實驗八減數(shù)分裂壓片標本制備與觀察

實驗八減數(shù)分裂壓片標本制備與觀察第一頁，共二十三頁，2022年，8月28日實驗目的1.了解高等植物減數(shù)分裂過程及染色體的動態(tài)變化。2.掌握制備植物細胞減數(shù)分裂玻片標本的技術和方法。第二頁，共二十三頁，2022年，8月28日減數(shù)分裂的特點減數(shù)分裂是一種特殊方式的細胞分裂，僅在配子形成過程中發(fā)生。減數(shù)分裂的特點是：連續(xù)進行兩次分裂，而染色體只復制一次，結果形成4個子核，每個子核只含單倍體的染色體，即染色體數(shù)減少一半，所以叫做減少分裂。另外一個特點是前期特別長，而且形態(tài)和行為變化復雜，包括同源染色體的配對、交換與分離等。第三頁，共二十三頁，2022年，8月28日減數(shù)分裂在遺傳上具有兩個重要的生物學意義：1、性母細胞（2n）經過減數(shù)分裂形成染色體數(shù)減半的配子（n），經過受精作用雌雄配子結合形成合子，染色體數(shù)恢復（2n），這樣在物種延續(xù)的過程中確保了染色體數(shù)目的恒定，從而使物種在遺傳上具有相對的穩(wěn)定性。2、在減數(shù)分裂過程中包含有同源染色體的配對、交換、分離和非同源染色體的自由組合，這些都是遺傳學分離、自由組合和連鎖互換規(guī)律的細胞學基礎，同源染色體的交換和非同源染色體的自由組合所產生的遺傳重組，又是生物變異和進化的重要遺傳基礎。第四頁，共二十三頁，2022年，8月28日植物花粉形成過程在植物花粉形成過程中，花藥內的一些細胞分化成小孢子母細胞（2n），每個小孢子母細胞進行2次連續(xù)的細胞分裂（第一次減數(shù)分裂和第二次減數(shù)分裂）。每一個小孢子母細胞產生4個子細胞，每個子細胞就是1個小孢子。小孢子內的染色體數(shù)目是體細胞的一半（圖2-1）。圖2-1減數(shù)分裂染色體行為示意圖第五頁，共二十三頁，2022年，8月28日動物的有性生殖過程中，也有一個由雙倍體到單倍體的減數(shù)過程，動物的精巢分化出精母細胞，精母細胞減數(shù)分裂形成單倍體的精子（圖2-2）第六頁，共二十三頁，2022年，8月28日動物減數(shù)分裂的細胞行為示意圖（圖2-2）第七頁，共二十三頁，2022年，8月28日減數(shù)分裂和有絲分裂的染色體行為比較（圖2-3）第八頁，共二十三頁，2022年，8月28日玉米花粉母細胞減數(shù)分裂過程如圖2-4第九頁，共二十三頁，2022年，8月28日蝗蟲精巢性母細胞減數(shù)分裂過程主要時期的染色體行為特征如圖2-4

1.細線期；2.偶線期；3.早粗線期；4.粗線期；5.晚粗線期；6.雙線期；7.終變期；8.中期I（側面圖）；9.中期I（極面圖）；10.早后期I；11.后期I；12.末期I；13.前期II;14.中期II；15.后期II；16.末期II;17.精細胞；18.精子第十頁，共二十三頁，2022年，8月28日第一次減數(shù)分裂（減數(shù)分裂I，包括染色體的復制）玉米減數(shù)分裂前期I細線期：第一次分裂開始，染色體很細很長，呈細線狀在核內交織成網(wǎng)。每一染色體已經復制為兩個染色單體，但在顯微鏡下看不出染色體的雙重性。(1)偶線期：染色體形態(tài)與細線期差別不大，染色體比細線期粗，同源染色體開始配對，形成二價體，每個二價體有一個著絲點。(2)第十一頁，共二十三頁，2022年，8月28日粗線期：染色體螺旋化，進一步縮短變粗，顯微鏡下可明顯看到每個染色體的兩個姐妹染色單體。二價體由四個姐妹染色單體和兩個著絲點組成，這時非姐妹染色單體間有可能發(fā)生交換第十二頁，共二十三頁，2022年，8月28日雙線期：染色體進一步螺旋化，比粗線期變得更為粗短，更為清晰，二價體中的兩條同源染色體相互分開出現(xiàn)交叉現(xiàn)象，出現(xiàn)交叉末端化，呈“X”、“V”、“O”、“∞”等形狀。終變期:染色體高度濃縮，染色體均勻地分散在核膜的附近，此時是檢查染色體數(shù)的最佳時期，這時核內有多少個二價體就說明有多少對同源染色體。第十三頁，共二十三頁，2022年，8月28日中期I核仁、核膜消失，二價體均勻排列在赤道板上，紡錘體形成。從側面看，一個個二價體就象一列橫隊排列在細胞中；從極面看，一個個二價體分散在細胞質中，這也是染色體計數(shù)的好時期。第十四頁，共二十三頁，2022年，8月28日后期I

二價體的兩個同源染色體分開（沒有著絲點的分開），由紡錘絲拉向兩極，染色體又變成了染色絲。

末期I

同源染色體分別到達細胞兩級，染色體變成了染色質狀，核膜、核仁重新出現(xiàn)，形成兩個子核，每個子核染色體數(shù)目減半為n，同時細胞質分開形成兩個子細胞，叫二分體。第十五頁，共二十三頁，2022年，8月28日第二次減數(shù)分裂（減數(shù)分裂II，染色體不復制）前期II染色體呈線狀，每個染色體由兩個姐妹染色單體，共用一個著絲點，二者間有明顯互斥作用，核膜消失。第十六頁，共二十三頁，2022年，8月28日中期II染色體排列在赤道板，每條染色體由兩個染色單體，共用一個著絲點。第十七頁，共二十三頁，2022年，8月28日后期II每個染色體從著絲點處分裂為二，分別移向兩極。末期II移到兩級的染色體解螺旋，再次出現(xiàn)核仁、核膜，形成單倍的子核，此時減數(shù)分裂I形成的兩個單倍核形成4個單倍核，最后形成4個子細胞，叫四分體。第十八頁，共二十三頁，2022年，8月28日理想的植物細胞減數(shù)分裂玻片標本在顯微鏡下可以觀察到減數(shù)分裂各個時期的典型細胞。第十九頁，共二十三頁，2022年，8月28日實驗材料

玉米（2n=20）花藥。

實驗器具和藥品器具顯微鏡、鑷子、解剖針、蓋玻片、載玻片、大培養(yǎng)皿、酒精燈、吸水紙。藥品無水乙醇、冰醋酸、醋酸洋紅染液、石蠟、二甲苯、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、加拿大樹膠、正丁醇或叔丁醇。第二十頁，共二十三頁，2022年，8月28日實驗步驟

1.取材在一朵花的減數(shù)分裂的全過程中能觀察染色體的時間是很短的，一般在終變期、中期I、后期I。因此，適時取材是是觀察花粉母細胞減數(shù)分裂的關鍵步驟，不同材料、不同地區(qū)或季節(jié)的取材適期略有差異。第二十一頁，共二十三頁，2022年，8月28日玉米雄穗北方的玉米5月份取材，時間為上午8：30為好，夏玉米一般在7月份取材，以上午7：00-8：00為好，在玉米雌穗未抽出前的7-10d手摸上部（喇叭口下部）有松軟感覺，表明雄花序即將抽出。用刀在頂葉近喇叭口處縱向劃一刀，切開長10-15cm，剝出雄花序，頂端花藥長3-5mm，花藥尚未變黃時取材為適期。將采集的雄穗浸入卡諾氏固定液中固定12-24h后，用95％酒精清洗凈醋酸氣味后，保存于70％酒精中置冰箱保存?zhèn)溆谩５诙?，共二十三頁?022年，8月28日2.制片取1-3枚花藥放在潔凈的載玻片上，用清潔刀片壓在花藥上向一端抹去，涂成薄層，然后滴1滴