三聚氰胺急性毒性試驗研究報告

三聚氰胺急性毒性試驗給藥方式，劑量M0為對照組，灌服蒸餾水;實驗組M1～M6組分別灌服120、240、360、480、600、720mg/kg·d三聚氰胺，每只孕鼠的灌胃劑量均為1mL/100g·次，產(chǎn)后停止灌胃。新生鼠出生后8h后從7個組中各隨機抽取18只新生鼠作為檢測樣本毒性反應新生鼠腎臟病理變化與M0組(圖1)比較，M6組可見局灶區(qū)間質(zhì)內(nèi)毛細血管輕-中度擴張充血(圖2)，近曲小管上皮細胞輕-中度水腫(圖3)，部分集合管和腎盂中可見少量紅細胞，提示有尿血(圖4)，腎間質(zhì)纖維組織明顯增生，少量慢性炎癥細胞浸潤(圖5)。一、孕鼠試驗給藥方式準確稱取蛋雞體重，計算每只蛋雞的三聚氰胺染毒量，裝膠囊。夜間禁食8h，次日7:30—8:00一次口服，3h后復食，自由飲水。給藥劑量選擇70只220日齡海蘭褐蛋雞隨機分成7組，每組10只，蛋雞一次口服三聚氰胺的劑量分別是944.7，1306.7，1807.4，2500.1，3458.0，4783.1和6616.0mg/kg，連續(xù)觀察14天。二、蛋雞試驗毒性反應蛋雞急性中毒，病程短急，表現(xiàn)食欲減退或廢絕，飲水次數(shù)增加，流涎。初期活動頻繁，后期沉郁、反應遲鈍，喜臥于一角、羽毛蓬松。在染毒后約4h，水樣糞便明顯增加，糞便白色物質(zhì)增多。肛門周圍羽毛會沾有一定亮澤的白色物質(zhì)，鏡檢見到較多典型的三聚氰胺單斜棱晶體，蛋雞嚴重脫水、消瘦。接觸由于三聚氰胺的水溶很差，23℃時,三聚氰胺在水中的溶解度為3240mg/L。本實驗條件下(26—27℃)三聚氰胺在水中的溶解度達到3500mg/L。根據(jù)《水生生物毒物試驗方法》在正式實驗開始前先進行預實驗,根據(jù)預實驗結(jié)果,試驗所用的三聚氰胺的梯度分為0mg/L和3500mg/L,每個處理組設3個重復,每個重復10尾魚。實驗開始前24h花鱸停止投喂。實驗開始時隨機選擇大小均勻,體質(zhì)健壯的花鱸放入對應濃度的實驗桶中。實驗花鱸的平均體重為50g左右。三、花鱸試驗結(jié)果實驗開始后,花鱸沒有發(fā)現(xiàn)有任何異常反應,其魚體側(cè)翻、游泳能力及呼吸功能和色素沉積等均未出現(xiàn)異常變化。96h內(nèi)對照組及3500mg/L三聚氰胺濃度組沒有一尾花鱸出現(xiàn)死亡。因此,水溫在27℃左右時,三聚氰胺對花鱸的半致死濃度LC50>3500mg/L,其水溶液毒性極低,不易達到急性毒性試驗要求動物死亡的濃度,無法測定出LC50。腹腔注射首先選擇幾個較大范圍的濃度梯度進行預試驗,將花鱸放入其中觀察其活動及存活情況。根據(jù)預實驗的結(jié)果,依寇氏法,三聚氰胺的濃度梯度分為5個,另外加1個對照組,即:0、200、360、648、1166.4、2099.52mg/kg·w。注射液均用7%的生理鹽水進行配制,將三聚氰胺配成一定濃度的混懸液,現(xiàn)用現(xiàn)配,注射量為1mL/100g體重。每個濃度梯度設3個重復。每個重復10尾魚。結(jié)果實驗開始36h后2099.52mg/kg·w組花鱸出現(xiàn)焦躁不安、狂游、頂網(wǎng)、身體側(cè)翻、游動不協(xié)亡。48h后2099.52mg/kg·w組出現(xiàn)大量死亡,1166.4mg/kg·w組也開始出現(xiàn)死亡。解剖魚體發(fā)現(xiàn),肝臟發(fā)白,膽道發(fā)黃,