標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 18634-2002 是一項(xiàng)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),全稱為《飼用植酸酶活性的測(cè)定 分光光度法》。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了使用分光光度法測(cè)定飼料中植酸酶活性的方法,旨在為飼料工業(yè)提供一個(gè)統(tǒng)一、準(zhǔn)確的檢測(cè)手段,以確保飼料質(zhì)量控制和動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需求。

標(biāo)準(zhǔn)適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于單胃動(dòng)物飼料中添加的植酸酶活性測(cè)定,植酸酶作為一種重要的飼料添加劑,能夠有效分解植物性飼料中的植酸磷,提高磷的利用率,減少環(huán)境污染。

測(cè)定原理

利用植酸酶對(duì)植酸的水解作用,產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷酸鹽。在特定條件下,無(wú)機(jī)磷酸鹽與鉬酸鹽反應(yīng)生成磷鉬雜多酸,再與抗壞血酸反應(yīng)形成藍(lán)色絡(luò)合物,通過(guò)分光光度計(jì)在特定波長(zhǎng)(一般為700nm)下測(cè)定吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出植酸酶活性。

主要步驟

  1. 樣品準(zhǔn)備:準(zhǔn)確稱取一定量的飼料樣品,經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理后,制備成適合測(cè)定的試樣溶液。

  2. 反應(yīng)體系建立:在試管或比色皿中,加入適量的試樣溶液、緩沖液、植酸鈉溶液等,按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件進(jìn)行預(yù)處理和酶促反應(yīng)。

  3. 顯色與測(cè)定:向反應(yīng)體系中加入鉬酸鹽溶液和抗壞血酸溶液,混勻后,在規(guī)定時(shí)間內(nèi)于分光光度計(jì)上測(cè)定吸光度值。

  4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:使用已知濃度的磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液,按同樣步驟處理,得到一系列吸光度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

  5. 結(jié)果計(jì)算:根據(jù)試樣溶液測(cè)得的吸光度,利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中植酸酶活性的單位,通常表示為每克樣品在特定條件下每分鐘能釋放的無(wú)機(jī)磷的微克數(shù)(μg/min/g)。

注意事項(xiàng)

  • 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,如溫度、pH值和反應(yīng)時(shí)間,以保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。
  • 所有試劑應(yīng)為分析純或更高純度,并注意避光保存,以防變質(zhì)影響測(cè)定結(jié)果。
  • 實(shí)驗(yàn)操作需遵循實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,注意個(gè)人防護(hù)。

結(jié)果表示

最終報(bào)告應(yīng)包含樣品編號(hào)、測(cè)定的吸光度值、計(jì)算出的植酸酶活性以及必要的重復(fù)測(cè)定數(shù)據(jù),以便于質(zhì)量控制和數(shù)據(jù)分析。


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  • 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替,建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 18634-2009
  • 2002-02-19 頒布
  • 2002-07-01 實(shí)施
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GB/T 18634-2002飼用植酸酶活性的測(cè)定分光光度法_第1頁(yè)
GB/T 18634-2002飼用植酸酶活性的測(cè)定分光光度法_第2頁(yè)
GB/T 18634-2002飼用植酸酶活性的測(cè)定分光光度法_第3頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS.65.120B46中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18634-2002飼用植酸酶活性的測(cè)定分光光度法DeterminationoffeedphytaseactivitySpectrothotometricmethod2002-02-19發(fā)布2002-07-01實(shí)施中華人民共和發(fā)布國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T18634-2002本標(biāo)準(zhǔn)參考美國(guó)公職分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(AOAC)方法和國(guó)外有關(guān)文獻(xiàn)資料制定。本標(biāo)準(zhǔn)確定了飼用植酸酶的活性單位定義·采用釩鉬顯色分光光度法測(cè)定植酸酶活性。此項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)分為絕對(duì)法和相對(duì)法,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和試劑的選擇均有詳細(xì)說(shuō)明。規(guī)定了方法的適用范圍,檢測(cè)原理,檢測(cè)程序及最佳樣品濃度。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是提示的附錄本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:國(guó)家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(北京)、羅氏泰山(上海)維生素制品有限公司、巴斯夫維生素有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:馬東霞、蘇曉鷗、張?zhí)K、王云全、張若寒

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)飼用植酸酶活性的測(cè)定GB/T18634-分光光度法一2002DeterminationoffeedphytaseactivitySpectrothotometricmethod1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了以分光光度法測(cè)定飼用植酸酶活性的方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于作飼料添加劑用的植酸酶產(chǎn)品,也適用于添加有植酸酶的配合飼料、濃縮飼料和添加劑預(yù)混合飼料。樣品最低檢出量為90U/kg.引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文,通過(guò)在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí),所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂,使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。GB/T6682—1992分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法(neqISO3696:1987)植酸酶活性單位定義樣品在植酸鈉濃度為5.0mmol/L、溫度37C、pH值5.50的條件下,每分鐘從植酸鈉中釋放1mol無(wú)機(jī)磷,即為一個(gè)植酸酶活性單位,以U表示。方法原理植酸酶在一定溫度和pH條件下,水解底物植酸鈉·生成正磷酸和肌醇衍生物,在酸性溶液中,用釩相酸銨處理會(huì)生成黃色的(NH,)PO.NH,VO,·16MoO,復(fù)合物,在波長(zhǎng)415nm下進(jìn)行比色測(cè)定。5試劑和溶液本標(biāo)準(zhǔn)中所用試劑,在沒(méi)有注明其他要求時(shí).均指分析純?cè)噭┖头螱B/T6682中規(guī)定的三級(jí)水。清洗試驗(yàn)用容器不要用含磷清洗劑。5.1乙酸緩沖液(I),c(CH.COONa·3H.O)為0.25mol/L:稱取34.02g三水乙酸鈉,0.1g吐溫20于1000mL容量瓶中,加入900mL水溶解,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.50±0.01,并用蒸留水定容至1000mL,室溫下存放2個(gè)月有效。5.2乙酸緩沖液(I).c(CH.COONa·3H.O)為0.25mol/L:稱取34.02g三水乙酸鈉.5g吐溫20.30g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)于1000mL容量瓶中,加入900mL水溶解,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.50±0.01.并用蒸雷水定容至1000mL,室溫下存放2個(gè)月有效5.3植酸鈉溶液·c(C.H.O.P.Naua)為7.5mmol/L:稱取0.6929g肌醇六礁酸鈉(C.H.O.P.Naa)于100mL容量瓶中,用乙酸緩沖液(5.1)溶解并定容至刻度,

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