標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 21794-2008 化學(xué)品 體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),用于評(píng)估化學(xué)品是否能夠引起哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目的異常變化。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、操作步驟以及結(jié)果分析的方法,適用于對(duì)新化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)時(shí)采用。
根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),試驗(yàn)通常選用適當(dāng)?shù)牟溉閯?dòng)物細(xì)胞系作為測(cè)試系統(tǒng),例如中國(guó)倉(cāng)鼠肺成纖維細(xì)胞(CHL)或人外周血淋巴細(xì)胞等。在準(zhǔn)備階段,需確定受試物的溶解度和毒性范圍,以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)中選擇合適的濃度梯度。溶劑的選擇也非常重要,應(yīng)確保其本身不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不良影響。
接下來(lái)是處理過(guò)程,將不同濃度的待測(cè)化學(xué)品加入到培養(yǎng)中的細(xì)胞內(nèi),并設(shè)置空白對(duì)照組與陽(yáng)性對(duì)照組以保證實(shí)驗(yàn)的有效性。處理時(shí)間依據(jù)具體的化學(xué)品性質(zhì)而定,可以是短期接觸也可以是連續(xù)暴露。之后通過(guò)特定技術(shù)如Giemsa染色法觀察并記錄下細(xì)胞分裂中期相的染色體形態(tài)。
數(shù)據(jù)分析方面,需要統(tǒng)計(jì)每個(gè)劑量組出現(xiàn)染色體斷裂、缺失或其他類型畸變的比例,并與對(duì)照組比較。如果發(fā)現(xiàn)顯著差異,則表明該化學(xué)品可能具有誘導(dǎo)染色體畸變的能力。此外,還需注意評(píng)估任何觀察到效應(yīng)的可重復(fù)性和劑量-反應(yīng)關(guān)系。
整個(gè)過(guò)程中,除了嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行之外,還要求實(shí)驗(yàn)室具備相應(yīng)的資質(zhì)和技術(shù)能力,以確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。
如需獲取更多詳盡信息,請(qǐng)直接參考下方經(jīng)官方授權(quán)發(fā)布的權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)文檔。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2008-05-12 頒布
- 2008-09-01 實(shí)施
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犐犆犛13.300;11.100
犃80
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
犌犅/犜21794—2008
化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變
試驗(yàn)方法
犆犺犲犿犻犮犪犾狊—犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犻狀狏犻狋狉狅犿犪犿犿犪犾犻犪狀犮犺狉狅犿狅狊狅犿犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀
20080512發(fā)布20080901實(shí)施
中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局
發(fā)布
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
書
犌犅/犜21794—2008
前言
本標(biāo)準(zhǔn)等同采用經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)化學(xué)品測(cè)試指南No.473(1997年)《體外哺乳動(dòng)物細(xì)
胞染色體畸變?cè)囼?yàn)》(英文版)。
本標(biāo)準(zhǔn)作了下列編輯性修改:
———增加了范圍部分;
———?jiǎng)┝繂挝桓某晌覈?guó)法定劑量單位;
———?jiǎng)h除了OECD的參考文獻(xiàn)部分。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)危險(xiǎn)化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC251)提出并歸口。
本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位:中國(guó)疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所。
本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位:遼寧省職業(yè)病防治院、天津市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:曲波、林錚、李雪飛、白羽、吳維皚、張國(guó)慶、李寧濤、張園。
Ⅰ
書
犌犅/犜21794—2008
犗犈犆犇引言
1.本試驗(yàn)的目的是識(shí)別或鑒定可導(dǎo)致體外培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變的化學(xué)致突變物。
染色體結(jié)構(gòu)畸變可有兩種形式,即染色體型畸變和染色單體型畸變。大多數(shù)化學(xué)致突變物誘發(fā)染色單
體型畸變,也可誘發(fā)染色體型畸變。多倍體增加表明受試物有導(dǎo)致染色體數(shù)目畸變的潛在作用。本方
法不用于檢測(cè)染色體數(shù)目畸變。染色體突變及其相關(guān)事件是很多人類遺傳性疾病的原因,并且有充分
證據(jù)表明,引起體細(xì)胞癌基因和腫瘤抑制基因改變的染色體畸變及其相關(guān)事件,與誘發(fā)人類及試驗(yàn)動(dòng)物
腫瘤有關(guān)。
2.體外染色體畸變?cè)囼?yàn)可選用已建立的細(xì)胞系、細(xì)胞株或原代細(xì)胞來(lái)培養(yǎng)。應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)的生長(zhǎng)能
力、核型的穩(wěn)定性、染色體數(shù)目、染色體的類型和染色體畸變的自發(fā)頻率選擇所用的細(xì)胞。
3.體外試驗(yàn)一般需要利用外源性代謝活化系統(tǒng)。外源性代謝活化系統(tǒng)不可能完全模擬哺乳動(dòng)物
體內(nèi)的代謝條件。應(yīng)注意避免不能真實(shí)反映致突變作用的假陽(yáng)性結(jié)果,它可能是由于pH值、滲透壓的
變化或受試物的高細(xì)胞毒性所致。
4.本試驗(yàn)用于篩選哺乳動(dòng)物的潛在致突變物和致癌物。本試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性的很多化學(xué)品是哺乳
動(dòng)物致癌物;但本試驗(yàn)結(jié)果與致癌性之間并無(wú)良好的相關(guān)性。相關(guān)性取決于化學(xué)品類別,并且有越來(lái)越
多的證據(jù)表明,那些在本試驗(yàn)中未被檢出的致癌物,不是通過(guò)直接損傷DNA的致癌機(jī)制起作用的。
Ⅱ
犌犅/犜21794—2008
化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變
試驗(yàn)方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)方法的范圍、術(shù)語(yǔ)和定義、試驗(yàn)基本原則、
試驗(yàn)方法、試驗(yàn)數(shù)據(jù)和報(bào)告。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)。
2術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
2.1
染色單體型畸變犮犺狉狅犿犪狋犻犱狋狔狆犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀
表現(xiàn)為染色單體斷裂或染色單體間斷裂和重接的染色體結(jié)構(gòu)損傷。
2.2
染色體型畸變犮犺狉狅犿狅狊狅犿犲狋狆犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀
表現(xiàn)為兩個(gè)染色單體在相同位點(diǎn)斷裂或斷裂重接的染色體結(jié)構(gòu)損傷。
2.3
內(nèi)復(fù)制犲狀犱狅狉犲犱狌狆犻犮犪狋犻狅狀
在DNA復(fù)制的S期后,細(xì)胞核并不進(jìn)入有絲分裂期,而開始另一個(gè)S期的過(guò)程。結(jié)果是染色體含
4、8、16…個(gè)染色單體。
2.4
裂隙犵犪狆
顯示為小于染色單體寬度的不著色的損傷,并伴有染色單體極小的錯(cuò)位。
2.5
有絲分裂指數(shù)犿犻狋狅狋犻犮犻狀犱犲狓
中期相細(xì)胞數(shù)與所觀察的細(xì)胞總數(shù)之比值,是一項(xiàng)反映細(xì)胞增殖程度的指標(biāo)。
2.6
數(shù)目畸變狀狌犿犫犲狉犻犪犾犪犫狉狉犪狋狅狀
染色體數(shù)目的改變,不同于所用細(xì)胞的染色體正常數(shù)目。
2.7
多倍體狆狅犾狔狆犾狅犻犱狔
單倍體染色體(狀)數(shù)目的倍數(shù),但不包括二倍體(即3狀,4狀等等)。
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