標(biāo)準(zhǔn)解讀
GB/T 18654.13-2008 是一項中國國家標(biāo)準(zhǔn),全稱為《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗 第13部分:同工酶電泳分析》。該標(biāo)準(zhǔn)主要規(guī)定了利用同工酶電泳技術(shù)對養(yǎng)殖魚類種質(zhì)進(jìn)行質(zhì)量檢測的方法、步驟和要求,以確保魚類種質(zhì)資源的優(yōu)良性狀得以保持和改善,促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。下面是對該標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的具體說明:
標(biāo)準(zhǔn)適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于養(yǎng)殖魚類種質(zhì)的同工酶電泳分析,通過這種方法可以鑒定魚類品種的純度、遺傳多樣性及種群間的遺傳關(guān)系,為魚類種質(zhì)資源的評估、選育及保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)。
同工酶電泳基本原理
同工酶是指催化相同化學(xué)反應(yīng)但分子結(jié)構(gòu)有所差異的一組酶。同工酶電泳是一種生物化學(xué)技術(shù),通過電場作用下蛋白質(zhì)(此處指同工酶)在凝膠介質(zhì)中的分離,來分析其多態(tài)性。不同基因型的個體,其同工酶譜帶表現(xiàn)會有所差異,據(jù)此可進(jìn)行遺傳差異分析。
檢驗材料與樣品制備
- 樣品選擇:應(yīng)從目標(biāo)魚類的不同群體中隨機(jī)選取健康、無疾病的個體作為檢測對象。
- 組織采集:通常采集肌肉、肝臟、鰓等組織,具體依魚種及實驗需求而定。
- 樣品保存與處理:采樣后需迅速冷凍或冷藏,以防止酶活性變化,隨后根據(jù)實驗要求進(jìn)行提取和制備。
電泳條件與操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了電泳緩沖液的配制、凝膠的制備、樣品加載、電泳條件(如電壓、電流、時間)以及染色與脫色等具體操作步驟,確保實驗結(jié)果的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。
結(jié)果分析與判定
- 譜帶觀察:電泳結(jié)束后,通過特定染色方法使同工酶條帶顯色,然后對比分析各條帶的位置、數(shù)量和強(qiáng)度。
- 數(shù)據(jù)記錄與比較:記錄各樣品的同工酶圖譜,通過比對不同樣品間譜帶的異同,評估遺傳相似性或差異。
- 判定標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)譜帶特征,可判定魚類的遺傳純度、雜交程度或種群間的親緣關(guān)系。
質(zhì)量控制與注意事項
標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)了實驗過程中的質(zhì)量控制措施,包括實驗室環(huán)境控制、試劑與儀器校準(zhǔn)、操作規(guī)范性等,確保檢驗結(jié)果的可靠性。同時提醒操作人員注意個人防護(hù),遵守生物安全原則。
文檔與報告
要求詳細(xì)記錄實驗過程、所用材料、操作步驟及觀察結(jié)果,并按照標(biāo)準(zhǔn)格式編制檢驗報告,以便于信息交流和后續(xù)研究。
該標(biāo)準(zhǔn)通過規(guī)范同工酶電泳分析方法,為養(yǎng)殖魚類種質(zhì)的科學(xué)管理和遺傳改良提供了重要的技術(shù)支持和質(zhì)量保障。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2008-06-27 頒布
- 2008-10-01 實施



文檔簡介
犐犆犛65.150
犅50
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
犌犅/犜18654.13—2008
養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗
第13部分:同工酶電泳分析
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20080627發(fā)布20081001實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局
發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
書
犌犅/犜18654.13—2008
前言
GB/T18654《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》分為下列部分:
———第1部分:檢驗規(guī)則;
———第2部分:抽樣方法;
———第3部分:性狀測定;
———第4部分:年齡與生長的測定;
———第5部分:食性分析;
———第6部分:繁殖性能的測定;
———第7部分:生態(tài)特性分析;
———第8部分:耗氧率與臨界窒息點的測定;
———第9部分:含肉率測定;
———第10部分:肌肉營養(yǎng)成分的測定;
———第11部分:肌肉中主要氨基酸含量的測定;
———第12部分:染色體組型分析;
———第13部分:同工酶電泳分析;
———第14部分:DNA含量的測定;
———第15部分:RAPD分析;
……
本部分為GB/T18654的第13部分。
本部分的附錄A為規(guī)范性附錄。
本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。
本部分由全國水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會淡水養(yǎng)殖分技術(shù)委員會歸口。
本部分起草單位:上海水產(chǎn)大學(xué)、中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所。
本部分主要起草人:李思發(fā)、趙金良、徐忠法、蔡完其、鄒曙明。
Ⅰ
書
犌犅/犜18654.13—2008
養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗
第13部分:同工酶電泳分析
1范圍
GB/T18654的本部分規(guī)定了魚類同工酶聚丙烯酰胺凝膠水平電泳分析的試劑與材料、儀器和設(shè)
備、抽樣、分析步驟和結(jié)果判定。
本部分適用于魚類同工酶電泳分析。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過GB/T18654的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文
件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分,然而,鼓勵根據(jù)本部分達(dá)成
協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本
部分。
GB/T18654.1—2002養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第1部分:檢驗規(guī)則
GB/T18654.2養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第2部分:抽樣方法
3原理
同工酶為該酶基因產(chǎn)物的表現(xiàn)型,根據(jù)其所帶電荷的不同和分子大小、形狀的不同,在電場和凝膠
中出現(xiàn)各同工酶組分不同的遷移率,經(jīng)催化、染色、掃描,根據(jù)酶帶遷移距離、數(shù)目及吸收強(qiáng)度進(jìn)行分析
比較,判定魚類物種、種群的遺傳特性。
4試劑和材料
除非另有說明,在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當(dāng)純度的水。
4.1丙烯酰胺(Arc)。
4.2犖′,犖′亞甲基雙丙烯酰胺或甲叉雙丙烯酰胺(Bis)。
4.3四甲基乙二胺(TEMED)。
4.4過硫酸胺。
4.5三羥甲基氨基甲烷(Tris)。
4.6檸檬酸。
4.7乙二胺四乙酸(EDTA)。
4.8硼酸。
4.9L組氨酸。
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