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第一頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的要求遵守學(xué)習(xí)紀(jì)律,準(zhǔn)時(shí)上、下課。實(shí)驗(yàn)期間不得無(wú)故外出或早退。特殊情況下,應(yīng)向教師請(qǐng)假。愛(ài)護(hù)公共財(cái)物,注意節(jié)約各種實(shí)驗(yàn)用品。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按組發(fā)給,如需補(bǔ)充使用,須經(jīng)教師同意才能補(bǔ)領(lǐng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在固定的盤上,每組上課時(shí)記住帶一張盤,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即將結(jié)果拷出。切勿在電腦上設(shè)置密碼,帶的盤要干凈,免得電腦被感染病毒。保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊,隨時(shí)清除污物。實(shí)驗(yàn)完畢后,應(yīng)將實(shí)驗(yàn)器材、用品收拾妥當(dāng);將手術(shù)器械擦洗干凈,清點(diǎn)數(shù)量,放回原處。經(jīng)教師檢查后才能離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)前必須仔細(xì)預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),了解實(shí)驗(yàn)的目的要求、基本原理以及簡(jiǎn)要的操作步驟。復(fù)習(xí)有關(guān)理論,以便提高實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的主動(dòng)性和效率,并進(jìn)一步鞏固有關(guān)理論知識(shí)實(shí)驗(yàn)報(bào)告第二頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)一、常用手術(shù)器械蛙類實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械:剪刀、鑷子、金屬探針、玻璃分針、銅鋅弓、蛙心夾、蛙板等。哺乳動(dòng)物手術(shù)器械:
手術(shù)刀、止血鉗、咬骨鉗、動(dòng)脈夾、氣管插管、血管插管(包括靜脈插管和動(dòng)脈插管)等。第三頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日止血鉗第四頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日手術(shù)刀第五頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日手術(shù)剪和手術(shù)鑷第六頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日二、手術(shù)器械的消毒方法煮沸消毒法:一般用蒸餾水加熱,水沸3~5min后,將器械放入消毒鍋內(nèi),等第二次水沸后15min,對(duì)懷疑有芽孢感染的,必須煮沸60min以上高壓蒸汽滅菌法:高壓滅菌鍋,蒸汽壓15~20lb/in2,溫度121.6~126.6C,30min左右。不宜于橡膠制品和銳利器械的滅菌。化學(xué)藥品消毒法:常用消毒劑有:LJ-強(qiáng)化戊二醛、70%乙醇(不適于金屬器械的消毒)、0.1%新潔爾滅、酶皂溶液、甲醛溶液等,金屬器械應(yīng)浸泡30min以上。(見(jiàn)下表)燒灼滅菌法,適用于金屬器械第七頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日第八頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日三、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物青蛙和蟾蜍家兔大白鼠和小白鼠魚(yú)類鳥(niǎo)類等第九頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取固定方法
蟾蜍蛙類抓取方法宜用左手將動(dòng)物背部貼緊手掌固定,以中指、無(wú)名指、小指壓住其左腹側(cè)和后肢,拇指和食指分別壓住左、右前肢、右手進(jìn)行操作。在抓取是蟾蜍時(shí),注意勿擠壓其兩則耳部突起之毒腺,以免毒液射進(jìn)眼中。實(shí)驗(yàn)如需長(zhǎng)時(shí)間觀察,可破壞其腦脊髓(觀察神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)時(shí)不應(yīng)破壞腦脊髓)或麻醉后用大頭針固定在蛙板上。依實(shí)驗(yàn)需要采取俯臥位或仰臥位固定。第十頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日家兔抓?。簩?shí)驗(yàn)家兔多數(shù)飼養(yǎng)在籠內(nèi),所以抓取較為方便,一般以右手抓住兔頸部的毛皮提起,然后左手托其臀部或腹部,讓其體重重量的大部分集中在左手上,這樣就避免了抓取過(guò)程中的動(dòng)物損傷。不能采用抓雙耳或抓提腹部。(1、2、3均為不正確的抓取方法(1.可損傷兩腎,2.可造成皮下出血,3.可傷兩耳),4、5為正確的抓取方法。頸后部的皮厚可以抓,并用手托兔體)第十一頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日臺(tái)式固定:做血壓測(cè)量、呼吸等實(shí)驗(yàn)和手術(shù)時(shí),則需將兔固定在兔臺(tái)上,四肢用粗棉繩活結(jié)綁住,拉直四肢,將繩綁在兔臺(tái)四周的固定木塊上,頭以固定夾固定或用一根粗棉繩挑過(guò)兔門齒綁在兔臺(tái)鐵柱上。第十二頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日幾種常用生理鹽溶液的配制生理性溶液為代替液,用于維持離體的組織、器官及細(xì)胞的正常生命活動(dòng)。它必須具備下列條件:⑴滲透壓與組織也相等;⑵應(yīng)含有組織、器官維持正常機(jī)能所必需的比例適宜的各種鹽類離子;⑶酸堿度應(yīng)與血漿相同,并具有充分的緩沖能力;⑷應(yīng)含有氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的生理鹽溶液有生理鹽水、任氏(Ringer)溶液、樂(lè)氏(Locke)溶液和臺(tái)氏(Tyrode)溶液四種,其成分各異,如下表所示。第十三頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日第十四頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日各種生理鹽溶液的用途
生理鹽水:即與血清等滲之NaCl溶液,在冷血?jiǎng)游飸?yīng)用0.6%-0.65%,在溫血?jiǎng)游飸?yīng)用0.85%-0.9%。任氏溶液:用于青蛙及其他冷血?jiǎng)游?。?lè)氏溶液:用于溫血?jiǎng)游镏呐K、子宮及其它離體臟器。用作灌注液者須于用前通入氧氣泡15分鐘。低鈣樂(lè)氏液(含無(wú)水氯化鈣0.05g)用于離體小腸及豚鼠的離體支氣管灌注。臺(tái)氏溶液:用于溫血?jiǎng)游镏x體小腸。第十五頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日動(dòng)物的麻醉在急、慢性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,手術(shù)前均應(yīng)將動(dòng)物麻醉,以減輕或消除動(dòng)物的痛苦,保持安靜狀態(tài),從而保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。理想的麻醉藥品應(yīng)當(dāng)是對(duì)動(dòng)物麻醉完善,其毒性和對(duì)生理功能干擾最小,使用方便。1.常用麻醉劑的種類和用法局部麻醉劑:0.5%-1.0%鹽酸普魯卡因或2%鹽酸可卡因用作皮膚或黏膜表面麻醉。全身麻醉劑:發(fā)揮性的乙醚,非揮發(fā)性的巴比妥類、氨基甲酸乙酯等,在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中,多采用全身麻醉劑。第十六頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日2.麻醉前的準(zhǔn)備工作熟悉麻醉藥品的特點(diǎn)
根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容合理選用麻醉藥。麻醉前應(yīng)核對(duì)藥物名稱;檢查藥品有無(wú)變質(zhì)或過(guò)期失效。狗、貓等手術(shù)前應(yīng)禁食12小時(shí),以減輕嘔吐反應(yīng)。需在全麻下進(jìn)行手術(shù)的慢性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,可適當(dāng)給予麻醉輔助藥。例如,皮下注射嗎啡鎮(zhèn)靜止痛,注射阿托品減少呼吸道分泌物的產(chǎn)生等。
第十七頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日3.給藥方法1)全身性麻醉:吸入麻醉:乙醚注射麻醉:常用烏拉坦、戊巴比妥鈉及氯醛糖等。主要給藥途徑有:靜脈注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射、皮下淋巴囊注射等2)局部麻醉:表面麻醉:藥物通過(guò)點(diǎn)眼、噴霧或涂布作用于粘膜表面,轉(zhuǎn)而透過(guò)粘膜接觸粘膜下神經(jīng)末梢而發(fā)揮作用。該藥物除具有麻醉作用外,還有較強(qiáng)的穿透力,如的卡因、利多卡因;浸潤(rùn)麻醉:用注射的方法將藥物送到神經(jīng)纖維旁。此類藥物只需有局部麻醉作用,不一定要求有強(qiáng)大的穿透力,如普魯卡因(對(duì)氨苯甲酸酯)、可卡因、利多卡因(其效力是普魯卡因的2倍)。用作局部麻醉的藥物的濃度一般為1%~2%,通常用0.5%~1%.第十八頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日4.麻醉效果的觀察呼吸:深慢而平穩(wěn)角膜反射:明顯遲鈍肌張力:全身肌肉松弛皮膚夾捏反射消失。第十九頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日5.兔耳緣靜脈注射時(shí)的注意事項(xiàng)麻醉前應(yīng)正確選用麻醉藥品、用藥劑量及給藥途徑;進(jìn)行靜脈麻醉時(shí),先將總用藥量的三分之一快速注入,使動(dòng)物迅速渡過(guò)興奮期,余下的三分之二量則應(yīng)緩慢注射,并密切觀察動(dòng)物麻醉狀態(tài)及反應(yīng),以便準(zhǔn)確判斷麻醉深度;如麻醉較淺,動(dòng)物出現(xiàn)掙扎或呼吸急促等,需補(bǔ)充麻醉藥以維持適當(dāng)?shù)穆樽?。一次補(bǔ)充藥量不宜超過(guò)原總用藥量的五分之一;麻醉過(guò)程中,應(yīng)隨時(shí)保持呼吸道通暢,并注意保溫;第二十頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日止血采血方法手術(shù)中,若遇到出血,常用的止血方法有:
鉗夾止血法,壓迫止血法,結(jié)扎止血法,燒烙止血法兔的采(?。┭椒ㄓ卸醒雱?dòng)脈取血,股動(dòng)脈取血,耳緣靜脈取血,心臟穿刺取血。第二十一頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)一生理機(jī)能系統(tǒng)的使用與
血型測(cè)定第二十二頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日一、生理機(jī)能系統(tǒng)的使用開(kāi)機(jī)順序:貴重儀器先關(guān)后開(kāi)熟悉系統(tǒng)操作儀器使用操作示教操作訓(xùn)練第二十三頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日二、血型測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理一、血型
血型:指的是紅細(xì)胞膜上特異性抗原的類型。所謂的血型,主要指紅細(xì)胞血型。紅細(xì)胞凝集:若不同血型的血液混合,會(huì)出現(xiàn)紅細(xì)胞彼此聚集在一起,成為一簇簇的細(xì)胞團(tuán),這種現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。紅細(xì)胞凝集反應(yīng)是一種抗原—抗體反應(yīng),它是免疫反應(yīng)的一種形式。凝集原(agglutinogen):紅細(xì)胞膜上存在著特異的抗原。凝集素(agglutinogen):血液中與紅細(xì)胞膜上的凝集原起反應(yīng)的特異抗體。第二十四頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日血型的分類:目前已知人類的RBC除ABO血型系統(tǒng)外,還有Rh、P等23個(gè)血型系統(tǒng)。ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞表面存在的凝集原(A或B)決定的,分為A、B、AB、O四型。第二十五頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日二、人類的Rh血型紅細(xì)胞中含Rh因子的為Rh陽(yáng)性,無(wú)為陰性我國(guó)漢人99%陽(yáng)性,少數(shù)人民陰性占一定比例。白種人陰性多于陽(yáng)性抗Rh抗體:為后天獲得的免疫性抗體。是一種IgG(分子較小),能透過(guò)胎盤。*臨床意義:
1.再次輸血時(shí),可能導(dǎo)致凝集反應(yīng)
2.再次懷孕可能會(huì)出現(xiàn)死胎第二十六頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日1.輸血型相合的血液,最好成分輸血;2.輸血前必須進(jìn)行血型交叉配血試驗(yàn)三、輸血的原則給血者受血者紅細(xì)胞血清紅細(xì)胞血清主側(cè)次側(cè)*兩側(cè)均不凝:配血相合,可以輸血;*主側(cè)凝集,配血不合,絕對(duì)不能輸!*主側(cè)不凝次側(cè)凝集,配血基本相合,緊
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