基因的表達與調(diào)控ppt

基因的表達與調(diào)控ppt第一頁，共五十一頁，2022年，8月28日

2.5.1基本概念與原理BasicConceptionsandPrinciple第二頁，共五十一頁，2022年，8月28日一、基因表達的概念*基因組(genome)一個細胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息或整套基因。基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯，產(chǎn)生具有特異生物學功能的蛋白質(zhì)分子的過程。*基因表達(geneexpression)基因表達是受調(diào)控的第三頁，共五十一頁，2022年，8月28日二、基因表達的時間性及空間性（一）時間特異性按功能需要，某一特定基因的表達嚴格按特定的時間順序發(fā)生，稱之為基因表達的時間特異性(temporalspecificity)。多細胞生物基因表達的時間特異性又稱階段特異性(stagespecificity)。第四頁，共五十一頁，2022年，8月28日（二）空間特異性基因表達伴隨時間順序所表現(xiàn)出的這種分布差異，實際上是由細胞在器官的分布決定的，所以空間特異性又稱細胞或組織特異性(cellortissuespecificity)。在個體生長全過程，某種基因產(chǎn)物在個體按不同組織空間順序出現(xiàn)，稱之為基因表達的空間特異性(spatialspecificity)。第五頁，共五十一頁，2022年，8月28日三、基因表達的方式按對刺激的反應性，基因表達的方式分為：（一）組成性表達某些基因在一個個體的幾乎所有細胞中持續(xù)表達，通常被稱為管家基因(housekeepinggene)。第六頁，共五十一頁，2022年，8月28日無論表達水平高低，管家基因較少受環(huán)境因素影響，而是在個體各個生長階段的大多數(shù)或幾乎全部組織中持續(xù)表達，或變化很小。區(qū)別于其他基因，這類基因表達被視為組成性基因表達(constitutivegeneexpression)。第七頁，共五十一頁，2022年，8月28日（二）誘導和阻遏表達在特定環(huán)境信號刺激下，相應的基因被激活，基因表達產(chǎn)物增加，這種基因稱為可誘導基因?？烧T導基因在特定環(huán)境中表達增強的過程，稱為誘導(induction)。

如果基因?qū)Νh(huán)境信號應答是被抑制，這種基因是可阻遏基因?？勺瓒艋虮磉_產(chǎn)物水平降低的過程稱為阻遏(repression)。第八頁，共五十一頁，2022年，8月28日在一定機制控制下，功能上相關的一組基因，無論其為何種表達方式，均需協(xié)調(diào)一致、共同表達，即為協(xié)調(diào)表達(coordinateexpression)，這種調(diào)節(jié)稱為協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)(coordinateregulation)。第九頁，共五十一頁，2022年，8月28日四、基因表達調(diào)控的生物學意義（一）適應環(huán)境、維持生長和增殖（二）維持個體發(fā)育與分化第十頁，共五十一頁，2022年，8月28日五、基因表達調(diào)控的基本原理（一）基因表達的多級調(diào)控基因激活轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄后加工mRNA降解蛋白質(zhì)降解等蛋白質(zhì)翻譯翻譯后加工修飾轉(zhuǎn)錄起始第十一頁，共五十一頁，2022年，8月28日（二）基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)基本要素基因表達的調(diào)節(jié)與基因的結構、性質(zhì)，生物個體或細胞所處的內(nèi)、外環(huán)境，以及細胞內(nèi)所存在的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白有關。1.特異DNA序列和調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)第十二頁，共五十一頁，2022年，8月28日原核生物

蛋白質(zhì)因子——操縱子(operon)

機制特異DNA序列編碼序列

啟動序列

操縱序列

其他調(diào)節(jié)序列(promoter)(operator)第十三頁，共五十一頁，2022年，8月28日是RNA聚合酶結合并啟動轉(zhuǎn)錄的特異DNA序列。1)啟動序列RNA轉(zhuǎn)錄起始-35區(qū)-10區(qū)TTGACATTAACTTTTACATATGATTTTACATATGTTTTGATATATAATCTGACGTACTGTN17N16N17N16N16N7N7N6N7N6AAAAAtrptRNATyrlacrecAAraBADTTGACATATAAT共有序列第十四頁，共五十一頁，2022年，8月28日共有序列(consensussequence)

決定啟動序列的轉(zhuǎn)錄活性大小。某些特異因子（蛋白質(zhì)）決定RNA聚合酶對一個或一套啟動序列的特異性識別和結合能力。第十五頁，共五十一頁，2022年，8月28日2操縱序列

——阻遏蛋白(repressor)的結合位點當操縱序列結合有阻遏蛋白時，會阻礙RNA聚合酶與啟動序列的結合，或是RNA聚合酶不能沿DNA向前移動，阻礙轉(zhuǎn)錄。啟動序列編碼序列操縱序列pol阻遏蛋白第十六頁，共五十一頁，2022年，8月28日3)其他調(diào)節(jié)序列、調(diào)節(jié)蛋白例如激活蛋白(activator)可結合啟動序列鄰近的DNA序列，促進RNA聚合酶與啟動序列的結合，增強RNA聚合酶活性。有些基因在沒有激活蛋白存在時，RNA聚合酶很少或完全不能結合啟動序列。第十七頁，共五十一頁，2022年，8月28日真核生物1)順式作用元件(cis-actingelement)——可影響自身基因表達活性的DNA序列BADNA編碼序列轉(zhuǎn)錄起始點不同真核生物的順式作用元件中也會發(fā)現(xiàn)一些共有序列，如TATA盒、CAAT盒等，這些共有序列是RNA聚合酶或特異轉(zhuǎn)錄因子的結合位點。

第十八頁，共五十一頁，2022年，8月28日2)真核基因的調(diào)節(jié)蛋白還有蛋白質(zhì)因子可特異識別、結合自身基因的調(diào)節(jié)序列，調(diào)節(jié)自身基因的表達，稱順式作用。由某一基因表達產(chǎn)生的蛋白質(zhì)因子，通過與另一基因的特異的順式作用元件相互作用，調(diào)節(jié)其表達。反式作用因子(trans-actingfactor)

這種調(diào)節(jié)作用稱為反式作用。第十九頁，共五十一頁，2022年，8月28日cDNAaDNA反式調(diào)節(jié)C順式調(diào)節(jié)mRNAC蛋白質(zhì)CBAmRNA蛋白質(zhì)AA第二十頁，共五十一頁，2022年，8月28日指的是反式作用因子與順式作用元件之間的特異識別及結合。通常是非共價結合，被識別的DNA結合位點通常呈對稱、或不完全對稱結構。絕大多數(shù)調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)結合DNA前，需通過蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用，形成二聚體(dimer)或多聚體(polymer)。2.DNA-蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)的相互作用第二十一頁，共五十一頁，2022年，8月28日3.RNA聚合酶⑴原核啟動序列/真核啟動子與RNA聚合酶活性RNA聚合酶與其的親和力，影響轉(zhuǎn)錄。⑵調(diào)節(jié)蛋白與RNA聚合酶活性一些特異調(diào)節(jié)蛋白在適當環(huán)境信號刺激下表達，然后通過DNA-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用影響RNA聚合酶活性。第二十二頁，共五十一頁，2022年，8月28日原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)RegulationofProkaryoticGeneTranscription第二十三頁，共五十一頁，2022年，8月28日——調(diào)節(jié)的主要環(huán)節(jié)在轉(zhuǎn)錄起始一、原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特點（一）σ因子決定RNA聚合酶識別特異性（二）操縱子模型的普遍性（三）阻遏蛋白與阻遏機制的普遍性第二十四頁，共五十一頁，2022年，8月28日二、乳糖操縱子調(diào)節(jié)機制（一）乳糖操縱子(lacoperon)的結構

調(diào)控區(qū)CAP結合位點啟動序列操縱序列

結構基因Z：β-半乳糖苷酶Y：透酶A：乙酰基轉(zhuǎn)移酶ZYAOPDNA第二十五頁，共五十一頁，2022年，8月28日mRNA阻遏蛋白IDNAZYAOPpol沒有乳糖存在時（二）阻遏蛋白的負性調(diào)節(jié)阻遏基因第二十六頁，共五十一頁，2022年，8月28日mRNA阻遏蛋白有乳糖存在時IDNAZYAOPpol啟動轉(zhuǎn)錄mRNA乳糖半乳糖β-半乳糖苷酶第二十七頁，共五十一頁，2022年，8月28日++++轉(zhuǎn)錄無葡萄糖，cAMP濃度高時有葡萄糖，cAMP濃度低時（三）CAP的正性調(diào)節(jié)ZYAOPDNACAPCAPCAPCAPCAPCAP第二十八頁，共五十一頁，2022年，8月28日（四）協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)※當阻遏蛋白封閉轉(zhuǎn)錄時，CAP對該系統(tǒng)不能發(fā)揮作用；※如無CAP存在，即使沒有阻遏蛋白與操縱序列結合，操縱子仍無轉(zhuǎn)錄活性。單純?nèi)樘谴嬖跁r，細菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在時，細菌首先利用葡萄糖。葡萄糖對lac操縱子的阻遏作用稱分解代謝阻遏(catabolicrepression)。

第二十九頁，共五十一頁，2022年，8月28日mRNA低半乳糖時高半乳糖時

葡萄糖低cAMP濃度高

葡萄糖高cAMP濃度低RNA-polOOOO第三十頁，共五十一頁，2022年，8月28日TrpTrp高時Trp低時mRNAOPtrpR調(diào)節(jié)區(qū)結構基因RNA聚合酶RNA聚合酶?三、其他轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機制（一）轉(zhuǎn)錄衰減色氨酸操縱子第三十一頁，共五十一頁，2022年，8月28日UUUU……UUUU……調(diào)節(jié)區(qū)結構基因trpROP前導序列衰減子區(qū)域UUUU……前導mRNA1234衰減子結構

第10、11密碼子為trp密碼子終止密碼子14aa前導肽編碼區(qū):

包含序列1形成發(fā)夾結構能力強弱：序列1/2>序列2/3>序列3/4

trp密碼子

UUUU……第三十二頁，共五十一頁，2022年，8月28日UUUU……34UUUU3’34核糖體前導肽前導mRNA1.當色氨酸濃度高時轉(zhuǎn)錄衰減機制125’trp密碼子衰減子結構就是終止子可使轉(zhuǎn)錄前導DNAUUUU3’RNA聚合酶終止第三十三頁，共五十一頁，2022年，8月28日UUUU……342423UUUU……核糖體前導肽前導mRNA15’trp密碼子

結構基因前導DNARNA聚合酶2.當色氨酸濃度低時Trp合成酶系相關結構基因被轉(zhuǎn)錄序列3、4不能形成衰減子結構第三十四頁，共五十一頁，2022年，8月28日（二）基因重組沙門菌鞭毛素基因的調(diào)節(jié)H2鞭毛素

阻遏蛋白Hin重組酶轉(zhuǎn)位片段hinH2IH1H1鞭毛素hinH2IDNA啟動序列H1啟動序列第三十五頁，共五十一頁，2022年，8月28日（三）SOS反應

SOS基因紫外線激活RecALexA阻遏蛋白

與DNA損傷修復有關的酶和蛋白質(zhì)基因表達LexA阻遏蛋白操縱序列DNA第三十六頁，共五十一頁，2022年，8月28日真核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)RegulationofEukaryoticGeneTranscription第三十七頁，共五十一頁，2022年，8月28日一、真核基因組結構特點（一）真核基因組結構龐大哺乳類動物基因組DNA約3×109

堿基對編碼基因約有40000個，占總長的6%rDNA等重復基因約占5%~10%第三十八頁，共五十一頁，2022年，8月28日（二）單順反子單順反子(monocistron)

即一個編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA分子，經(jīng)翻譯生成一條多肽鏈。（三）重復序列單拷貝序列（一次或數(shù)次）高度重復序列（106

次）中度重復序列（103~104次）多拷貝序列（四）基因不連續(xù)性第三十九頁，共五十一頁，2022年，8月28日二、真核基因表達調(diào)控特點（一）RNA聚合酶（二）活性染色體結構變化1.對核酸酶敏感活化基因常有超敏位點，位于調(diào)節(jié)蛋白結合位點附近。第四十頁，共五十一頁，2022年，8月28日2.DNA拓撲結構變化天然雙鏈DNA均以負性超螺旋構象存在；基因活化后RNA-pol正超螺旋負超螺旋轉(zhuǎn)錄方向3.DNA堿基修飾變化真核DNA約有5%的胞嘧啶被甲基化，甲基化范圍與基因表達程度呈反比。第四十一頁，共五十一頁，2022年，8月28日4.組蛋白變化①富含Lys組蛋白水平降低②H2A,H2B二聚體不穩(wěn)定性增加③組蛋白修飾④H3組蛋白巰基暴露（三）正性調(diào)節(jié)占主導（四）轉(zhuǎn)錄與翻譯分隔進行（五）轉(zhuǎn)錄后修飾、加工第四十二頁，共五十一頁，2022年，8月28日三、真核基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)（一）順式作用元件1.啟動子真核基因啟動子是RNA聚合酶結合位點周圍的一組轉(zhuǎn)錄控制組件，至少包括一個轉(zhuǎn)錄起始點以及一個以上的功能組件。TATA盒GC盒CAAT盒第四十三頁，共五十一頁，2022年，8月28日第四十四頁，共五十一頁，2022年，8月28日2.增強子(enhancer)指遠離轉(zhuǎn)錄起始點、