項(xiàng)目一紫外分光光度計(jì)的使用

任務(wù)2：紫外可見分光光度計(jì)的使用紫外-可見分光光度法模塊之2023/2/31儀器分析實(shí)驗(yàn)2023/2/32儀器分析實(shí)驗(yàn)

最新設(shè)計(jì)的UV－1801是通用型具有掃描功能的紫外可見分光光度計(jì)，可滿足各種應(yīng)用的要求，可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學(xué)研究、環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、衛(wèi)生防疫等領(lǐng)域。波長范圍： 190～1100nm顯示方式： 六英寸高亮度藍(lán)色液晶顯示屏檢測器： 進(jìn)口硅光二極管光源： 進(jìn)口氘燈，進(jìn)口鎢燈2023/2/33儀器分析實(shí)驗(yàn)波長范圍： 190～1100nm顯示方式： 液晶檢測器： 進(jìn)口硅光電池光源： 進(jìn)口氘燈、進(jìn)口鹵鎢燈具有波長掃描、時(shí)間掃描、多波長測定等多種測量方法，可滿足不同測量的要求。2023/2/34儀器分析實(shí)驗(yàn)1、定性分析

通常根據(jù)吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目以及最大吸收波長的位置和相應(yīng)的摩爾吸收系數(shù)進(jìn)行定性鑒定。一般采用比較光譜法：即在相同的測定條件下，比較待測物與已知標(biāo)準(zhǔn)物的吸收光譜曲線，如果它們的吸收光譜曲線完全等同，則可認(rèn)為是同一物質(zhì)。2023/2/35儀器分析實(shí)驗(yàn)2023/2/36儀器分析實(shí)驗(yàn)在進(jìn)行定性鑒定時(shí)，需要注意：1）.測試溶劑：應(yīng)當(dāng)對標(biāo)準(zhǔn)物和待測物有良好的溶解度，本身在測定的波長內(nèi)無光的吸收，有良好的穩(wěn)定性。2）.測試的條件：標(biāo)準(zhǔn)物和待測物測試條件要完全相同，如溶劑、PH、離子強(qiáng)度、溫度及所用儀器等。3）.更改測試條件：為了防止測試數(shù)據(jù)的假象，要對現(xiàn)有某些條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖儞Q，改變其中的某些測定條件，然后看標(biāo)準(zhǔn)物和待測物的吸收光譜是否仍然完全相同。2023/2/37儀器分析實(shí)驗(yàn)二、定量分析-標(biāo)準(zhǔn)曲線法配制一系列不同含量的待測組分的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以不含待測組分的空白溶液為參比，測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。并繪制吸光度—濃度曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線（工作曲線），然后再在相同條件下測定試樣溶液的吸光度。由測得的吸光度在曲線上查得試樣溶液中待測組分的濃度，最后計(jì)算得到試樣中待測組分的含量。2023/2/38儀器分析實(shí)驗(yàn)ACCxAx標(biāo)準(zhǔn)曲線/工作曲線制作根據(jù)光的吸收定律:吸光度與吸光物質(zhì)的含量成正比，這是光度法進(jìn)行定量的基礎(chǔ)，標(biāo)準(zhǔn)曲線就是根據(jù)這一原理制作的。2023/2/39儀器分析實(shí)驗(yàn)定性分析與定量分析的基礎(chǔ)定性分析基礎(chǔ)定量分析基礎(chǔ)物質(zhì)對光的選擇吸收物質(zhì)的電子結(jié)構(gòu)不同，所能吸收光的波長也不同，這就構(gòu)成了物質(zhì)對光的選擇吸收基礎(chǔ)。ABA在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)的濃度成正比。AC增大吸收曲線2023/2/310儀器分析實(shí)驗(yàn)①未知物的定性分析

未知物40-60ug/mL稀釋未知物10ug/mL210～350nm確定未知物及最大吸收波長2023/2/311儀器分析實(shí)驗(yàn)苯甲酸水楊酸2023/2/312儀器分析實(shí)驗(yàn)②未知物定量分析

水楊酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1mg/mL精密吸取10ml定容至100ml，移取測量吸光度4ml6ml8ml10ml定容至50ml8ug/mL12ug/mL16ug/mL20ug/mL水楊酸未知液精密吸取10ml定容至50mlAx水楊酸濃度？2023/2/313儀器分析實(shí)驗(yàn)苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1mg/mL精密吸取5ml定容至100ml，移取測量吸光度2ml4ml6ml8ml定容至50ml2ug/mL4ug/mL6ug/mL8ug/mL水楊酸未知液精密吸取5ml定容至50mlAx苯甲酸2023/2/314儀器分析實(shí)驗(yàn)UV1101分光光度計(jì)的使用1.初始化2.主菜單2023/2/315儀器分析實(shí)驗(yàn)3、定量分析選擇Photometry（定量運(yùn)算）時(shí)，按數(shù)字鍵[1]，則畫面進(jìn)入下一級子菜單，即Photometry（定量運(yùn)算）子菜單。如果希望返回上一級菜單，請按[CLEARRETURN]。如果希望返回到主菜單畫面，請按[MAINMENU]。2023/2/316儀器分析實(shí)驗(yàn)3.1透過率/吸光度（%T/Abs）測定模式12023/2/317儀器分析實(shí)驗(yàn)條件設(shè)定2023/2/318儀器分析實(shí)驗(yàn)（2）自動(dòng)調(diào)零（AUTOZERO）條件設(shè)定完成后，儀器的顯示屏進(jìn)入如圖3-8所示的畫面。此時(shí)將裝有空白樣品（例如蒸餾水）的比色皿放入樣品室中，再按[START/STOP]鍵，可進(jìn)行零點(diǎn)的自動(dòng)調(diào)整。2023/2/319儀器分析實(shí)驗(yàn)3）測定自動(dòng)調(diào)零完成后，即可進(jìn)行樣品的測定。將裝有空白樣品的比色皿取出，換成裝有被測樣品的比色皿，再按[START/STOP]鍵進(jìn)行測量。得到各對應(yīng)波長的數(shù)據(jù)值后，儀器的顯示屏進(jìn)入如圖3-9所示的畫面。如果希望更改測定條件，只要按[CLEARRETURN]鍵，即可返回條件設(shè)定畫面。2023/2/320儀器分析實(shí)驗(yàn)3.2掃描測定模式主菜單2023/2/321儀器分析實(shí)驗(yàn)在MAINMENU主菜單畫面（圖3-2）中，按數(shù)字鍵[2]，則畫面進(jìn)入波長掃描子菜單，如圖2023/2/322儀器分析實(shí)驗(yàn)（1）條件測定2023/2/323儀器分析實(shí)驗(yàn)2）基線校正（BaselineCalibration）條件設(shè)定完成后，儀器的顯示屏進(jìn)入如圖3-39所示的畫面。此時(shí)將裝有空白樣品（例如蒸餾水）的比色皿放入樣品室中，再按[START/STOP]鍵，則可進(jìn)行基線的自動(dòng)校正。在掃描測定過程中，如果按[START/STOP]鍵，則該鍵起STOP（停止）功能；在其他情況下按[START/STOP]鍵，則該鍵起START（啟動(dòng)）功能。2023/2/324儀器分析實(shí)驗(yàn)3）樣品測定基線校正完成后，儀器的顯示屏?xí)M(jìn)入如圖3-41所示的畫面。2023/2/325儀器分析實(shí)驗(yàn)將裝有被測樣品的比色皿放入樣品室中，按[START/STOP]鍵，則樣品掃描測定開始。在測量過程中，儀器的顯示屏進(jìn)入如圖2023/2/326儀器分析實(shí)驗(yàn)樣品掃描測量