宮頸癌基因南陽講課

宮頸癌基因南陽講課第一頁，共三十二頁，2022年，8月28日

HPV癌基因E6/E7mRNA

主要內(nèi)容

報(bào)告解讀、處理建議1

臨床意義、適用范圍

32第二頁，共三十二頁，2022年，8月28日

主要內(nèi)容1

HPV癌基因E6/E7mRNA

1第三頁，共三十二頁，2022年，8月28日2.型別：120多種（依據(jù)L1DNA）1.結(jié)構(gòu)：

外殼蛋白：L1蛋白（72個(gè)五聚體），

L2蛋白（12個(gè)）。

內(nèi)部遺傳物質(zhì)：閉環(huán)、雙鏈DNA。

（不含RNA）3.分類：依據(jù)生物特性、致癌性

高危型HPV(HR-HPV)：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、66

低危型HPV（LR-HPV）：6、11、42、43、44

什么是E6/E7mRNA?第四頁，共三十二頁，2022年，8月28日L1:主要衣殼蛋白，是疫苗的主要成分。

L2:次要衣殼蛋白，是市售抗體的主要識(shí)別位點(diǎn)。E4：結(jié)合并破壞細(xì)胞角蛋白網(wǎng)，形成挖空細(xì)胞的外觀。E2：負(fù)性調(diào)節(jié)E6和E7，維持凋亡和細(xì)胞周期的調(diào)控。通常在病毒發(fā)生整合時(shí)失活。HPV的主要致癌基因E6通過抑制p53而阻斷凋亡E7通過抑制pRB使細(xì)胞周期失控。XHPV的基因片段及功能E6/E7mRNA?第五頁，共三十二頁，2022年，8月28日高危亞型HPV感染宮頸上皮細(xì)胞，將產(chǎn)生兩種癌蛋白：E6和E7蛋白。癌蛋白可與宿主細(xì)胞的細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白（抑癌蛋白如P53、RB等）相結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞周期控制失常，發(fā)生癌變。

（人民衛(wèi)生出版社、婦產(chǎn)科學(xué)、2004年1月第6版）致癌原理E6/E7mRNA與宮頸癌的關(guān)系E6、E7mRNA--是宮頸病變開始和進(jìn)展的必由之路!第六頁，共三十二頁，2022年，8月28日HPV感染在宮頸細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)過程基因改變?cè)缬诩?xì)胞改變第七頁，共三十二頁，2022年，8月28日E6/E7mRNA：是致癌基因E6/E7表達(dá)的直接產(chǎn)物；是最終致癌物-E6/E7癌蛋白合成的模板；

是宮頸病變開始和進(jìn)展的必要條件！

小結(jié)第八頁，共三十二頁，2022年，8月28日

主要內(nèi)容1

E6/E7mRNA的臨床意義與適用范圍

2第九頁，共三十二頁，2022年，8月28日高危的HPV感染宮頸上皮細(xì)胞癌基因E6、E7mRNAE6、E7癌蛋白E6、E7癌蛋白與抑癌蛋白P53、RB等結(jié)合宮頸細(xì)胞CIN或癌變癌基因E6、E7DNAHPV病毒學(xué)檢測(cè)病毒癌基因?qū)W檢測(cè)細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)HPVL1DNAHPVL1mRNAHPVL1蛋白HPV復(fù)制繁殖HPV感染后演變路徑及宮頸癌篩查&診斷方法應(yīng)用第十頁，共三十二頁，2022年，8月28日檢測(cè)方法檢測(cè)靶標(biāo)主要檢測(cè)意義巴氏涂片

宮頸上皮細(xì)胞提示宮頸細(xì)胞已發(fā)生的病變情況，篩查的基本方法。主要用于評(píng)估現(xiàn)階段宮頸（病變）情況。液基細(xì)胞學(xué)（TCT）HPV病毒學(xué)HPV

病毒DNA提示是否有病毒感染。主要用于評(píng)估現(xiàn)階段宮頸是否有病毒感染。癌基因E6/E7mRNA檢測(cè)病毒癌基因E6/E7mRNA提示病毒癌基因已經(jīng)轉(zhuǎn)錄表達(dá)?？捎糜诹私馊梭w宮頸細(xì)胞或組織癌變的發(fā)展趨勢(shì)。陰道鏡檢宮頸內(nèi)表面提示已經(jīng)發(fā)展到宮頸表面的病變及其位置。主要是更直接輔助檢查現(xiàn)階段宮頸（病變）情況。宮頸活檢宮頸組織提示宮頸組織病變情況，確診金標(biāo)準(zhǔn)。臨床意義----特異性強(qiáng)、陽性預(yù)測(cè)值高第十一頁，共三十二頁，2022年，8月28日正常宮頸感染HPV輕度宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅠ)中度宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅡ)高度宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅢ)原位癌浸潤(rùn)癌依靠免疫力80%自行消退06-18個(gè)月至少2年后5-10年后一過性感染持續(xù)性感染62%轉(zhuǎn)為正常16%進(jìn)一步進(jìn)展22%維持原狀54%轉(zhuǎn)為正常30%進(jìn)一步進(jìn)展16%維持原狀100%HPV感染致宮頸癌模式圖什么樣的感染者會(huì)進(jìn)一步進(jìn)展呢？哪種檢測(cè)方法能提示？第十二頁，共三十二頁，2022年，8月28日E6/E7mRNA檢測(cè)1、發(fā)現(xiàn)已感染HPV，且癌基因已經(jīng)表達(dá)的宮頸病變高風(fēng)險(xiǎn)者,特異性強(qiáng)、陽性預(yù)測(cè)值高；2、彌補(bǔ)：細(xì)胞學(xué)檢測(cè)敏感性；

HPV檢測(cè)特異性；陰道鏡/活檢的漏檢等。3、預(yù)測(cè)發(fā)展趨勢(shì)，指導(dǎo)后續(xù)治療、隨訪。

提供關(guān)鍵的癌變信息，治療更及時(shí)，預(yù)防更有效！

小結(jié)第十三頁，共三十二頁，2022年，8月28日適用范圍（不局限于30歲以上人群）：

1、篩查：細(xì)胞學(xué)+E6/E7mRNA檢測(cè)；

2、輔助診斷：

（1）細(xì)胞學(xué)+E6/E7mRNA檢測(cè)；（2）若HPV（+）→E6/E7mRNA檢測(cè)；（3）病理組織+E6/E7mRNA檢測(cè)。

3、手術(shù)后及隨訪時(shí):

組織學(xué)+癌基因E6/E7mRNA；

細(xì)胞學(xué)+E6/E7mRNA檢測(cè)。第十四頁，共三十二頁，2022年，8月28日TCT結(jié)果正常的女性，在正常篩查間隔內(nèi)一定是安全的嗎？TCT結(jié)果：ASCUS，如何評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)？直接鏡檢&活檢：過度檢查？隨訪：漏診？

30歲以下婦女，感染率高，清除率高，HPV（+）率高，該如何評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)？篩查常見問題第十五頁，共三十二頁，2022年，8月28日.IntracellularHumanPapillomavirusE6,E7mRNAQuantificationPredictsCIN2+inCervicalBiopsiesBetterThanPapanicolaouScreeningforWomenRegardlessofAge.ArchPatholLabMed.2012；136:956-960.第十六頁，共三十二頁，2022年，8月28日E6/E7mRNA檢測(cè)；聯(lián)合TCT篩查基因改變?cè)缬诩?xì)胞形態(tài)改變，輔助提高細(xì)胞學(xué)敏感性，ASC-US分流30歲以下女性篩查效率。篩查應(yīng)用第十七頁，共三十二頁，2022年，8月28日CIN1風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估？隨訪時(shí)間確定。CINII-III的患者，手術(shù)方式術(shù)后隨訪。

特殊病例：未生育女性、妊娠女性？隨訪間隔？輔助診斷常見問題：第十八頁，共三十二頁，2022年，8月28日正常宮頸感染HPV輕度宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅠ)中度宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅡ)高度宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINⅢ)原位癌浸潤(rùn)癌依靠免疫力80%自行消退06-18個(gè)月至少2年后5-10年后一過性感染持續(xù)性感染62%轉(zhuǎn)為正常16%進(jìn)一步進(jìn)展22%維持原狀54%轉(zhuǎn)為正常30%進(jìn)一步進(jìn)展16%維持原狀100%HPV感染致宮頸癌模式圖第十九頁，共三十二頁，2022年，8月28日預(yù)測(cè)性能ASCUS&LSIL者，2年內(nèi)跟蹤診斷至CIN2+女性：HPVE6、E7mRNA作為監(jiān)測(cè)手段：檢測(cè)呈陽性數(shù)量約是陰性數(shù)量的69.8倍。HPVDNA作為監(jiān)測(cè)手段：檢測(cè)呈陽性數(shù)量約是陰性數(shù)量的5.7倍。TorMoldenetc.PredictingCIN2+whendetectingHPVmRNAandDNAbyPreTectHPV-ProoferandconsensusPCR:a2-yearfollow-upofwomenwithASCUSorLSILPapsmear.InternationalJournalofCancer.Int.J.Cancer,2005,114:973–976.第二十頁，共三十二頁，2022年，8月28日E6/E7mRNA檢測(cè)——

輔助活檢后人群的后續(xù)處理，提高診斷水平：組織學(xué)CIN1，建議采用E6/E7mRNA檢測(cè)：

E6/E7mRNA檢測(cè)陽性，建議縮短隨訪時(shí)間；E6/E7mRNA檢測(cè)陰性，建議根據(jù)醫(yī)囑隨訪。組織學(xué)CIN2+，建議采用E6/E7mRNA檢測(cè)：

E6/E7mRNA檢測(cè)陽性，建議積極治療；E6/E7mRNA檢測(cè)陰性，建議保守治療，密切隨訪。輔助診斷應(yīng)用第二十一頁，共三十二頁，2022年，8月28日手術(shù)后殘端是否會(huì)殘留病毒？復(fù)發(fā)的可能性多大？

術(shù)后隨訪間隔是多久，確定依據(jù)是什么？術(shù)后隨訪常見問題：第二十二頁，共三十二頁，2022年，8月28日DetectionofResidual/RecurrentCervicalDiseaseafterSuccessfulLEEPConization:thePossibleRoleofmRNA-HPVTest.

Leep錐切術(shù)成功后檢測(cè)剩余/復(fù)發(fā)的宮頸疾?。簃RNAHPV檢測(cè)可能發(fā)揮的作用。14%-70%的陽性切緣患者5-15%的干凈切緣患者存在復(fù)發(fā)宮頸疾病的風(fēng)險(xiǎn)。E6/E7mRNA檢測(cè)的隨訪第二十三頁，共三十二頁，2022年，8月28日DetectionofResidual/RecurrentCervicalDiseaseafterSuccessfulLEEPConization:thePossibleRoleofmRNA-HPVTest.CurrentPharmaceuticalDesign2013,19,1450-1457.術(shù)后，mRNA（+）比mRNA（-）復(fù)發(fā)的幾率更高n=116（CIN患者經(jīng)LEEP刀治療后）第二十四頁，共三十二頁，2022年，8月28日E6/E7mRNA檢測(cè)，輔助術(shù)后的后續(xù)處理：手術(shù)后，病理組織學(xué)診斷+E6/E7mRNA檢測(cè)術(shù)后隨訪，細(xì)胞學(xué)+E6/E7mRNA檢測(cè)。

術(shù)后隨訪應(yīng)用第二十五頁，共三十二頁，2022年，8月28日病例分析----30歲已婚女性2013.12.3體檢：

E6/E7mRNA(+)低度風(fēng)險(xiǎn)TCT正常未進(jìn)行干預(yù)性治療，3個(gè)月復(fù)查2014.3.25細(xì)胞學(xué)：ASC-US

E6/E7mRNA(+)高度風(fēng)險(xiǎn)術(shù)后病檢結(jié)果：宮頸1點(diǎn)、6點(diǎn)慢性宮頸炎，部分區(qū)域呈濕疣性改變；12點(diǎn)處小灶區(qū)域CIN2LEEP第二十六頁，共三十二頁，2022年，8月28日3:2012.9月，廣東一家醫(yī)院，一病人66歲TCTHSIL，E6、E7mRNA檢測(cè)陰

性，TCT閱片老師認(rèn)為那個(gè)標(biāo)本報(bào)告為癌都不為過，所以進(jìn)行活檢，但

活檢結(jié)果為CIN1--2級(jí)，臨床醫(yī)生對(duì)活檢不滿意，并考慮到該病人年齡比較大，行使錐切后活檢，活檢結(jié)果CIN1。1：2012.3月，河北一醫(yī)院對(duì)一LEEP術(shù)后45歲病人加做E6，E7mRNA檢

測(cè)，發(fā)現(xiàn)拷貝值為2萬多，兩周后重新取樣檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)E6,E7mRNA

檢測(cè)仍有一萬多拷貝，于是重新取樣活檢，發(fā)現(xiàn)切緣為CIN3級(jí)。2：2012.7月浙江余姚市一醫(yī)院，一病人HPV檢測(cè)陰性，TCT檢測(cè)正常，

E6、E7mRNA檢測(cè)一萬多拷貝，主任對(duì)該檢測(cè)結(jié)果質(zhì)疑，對(duì)該病人進(jìn)行活檢，病理結(jié)果CIN2—3級(jí)。病例第二十七頁，共三十二頁，2022年，8月28日

主要內(nèi)容1

報(bào)告解讀及處理建議

3第二十八頁，共三十二頁，2022年，8月28日

細(xì)胞學(xué)E6、E7mRNA結(jié)果解讀臨床處理建議正常-未檢測(cè)到癌基因轉(zhuǎn)錄。1年后復(fù)查細(xì)胞學(xué)和E6/E7mRNA。+癌基因轉(zhuǎn)錄，未觀察到細(xì)胞形態(tài)的改變。酌情進(jìn)行陰道鏡檢或6個(gè)月后復(fù)查細(xì)胞學(xué)和E6/E7mRNA。ASC-US-未檢測(cè)到癌基因轉(zhuǎn)錄。6-12個(gè)月復(fù)查細(xì)胞學(xué)和E6/E7mRNA。+癌基因已經(jīng)開始轉(zhuǎn)錄，細(xì)胞形態(tài)處于轉(zhuǎn)變期。異常-癌基因此時(shí)處于轉(zhuǎn)錄不活躍狀態(tài)。+癌基因已經(jīng)開始轉(zhuǎn)錄，細(xì)胞形態(tài)已經(jīng)明顯改變，處于細(xì)胞形態(tài)改變狀態(tài)。陰道鏡/活檢如無病變，半年后復(fù)查E6/E7mRNA如E6/E7mRNA（+），查細(xì)胞學(xué)細(xì)胞學(xué)＞ASC-US,陰道鏡檢如E6/E7mRNA（-），半年后查E6/E7mRNA+細(xì)胞學(xué)。陰道鏡/活檢無病變：嚴(yán)密隨訪CIN2+:相應(yīng)手術(shù)治療第二十九