革蘭氏染色的機(jī)理和步驟

.革蘭氏染色的機(jī)理和步驟機(jī)理：、主要由其

化學(xué)成分的差異而引起對(duì)乙醇的通透性，抗脫色能力的差異。主要有肽聚糖的厚度和結(jié)構(gòu)所決定。的

肽聚糖層厚，脂質(zhì)含量低。乙醇脫色時(shí)

脫水，孔徑減少，透性降低，不易脫色，呈初染得藍(lán)紫色。的

透性升高，細(xì)胞被復(fù)染顯紅色。涂布于水中。②固定：將玻片靠近酒精燈火焰，蒸干水分，但不要烤焦。③初染：用堿性顏料結(jié)晶紫對(duì)菌液涂片進(jìn)行初染。④媒染:

以碘液媒染

，水洗，吸干水分。細(xì)胞內(nèi)形成結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，增強(qiáng)相互作用）⑤脫色

的乙醇脫色

是乙醇脫色完全。⑥水洗，吸干。⑦復(fù)染：第

張）復(fù)染

，水洗吸干。⑧干燥鏡檢。、用滲透皮層膨脹學(xué)說解說芽孢耐熱機(jī)制。芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽離子和水分的透性很差，以及..失水的核心才賦予芽孢極強(qiáng)的耐熱性。、引起微生物培養(yǎng)過程中

變化的幾種可能反應(yīng)，并說明如何能夠維持微培

穩(wěn)定。會(huì)導(dǎo)致

變化。（第

張中的圖）還與培養(yǎng)基的

比有關(guān)，

高，經(jīng)培養(yǎng)基后

顯著下降，低，經(jīng)培養(yǎng)基后

明顯上升。K

常用:一氫二氫磷酸鹽，

呈堿性KKH

酸性，只在一定的

范圍內(nèi)調(diào)節(jié)（）②大量產(chǎn)酸的菌株，加

調(diào)節(jié)，

難溶于水，不會(huì)使培養(yǎng)液的

過度增加，但可不斷中和微生物產(chǎn)的酸。③培養(yǎng)液中存在天然的緩沖系統(tǒng)，如AA，肽，

均屬兩性電解質(zhì)，也起緩沖的作用。④過酸：治標(biāo)

加

、

中和，治本

加適量氮源：、、·；增加通風(fēng)量。⑤過堿：治標(biāo)、

中和，治本加適量碳源:G

類，脂類;減小通風(fēng)量。、抗生素法和菌絲過濾法為何能濃縮營養(yǎng)缺陷型突變株？

，野生型B

處于正常生長繁殖，所以對(duì)青霉素敏感，可被抑制或殺死；營缺

B

在基本培養(yǎng)基上休眠狀態(tài)..存活下來，從而達(dá)到濃縮營缺型目的。制霉菌素法適用于真菌，其可與

上？（第

張）醇作用，引起

損傷，因?yàn)樗荒軞⑺郎L繁殖著的真菌，所以......菌絲過濾法:基本培上，野生型霉菌，？菌的孢子能萌發(fā)并長成菌絲，而缺型孢子一般不萌發(fā)，或不能長成菌絲，因此培養(yǎng)一段時(shí)間后，用生型，從而……、生產(chǎn)蛋白酶的枯草芽孢桿菌發(fā)生遺傳變異，使得產(chǎn)量性狀下降，你如何解決？寫出具體實(shí)驗(yàn)方案。答：將一定量的枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液，做一定濃度的稀釋，涂布在含有酪素蛋白質(zhì)的基本培養(yǎng)基上，°

菌。、以磺胺為例，說明化學(xué)治療機(jī)的作用機(jī)制。（答：機(jī)理:磺胺是葉酸組成部分對(duì)氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu)類似物，

磺胺類（藥物取代對(duì)氨基苯甲酸，干擾葉酸的合成，抑制了轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)，導(dǎo)致代謝紊亂，從而抑制B

基苯甲酸合成葉酸的相關(guān)酶二氫葉酸合成酶，不能用外界提供的（長?；前奉悾?.

張）、微生物的共性？哪個(gè)最基本答：①體積小，面積大（最基本）②吸收多，轉(zhuǎn)化快③生長旺，繁殖快思適應(yīng)性強(qiáng)，易變異⑤分布廣，種類多。、比較

， B

在

結(jié)構(gòu)，組成，對(duì)溶菌酶，青霉素的敏感性

方面的異同點(diǎn)。結(jié)構(gòu) 成分 對(duì)溶菌酶 青霉素

肽聚糖（

）磷

敏感

生

長

期

的簡(jiǎn)單，厚 壁酸（）

外

敏感

對(duì)其敏感不敏感復(fù)雜，薄 脂蛋白、表型延遲現(xiàn)象？如何克服？答：表型延遲：表型的改變落后于？（第四張）改變的現(xiàn)象，分為①分離性延遲;突變的？經(jīng)

型才能表現(xiàn)出來。②生理性延遲;雜合狀態(tài)→純合狀態(tài)，仍不能表現(xiàn)定下來，克服表型延遲。、培養(yǎng)

B

常用的斜面培養(yǎng)基是什么？簡(jiǎn)述配制程序。答：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基..①稱量;按配方依次準(zhǔn)確稱量②融化:

的蛋白胨，加熱溶解，加的牛肉膏，加熱溶解，加的

熱熔，

至

⑤分裝入試管，加塞，包扎，高壓滅菌⑥擱置斜面（斜面長度不超過試管一半）⑦無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入

°

的溫室中培養(yǎng)，以檢查滅菌是否徹底。、啤酒酵母在分批發(fā)酵中的生長曲線分哪幾個(gè)時(shí)期？在菌種擴(kuò)培時(shí)，哪個(gè)時(shí)期做種子？為什么？答：延滯期，對(duì)數(shù)生長期，穩(wěn)定期，衰退期。對(duì)數(shù)期做種子。利于縮短延滯期。、菌種衰退的根本原因？防治措施？答：？的自發(fā)突變。傳代④采取良好的菌種保藏措施、菌種衰退的根本原因，防止措施。如何區(qū)分衰退和飾變？例占優(yōu)勢(shì)，③培養(yǎng)條件）防止措施見上題。區(qū)分：衰退：指隨著菌體的不斷生長，負(fù)突變菌株的數(shù)量占整個(gè)菌體數(shù)量的比例增大，最終導(dǎo)致菌株的生產(chǎn)性能大幅下降的現(xiàn)象。..宿主侵襲力下降⑤抵抗力下降飾變:遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化，而只在轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)譯水平上的表型變化，可以同一條件繼續(xù)培養(yǎng)，觀察子代的情況。飾變特點(diǎn)：暫時(shí)性，不可遺傳性，表現(xiàn)為全部個(gè)體的行為。變異：遺傳性，群體中極少數(shù)個(gè)體的行為。、gone？突變的特點(diǎn)？答：①自發(fā)性②非對(duì)應(yīng)性③稀有性（突變率

）④獨(dú)立性⑤

10~10^5

<=>突變型）、（第三張）的特點(diǎn)。答：①形體微小，能通過細(xì)胞濾器（見②不具有細(xì)胞機(jī)構(gòu)，主要成分，③V

只含有一種核酸，或

④無核糖體，即無產(chǎn)能酶系，也無

合成酶系，專性活細(xì)胞內(nèi)寄生⑤無個(gè)體生長，也不進(jìn)行二分裂，以

等“元件”裝多數(shù)抗生素不敏感，對(duì)干擾素敏感。、？月元病毒的致病機(jī)理。答：月元病毒是一種

侵染顆粒，僅有

組成，稱作

。細(xì)胞型

對(duì)蛋白酶敏感，無凝聚能力，而致病型

對(duì)蛋白酶有一定抗性，可凝集成纖維狀組織，

進(jìn)

復(fù)合體，

構(gòu)型發(fā)生改變，轉(zhuǎn)化成，

數(shù)量呈指數(shù)增加，其潛伏期長，對(duì)中樞神經(jīng)損害嚴(yán)重。..估菌計(jì)數(shù)法及其特點(diǎn)（筆記）乳糖操縱子（）、營養(yǎng)價(jià)值 融化溫度（℃）凝固溫度（℃）

常用

瓊脂明膠

無氮源

、伴孢晶體？它在何種B

中產(chǎn)生？為伴孢晶體。對(duì)約

種昆蟲無為鱗翅目幼蟲有毒殺作用，可制成B

殺蟲劑。、霉菌菌落的特征？答：①質(zhì)地疏松，呈絮狀，網(wǎng)狀，絨毛狀，地毯狀。②形態(tài)大，分為局限性生長（青、曲）和蔓延性生長（根毛）③菌落干燥（孢子）在一定培養(yǎng)基上，形成的菌落大小，形狀，顏色相對(duì)穩(wěn)定，為分類依據(jù)之一。、利用磷酸鹽或碳酸鈣如何維持

穩(wěn)定性？答：①磷酸氫二鉀略呈堿性，磷酸氫二鉀略呈酸性，兩物質(zhì)以等摩爾濃度溶液

為

，其緩沖能力一般在

范圍內(nèi)有效。磷酸氫二鉀

陽離子磷酸氫二鉀

陽離子..磷酸二氫鉀

陽離子

→磷酸氫二鉀②大量產(chǎn)酸的菌株，加入碳酸鈣調(diào)節(jié)，碳酸鈣難溶于水，不會(huì)使培養(yǎng)基

過度升高，但可不斷中和微生物產(chǎn)的酸，同時(shí)放出二氧化碳，而降培養(yǎng)基

控制在一定范圍。、單倍體酵母細(xì)胞經(jīng)（第

張）誘變后，得到一系列的突變株，欲從中分離篩選出一株（請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)程序。答：淘汰型野生型→（制霉菌素法）→檢出→鑒定（濾紙片法）將單倍體酵母細(xì)胞突變株，制成菌懸液，均勻涂布于完全培養(yǎng)基上，心，水洗之后制成適當(dāng)濃度的菌懸液，與基本培養(yǎng)基均勻混合后，傾注于平板中，干燥凝固之后，在板上劃分幾個(gè)區(qū)，在區(qū)中加入蘸有色AA

的濾紙片，經(jīng)培養(yǎng)后，在紙片周圍有渾濁的生長圈的，說明為色AA

營養(yǎng)缺陷株。、實(shí)驗(yàn)的原理。答：：用來檢測(cè)由

產(chǎn)生的有機(jī)酸，如甲酸，乙酸，乳酸等，細(xì)菌代謝糖產(chǎn)酸，

降低，甲基紅指示劑由橙色（）變成紅色（）大腸桿菌陽性：利用乳糖產(chǎn)生乳酸，培養(yǎng)后大腸桿菌陰性：早起產(chǎn)有機(jī)酸，后轉(zhuǎn)化有機(jī)酸→乙醇，丙酮酸。②

用來測(cè)定細(xì)菌利用

產(chǎn)生非酸性或中性末端產(chǎn)物的能力，如..丙酮酸。丙酮酸經(jīng)縮合→乙酰甲基甲醇（經(jīng)堿性、氧化）→二乙酰。二乙酰與蛋白胨中精AA

陽性，大腸桿菌陰性。、什么叫生長曲線？單細(xì)胞微生物的典型生長曲線分幾期？劃分依據(jù)？標(biāo)作圖，得到一條反應(yīng)在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。分為延滯期，對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期，衰亡期。根據(jù)生長速率常數(shù)劃分，即單位時(shí)間內(nèi)分裂次數(shù)的不同。、為什么誘變時(shí)，要制成充分分散的單細(xì)胞或單孢子懸液？對(duì)放線菌進(jìn)行誘變育種時(shí)，宜處理其孢子還是菌絲細(xì)胞？為什么？答：使每個(gè)細(xì)胞均勻接觸誘變劑，減少表型延遲現(xiàn)象，并避免長出不純菌落。 多使用單核無性孢子，由于孢子生理上處于休眠狀態(tài)，單核區(qū)基中了大部分的，減少分離表型延遲，提高突變效果。

條件⑤控制氧化還原電位⑥原料來源經(jīng)濟(jì)節(jié)約⑦滅菌處理、青霉素的作用機(jī)制？答：原理：β內(nèi)酰胺環(huán)的結(jié)構(gòu)與肽聚糖單體五肽尾末端的

二肽結(jié)構(gòu)相近，因而可競(jìng)爭(zhēng)性的抑制轉(zhuǎn)肽酶的活性，抑..制單體間交聯(lián)，形成缺損的

。青霉素對(duì)生長旺盛的

有明顯的抑制作用，對(duì)休眠期的無抑制，對(duì)的作用比

強(qiáng)得多。、篩選抗代謝結(jié)構(gòu)類似物突變株的意義是什么？產(chǎn)物，所以采取一定的方法，篩選到抗代謝結(jié)構(gòu)類似物突變株，即可獲得終產(chǎn)物的高產(chǎn)菌株。

、烈性噬菌體？生活史包括幾個(gè)過程？噬菌體。吸附→侵入→增殖（

復(fù)制，

的生物合成）→裝配（成熟）→裂解（釋放）、縮短延滯期的措施答：①利用遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性，使延滯期縮短，②利用對(duì)差太大④適當(dāng)擴(kuò)大接種量、計(jì)算代時(shí)R）答：見第七張、誘變育種？舉例①非電離輻射誘變劑②電離輻射誘變劑③烷化劑④插入誘變劑⑤間接引起堿基置換的誘變劑..其突變率顯著提高，然后從中選取少數(shù)符合育種目的的突變株的方法。①紫外線②

射線，γ射線③，④吖啶類顏料，ICR

類⑤堿基類似物

等（直接引起：①亞硝酸②羥胺:只引起

③烷化劑

）、什么是鑒別培養(yǎng)基？利用EMB

培養(yǎng)正常大腸桿菌和沙門氏菌時(shí)，菌落現(xiàn)象？為什么？答;鑒別培養(yǎng)基：用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)集中加能將該種微生物的菌落與外形相似的其他微生物菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基。金屬閃光。沙門氏菌不能利用乳糖，菌落無色通明。、微生物的產(chǎn)能方式有？與食品發(fā)酵工業(yè)密切相關(guān)的微生物的代謝方式有哪幾種？答：微生物產(chǎn)能方式分為：發(fā)酵，有氧呼吸，無氧呼吸?；粡氐祝a(chǎn)能水平低，為厭氧條件，兼性厭氧菌在有氧的條件下，..從發(fā)酵→呼吸作用，對(duì)發(fā)酵作用抑制（巴氏效應(yīng)）、高壓蒸汽滅菌法的操作步驟和注意事項(xiàng)？答：步驟：①取出內(nèi)層鍋，外層鍋加水至與三角擱架相平②放回內(nèi)層

℃計(jì)時(shí)，控制熱源

℃

開蓋取物⑥無菌檢查注意；①切勿忘記加水，水量不可過少②三角瓶，試管口不要與桶壁接觸③切勿忘記打開排氣閥排鍋內(nèi)空氣④壓力降為

才能打開排氣閥，開蓋、培養(yǎng)基應(yīng)包括哪幾種營養(yǎng)物質(zhì)？如何控制？答；碳源，氮源，能源，生長因子，無機(jī)鹽，水治標(biāo) 過酸、·過堿、治本 酸加氮源，增大通風(fēng)量

，堿加堿？（第

張）源，減小通風(fēng)量加緩沖劑：加碳酸鈣、如何延長對(duì)數(shù)生長期？答;補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)，調(diào)整，取走代謝產(chǎn)物，改善物化條件，調(diào)整營養(yǎng)配比，

比

時(shí)，菌體大量繁殖。、簡(jiǎn)述烈性噬菌體一步生長曲線制作過程，并繪制曲線圖。答:適量噬菌體接種于培養(yǎng)好的高濃度敏感細(xì)胞中，②經(jīng)數(shù)

吸附后，將培養(yǎng)物高倍稀釋，或加入抗

V

抗血清，中和給定時(shí)間內(nèi)未吸..附的噬菌體，從而使因吸附噬菌體建立同步感染③適溫下繼續(xù)培養(yǎng)，定時(shí)取樣，測(cè)樣品中

V

的效價(jià)。感染

T

橫坐標(biāo)，V

效價(jià)縱坐標(biāo)，繪

張）、利用物理化學(xué)誘變劑對(duì)微生物進(jìn)行誘變的目的有哪些？中間培養(yǎng)的目的？用簡(jiǎn)圖表示利用

對(duì)微生物進(jìn)行誘變育種的過程？株（檢致癌物，高產(chǎn)次代產(chǎn)物

）中間培養(yǎng)為了克服表型延遲現(xiàn)象。（甲基磺酸乙酯）烷化劑直接引起堿基置換（烷化后的堿基引起堿基配對(duì)錯(cuò)誤，也能使嘌呤整體直接從

鏈堿基，從而引起轉(zhuǎn)換或顛換）選擇出發(fā)菌株→前培養(yǎng)，制作菌懸液→

合適劑量誘變處理→中間培養(yǎng)→初篩培養(yǎng)基涂布→劃線分離→菌種鑒定、意圖，并對(duì)主要步驟作簡(jiǎn)要說明。答：見第

張常用培養(yǎng)基：細(xì)菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（）放線菌高氏

號(hào)培養(yǎng)基（）酵母菌麥芽汁培養(yǎng)基

（）霉菌查氏合成培養(yǎng)基（）..、放線菌的培養(yǎng)：℃，，

染

褶，小不蔓延，不易挑起。、酵母菌培養(yǎng)：℃，，，染色：美藍(lán)活體染色

B

的大且厚，多為乳白色，表面濕潤，粘稠，邊緣整齊，易被挑起。、霉菌培養(yǎng)：℃，5~7

天，，染色：乳酸碳酸棉簽染液。

觀察：見第

張、酵母菌①大小測(cè)定：測(cè)微尺，酵母培養(yǎng)物制成水漫片，高倍鏡測(cè)出寬長與目鏡測(cè)微尺的格數(shù)，再乘以目鏡微尺每格代表長度。②計(jì)數(shù)：血球計(jì)數(shù)板：死菌+活菌總數(shù)，

總菌數(shù)=5

中方格總數(shù)中方格數(shù)稀釋倍數(shù)平板菌落計(jì)數(shù)法：只活菌、革蘭氏染色:機(jī)理+步驟

真題①）、，試驗(yàn)（

真題⑥）吲哚試驗(yàn)檢驗(yàn)水解色

AA，水解色

AA（經(jīng)水解）→丙酮酸+吲哚大腸桿菌陽性，產(chǎn)氣腸桿