免疫凝集試驗(yàn)

免疫凝集試驗(yàn)第一頁，共五十三頁，2022年，8月28日

教學(xué)目的掌握：直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)的試驗(yàn)原理、類型；抗球蛋白參與的試驗(yàn)原理熟悉：凝集反應(yīng)的特點(diǎn)、應(yīng)用第二頁，共五十三頁，2022年，8月28日第一節(jié)免疫凝集試驗(yàn)的基本原理凝集反應(yīng)(agglutinationreaction)

是指細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗體）的顆粒性載體與相應(yīng)抗體（或抗原）發(fā)生特異性結(jié)合后，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第三頁，共五十三頁，2022年，8月28日分兩個(gè)階段：①抗原抗體的特異性結(jié)合階段②出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象第一節(jié)免疫凝集試驗(yàn)的基本原理第四頁，共五十三頁，2022年，8月28日第五頁，共五十三頁，2022年，8月28日可見反應(yīng)形成第六頁，共五十三頁，2022年，8月28日第二節(jié)直接免疫凝集試驗(yàn)直接凝集反應(yīng)(directagglutination)細(xì)菌、螺旋體、紅細(xì)胞等顆粒性抗原，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第七頁，共五十三頁，2022年，8月28日一、玻片凝集試驗(yàn)

(slideagglutinationtest)YYY+第八頁，共五十三頁，2022年，8月28日第九頁，共五十三頁，2022年，8月28日紅細(xì)胞懸液BA紅細(xì)胞血型鑒定第十頁，共五十三頁，2022年，8月28日

方法評(píng)價(jià):定性試驗(yàn)簡便和快速敏感度低

臨床應(yīng)用:菌種鑒定血清學(xué)分型血型鑒定第十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日

在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。二、試管凝集試驗(yàn)第十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日試管凝集試驗(yàn)第十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日

免疫血清12310

1：10陰性對(duì)照

………血清稀釋度1:201:401:80步驟：1）加生理鹽水0.5ml2）依次倍比稀釋免疫血清

3）加相同濃度的細(xì)菌懸液0.5ml第十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日

方法評(píng)價(jià)：半定量試驗(yàn)簡便、快速敏感度低可有假陽性

臨床應(yīng)用：WidalreactionWeil-felixreactionWrighttest:布魯菌病交叉配血試驗(yàn)第十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日

第三節(jié)間接免疫凝集試驗(yàn)間接免疫凝集試驗(yàn)(indirect

agglutination)

將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。第十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日正向間接免疫凝集試驗(yàn)反向間接免疫凝集試驗(yàn)間接免疫凝集抑制試驗(yàn)協(xié)同免疫凝集試驗(yàn)一、間接免疫凝集試驗(yàn)的類型第十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日抗原致敏載體--檢測抗體（一）正向間接免疫凝集試驗(yàn)第十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日（一）正向間接免疫凝集試驗(yàn)

特點(diǎn)：簡便快速，敏感性和特異性均高，成本低廉。應(yīng)用：傷寒沙門菌的多糖抗原致敏綿羊紅細(xì)胞測傷寒抗體?？乖贵w載體顆?？乖旅纛w粒第十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）反向間接免疫凝集試驗(yàn)用抗體致敏載體----檢測抗原第二十頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）反向間接免疫凝集試驗(yàn)應(yīng)用：檢測HbsAg、AFP等。特點(diǎn)：本方法快速、敏感性高、特異性強(qiáng)。

抗體抗原載體顆粒抗體致敏顆粒

第二十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日（三）間接免疫凝集抑制試驗(yàn)用抗原致敏載體--檢測抗原第二十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日（三）間接免疫凝集抑制試驗(yàn)

+

說明標(biāo)本中不存在相應(yīng)抗原

—

說明標(biāo)本中含有相應(yīng)抗原第二十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日

抗原抗原致敏顆粒A抗體抗原抗體不凝集復(fù)合物抗原致敏顆粒無抗原

B抗體游離抗體凝集

第二十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日

結(jié)果判定試驗(yàn)結(jié)果+(凝集)--(不凝集)

檢測結(jié)果--+第二十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日SPA:SPA-IgGFc;SPA抗體致敏----測抗原反向間接凝集反應(yīng)（四）協(xié)同免疫凝集試驗(yàn)第二十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日（四）協(xié)同免疫凝集試驗(yàn)載體：金黃色葡萄球菌。優(yōu)點(diǎn)：特異、靈敏、簡便、快速。應(yīng)用：可用于細(xì)菌、病毒、毒素及各種可溶性抗原的快速檢測。第二十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日第二十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日

載體種類：常用的載體有動(dòng)物或人紅細(xì)胞、聚苯乙烯膠乳顆粒、明膠顆粒和活性炭等。第二十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接免疫血凝試驗(yàn)第三十頁，共五十三頁，2022年，8月28日

（一）載體：是以紅細(xì)胞作為載體的間接免疫凝集試驗(yàn)。常用的載體有：綿羊、家兔、雞紅細(xì)胞和O型人紅細(xì)胞。二、間接免疫血凝試驗(yàn)第三十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）致敏

蛋白質(zhì)致敏紅細(xì)胞的方法有：

直接法和間接法。（三）血凝試驗(yàn)微量滴定板或試管標(biāo)本倍比稀釋（1：64）1滴

+0.5%致敏紅細(xì)胞懸液1滴充分混勻室溫1-2h第三十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日血凝反應(yīng)強(qiáng)度示意圖第三十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接免疫血凝試驗(yàn)載體：紅細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)：紅細(xì)胞來源廣，價(jià)格低。該試驗(yàn)為最經(jīng)典的抗原抗體反應(yīng)之一。應(yīng)用：常用于測定抗核抗體、類風(fēng)濕因子等。

第三十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日三、顆粒免疫凝集試驗(yàn)（一）膠乳顆粒凝集試驗(yàn)第三十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日（一）膠乳顆粒凝集試驗(yàn)載體：聚苯乙烯膠乳優(yōu)點(diǎn)：性能穩(wěn)定，均一性好。缺點(diǎn)：敏感度不及血凝試驗(yàn)。應(yīng)用：臨床常用于檢測抗溶血素0

和類風(fēng)濕因子等。第三十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日第三十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日（二）明膠顆粒凝集試驗(yàn)（三）炭顆粒凝集試驗(yàn)（四）甲苯胺紅顆粒凝集試驗(yàn)第三十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日第四節(jié)

抗球蛋白紅細(xì)胞免疫凝集試驗(yàn)

(antiglobulintest)抗球蛋白試驗(yàn)又稱Coombs試驗(yàn)第三十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日一、直接Coombs試驗(yàn)檢測紅細(xì)胞上抗體不完全抗體第四十頁，共五十三頁，2022年，8月28日一、直接Coombs試驗(yàn)

抗球蛋白抗體

抗膜抗原的抗體凝集結(jié)合在紅細(xì)胞表面第四十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日第四十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日

可用玻片法定性，也可用試管法半定量分析。臨床應(yīng)用：新生兒溶血癥、特發(fā)性自身免疫性貧血、自身免疫性溶血癥、和醫(yī)源性溶血性疾病等的檢測。第四十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接Coombs試驗(yàn)檢測血清中的抗紅細(xì)胞抗體第四十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、間接Coombs試驗(yàn)檢測血清中游離的不完全抗體標(biāo)本中不完全抗體抗球蛋白抗體具有特異抗原的紅細(xì)胞凝集

第四十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日第四十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日

臨床應(yīng)用：

1.檢測母體Rh(D)抗體，以便盡早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥發(fā)生。

2.輸血前交叉配血或不相容輸血后抗體檢測。第四十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日

第五節(jié)自身紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)

與一般間接免疫血凝試驗(yàn)不同之處在于反應(yīng)中的紅細(xì)胞是未經(jīng)致敏的受檢者新鮮紅細(xì)胞。

第四十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日第六節(jié)免疫凝集試驗(yàn)的臨床應(yīng)用一、直接免疫凝集試驗(yàn)的臨床應(yīng)用

1、玻片凝集試驗(yàn):定性檢測，如細(xì)菌菌種鑒定及分型、ABO血型鑒定等

2、試管凝集試驗(yàn):半定量檢測，如輔助診斷傷寒、副傷寒的肥達(dá)試驗(yàn)等。

第四十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日

第六節(jié)免疫凝集試驗(yàn)的臨床應(yīng)用二、間接免疫凝集試驗(yàn)的臨床應(yīng)用（一）抗原的檢測病原體可溶性抗原、各種蛋白質(zhì)檢測（二）抗體的檢測檢測細(xì)菌、病毒等產(chǎn)生的抗體、自身免疫病抗體、超敏反應(yīng)抗體等第五十頁，共五十三頁，2022年，8