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不常見細(xì)菌耐藥表型結(jié)果探討胡付品華山醫(yī)院抗生素研究所藥物敏感性試驗(yàn)方法稀釋法試管稀釋法(肉湯稀釋法)平板稀釋法(瓊脂稀釋法)微量肉湯稀釋法擴(kuò)散法(紙片法)Kirby-bauer(K-B)法E-test自動(dòng)化儀器紙片擴(kuò)散法原理:將浸有抗菌藥物的紙片貼在涂有細(xì)菌的瓊脂平板上,抗菌藥物在瓊脂內(nèi)向四周擴(kuò)散,因此敏感細(xì)菌在紙片周圍一定距離內(nèi)的生長(zhǎng)受到抑制。ColoniesLoseResistanceOnecolonyPlasmid

Multiplecolonies如何制備菌懸液?May正確測(cè)量苯唑西林、萬古霉素和利奈唑胺對(duì)葡萄球菌;以及萬古霉素對(duì)腸球菌的抑菌圈直徑不要用反射光要使用透射光大腸埃希菌污染腸球菌;菌落再次純分銅綠假單胞菌有耐藥菌落抑菌圈內(nèi)有菌落,怎么辦?第1問:如何解釋阿米卡星對(duì)大腸埃希菌的抑菌現(xiàn)象?阿米卡星厄他培南J.Exp.Med.,Jul1948;88:99-131藥物:青霉素G細(xì)菌:β-溶血性鏈球菌矛盾的現(xiàn)象(Eagle現(xiàn)象)指抗菌藥物在高濃度的時(shí)候反而降低殺菌活性這種現(xiàn)象第一次由Eagle和Musselman兩位科學(xué)家發(fā)現(xiàn)并報(bào)道。青霉素類抗菌藥物在作用于葡萄球菌、β溶血性鏈球菌以及腸球菌時(shí)出現(xiàn)藥物低濃度(仍超過MIC值)時(shí)抗菌活性好于高濃度。

J.Exp.Med.,Jul1948;88:99-131表型結(jié)果克林霉素報(bào)告紅霉素耐藥(R)陰性敏感(S)評(píng)論或解釋:該菌不表現(xiàn)為體外誘導(dǎo)型克 林霉素耐藥。紅霉素耐藥(R)陽性耐藥(R)評(píng)論或解釋:該菌表現(xiàn)為體外誘導(dǎo)型克林

霉素耐藥,用克林霉素治療可能無效。第2問:金黃色葡萄球菌D試驗(yàn)erm基因編碼改變的核糖體結(jié)構(gòu)(23SrRNA甲基化),導(dǎo)致對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和林可霉素類耐藥。erm基因需誘導(dǎo),紅霉素具誘導(dǎo)作用。若出現(xiàn)紅霉素R而克林霉素S,但D試驗(yàn)陽性。若未進(jìn)行D試驗(yàn),克林霉素很可能會(huì)被報(bào)告敏感而誤導(dǎo)臨床用藥。第3問:如何解釋萬古霉素E-試驗(yàn)結(jié)果?萬古霉素依賴的糞腸球菌長(zhǎng)期使用包括糖肽類、氨基糖肽類等抗生素壓力下,必須依賴萬古霉素才能生長(zhǎng)Thechangeattheninthcodonresultedinthe inactivationoftheddlgeneand vancomycin-dependentgrowth.第4問:銅綠假單胞菌對(duì)復(fù)方新諾明天然耐藥?第4問:銅綠假單胞菌對(duì)復(fù)方新諾明天然耐藥?耐藥率(%)2011年CHINET監(jiān)測(cè)6981株克雷伯菌屬耐藥率(%)9.312.41924.727.534.894.72010304090807060501000

亞胺培南阿米卡星頭孢西丁頭孢吡肟環(huán)丙沙星頭孢他啶頭孢噻肟氨芐西林 抗菌藥物

肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林天然耐藥是天然產(chǎn)SHV型酶

160株肺桿中20株對(duì)氨芐西林敏感19株細(xì)菌SHV基因出現(xiàn)“點(diǎn)突變”,mRNA逆轉(zhuǎn)錄失敗,無法翻譯出由SHV基因正確編碼的β-內(nèi)酰胺酶。第6問:大腸埃希菌對(duì)頭孢噻肟的耐藥機(jī)制?頭孢呋辛頭孢唑林第7問:如何解釋大腸埃希菌對(duì)頭孢唑啉S但頭孢呋辛R的現(xiàn)象?

頭孢呋辛酶可水解頭孢呋辛但不能水解

頭孢唑啉第8問:大腸埃希菌紙片法藥敏結(jié)果,結(jié)果可能嗎?頭孢唑林S頭孢他啶R2005年,LingMa發(fā)現(xiàn)一株大腸埃希菌具有特殊的耐藥表型,該菌對(duì)氨芐西林和頭孢他啶耐藥,但對(duì)頭孢西丁、頭孢曲松、頭孢噻肟、亞胺培南和頭孢唑啉敏感。分子生物學(xué)試驗(yàn)研究結(jié)果證實(shí),該菌產(chǎn)SHV-57型ESBL第9問:這株大腸埃希菌可能的耐藥機(jī)制是什么?第10問:這株銅綠假單胞菌可能的耐藥機(jī)制是什么?可能的機(jī)制:1、膜孔蛋白缺失:導(dǎo)致亞胺培南耐藥2、AmpC酶:對(duì)頭孢西丁耐藥3、ESBL:對(duì)頭孢他啶和頭孢吡肟耐藥產(chǎn)ESBL菌株的檢測(cè)含酶抑制劑復(fù)合制劑與相應(yīng)單藥抑菌圈直徑相差≥5mm,即判斷該菌為產(chǎn)ESBLs菌株

頭孢他啶:0.5g/mL頭孢他啶/克拉維酸:0.19g/mL=2.63

頭孢他啶:>32g/mL頭孢他啶/克拉維酸:0.19g/mL=>168第11問:該菌一定為產(chǎn)ESBL菌株?MIC比值假陽性結(jié)果第12問:如何解釋這株大腸埃希菌的藥敏結(jié)果?耐藥阿莫西林、哌拉西林、頭孢噻吩、頭孢呋辛、頭孢哌酮阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦敏感頭孢噻肟、頭孢他啶第12問:如何解釋這株大腸埃希菌的藥敏結(jié)果?ESBL確證試驗(yàn)陰性本株細(xì)菌產(chǎn)生TEM-1型β內(nèi)酰胺酶、膜孔蛋白缺失。頭孢西丁的耐藥性可能是由膜孔蛋白缺失所致,而非β-內(nèi)酰胺酶Pa/Pb調(diào)控TEM-1b高表達(dá)所致,強(qiáng)啟動(dòng)子Pa/Pb是由弱啟動(dòng)子P3經(jīng)32CC→T突變而成第13問:腸桿菌科細(xì)菌對(duì)頭孢西丁耐藥就表示細(xì)菌產(chǎn)AmpC

酶嗎?腸桿菌科細(xì)菌對(duì)頭孢西丁耐藥只能表示該菌是產(chǎn)AmpC的可疑菌株。某些類型的ESBL也能水解頭孢西丁1234123124342009年14家醫(yī)院大腸埃希菌的耐藥率(%)(CHINET監(jiān)測(cè))耐藥率耐藥率抗菌藥物阿米卡星慶大霉素哌拉西林哌拉西林/他唑巴坦頭孢唑林頭孢呋辛頭孢噻肟頭孢他啶產(chǎn)ESBL(4515株)

10.1 61.8 97.8 5.0 98.4 98.0 85.8 31.2非產(chǎn)ESBL (3477株)

4.3 40.3 49.5 4.1 26.4 16.5 10.4 6.4抗菌藥物頭孢吡肟頭孢哌酮/舒巴坦頭孢西丁亞胺培南美羅培南厄他培南環(huán)丙沙星復(fù)方磺胺甲噁唑產(chǎn)ESBL(4515株)

36.9 7.4

13.2

0.2 0.3 0.5 71.0 74.0非產(chǎn)ESBL (3477株)

6.5 2.4

7.2

0.6 0.5 1.1 42.4 56.1第14問:改良Hodge試驗(yàn)陽性就是產(chǎn)KPC酶?改良Hodge試驗(yàn)檢測(cè)假陽性結(jié)果Figure1.PhenotypiccarbapenemasedetectionbyMHT 1、K.pneumoniaeATCCBAA-1705,positiveresult 2、K.pneumoniaeATCCBAA-1706,negativeresult 3、CTX-M-producingK.pneumoniaeclinicalisolate

4、KPC-producingK.pneumoniaeclinicalisolateETPMEM改良Hodge試驗(yàn)檢測(cè)假陰性結(jié)果第15問:這株大腸埃希菌對(duì)厄他培南可能的耐藥機(jī)制是什么?1.厄他培南:13mm2.厄他培南+APB14mm3.厄他培南+EDTA14mm4.亞胺培南:30mm5.頭孢吡肟:12mm第16問:這株大腸埃希菌對(duì)厄他培南可能的耐藥機(jī)制是什么?1.厄他培南:13mm2.厄他培南+APB+EDTA14mm3.美羅培南:28mm4.法羅培南:23mm5.法羅培南+APB23mm第16問:這株大腸埃希菌對(duì)厄他培南可能的耐藥機(jī)制是什么?1、頭孢美唑:26mm2、頭孢噻肟:11mm3、頭孢噻肟/克拉維酸:30mm4、頭孢他

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