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醫(yī)院微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的留取及質(zhì)量保證詳解演示文稿第一頁(yè),共二十六頁(yè)。(優(yōu)選)醫(yī)院微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的留取及質(zhì)量保證第二頁(yè),共二十六頁(yè)。臨床微生物室概論臨床微生物實(shí)驗(yàn)室:當(dāng)代的臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的功能不僅是檢驗(yàn)的場(chǎng)所,更是與臨床感染疾病的流行病史結(jié)合、建立、分離、鑒定樣品中病原微生物的方法學(xué),并進(jìn)行藥敏試驗(yàn),開(kāi)展本單位的耐藥檢測(cè),為臨床醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)用藥和目標(biāo)用藥提供參考依據(jù);結(jié)合臨床需要開(kāi)展科學(xué)研究,不斷建立滿足臨床工作所需的現(xiàn)行有效的檢驗(yàn)項(xiàng)目,淘汰陳舊的、無(wú)用的或錯(cuò)誤的微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目;追溯傳代源,降低醫(yī)院感染率的機(jī)構(gòu)。第三頁(yè),共二十六頁(yè)。臨床微生物室的工作病原微生物檢測(cè),明確診斷抗菌藥物敏感試驗(yàn),協(xié)助治療,預(yù)后評(píng)估耐藥菌檢測(cè),細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)院感偵查1/18/2023第四頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18臨床微生物實(shí)驗(yàn)室5第五頁(yè),共二十六頁(yè)。微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的留取及質(zhì)量保證微生物標(biāo)本的留取微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制1/18/2023第六頁(yè),共二十六頁(yè)。正確的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果1、標(biāo)本的正確留取2、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量的保證3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確理解第七頁(yè),共二十六頁(yè)。血標(biāo)本和骨髓標(biāo)本指征:寒戰(zhàn)、發(fā)熱或體溫過(guò)低、皮疹(粘膜出血)、肝脾腫大、關(guān)節(jié)疼痛、神志昏迷或休克。當(dāng)患者高度考慮為血流感染,但外周血培養(yǎng)連續(xù)多次陰性時(shí)可以考慮做骨髓培養(yǎng)。時(shí)間:患者寒戰(zhàn)前、寒戰(zhàn)時(shí)、或寒戰(zhàn)后一小時(shí)內(nèi)采血;使用抗菌藥物之前,應(yīng)立即采集血液做培養(yǎng)(心內(nèi)膜炎除外)。采集:嚴(yán)格執(zhí)行“三步消毒法”乙醇擦拭靜脈穿刺部位待30s以上;碘酊作用30s或碘伏作用90s以上,從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒,至消毒區(qū)域直徑3cm以上;70%乙醇脫碘待干。70%乙醇擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞,作用60s后用無(wú)菌紗布或無(wú)菌棉簽清除殘余乙醇。用注射器穿刺采血后,直接注入血培養(yǎng)瓶,或嚴(yán)格按血培養(yǎng)瓶廠家推薦的方法采血,接種到血瓶后,輕輕顛倒混勻,防止血液凝固,成人采血5-10ml/瓶(成人)為最佳。嬰幼兒采血量為全血量的1%(1-2ml);骨髓采集量一般為1-2ml。如果不能立即送到微生物室,自動(dòng)化儀器配套的血培養(yǎng)瓶可臨時(shí)室溫保存,切勿冷藏。第八頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18院內(nèi)獲得性感染:入院48小時(shí)后,多由耐藥的微生物引起致病微生物:細(xì)菌(90%)、真菌、病毒、支原體、衣原體等ICU常見(jiàn)致病微生物:陽(yáng)性球菌感染增加、真菌感染增多銅綠假單胞不動(dòng)桿菌金葡菌真菌不同感染部位常見(jiàn)致病菌:尿路:大腸桿菌、腸球菌傷口:葡萄球菌、大腸桿菌呼吸系統(tǒng);G-多見(jiàn),近年球菌增多腹腔感染:多混有厭氧菌長(zhǎng)期應(yīng)用抗生素:真菌感染,念珠菌(白念)多見(jiàn)血流感染常見(jiàn)病原體第九頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18陽(yáng)性報(bào)告一級(jí)報(bào)告(初步報(bào)告):報(bào)告臨床陽(yáng)性并涂片二級(jí)報(bào)告(補(bǔ)充報(bào)告):初步鑒定結(jié)果和直接藥敏三級(jí)報(bào)告(終報(bào)告):菌種名稱和標(biāo)準(zhǔn)藥敏結(jié)果陰性報(bào)告“血培養(yǎng)經(jīng)xx天培養(yǎng)陰性”血培養(yǎng)報(bào)告第十頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18PerformvenipuncturePlaceAdaptercapobtain8-10mlofbloodSkinPreparationORBottlePreparation第十一頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18全自動(dòng)血培養(yǎng)檢測(cè)原理第十二頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18第十三頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18一套兩套三套采血份數(shù)Cockerill,CID2004研究表明:一套血培養(yǎng)選擇1個(gè)需氧瓶和1個(gè)厭氧瓶組合檢測(cè)出的葡萄球菌、腸桿菌科菌中某些菌和厭氧菌比一對(duì)需氧瓶多。第十四頁(yè),共二十六頁(yè)。在發(fā)熱開(kāi)始的24h內(nèi)進(jìn)行血培養(yǎng)。盡力保證在抗感染治療前獲得首份血培養(yǎng)標(biāo)本。同時(shí)經(jīng)2個(gè)獨(dú)立部位抽取血標(biāo)本,此結(jié)果比單一部位的血培養(yǎng)更有臨床意義。除新生兒外,不建議只進(jìn)行單套血培養(yǎng)(II級(jí))。48-96h后評(píng)估治療效果,再次血培養(yǎng)不能單取1套,必須同時(shí)抽取2套標(biāo)本(II級(jí))。但對(duì)懷疑血管內(nèi)的感染,應(yīng)該間隔一段時(shí)間區(qū)不同部位的靜脈穿刺抽血,有助于診斷持續(xù)性菌血癥(II級(jí))。成人:任何時(shí)候,絕對(duì)不能只送一瓶!2023/1/18指南中強(qiáng)調(diào):血培養(yǎng)至少送2套CritCareMed2008Vol.36.No.4:CLSI指南:英國(guó)指南第十五頁(yè),共二十六頁(yè)。導(dǎo)管導(dǎo)管相關(guān)性感染:診斷依據(jù):導(dǎo)管培養(yǎng)、導(dǎo)管內(nèi)血培養(yǎng)、外周血培養(yǎng)為同一種菌。除感染癥狀外還要滿足以下某一條件:5cm導(dǎo)管尖端,半定量培養(yǎng)陽(yáng)性(>15CFU),或者定量培養(yǎng)陽(yáng)性(>100CFU),同時(shí)從導(dǎo)管培養(yǎng)出的細(xì)菌與外周血培養(yǎng)結(jié)果一致(種屬和藥敏結(jié)果);同時(shí)從CVCs、外周靜脈抽血送細(xì)菌培養(yǎng),CVCs所取血樣培養(yǎng)出現(xiàn)陽(yáng)性的時(shí)間比外周血早2小時(shí)以上。標(biāo)本送檢:1)、導(dǎo)管:用75%乙醇清潔導(dǎo)管周?chē)つw,無(wú)菌手續(xù)移動(dòng)導(dǎo)管,剪取導(dǎo)管尖端5cm,直接置入無(wú)菌容器中,盡快送檢。2)、經(jīng)外周靜脈穿刺采血>=1套;從導(dǎo)管中心或靜脈留置口隔膜采血1套;二者采血的時(shí)間接近(建議<=5min)常見(jiàn)菌:凝固酶陰性葡萄球菌。如果僅導(dǎo)管血報(bào)陽(yáng)則不能確定CRBSI,但為金葡或念珠菌時(shí),且沒(méi)有其他任何部位感染癥狀時(shí)首先考慮CRBSI。第十六頁(yè),共二十六頁(yè)。腦脊液指征:發(fā)熱等全身性感染癥狀;顱內(nèi)壓升高癥狀,小兒前囟飽滿等;腦膜刺激癥;神經(jīng)麻痹癥;腦脊液變化;新生兒和嬰兒發(fā)熱、抽搐或伴嘔吐等癥狀;一些腦膜疾病等。時(shí)間:懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液,最好是應(yīng)用抗生素之前。注意事項(xiàng):最好在抗生素治療之前;穿刺過(guò)程嚴(yán)格無(wú)菌操作防止污染;如果只采集一管,應(yīng)先送至細(xì)菌室;不需加抗凝劑或防腐劑;做腦脊液培養(yǎng)同時(shí)建議做血培養(yǎng);禁止使用腦室引流液代替穿刺的腦脊液。送檢時(shí)應(yīng)保溫如檢查病毒,則應(yīng)將裝腦脊液管的容器放入冰塊中。第十七頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18第十八頁(yè),共二十六頁(yè)。胸腹水、膽汁指征:胸水:伴有胸痛、發(fā)熱、胸腔積液(根據(jù)抽出的液體的外觀分為混濁、乳糜性、血性和膿性)結(jié)核性、細(xì)菌性胸膜炎,真菌引起的胸腔積液,胸腔積膿。腹水:結(jié)核性腹膜炎、肝硬化腹水合并感染,胃腸穿孔,盆腔積液,腹壁膿腫。膽汁:腹痛、黃疸、右上腹壓痛、肌緊張、膽囊去深呼吸時(shí)有觸痛,即Murphy征陽(yáng)性、中毒或休克,常伴惡心、嘔吐、發(fā)熱、尿少且黃。采集:手術(shù)中或B超介導(dǎo)下穿刺。(膽汁僅手術(shù)中留?。┳⒁馐马?xiàng):無(wú)菌操作留取標(biāo)本;標(biāo)本量一般為5-10ml,不能用拭子蘸取;可在容器中加入少量滅菌肝素,或?qū)?biāo)本直接注入血培養(yǎng)瓶中。第十九頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18第二十頁(yè),共二十六頁(yè)。痰、肺泡灌洗液標(biāo)本肺泡灌洗液BAL:應(yīng)用纖維支氣管鏡進(jìn)行支氣管肺泡灌洗,采集肺泡表面襯液進(jìn)行微生物、免疫細(xì)胞及可溶性物質(zhì)檢查的方法。用于下呼吸道疾病的診斷、鑒別診斷和預(yù)后評(píng)估。指征:發(fā)熱、咳嗽、和咳痰,痰呈膿性、粘稠或血性,伴有胸痛、氣急,肺部聞及濕羅音,外周血白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例明顯增高,X線檢查提示肺部有炎性浸潤(rùn)或胸腔積液,時(shí)采集其他類(lèi)型的下呼吸道標(biāo)本,例如纖支鏡灌洗液、纖支鏡刷出物、氣管穿刺痰、肺穿刺活檢物或吸出物送檢。時(shí)間和頻率:用用抗生素之前采集;最好清晨采集;建議一個(gè)檢驗(yàn)周期(4天)只送一次,不建議24小時(shí)多次送檢;懷疑分枝桿菌感染時(shí),應(yīng)連續(xù)送檢三天清晨痰。采集方法:1.自然咳痰法,留取前清潔口腔,然后咳深部痰至戴蓋的無(wú)菌痰杯內(nèi),蓋好蓋子盡快送檢。2.用纖支鏡或吸痰器吸痰或經(jīng)胸壁穿刺取痰等特殊方法取痰。常見(jiàn)菌:肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡塔布蘭罕菌、肺炎克雷伯及其他一些條件致病菌。第二十一頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18第二十二頁(yè),共二十六頁(yè)。鼻咽拭子標(biāo)本咽部存在多種細(xì)菌,在機(jī)體免疫力低下時(shí),可以導(dǎo)致上呼吸道化膿性病變,如化膿性鏈球菌、隱秘桿菌等可導(dǎo)致化膿性咽峽炎和扁桃體炎。注意事項(xiàng):應(yīng)用抗生素治療之前;標(biāo)本采集前數(shù)小時(shí)不能用消毒藥物漱口或涂抹病灶局部;應(yīng)準(zhǔn)確采取病變部位,避免觸及舌、口粘膜,以防污染;采集扁桃體標(biāo)本時(shí),應(yīng)采集扁桃體上化膿點(diǎn)。1/18/2023第二十三頁(yè),共二十六頁(yè)。2023/1/18第二十四頁(yè),共二十六頁(yè)。消化道標(biāo)本感染性腹瀉:由細(xì)菌、真菌、病毒、原蟲(chóng)及蠕蟲(chóng)等,經(jīng)口腔進(jìn)入消化道后在一定條件下引起的腸粘膜炎癥,或吸收或分泌功能障礙導(dǎo)致排便次數(shù)增多,同時(shí)伴隨糞便性狀改變,腹脹、腹痛等在所有導(dǎo)致腹瀉的因素中只有細(xì)菌感染性腹瀉才需要
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