GB/T 14926.18-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒檢測(cè)方法

ICS65.020.30B44中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T14926.18—2001代替GB/T14926.18-1994實(shí)驗(yàn)動(dòng)物淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒檢測(cè)方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationoflymphocyticchoriomeningitisvirus（LCMV)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實(shí)施中華人民共和國(guó)發(fā)布國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T14926.18-2001前本標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)GB/T14926.18—1994《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒檢測(cè)方法》的修訂本標(biāo)淮刪除了GB/T14926.18一1994中“酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、間接免疫熒光法和免疫醇染色法”的內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)科學(xué)技術(shù)部提出并歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：賀爭(zhēng)鳴。本標(biāo)準(zhǔn)于1994年1月首次發(fā)布.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物實(shí)動(dòng)GB/T14926.18-2001淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒檢測(cè)方法代替GB/T14926.18一1994Laboratoryanimal-Methodforexaminationoflymphocyticchoriomeningitisvirus（LCMV)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒(LCMV)的檢測(cè)方法、試劑等。本標(biāo)準(zhǔn)適用于小鼠、豚鼠、地鼠L.CMV的檢測(cè)引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過(guò)在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)淮出版時(shí)，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性.GB/T14926.50—2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)GB/T14926.52-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫熒光試驗(yàn)GB/T14926.51-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫酶試驗(yàn)原理根據(jù)免疫學(xué)原理，采用ICMV抗原檢測(cè)小鼠、豚鼠、地鼠血清中LCMV抗體主要試劑和器材4.1試劑：4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原在生物安全柜內(nèi)·用ICMV感染Vero細(xì)胞，當(dāng)病變達(dá)十十十～十十十十時(shí)，收獲培養(yǎng)物。凍融三次或超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片,上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成ELISA抗原。4.1.1.2正?？乖璙ero細(xì)胞凍融破碎后,經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清液4.1.2抗原片在生物安全柜內(nèi),LCMV感染Vero細(xì)胞，每2～3d更換維持液，培養(yǎng)7～10d,用IFA法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)特異性熒光。當(dāng)熒光達(dá)士十～十十十時(shí),將細(xì)胞用胰酶消化分散,PBS洗滌·涂片。室溫干燥的同時(shí)在紫外線下20cm處照射30min,冷丙酮固定10min，－20℃保存。4.1.3陽(yáng)性血清用β-丙內(nèi)脂滅活1.CMV抗原·免疫清潔或SPF小鼠、豚鼠、地鼠