實(shí)驗(yàn)四 紅細(xì)胞抗體吸收試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)八紅細(xì)胞抗體吸收試驗(yàn)Erythrocyteantibodyabsorptiontest一、檢測(cè)原理

1.一定稀釋度的抗體加入已知抗原的紅細(xì)胞（檢測(cè)抗體）

或被檢紅細(xì)胞加入已知效價(jià)的特異性抗血清（檢測(cè)紅細(xì)胞抗原）

2.溶液中的抗體就會(huì)結(jié)合到紅細(xì)胞上，離心后將經(jīng)過抗原吸收的血清和紅細(xì)胞分開。

3.將吸收前、后的血清倍比稀釋再與已知抗原的紅細(xì)胞共同溫育，檢查血清和紅細(xì)胞中抗體效價(jià)是否降低或消失。若明顯降低或消失，證明抗體已被紅細(xì)胞吸附，血清中含有與紅細(xì)胞抗原相對(duì)應(yīng)的抗體，或被檢紅細(xì)胞血型與加入的已知抗原的紅細(xì)胞相同。

二、儀器和試劑【器材】尖滴管、刻度吸管、小試管、離心機(jī)。【標(biāo)本】靜脈血。【試劑】1．標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B血清。2．2%A型及B型紅細(xì)胞生理鹽水懸液。3．生理鹽水。三、實(shí)驗(yàn)步驟采集靜脈血2～3ml分離血標(biāo)本:分離出血清和紅細(xì)胞，分別作好標(biāo)記.制備壓積紅細(xì)胞將患者紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次，離心后棄去上層液。標(biāo)定抗血清將標(biāo)準(zhǔn)抗A（抗B）血清倍比稀釋，分別加入等量2%A型及B型紅細(xì)胞生理鹽水懸液，室溫下反應(yīng)15min后，1000r/min離心1min，觀察凝集結(jié)果。選擇出現(xiàn)（＋＋＋＋）凝集強(qiáng)度最高的1管稀釋度作為抗A（抗B）吸收用作標(biāo)定血清（一般應(yīng)稀釋到1∶32）。

姓名血漿姓名血球壓積RBC抗A標(biāo)定抗A標(biāo)定已準(zhǔn)備好2%ARBC2%BRBC三、實(shí)驗(yàn)步驟抗體吸收：取2支小試管，分別標(biāo)記抗A、抗B。按標(biāo)記分別加入抗A、抗B標(biāo)定血清0.5ml。分別加入被檢者壓積紅細(xì)胞0.5ml?；靹?，4℃放置1h，每10min搖動(dòng)1次，使其充分接觸1000r/min離心3min后，將上清液分別移入另2支試管，并標(biāo)記抗A吸收液和抗B吸收液。

抗A標(biāo)定抗B標(biāo)定0.5ml0.5ml0.5ml壓積RBC0.5ml壓積RBC4℃放置1h1000r/min離心3min抗B吸收液抗A吸收液三、實(shí)驗(yàn)步驟抗體鑒定：20支小試管12340.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s抗B吸收液0.2ml抗A吸收液0.2ml未吸收抗A標(biāo)定液0.2ml未吸收抗B標(biāo)定液0.2ml0.2ml2:4:8:16:320.2ml0.2ml0.2ml0.2ml2%A型RBC0.2ml2%B型RBC混勻，1000r/min，1min，觀察四、結(jié)果判斷：

吸收后抗體效價(jià)較吸收前降低2個(gè)滴度以上（Am亞型除外）者為陽性

吸收后抗A效價(jià)較未吸收抗A效價(jià)顯著降低或消失為A型

吸收后抗B效價(jià)較未吸收抗B效價(jià)顯著降低或消失者為B型

吸收后抗A及抗B效價(jià)都較未吸收抗A及抗B效價(jià)顯著降低者為AB型吸收后抗A及抗B效價(jià)較未吸收抗A及抗B效價(jià)無明顯差異者為O型。如試驗(yàn)的目的是鑒定A亞型，則按被檢紅細(xì)胞的吸收強(qiáng)度A1＞A2＞A3＞AX＞Am規(guī)律來判定

五、報(bào)告方式本人血型為：六、注意事項(xiàng)抗A、抗B血清應(yīng)標(biāo)定，其效價(jià)不宜過高，應(yīng)先將抗血清的效價(jià)稀釋到1∶32為宜。因?yàn)榭寡蹇贵w效價(jià)太高，抗血清中的抗體被亞型紅細(xì)胞吸收后，效價(jià)下降不明顯，難以判斷結(jié)果