhǔn)備一、大腸菌群的檢驗—操作步驟準(zhǔn)備一、大腸菌群的檢驗—操作步驟③②①④接樣一、大腸菌群的檢驗—操作步驟⑤⑥⑦接樣一、大腸菌群的檢驗—操作步驟接樣⑧⑨⑩一、大腸菌群的檢驗—操作步驟接樣⑾⑿⒀一、大腸菌群的檢驗—操作步驟接樣①②③一、大腸菌群的檢驗—操作步驟④⑤⑥⑦⑧拿取裝有9ml生理鹽水的試管，試管口過火焰2-3次，打開試管。⑨檢樣稀釋一、大腸菌群的檢驗—操作步驟檢樣稀釋⑽⑾⑿一、大腸菌群的檢驗—操作步驟培養(yǎng)一、大腸菌群的檢驗—操作步驟結(jié)果觀察一、大腸菌群的檢驗—操作步驟分離培養(yǎng)驗證一、大腸菌群的檢驗—操作步驟革蘭氏染色革蘭氏陽性菌，紫色一、大腸菌群的檢驗—操作步驟結(jié)果判定一、大腸菌群的檢驗—操作步驟MPN表二、菌落總數(shù)的檢驗1.目的：監(jiān)測食品被污染程度。2.檢驗標(biāo)準(zhǔn)：

GB/T4789.2-2010——2012.6.1二、菌落總數(shù)的檢驗—儀器二、菌落總數(shù)的檢驗—儀器二、菌落總數(shù)的檢驗—儀器二、菌落總數(shù)的檢驗—試劑二、菌落總數(shù)的檢驗—試劑二、菌落總數(shù)的檢驗—器皿二、菌落總數(shù)的檢驗—器皿實驗前準(zhǔn)備第二步：無菌室和緩沖間進(jìn)行紫外燈滅菌，30min在紫外殺菌燈關(guān)閉半小時后方可進(jìn)入緩沖無菌室。第四步：用新吉爾滅水洗手，做樣前用酒精棉球擦拭手部和樣品包裝表面。第三步：準(zhǔn)備0.1%的新潔爾滅溶液、體積分?jǐn)?shù)為70%-75%的酒精棉球，以便樣品表面及意外污染消毒。第一步：將所需物品進(jìn)行（121℃，20min）高壓滅菌處理，如：瓊脂、生理鹽水、無菌瓶、吸管、槍頭等。1234二、菌落總數(shù)的檢驗—檢驗步驟123456檢樣：1、將無菌生理鹽水到天平上歸零。2、將待檢樣品用酒精棉球擦拭開口處。3、用酒精棉球?qū)⑷佑玫蔫囎硬潦孟尽?、將鑷子過火焰消毒。5、取待檢樣品25g于225ml的滅菌生理鹽水中。（稀釋10倍）6、將樣液混勻備用。二、菌落總數(shù)的檢驗—檢驗步驟T度稀釋：吸取1ml10倍樣液于9ml滅菌生理鹽水管中，混勻。（稀釋100倍）吸取樣液：吸取10倍、100倍稀釋液各1ml于滅菌平皿中。傾倒平板：每個平皿中加入15-20ml平板計數(shù)瓊脂（46±1℃）混勻。二、菌落總數(shù)的檢驗—檢驗步驟冷卻：將倒好的平皿放入超凈臺內(nèi)，冷卻，待瓊脂凝固。培養(yǎng)：將凝固的培養(yǎng)皿翻轉(zhuǎn)放入36±1℃培養(yǎng)48±2h。如果樣品中可能含有在培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時，可以再凝固后在瓊脂表面覆蓋一層瓊脂培養(yǎng)基，約4ml。菌落計數(shù)：用計數(shù)器記錄稀釋倍數(shù)相應(yīng)的菌落個數(shù)，二、菌落總數(shù)的檢驗—檢驗步驟菌落計數(shù)方法：1、選取菌落數(shù)在30cfu-300cfu之間、無菌落蔓延生長的的平板菌落總數(shù)，低于30cfu的平板，記錄具體的菌落數(shù)，大于300cfu的可以記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)該采用兩個平板的平均數(shù)。2、其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)無片狀菌落的生長的的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2代表一個平板菌落數(shù)。3、當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間沒有明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。二、菌落總數(shù)的檢驗—結(jié)果報告結(jié)果表述：1、若只有一個稀釋度平板在適宜計數(shù)范圍內(nèi)，計算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)，作為每克或每毫升中菌落總數(shù)結(jié)果。2、若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜的計數(shù)范圍內(nèi)時，按照式1計算。N=Σc/（n1+0.1n2）d.......................(1)N--樣品中的菌落數(shù)；Σc--