基因工程章末檢測附答案

..章末檢測1．下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述,正確的是<>A．表達(dá)載體中的胰島素基因可通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B．表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動于復(fù)制原<起>點(diǎn)C．借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來D．啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用2．某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶<Amy>基因a,通過基因工程的方法,將基因a與載體結(jié)合后導(dǎo)入馬鈴薯植株中,經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在。下列有關(guān)這一過程的敘述不正確的是<>A．獲取基因a的限制酶的作用部位是圖中的①B．連接基因a與載體的DNA連接酶的作用部位是圖中的②C．基因a進(jìn)入馬鈴薯細(xì)胞后,可隨馬鈴薯DNA分子的復(fù)制而復(fù)制,傳給子代細(xì)胞D．通過該技術(shù)人類實(shí)現(xiàn)了定向改造馬鈴薯的遺傳性狀3．以下甲、乙兩圖表示從細(xì)菌細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法,以下說法中錯誤的是<>A．甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文庫B．乙方法可建立該細(xì)菌的cDNA文庫C．甲方法要以脫氧核苷酸為原料D．乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與4．在判斷抗蟲基因是否成功轉(zhuǎn)入棉花基因組的方法中,不屬于分子檢測的是<>A．觀察害蟲吃棉葉是否死亡B．檢測目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶C．檢測目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D．檢測目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶5．右圖表示細(xì)胞膜上乙酰膽堿<一種神經(jīng)遞質(zhì)>受體基因的克隆技術(shù)操作過程,下列相關(guān)分析中正確的是<>A．獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B．構(gòu)建基因表達(dá)載體最可能使用的載體是大腸桿菌C．完成過程①②必不可少的酶分別是逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶D．探針篩選的目的是淘汰被感染的細(xì)菌,獲得未被感染的細(xì)菌6．應(yīng)用基因工程技術(shù)診斷疾病的過程中,必須使用基因探針才能達(dá)到檢測疾病的目的。這里的基因探針是指<>A．用于檢測疾病的醫(yī)療器械B．用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子C．合成β－珠蛋白的DNAD．合成苯丙氨酸羥化酶的DNA片段7．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的敘述,正確的是<>A．將一種生物的基因轉(zhuǎn)移到另一種生物體內(nèi),使生物表現(xiàn)出新的性狀B．干擾素是動物體內(nèi)的一種蛋白質(zhì),可用于治療病毒的感染和癌癥C．由于賴氨酸抑制天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性,所以賴氨酸產(chǎn)量難以提高D．蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界已有的蛋白質(zhì)8．下圖表示一項(xiàng)重要的生物技術(shù),對圖中物質(zhì)a、b、c、d的描述,正確的是<>A．通常情況下,a與d需要用同一種限制酶進(jìn)行切割B．b能識別特定的核苷酸序列,并將A與T之間的氫鍵切開C．c連接雙鏈間的A和T,使黏性末端處堿基互補(bǔ)配對D．b代表的是限制性核酸內(nèi)切酶,c代表的是RNA聚合酶9．下列關(guān)于限制酶的敘述中,錯誤的是<>A．它能在特殊位點(diǎn)切割DNA分子B．同一種限制酶切割不同的DNA產(chǎn)生的黏性末端能夠很好地進(jìn)行堿基配對C．它能任意切割DNA,從而產(chǎn)生大量DNA片段D．每一種限制酶只能識別特定的核苷酸序列10．現(xiàn)有一長度為1000堿基對<bp>的DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ單獨(dú)酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,用KpnⅠ單獨(dú)酶切得到400bp和600bp兩種長度的DNA分子,用EcoRⅠ、KpnⅠ同時(shí)酶切后得到200bp和600bp兩種長度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是<>11．下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是<>①從基因文庫中獲取目的基因②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因③反轉(zhuǎn)錄法④通過DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成目的基因A．①②③④B．①②③C．②③④D．②③12．質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,它存在于許多細(xì)菌體內(nèi),某細(xì)菌質(zhì)粒上的標(biāo)記基因如圖所示,通過標(biāo)記基因可以推知外源基因<目的基因>是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同,細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長情況也不同,如圖所示外源基因在質(zhì)粒中可插入的位置有a、b、c三點(diǎn)。某同學(xué)根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象對其插入的位點(diǎn)進(jìn)行分析,其中分析正確的是<>實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)推論在含青霉素培養(yǎng)基上生長情況在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長情況目的基因插入的位置A能生長能生長aB不能生長能生長bC能生長不能生長cD不能生長不能生長c13．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的敘述,錯誤的是<>A．蛋白質(zhì)工程操作的實(shí)質(zhì)是改造基因B．蛋白質(zhì)工程在設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)時(shí)的依據(jù)是現(xiàn)有基因的脫氧核苷酸序列C．蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)是基因工程D．蛋白質(zhì)工程遵循的原理包括中心法則14．科學(xué)家為提高玉米中賴氨酸含量,計(jì)劃將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸,將二氫吡啶二羧酸合成酶中104位的氨基酸由天冬酰胺變成異亮氨酸,就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸含量分別提高5倍和2倍。下列對蛋白質(zhì)的改造,操作正確的是<>A．直接通過分子水平改造蛋白質(zhì)B．直接改造相應(yīng)的mRNAC．對相應(yīng)的基因進(jìn)行操作D．重新合成新的基因15．基因工程技術(shù)也稱DNA重組技術(shù),其實(shí)施必須具備的4個(gè)必要條件是<>A．工具酶、目的基因、載體、受體細(xì)胞B．重組DNA、RNA聚合酶、限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶C．模板DNA、信使RNA、質(zhì)粒、受體細(xì)胞D．目的基因、限制性核酸內(nèi)切酶、載體、受體細(xì)胞16．在基因工程中,為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常采用土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,在土壤農(nóng)桿菌中常含有一個(gè)Ti質(zhì)粒。某科研小組欲將某抗蟲基因?qū)肽持参?下列分析錯誤的是<>A．Ti質(zhì)粒含有對宿主細(xì)胞生存具有決定性作用的基因,是基因工程中重要的載體B．用Ca2＋處理細(xì)菌是重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中的重要方法C．重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌成功感染植物細(xì)胞,可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)將該細(xì)胞培養(yǎng)成具有抗蟲性狀的植物D．若能夠在植物細(xì)胞中檢測到抗蟲基因,則說明將重組質(zhì)粒成功地導(dǎo)入到了受體細(xì)胞17．下圖表示基因工程中獲取水稻某目的基因的不同方法。下列相關(guān)敘述中正確的是<>A．這三種方法都用到酶,都是在體外進(jìn)行B．①②③堿基對的排列順序均相同C．圖示a、b、c三種方法均屬于人工合成法D．方法a不遵循中心法則18．某研究小組為了研制預(yù)防禽流感病毒的疫苗,開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是<>A．步驟①所代表的過程是反轉(zhuǎn)錄B．步驟②需使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶C．步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其從感受態(tài)恢復(fù)到常態(tài)D．檢驗(yàn)Q蛋白的免疫反應(yīng)特性,可用Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)19.20XX3月在上海和XX首次發(fā)現(xiàn)H7N9禽流感病例,現(xiàn)在我國多地出現(xiàn)禽流感疫情,為此某研究小組為了研制預(yù)防H7N9禽流感病毒的疫苗,開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是<>A.步驟①所代表的過程是反轉(zhuǎn)錄B.步驟②需使用限制酶和DNA連接酶C.步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其從感受態(tài)恢復(fù)到常態(tài)D.檢驗(yàn)Q蛋白的免疫反應(yīng)特性,可用Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)20.甲、乙兩圖均為DNA測序儀顯示的圖像,已知甲圖顯示的堿基順序?yàn)門CGAAT,則乙圖顯示的堿基順序?yàn)?lt;>A.TCGCAC B.ACCGTG C.ATTCAG D.TCCGGA21.某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶<Amy>基因a,通過基因工程的方法,將基因a轉(zhuǎn)移到馬鈴薯植株中,經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)Amy在馬鈴薯成熟塊莖細(xì)胞中存在。下列說法正確的是<>A.基因a只有導(dǎo)入到馬鈴薯受精卵中才能表達(dá)B.目的基因來自細(xì)菌,可以不需要載體直接導(dǎo)入受體細(xì)胞C.基因a導(dǎo)入成功后,將抑制細(xì)胞原有的新陳代謝,開辟新的代謝途徑D.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,可隨著馬鈴薯DNA分子的復(fù)制而復(fù)制,傳給子代細(xì)胞并表達(dá)22．下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性核酸內(nèi)切酶。下列有關(guān)說法,正確的是〔A．一種限制性核酸內(nèi)切酶不只識別一種特定的脫氧核苷酸序列B．表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)需要用到SmaⅠ、PstⅠ限制性核酸內(nèi)切酶C．抗卡那霉素基因的主要作用是促進(jìn)抗原基因在受體細(xì)胞表達(dá)D．除圖示標(biāo)注的結(jié)構(gòu)外表達(dá)載體中還應(yīng)有啟動子和終止子等23．已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)<P>,該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,由305個(gè)氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸,240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸,改變后的蛋白質(zhì)<P1>不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉栴}。<1>從上述資料可知,若要改變蛋白質(zhì)的功能,可以考慮對蛋白質(zhì)的_________________進(jìn)行改造。<2>以P基因序列為基礎(chǔ),獲得P1基因的途徑有修飾________基因或合成________基因。所獲得的基因表達(dá)是遵循中心法則的,中心法則的全部內(nèi)容包括_______________________的復(fù)制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動,即：___________________________________。<3>蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程,其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā),通過________________________和____________________________,進(jìn)而確定相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列,據(jù)此獲得基因,再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì),之后還需要對蛋白質(zhì)的生物________進(jìn)行鑒定。24．將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉,其過程如圖所示<注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有TDNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中>。<1>過程①需用同種________酶對含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來,應(yīng)使用________培養(yǎng)基。<2>過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓________進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),目的是______________________。<3>若過程④僅獲得大量的根,則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加________以獲得芽；部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根,原因是______________________________________________。<4>檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀,常用方法是________。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少________的使用,以減輕環(huán)境污染。25．酵母菌的維生素、蛋白質(zhì)含量高,可生產(chǎn)食品和藥品等?？茖W(xué)家將大麥細(xì)胞的LTP1基因?qū)肫【平湍妇?獲得的啤酒酵母菌可產(chǎn)生LTP1蛋白,并釀出泡沫豐富的啤酒?；静僮鬟^程如圖所示,請據(jù)圖回答下列問題：<1>該技術(shù)定向改變了酵母菌的性狀,這種可遺傳變異屬_______________。<2>從大麥細(xì)胞中可直接分離獲得LTP1基因,還可采用__________方法獲得目的基因。本操作中為了將LTP1基因?qū)虢湍妇?xì)胞內(nèi),所用的載體是___________________________。<3>要使載體與LTP1基因連接,首先應(yīng)使用__________進(jìn)行切割。假如載體被切割后,得到的分子末端序列為AATTCG,則能與該載體連接的LTP1基因分子末端是____________。A．GCTTAAB．TAATTCCC．CTTTAGD．AAATCT<4>切割完成后,采用____________酶將載體與LTP1基因連接,連接后得到的DNA分子稱為__________。<5>此操作中可以分別用含有青霉素、四環(huán)素的兩種選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,則有C進(jìn)入的酵母菌在選擇培養(yǎng)基上的生長情況是____________________________________________。<6>除了看啤酒泡沫豐富與否外,還可用什么方法檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表達(dá)？________________________________________________________________________。26．下面是口蹄疫疫苗生產(chǎn)過程示意圖,請據(jù)圖回答下列問題：<1>首先從口蹄疫病毒中提取部分合成病毒蛋白的RNA,而不是用口蹄疫病毒的全部RNA,原因是合成病毒蛋白的RNA控制合成的病毒蛋白質(zhì),具有________________________________特性,又不會使動物致病。以合成病毒蛋白的RNA產(chǎn)生病毒蛋白的DNA,需用到的工具酶是_______________________________________________。<2>構(gòu)建基因表達(dá)載體所需要的工具酶是____________________________?；虮磉_(dá)載體除目的基因外,還應(yīng)包括______________________________。<3>導(dǎo)入大腸桿菌前需先將大腸桿菌處理為______________________細(xì)胞。<4>為檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,常常要借助載體上______________的表達(dá),更準(zhǔn)確的方法是利用放射性同位素標(biāo)記的______________作探針與基因組DNA雜交。最后還要檢測目的基因是否翻譯成了病毒蛋白質(zhì),利用的技術(shù)是_________________________________________。27．科學(xué)家將動物體內(nèi)的能夠合成胰島素的基因與大腸桿菌的DNA分子重組,并且在大腸桿菌體內(nèi)表達(dá)成功。請據(jù)圖回答下列問題：<1>圖中①DNA是以________________為模板,____________形成單鏈DNA,在酶的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要的基因。<2>圖中②代表的是__________________,在它的作用下將質(zhì)粒<______________DNA>切出________末端。<3>圖中④表示將____________________。⑤表示____________隨大腸桿菌的繁殖而進(jìn)行________________________________________________________________________。<4>采用蛋白質(zhì)工程可以對胰島素進(jìn)行改造,使之起效時(shí)間縮短,保證餐后血糖高峰和血液中胰島素高峰一致。如果你是科研工作者,請寫出研制速效胰島素的思路。_____________________________________________________________________。<5>下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法不正確的是<>A．蛋白質(zhì)工程能將人抗體某些區(qū)段替代鼠單克隆抗體的區(qū)段,降低鼠單克隆抗體免疫原性B．蛋白質(zhì)工程可對酶的催化活性、底物專一性、抗氧化性、熱變性、堿變性等加以改變C．理論上通過對關(guān)鍵氨基酸的轉(zhuǎn)換與增刪是進(jìn)行蛋白質(zhì)工程的唯一方法D．蛋白質(zhì)工程的崛起主要是工業(yè)生產(chǎn)和基礎(chǔ)理論研究的需要28．通過基因工程的方法,科學(xué)家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并獲得成功表達(dá)。棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發(fā)時(shí)形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊,進(jìn)而導(dǎo)入尚不具備細(xì)胞壁的合子或早期胚體細(xì)胞中,借助天然的種胚系統(tǒng),形成含有目的基因的種胚。請回答下列問題：<1>下列所示的黏性末端是由________種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。<2>利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)朊藁?xì)胞,此過程是基因工程操作步驟中的第三步,即________。獲取目的基因時(shí),如果基因比較小,核苷酸序列又已知,則可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接________。<3>該目的基因在導(dǎo)入受體細(xì)胞前需要與載體結(jié)合,目前經(jīng)常使用的載體是________。<4>基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定,其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的技術(shù)是________；其次還要檢測________,方法同樣是采用分子雜交技術(shù)；最后檢測________,方法是________雜交。29.有一種單基因遺傳病——α1-抗胰蛋白缺乏癥,患者會出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病。注射α1-抗胰蛋白酶可治療該病。圖甲表示獲取人α1-抗胰蛋白酶基因的兩種方法,圖乙表示獲取α1-抗胰蛋白酶的方法。據(jù)圖回答：<1>圖甲表示的是基因工程中的________________步驟。完成a過程的酶的作用特點(diǎn)是___________________________________________________。<2>c過程需要的原料是____________________,遺傳信息的傳遞方向是______________。<3>圖乙中的d表示__________________。<4>GEP<綠色熒光蛋白>基因的作用是_____________________________。30.轉(zhuǎn)基因草莓中有能表達(dá)乙肝病毒表面抗原的基因,由此可獲得用來預(yù)防乙肝的一種新型疫苗,其培育過程如下圖所示<①至④代表過程,A至C代表結(jié)構(gòu)或細(xì)胞>：<1>在圖中①基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中,為了使目的基因正常表達(dá),目的基因的首端必須有____________識別和結(jié)合的部位。若選擇的限制酶切出的DNA片段是平末端,應(yīng)選擇______________進(jìn)行連接。<2>將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法很多,在該題中涉及的方法是__________________,之所以要把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中,這是利用T-DNA__________________的特點(diǎn)。<3>過程②的具體操作是：先用____________處理農(nóng)桿菌,使其處于感受態(tài)；再將含乙肝病毒表面抗原基因的重組Ti質(zhì)粒溶于緩沖液中與經(jīng)處理的農(nóng)桿菌混合,完成轉(zhuǎn)化過程。<4>圖中③和④過程分別叫做______________,將葉盤培養(yǎng)成草莓幼苗所依據(jù)的原理是__________________________。<5>乙肝病毒表面抗原的基因能否在草莓植株體內(nèi)維持穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是_____________,通常采用___________________的方法進(jìn)行檢測。31.應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請據(jù)圖回答下列問題。<1>要獲得抗蟲基因,可采用______________________________等方法,基因工程的核心是______________________。<2>如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是____________,原因是___________________。若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為__________細(xì)胞。<3>在培育轉(zhuǎn)人生長激素基因牛的過程中,②過程常用的方法是_________。<4>轉(zhuǎn)人生長激素基因?？赏ㄟ^分泌的乳汁來生產(chǎn)人生長激素,在基因表達(dá)載體中,人生長激素基因的首端必須含有_________________。參考答案：1.[解析]人肝細(xì)胞中胰島素基因不表達(dá),通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄不能得到胰島素基因,A項(xiàng)錯誤；基因表達(dá)載體的復(fù)制原點(diǎn)和啟動子是不同的位點(diǎn),基因表達(dá)載體的復(fù)制開始于復(fù)制原點(diǎn),胰島素基因的表達(dá)開始于啟動子,B項(xiàng)錯誤；抗生素抗性基因可作為基因工程中的標(biāo)記基因,可將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來,C項(xiàng)正確；啟動子在基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄中起作用,終止密碼子在基因表達(dá)的翻譯中起作用,D項(xiàng)錯誤。[答案]C2.[解析]限制酶和DNA連接酶的作用部位都位于①,但兩者作用相反。載體具有在宿主細(xì)胞中復(fù)制的能力,與目的基因結(jié)合后,目的基因也會在宿主細(xì)胞中一起復(fù)制。基因工程的目的就是定向改造生物的遺傳性狀。[答案]B3.[解析]甲方法是從細(xì)菌的DNA中直接提取,故可以建立該細(xì)菌的基因組文庫；乙方法是由mRNA反轉(zhuǎn)錄的目的基因,故可以建立該細(xì)菌的cDNA文庫。乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶和脫氧核苷酸為原料。[答案]C4.[解析]A項(xiàng)屬于個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,不是分子檢測；B、C兩項(xiàng)為分子檢測,利用分子雜交技術(shù),觀察目的基因及目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA能否與DNA探針進(jìn)行雜交形成雜交帶；D項(xiàng)也為分子檢測內(nèi)容,利用抗原－抗體雜交的原理,檢測基因表達(dá)產(chǎn)物能否與特定抗體形成雜交帶。[答案]A5.[解析]該受體基因在神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá),獲得該mRNA的最佳材料是神經(jīng)細(xì)胞。構(gòu)建基因表達(dá)載體最可能使用的載體是質(zhì)粒。探針篩選的目的是檢測是否存在cDNA。[答案]C6.[解析]基因探針是用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子。[答案]B7.[解析]蛋白質(zhì)工程崛起的緣由是為了得到符合人類生產(chǎn)和生活需要的特定的蛋白質(zhì)。如玉米生產(chǎn)過程中將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸,將二氫吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺變成異亮氨酸,就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸分別提高5倍和2倍。[答案]C8.[解析]b是限制性核酸內(nèi)切酶,能識別特定的核苷酸序列并使DNA分子的每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,而不是使氫鍵斷開；c是DNA連接酶,能連接兩個(gè)DNA片段。[答案]A9.[解析]限制酶是基因工程的重要工具之一。每種限制酶只能識別特定的核苷酸序列,并在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子。同一種限制酶切割不同的DNA產(chǎn)生的黏性末端能進(jìn)行互補(bǔ)配對。[答案]C10.[解析]由題干條件可知用EcoRⅠ酶切后,并不能將DNA分為兩段,故可判斷為環(huán)狀DNA,再根據(jù)"用EcoRⅠ、KpnⅠ同時(shí)酶切后得到200bp和600bp兩種長度的DNA分子"可得到答案D。[答案]D11.[解析]PCR利用的是DNA雙鏈復(fù)制原理。即將雙鏈DNA之間的氫鍵打開,變成單鏈DNA,作為聚合反應(yīng)的模板鏈。反轉(zhuǎn)錄法則是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,先反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)的單鏈DNA,再合成雙鏈的DNA。①④則均不需要模板。[答案]D12.[解析]若質(zhì)粒上插入的位置在c點(diǎn),那么抗四環(huán)素基因和抗青霉素基因都沒有被破壞,導(dǎo)入該重組質(zhì)粒的細(xì)菌在含青霉素的培養(yǎng)基和在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上均能生長。[答案]B13.[解析]蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。它的目標(biāo)是依據(jù)人們對蛋白質(zhì)功能的特定需求,對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì),最終用人工合成的方法合成相應(yīng)的基因,而改造的基因須按照中心法則才能合成人類需要的蛋白質(zhì)。[答案]B14.[解析]蛋白質(zhì)工程的目的是對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,從而使蛋白質(zhì)功能可以滿足人們需求。而蛋白質(zhì)功能與其高級結(jié)構(gòu)密切相關(guān),蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)又非常復(fù)雜,所以直接對蛋白質(zhì)改造非常困難,而蛋白質(zhì)是由基因控制合成的,對基因進(jìn)行操作就容易得多。另外,改造后的基因可以遺傳,如對蛋白質(zhì)直接改造,即使成功也不能遺傳。[答案]C15.[解析]基因工程是按照人們的意愿,把一種生物的個(gè)別基因<目的基因>復(fù)制出來,加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞<受體細(xì)胞>里,定向地改造生物的遺傳性狀?；虿僮鞯墓ぞ呙甘窍拗菩院怂醿?nèi)切酶和DNA連接酶,基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)輸工具是載體。[答案]A16.[解析]Ti質(zhì)粒是基因工程中重要的載體,不含有對宿主細(xì)胞生存具有決定性作用的基因；用Ca2＋處理細(xì)菌可增加細(xì)胞壁的通透性,是重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中的重要方法；轉(zhuǎn)基因成功的植物細(xì)胞,可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植物。在植物細(xì)胞中檢測到抗蟲目的基因,說明目的基因已成功導(dǎo)入,但不能證明其能表達(dá)。[答案]A17.[解析]由圖示可知a為反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因,用到逆轉(zhuǎn)錄酶；b為直接從生物體獲得目的基因,用到限制酶；c為用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲取目的基因,用到Taq酶,且三種方法均在生物體外進(jìn)行,故A正確。[答案]A18.[解析]由圖可知,步驟①所代表的過程是反轉(zhuǎn)錄；步驟②需使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其細(xì)胞從常態(tài)轉(zhuǎn)化為感受態(tài)；檢驗(yàn)Q蛋白的免疫反應(yīng)特性,可用Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。[答案]C19.[解析]由圖可知：步驟①是由RNA合成DNA的過程,表示反轉(zhuǎn)錄,選項(xiàng)A正確；步驟②是把目的基因與質(zhì)粒連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程,該過程需使用限制酶和DNA連接酶,選項(xiàng)B正確；步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其從常態(tài)轉(zhuǎn)化為感受態(tài),選項(xiàng)C錯誤；檢驗(yàn)Q蛋白的免疫反應(yīng)特性,可用Q蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進(jìn)行抗原-抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn),選項(xiàng)D正確。[答案]C20.[解析]由第一幅圖給出的條件可知,從左到右看依次為ACGT,但解題時(shí)應(yīng)從上向下看,這樣就可得出乙圖顯示的堿基順序?yàn)锳CCGTG。[答案]B21.[解析]植物基因工程的受體細(xì)胞可以是受精卵,也可以是體細(xì)胞。目的基因需要構(gòu)建基因表達(dá)載體才能導(dǎo)入受體細(xì)胞。基因a導(dǎo)入成功后,不會抑制細(xì)胞原有的新陳代謝?；騛進(jìn)入受體細(xì)胞后,會整合到馬鈴薯細(xì)胞的DNA分子上,可以隨著馬鈴薯DNA分子的復(fù)制而復(fù)制,并能傳給子代細(xì)胞并表達(dá)。[答案]D22.[解析]限制酶具有特異性,即一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列并在特點(diǎn)的位點(diǎn)切割,A錯誤；用SmaⅠ酶切割會破壞目的基因,因此表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)需要用到EcoRⅠ、PstⅠ限制性核酸內(nèi)切酶,B錯誤；抗卡那霉素基因的主要作用是篩選含有目的基因的受體細(xì)胞,C錯誤；基因表達(dá)載體的組成包括啟動子、標(biāo)記基因、目的基因和終止子等,因此除圖示標(biāo)注的結(jié)構(gòu)外表達(dá)載體中還應(yīng)有啟動子和終止子等,D正確。[答案]D23.[解析]本題考查蛋白質(zhì)工程和基因工程的原理及操作流程。<1>由題干信息可知,改造蛋白質(zhì)的功能可通過改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)。<2>依據(jù)蛋白質(zhì)工程的定義及題中信息可知,獲得P1基因的途徑有修飾現(xiàn)有<P>基因或合成新<P1>基因。中心法則的全部內(nèi)容包括DNA的復(fù)制、RNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄和翻譯。<3>蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列。通過蛋白質(zhì)工程合成的蛋白質(zhì)還需要進(jìn)行生物活性的鑒定即功能鑒定,看是否達(dá)到人們的需求。[答案]<1>氨基酸序列<或結(jié)構(gòu)><2>PP1DNA和RNA<或遺傳物質(zhì)>DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白質(zhì)<或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯><3>設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測氨基酸序列功能24.[解析]<1>過程①需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基。<2>將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓TDNA進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),篩選出含TDNA片段的棉花細(xì)胞。<3>增加細(xì)胞分裂素濃度,使生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值降低,有利于芽的分化；部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根,原因是芽頂端合成的生長素向基部運(yùn)輸,促進(jìn)下端生根。<4>檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀,常用方法是投放棉鈴蟲,看食用轉(zhuǎn)基因棉的棉鈴蟲是否死亡。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用,以減輕環(huán)境污染。[答案]<1>限制性核酸內(nèi)切選擇<2>TDNA篩選獲得TDNA片段的植物細(xì)胞<3>細(xì)胞分裂素濃度芽頂端合成的生長素向基部運(yùn)輸,促進(jìn)根的分化<4>投放棉鈴蟲農(nóng)藥25.[解析]基因工程從變異角度分析應(yīng)屬于基因重組,獲取目的基因可采用直接從物種中分離或人工合成等方法,常用的載體是質(zhì)粒。[答案]<1>基因重組<2>人工合成質(zhì)粒<3>限制酶A<4>DNA連接重組DNA<重組質(zhì)粒><5>能在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活,但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活<6>檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因啤酒酵母菌能否產(chǎn)生LTP1蛋白26.[解析]<1>病毒由核酸和蛋白質(zhì)組成,其蛋白質(zhì)外殼具有免疫特性,故口蹄疫疫苗生產(chǎn)過程只需提取口蹄疫病毒中控制合成病毒蛋白的RNA部分。以RNA為模板合成DNA的過程屬于反轉(zhuǎn)錄,需要逆轉(zhuǎn)錄酶。<2>基因表達(dá)載體的組成：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因。構(gòu)建基因表達(dá)載體一般用一定的限制酶切割質(zhì)粒,使其出現(xiàn)一個(gè)有黏性末端的切口,再用同種限制酶切割目的基因,產(chǎn)生相同的黏性末端。將切下的目的基因片段,插入質(zhì)粒的切口處,在DNA連接酶的作用下使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合形成重組質(zhì)粒。<3>將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞前,常用Ca2＋處理使其成為感受態(tài)細(xì)胞。<4>標(biāo)記基因的表達(dá)可檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,除此之外還可以用DNA雜交法和抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。[答案]<1>抗原逆轉(zhuǎn)錄酶<2>限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶啟動子、終止子、標(biāo)記基因<3>感受態(tài)<4>標(biāo)記基因病毒蛋白基因<目的基因>抗原—抗體雜交技術(shù)27.[解析]蛋白質(zhì)工程的類型主要有兩種：一是從頭設(shè)計(jì),即完全按照人的意愿設(shè)計(jì)合成蛋白質(zhì)。從頭設(shè)計(jì)是蛋白質(zhì)工程中最有意義,也是最困難的操作類型,目前技術(shù)尚不成熟,但理論上可行。二是定位突變與局部修飾,即在已有蛋白質(zhì)基礎(chǔ)上,只進(jìn)行局部的修飾。通過造成一個(gè)或幾個(gè)堿基定位突變,以達(dá)到修飾蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的目的。"從頭設(shè)計(jì)"的方法：確定蛋白質(zhì)的功能→蛋白質(zhì)應(yīng)有的高級結(jié)構(gòu)→蛋白質(zhì)應(yīng)具備的折疊狀態(tài)→應(yīng)有的氨基酸序列→應(yīng)有的堿基序列,可以創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程的崛起是因?yàn)樘烊坏鞍踪|(zhì)不能滿足人類的需求,例如多數(shù)酶雖然在自然狀態(tài)下有活性,但在工業(yè)生產(chǎn)中沒有活性或活性很低。[答案]<1>原胰島素mRNA反轉(zhuǎn)錄<2>特定的限制性核酸內(nèi)切酶環(huán)狀黏性<3>目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞重組DNA擴(kuò)增<4>確定蛋白質(zhì)的功能→蛋白質(zhì)應(yīng)有的高級結(jié)構(gòu)→蛋白質(zhì)應(yīng)具備的折疊狀態(tài)→應(yīng)有的氨基酸序列→應(yīng)有的堿基序列<5>C28.[解析]<1>限制性核酸內(nèi)切酶能識別特定的核苷酸序列,并在特定的位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵。題圖顯示的黏性末端有4種,因此是由4種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。<2>基因工程操作步驟中的第三步是：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。獲取目的基因時(shí),如果基因比較小,核苷酸序列又已知,可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。<3>質(zhì)粒是基因